Experimental study on model establishment，mechanism of production，and reverse therapy of gastric mucosal precancerous lesions

Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｔｕｄｙｏｎｍｏｄｅｌｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ，ｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，ａｎｄｒｅｖｅｒｓｅｔｈｅｒａｐｙｏｆｇａｓｔｒｉｃｍｕｃｏｓａｌｐｒｅｃａｎｃｅｒｏｕｓｌｅｓｉｏｎｓｉｎｒａｔｓ￥ＬｉＣｈｕｎ...

基于Wnt/β-catenin信号通路探究过表达miR-124对胃癌前病变模型大鼠的干预效果

背景Wnt/β-catenin信号通路的活跃可以促进胃黏膜细胞的分裂和增长,增加癌变的可能。目的探究基于Wnt/β-catenin信号通路过表达miR-124对胃癌前病变模型大鼠的干预效果影响。方法选取43只SPF级Wistar大鼠作前瞻性研究,从中选取10只作为对照组(0.9%氯化钠注射液),并将剩余33只大鼠构建胃癌前病变模型,最终建模成功30只,平均分为模型组(0.9%氯化钠注射液)、miR-124抑制剂组(miR-124 inhibitor)和miR-124模拟物组(miR-124 mimic)。结果与对照组相比,模型组、miR-124抑制剂组、miR-124模拟物组miR-124相对表达量下降,表皮细胞生长因子(epidermal growth factor,EGF)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α)水平以及Wnt、β-catenin表达量升高(P均<0.05);与模型组相比,miR-124抑制剂组miR-124表达水平下降,EGF、EGFR、IL-6、TNF-α水平以及Wnt、β-catenin表达量升高,miR-124模拟物组miR-124相对表达量升高,EGF、EGFR、IL-6、TNF-α水平以及Wnt、β-catenin表达量降低(P均<0.05);与miR-124抑制剂组相比,mi R-124模拟物组miR-124相对表达量升高,EGF、EGFR、IL-6、TNF-α水平以及Wnt、β-catenin表达量降低(P均<0.05)。结论过表达miR-124可降低大鼠胃黏膜的损害,改善其炎症反应,其机制可能与Wnt/β-catenin信号通路被抑制有关。

褪黑素对心理应激大鼠胃黏膜SOD、MDA和胃黏膜损伤的影响

目的 探讨褪黑素 (MT)对心理应激性胃黏膜损伤的保护作用及其机制。方法 48只雄性SD大鼠随机分为对照组 (C组 )、规则光组 (R组 )、不规则光组 (I组 )和褪黑素组 (M组 )。检测大鼠胃黏膜损伤指数 (UI) ,胃黏膜超氧化物歧化酶 (SOD)活性、丙二醛 (MDA)含量及血清皮质醇浓度。结果 C组大鼠胃黏膜光整完好 ,肉眼未见糜烂及溃疡。R和I组UI均高于C组 (P <0 .0 5) ,M组UI低于I组 (P <0 .0 5)。R、I组胃黏膜SOD活性降低 ,I组降低更明显 (P <0 .0 5) ;R、I组胃黏膜MDA含量升高 ,I组升高明显 (P <0 .0 5) ,但M组SOD升高 ,MDA含量下降 (P <0 .0 5)。R、I组大鼠血清皮质醇升高 ,I组明显升高 (P <0 .0 5) ;而M组血清皮质醇较I组降低 (P <0 .0 5)。

幽门螺杆菌感染与不同胃粘膜病变中c-myc、Bcl-2和Bax表达的关系

背景与目的:幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,HP)是确定的胃癌致癌因子之一,但其致癌的确切机制仍不清楚。本实验研究不同胃粘膜病变中幽门螺杆菌感染与细胞增生、凋亡的关系,探讨HP致胃癌发生的可能机制。方法:选择272例病例,包括慢性胃炎(chronicgastritis,CG)42例,肠上皮化生(intestinalmetaplasia,IM)Ⅰ～Ⅱ46例,IMⅢ25例,轻度不典型增生(dysplasiaⅠ,DysⅠ)21例,中、重度不典型增生(DysⅡ～Ⅲ)54例及胃癌(gastriccancer,GC)84例。采用Warthin-Starry细菌染色及SP免疫组化法检测HP的感染情况;HID-AB(pH2.5)-PAS粘液染色检测胃粘膜上皮及肿瘤组织中的粘液性质;SP法检测c-myc、Bcl-2和Bax的表达。采用卡方检验、Fishers精确概率法进行率的比较。结果:(1)在CG、IM、Dys、GC的胃粘膜病变标本中,c-myc、Bcl-2的表达率依次增加,而Bax的表达率则依次降低。c-myc在GC中的表达率显著高于DysⅡ～Ⅲ及IMⅢ(均P<0.01),而Bax在GC中的表达率明显低于DysⅡ～Ⅲ及IMⅢ(P<0.05或P<0.01)。(2)c-myc在IMⅢ、DysⅡ～Ⅲ病变的HP感染组中的表达率分别为62.50%、66.67%,明显高于非感染组的11.11%、27.78%(均P<0.05)。Bax在CG、IMⅠ～Ⅱ和IMⅢ病变的HP感染组中的表达率分别为87.10%、81.25%、62.50%,明显高于非感染组的54.55%

血清胃蛋白酶原异常居民胃粘膜变化的随访观察

目的 :探讨血清胃蛋白酶原 (PG)水平变化与我国胃癌高发区居民胃癌发生的关系及PG异常在人群胃癌筛查中的价值。方法 :在对赞皇县 15 0 4名农村居民进行血清PG和HP抗体检测的基础上 ,对受检居民进行了随访 ,并分析了受检后 16～ 30个月胃粘膜病理形态学变化。结果 :赞皇县居民血清PG水平具有明显的性别差异 ,男性居民PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ /PGⅡ比值明显高于女性居民 ,但男女居民中血清PG异常者检出率无明显差异(11.7%∶9.6 % ,P >0 .0 5 )。随访期内PG异常居民胃癌死亡率 (0 .6 4% )高于正常居民 (0 .0 0 7% ) ,但统计学意义不明显。血清PG异常组居民胃粘膜腺体萎缩和腺上皮不典型增生的发生率均达到 70 %以上 ,肠上皮化生的发生率也超过 5 0 % ,明显高于血清PG正常居民 (P <0 .0 1)。血清PG异常伴HP抗体阳性者腺体萎缩、肠上皮化生及腺上皮不典型增生发生率均明显高于HP抗体阴性者。结论 :血清PG异常居民胃粘膜多有明显的癌前病变 ,是胃癌的高危人群。

放大胃镜对胃黏膜隆起病变定性诊断的临床研究

目的通过比较分析放大胃镜和普通胃镜下胃癌及癌前病变的胃黏膜病变的形态特征,评价放大胃镜对胃黏膜隆起病变定性诊断的临床价值。方法将2014年3月-2015年3月符合要求的291例患者分成两组。其中,148例行放大胃镜检查,观察胃小凹及微血管形态,指导靶向活检;143例行普通胃镜下的常规黏膜活检。结果放大胃镜组检出胃黏膜上皮内瘤变25例(16.9%),其中高级别瘤变1例(0.7%),早期胃癌5例,早期胃癌检出率3.4%,总的胃癌及癌前病变的检出率20.3%;与普通胃镜组比较差异具有统计学意义(P<0.05);癌变胃小凹分型为Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型;微血管形态主要为C型和D型。结论放大胃镜有助于发现早期胃癌及癌前病变。

军事应激对部队官兵胃黏膜病变的影响

目的对军事应激状态下部队官兵的胃黏膜病变情况进行调查。方法采用消化内窥镜、光学显微镜及快速尿素酶试验检测某部60名官兵军事演习前后的胃黏膜形态、组织病理学改变及幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染情况。结果军演后官兵内镜下糜烂性胃炎、胆汁反流性胃炎及十二指肠球部溃疡较军演前增加,并新出现了胃溃疡及急性胃黏膜病变(P<0.01);组织活检标本的光镜结果显示军演后官兵胃黏膜急性炎症改变增多,出现溃疡者胃黏膜上皮破坏严重,细胞界限不清、坏死脱落;胃黏膜Hp感染率在军演前后无明显变化(P>0.05)。结论军事应激可导致官兵胃黏膜病变。重视部队官兵的心理健康,提高应激能力,有助于减少军事应激对于官兵胃黏膜的不良影响。

寒、热型胃黏膜损伤模型的对比和应用研究

目的讨论建立病证结合的寒、热型急性胃黏膜损伤动物模型的思路和方法。方法分别采用无水乙醇或辣椒+乙醇给大鼠灌胃造成胃热Ⅰ°和胃热Ⅱ°模型,采用NaOH或冰水+NaOH造成胃寒Ⅰ°和胃寒Ⅱ°模型。结果多次试验结果证实造模大鼠的一般状况、胃黏膜的病理组织形态、微观指标变化等都符合临床相应证候的表现;应用于相应的药物试验也进一步证明了模型的寒热区别。结论建立的寒、热型胃黏膜损伤病证结合模型从理论和方法学上可行,可用于评价相应中药和方剂的药效。

维甲酸治疗胃粘膜癌前病变的实验研究

应用含０．０３％雷尼替丁的标准粉末状饲料和５０μｇ／ｍｌＭＮＮＧ联合喂饲大鼠共２０周，诱发胃粘膜病变。实验从第３６周起，按４０ｍｇ／ｋｇ体重，每日１次给大鼠喂服维甲酸共８周，之后处死动物进行观察。维甲酸治疗组大鼠胃粘膜肠化生、中重度异型增生及胃癌的发生率（各为７２．０％、２４．０％、０％）显著地低于未加治疗的对照组（各为１００．０％、５２．０％、１６．０％）（Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．０５）；维甲酸治疗组大鼠，病变胃粘膜血流量改善，泌酸功能显著好转，血和组织中ＬＰＯ含量明显下降，跨膜电位差恢复接近正常水平；维甲酸服用组大鼠未见明显毒副反应。表明维甲醇对大鼠实验性胃粘膜癌前病变有一定的治疗作用，清除自由基可能为其作用机理之一。

具有胃黏膜保护作用的羊肚菌菌株的筛选及其液体发酵

目的:筛选获得具有胃黏膜保护作用且生物量较高的羊肚菌菌株,并优化所获得菌株的发酵培养基,筛选获得对胃黏膜保护效果较好的羊肚菌发酵培养基中的碳、氮源。方法:将小鼠随机分为正常组、模型对照组和不同给药剂量组,以无水乙醇诱导胃黏膜损伤为模型,比较各组胃黏膜损伤指数,同时测定并比较不同羊肚菌菌株生物量;利用碳氮源单因素和正交试验,以胃黏膜损伤指数为主要筛选指标,同时测定并比较不同培养基发酵羊肚菌菌株生物量与胞外多糖含量。结果:羊肚菌M1液体发酵物的水提液,能显著降低小鼠急性酒精胃黏膜损伤的损伤指数(P<0.05),同时生物量达到10.28g/L;分别以可溶性淀粉与酵母膏为碳、氮源时M1液体发酵物的水提液对小鼠胃黏膜保护效果最好,抑制率分别达到80.92%、53.02%;正交试验结果表明:以质量分数2.0%可溶性淀粉和1.5%酵母膏组合时M1液体发酵物的水提液对小鼠胃黏膜保护效果较好,抑制率达到76.02%,生物量达到8.88g/L。结论:羊肚菌M1不仅对小鼠胃黏膜具有较好的保护作用,而且生物量较高,其对胃黏膜保护效果较好的发酵培养基中的最适碳、氮源为可溶性淀粉2.0%、酵母膏1.5%。

HSP60和HSP70在严重烧伤大鼠胃黏膜的表达及对胃黏膜的保护作用

目的观察严重烧伤大鼠胃黏膜热休克蛋白60和70(HSP60、HSP70)的表达变化及热休克预处理(HS)对严重烧伤大鼠胃黏膜的影响,探讨热休克预处理诱导HSP60、HSP70过量表达后对严重烧伤大鼠胃黏膜的保护作用。方法将Wistar大鼠随机分为2大组:①烧伤组(B组)40只大鼠烧伤后即制作急性胃黏膜损伤模型;另取8只大鼠不烧伤,作为正常对照组(伤前);②HS+烧伤组(HB组)40只大鼠于烧伤前20 h行HS,另取8只大鼠只行HS不烧伤,作为实验对照组(伤前)。各组于伤后3、6、12、24、48 h处死大鼠(B组、HB组每时相点8只大鼠),留取标本检测胃黏膜损伤指数(UI)、HSP60、HSP70的变化,并进行相关分析。结果大鼠严重烧伤后胃黏膜HSP60、HSP70表达迅速升高,随后开始下降,伤后24 h降至最低,此时胃黏膜损伤程度最严重(UI=12.74±1.92)。HB组大鼠较B组大鼠HSP60、HSP70表达均显著增强,胃黏膜损伤程度则明显减轻(P<0.05或P<0.01)。UI与HSP70呈显著负相关(r=-0.794,P<0.05),UI与HSP60无相关性(r=-0.625,P>0.05)。结论热休克预处理诱导HSP60、HSP70过量表达后可减轻大鼠烧伤后急性胃黏膜损害。烧伤大鼠胃黏膜HSP60、HSP70的表达增强可能是胃黏膜保护或修复的一种机制。

胶体枸橼酸铋钾预防阿司匹林所致大鼠胃粘膜损伤的研究

目的 :研究枸橼酸铋钾对阿司匹林所致大鼠胃粘膜损伤的预防保护作用及其机制。方法 :采用阿司匹林腹腔注射造成Wistar大鼠急性胃粘膜损伤模型。实验动物分为空白对照组、单纯损伤组、枸橼酸铋钾保护组和米索前列醇保护组。保护组分别用枸橼酸铋钾和米索前列醇灌胃 ,其后用阿司匹林行腹腔注射 ,然后分别测定各组的胃粘膜溃疡指数、胃粘膜血流、胃粘膜氨基己糖含量等指标 ,并观察大体及显微镜下组织学变化 ,以评价胃粘膜损伤程度及药物的预防保护效果。结果 :枸橼酸铋钾保护组与单纯损伤组比较 ,胃粘膜损伤指数明显下降(P <0 .0 1 ) ,胃粘膜血流增加 (P <0 .0 1 ) ,胃粘膜氨基己糖含量增加 (P <0 .0 1 )。且与米索前列醇保护组相比胃粘膜溃疡指数、粘膜血流、氨基己糖含量无明显差异。结论 :枸橼酸铋钾对阿司匹林所致的大鼠急性胃粘膜损伤有明显预防保护作用 ,其保护作用与米索前列醇相当 ;作用机制与增加胃粘膜血流 。

硫氧还蛋白-1在急性坏死性胰腺炎并急性胃黏膜损伤中的作用

目的探讨硫氧还蛋白-1(TRX-1)在实验性急性坏死性胰腺炎(ANP)并急性胃黏膜损伤发病机制中的作用以及抗氧化剂褪黑素对其的影响。方法72只大鼠随机分为对照组(C组,n=24)、ANP组(A组,n=24)和褪黑素干预组(M组,n=24)。A组分3次腹腔内注射6%L-精氨酸(L-Arg)1.5 g/kg建立ANP模型;C组同法注射等量生理盐水;M组于首次注射L-Arg前0.5 h腹腔内注射1%褪黑素50μg/kg。各实验组大鼠于末次腹腔内注射后6 h、12 h和24 h分批处死。光镜下观察胰腺和胃组织并进行病理学评分,采用免疫组化检测TRX-1在胃黏膜的表达,并检测胃黏膜中MDA、MPO的含量。结果A组各时点胃黏膜TRX-1的染色积分及MDA、MPO的含量明显高于C组(P均<0.05);M组各时点胃黏膜中TRX-1的染色积分及MDA、MPO的含量明显低于A组(P均<0.05),胰腺和胃组织病理改变较A组明显减轻(P均<0.05)。结论内源性的TRX-1可能是胃黏膜组织抵御氧化应激损伤的重要因子之一,TRX-1的表达量可能与组织氧化应激损伤的严重程度有关。外源性的褪黑素在ANP时可能通过其抗氧化作用,减轻胃黏膜氧化应激损伤的程度,对胃黏膜有一定的保护作用。

半胱胺对吲哚美辛诱发的大鼠胃粘膜溃疡的保护与抗氧化研究

为探讨半胱胺对动物应激性胃粘膜溃疡的保护和抗氧化机制,本研究利用吲哚美辛（IN）诱导大鼠胃部急性溃疡模型。选取雄性SD大鼠45只,体重180~220 g,随机分为3组,每组15只。对照组（A）：灌服生理盐水1 mL/只;应激组（B）：灌服吲哚美辛（45 mg/kg体重）;抗氧化组（C）：灌服半胱胺处理（100 mg/kg体重）,1 h后灌服吲哚美辛（45 mg/kg体重）。结果表明：半胱胺明显抑制了吲哚美辛诱导的胃粘膜溃疡。与对照组A比较,灌服IN显著降低了胃粘膜中超氧化物歧化酶（SOD）活性以及谷胱甘肽（GSH）、线粒体中ATP、ADP、AMP、总腺苷酸和能荷（EC）水平（P〈0.05）,然而过氧化氢酶（CAT）明显提高,脂质过氧化物（LPO）产量显著增加。灌服半胱胺明显遏制了上述各项指标改变,显著提高了胃粘膜组织中SOD活性以及GSH、线粒体中总腺苷酸含量和EC值,同时降低了LPO和溃疡指数（P〈0.05）。

应用蛋白质芯片技术研究艾灸对大鼠胃黏膜损伤修复相关蛋白质的差异表达

目的:观察艾灸对大鼠胃黏膜损伤修复过程中相关血清蛋白质的差异表达。方法:40只大鼠随机分为正常组、模型组、经穴组和非经穴组。将模型组、经穴组和非经穴组大鼠制成胃黏膜损伤模型,造模成功后,经穴组取梁门、足三里艾灸,非经穴组取以上两穴外侧旁开0.5 cm艾灸。治疗10 d后应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质(SELDI-TOF-MS)技术筛选大鼠血清蛋白质的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清有5个蛋白质峰差升高。与模型组比较,经穴组大鼠有3个蛋白质峰增高;非经穴组8个蛋白质峰增高,4个降低。与非经穴组比较,经穴组大鼠血清蛋白质峰4个增高,3个降低(P<0.05)。结论:艾灸可促进胃黏膜损伤修复特异相关的蛋白质差异表达,且存在一定的经脉脏腑相关性。

力竭性运动对大鼠胃组织损伤的研究

观察力竭性运动所致大鼠胃粘膜的损伤情况,研究其病理机制。方法:应用力竭性游泳方法导致大鼠应激性胃粘膜的损伤,观察大鼠胃粘膜溃疡指数;胃粘膜超氧化歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及血清SOD活性、MDA和一氧化碳(NO)含量变化。结果:力竭运动导致胃粘膜损伤指数显著增加;NO含量明显下降;SOD活性有明显降低;MDA的含量则显著增加。结论:力竭性游泳运动可导致胃粘膜出现溃疡病变,机体抗氧化能力和NO含量的改变是运动应激性胃溃疡的产生机制之一。

应激大鼠胃黏膜氧化应激指标受褪黑素影响的研究

目的探讨褪黑素干预应激大鼠胃黏膜氧化应激指标影响的研究。方法采用浸水-束缚(WIR)应激实验复制大鼠应激性溃疡模型。应激前30 min,MT(melatonin)5、20mg.kg-1和应激组大鼠分别腹腔注射MT 52、0mg.kg-1和等体积生理盐水。应激6h后,观察各组大鼠胃黏膜病变情况,对溃疡指数(UI)进行评分,同时检测各组大鼠胃黏膜内丙二醛(MDA)含量、胃黏膜超氧化物歧化酶(SOD)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)水平。结果WIR应激6h后,应激组大鼠胃黏膜MDA水平显著高于对照组(P<0.01)。MT 52、0mg.kg-1组较应激组MDA水平显著下降(P<0.01),且MT 20mg.kg-1组显著低于MT 5mg.kg-1组(P<0.01)。应激组大鼠SOD、GSH活性较对照组明显降低(P<0.01),MT 5、20mg.kg-1组较应激组SOD、GSH活性有升高趋势。比较各组UI发现,MT 5、20mg.kg-1组UI显著低于应激组(P<0.01),其中MT 20mg.kg-1组UI显著低于MT 5mg.kg-1组(P<0.05)。结论褪黑素通过其抗氧化的作用对应激大鼠胃黏膜损伤起保护作用。

模拟战争环境应激对胃粘膜损伤及对相关因素影响的实验研究

目的探讨战争应激环境状态下,单一和复合应激条件对胃运动和胃粘膜损伤的变化情况。研究应激对胃功能的损伤机制。方法将SD雄性大鼠随机分成四组,即而形成枪击音应激组(A组);睡眠剥夺应激组(B组);枪击音和睡眠剥夺联合应激组(C组);并设立空白对照组(D组)。在给予不同的应激条件干预下,在不同的时间内,分别采用浆膜法检测大鼠胃电的变化,采用Chen法对胃粘膜的损伤情况进行分析处理。同时对不同应激组在一定时间段内的胃粘膜的病理变化进行观察。结果随着应激时间的不断增加,不同条件的应激组其胃运动的变化呈现抑制状态,而复合应激因素的影响较单一应激因素的影响明显;不同条件的应激组其胃粘膜损伤和病理变化,随着应激时间的不断增加,粘膜损伤加重,病理变化愈加明显。复合应激因素对胃粘膜的损伤影响更加显著。结论战争环境因素应激对胃的运动和胃粘膜造成不同程度的影响和损伤,而多种应激因素的影响和损伤更为严重。

胃萎Ⅰ号颗粒对急性胃黏膜损伤模型大鼠胃黏膜的保护作用研究

目的:观察胃萎Ⅰ号颗粒对急性胃黏膜损伤大鼠的胃黏膜保护作用。方法:将30只SD大鼠随机分为正常组、模型对照组、胃萎Ⅰ号组和替普瑞酮组,采用60%乙醇灌胃制备急性胃黏膜损伤大鼠模型,观察胃萎Ⅰ号颗粒对大鼠胃黏膜损伤的影响,并测定血清和胃黏膜组织中PGE2、EGF、SS的含量。结果:胃萎Ⅰ号组和替普瑞酮组均能明显改善黏膜损伤状况,并能显著提高血清和胃组织中PGE2、EGF、SS的含量,较模型对照组均有显著性差异(P<0.01);且胃萎Ⅰ号组对EGF、SS含量的提高优于替普瑞酮组(P<0.05)。结论:胃萎Ⅰ号颗粒具有保护胃黏膜的作用,其机理可能与促进EGF、SS、PGE2等胃黏膜保护因子的生长有关。

益胃化裁方免煎颗粒抗胃黏膜损伤的作用机制研究

目的:观察益胃化裁方免煎颗粒对大鼠急性胃黏膜损伤模型成模的抑制作用,揭示益胃化裁方免煎颗粒对急性胃黏膜损伤的预防保护作用及其可能机制。方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组、益胃化裁方免煎颗粒组和替普瑞酮组,采用60%乙醇灌胃制备急性胃黏膜损伤大鼠模型,观察益胃化裁方免煎颗粒对急性大鼠胃黏膜损伤模型成模的影响,并测定血清和胃黏膜组织中SS、PGE2的含量。结果:益胃化裁方免煎颗粒组和替普瑞酮组均能明显改善黏膜出血、糜烂及炎症等损伤状况,并能分别显著提高血清和胃组织中SS、PGE2的含量,较模型组有显著性差异(P<0.01,P<0.05);且益胃化裁方免煎颗粒组对血清及胃组织中SS含量的提高优于替普瑞酮组(P<0.05)。结论:益胃化裁方免煎颗粒对大鼠急性胃黏膜损伤具有成模抑制作用,对急性胃黏膜损伤具有预防保护作用,其机理可能与促进SS、PGE2等胃黏膜保护因子的生长有关。