胃泌素及其受体拮抗剂对原代培养胃癌细胞的作用研究

目的研究胃泌素及其受体拮抗剂对原代培养胃癌细胞的作用,探讨胃癌患者非细胞毒内分泌治疗的可行性。方法从新鲜胃癌切除标本中分离胃癌细胞进行体外培养,应用MTT比色分析法和流式细胞仪观察胃泌素及其受体拮抗剂丙谷胺对细胞增殖、周期分布的影响。结果胃泌素可明显促进部分胃癌细胞的增殖,使细胞从G0/G1期向S期和G2/M期转化,与对照组比较有显著差异(P<0.01),丙谷胺可阻断胃泌素的作用。对胃泌素敏感的胃癌原发部位多在胃体部(13/34)和贲门部(15/34),胃窦部较少(6/34);以低分化或未分化腺癌为主(77.1%),多为中晚期。结论胃泌素可促进部分胃癌患者肿瘤细胞的增殖和细胞内DNA合成,以胃体、贲门癌为著,胃泌素受体拮抗剂可望成为胃癌非细胞毒内分泌治疗新途径。

前药5-FC联合胃泌素拮抗剂CI-988对转CD基因大肠癌SW480细胞的杀伤作用

目的:探讨联合应用前药5-氟胞嘧啶(5-fluorocytosine,5-FC)和胃泌素拮抗剂CI-988对转组织特异性胞嘧啶脱氨基酶(cytosine deaminase,CD)基因的大肠癌SW480细胞生长的影响。方法:将转CD基因大肠癌SW480细胞接种至4块24孔细胞培养板中,依次分为实验组1、2、3及对照组,分别以含有前药5-FC、胃泌素拮抗剂CI-988、5-FC联合CI-988及正常培养液进行培养。每天胰酶消化法计数各组4孔,共6d,绘制细胞生长曲线并计算生长抑制率。按上述分组方法另接种培养4组细胞,于培养72h行MTT法检测490nm处吸光度A值,计算细胞杀伤率。结果:应用5-FC联合CI-988处理的转CD基因大肠癌SW480细胞在6d后生长抑制率达97;于培养72h时,实验组1、3细胞杀伤率较对照组有显著性差异(P<0.01);实验组2与对照组无显著性差异(P>0.05);实验组3较实验组1、2有显著性差异(P<0.01)。结论:CD/5-FC系统和胃泌素拮抗剂CI-988对转基因大肠癌SW480细胞具有杀伤或抑制作用,联合应用胃泌素拮抗剂可以提高CD/5-FC自杀基因系统对大肠癌细胞的杀伤效应。

胃泌素受体拮抗剂对胃癌细胞株MKN_(45)裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的探索应用胃泌素受体拮抗剂调控胃癌细胞自分泌生长的作用及其机制。方法建立胃癌细胞株ＭＫＮ４５移植瘤的动物模型，观察胃泌素受体拮抗剂丙谷胺对移植瘤的面积、重量、胃癌细胞ＤＮＡ及血清促胃液素含量的影响。结果第１６天丙谷胺组移植瘤面积（６１．４１±１８．５７）ｍｍ２较对照组（９４．８６±２８．０５）ｍｍ２明显缩小（Ｐ＜０．０５），第２８天时差别更明显（１２５．５７±４０．２６）∶（２１１．５９±５０．０８）ｍｍ２。第２８天时丙谷胺组及对照组的移植瘤重量分别为（８４７．９±６９．６）ｍｇ及（１１７７．７±８３．５）ｍｇ（Ｐ＜０．０５）。丙谷胺组胃癌细胞ＤＮＡ指数、平均ＤＮＡ含量及Ｓ期细胞比例均低于对照组。丙谷胺对血清促胃液素含量没有影响。结论丙谷胺对胃癌细胞株ＭＫＮ４５移植瘤有抑制生长的作用；丙谷胺发挥抗肿瘤作用是通过改变胃癌细胞ＤＮＡ代谢过程，而与血清促胃液素含量的改变无关。

生长抑素增强丙谷胺抑制裸鼠胃癌生长的实验研究

研究胃泌素受体拮抗剂——丙谷胺(PGL)对裸鼠胃癌的抑制作用,以及短期应用生长抑素(SST)能否增强PGL的作用。方法:建立胃癌细胞株MKN_(45)裸鼠移植瘤的动物模型。荷瘤裸鼠30只随机分成:对照组、PGL组(500mg/kg)、SST组(200μg/kg)和PGL+SST组。观察PGL、SST及PGL+SST对胃癌移植瘤的面积、重量、胃癌细胞DNA的影响及其副作用。结果:第16、28天时,PGL组和PGL+SST组移植瘤的面积、重量均低于对照组,且此两组胃癌细胞DNA指数、平均DNA含量及S期细胞比例均较对照组为低,尤以PGL+SST组更明显;各组胃、结肠及胰腺的重量均相近。结论:PGL能抑制裸鼠胃癌细胞株MKNe移植瘤的生长;短期应用SST能增强PGL的作用,且对其他脏器无明显副作用,为他们的临床应用于治疗胃癌提供了理论依据。

胃肠道肿瘤抗胃泌素治疗研究进展

胃泌素是胃窦和十二指肠黏膜G细胞分泌的多肽类激素 ,主要生理作用是促进胃酸分泌和胃肠道黏膜细胞生长。研究显示胃泌素是胃肠道肿瘤细胞一种自泌性的生长因子 ,通过促进增殖、抑制凋亡、刺激浸润以及和COX 2协同作用促进肿瘤生长。胃肠道肿瘤抗胃泌素治疗途径分为分泌抑制、受体拮抗、反义寡核苷酸抑制和抗胃泌素抗体治疗。其中抗胃泌素抗体治疗具有诸多优点 。

胃泌素受体拮抗剂抑制胰腺癌细胞生长的初步研究

目的探讨应用胃泌素受体拮抗剂治疗胰腺癌的可行性。方法在体外条件下观察胃泌素及其受体拮抗剂丙谷胺对胰腺癌细胞株的细胞活力及细胞增殖的影响。结果在体外条件下,胃泌素能促进胰腺癌细胞株的增殖,而丙谷胺能完全阻断胃泌素的作用。结论胃泌素受体拮抗剂能够抑制胃泌素受体阳性的胰腺癌细胞生长,有望为胰腺癌的治疗提供一种新手段。

胃癌非细胞毒性化疗的研究

目的 研究非细胞毒性化疗药物对胃癌生长的抑制作用及机制。方法 观察胃泌素受体（GR）拮抗剂对胃癌细胞株MKN45移植瘤生长的抑制作用;在测定34例胃癌患者达GR的基础上,对GR阳性的胃癌患者加用丙谷胺（PGL）,评价其初步临床效果。结果PGL组移植面积、重量、胃癌细胞 DNA指数、DNA含量及S期细胞比例均低于对照组,PGL+SST组更低;晚期胃体癌、胃底贲门癌易于表达GR;对14例GR阳性的胃癌患者随访16～21月,对照组8例患者中有2例死亡,PGL组6例均存活。结论PGL能调控胃癌细胞株MKN45移植瘤的生长,有望能改善胃癌患者的预后。

DLD-1细胞上甘氨酸延伸型胃泌素受体的结合特性

目的考察人结直肠肿瘤细胞株DLD - 1上甘氨酸延伸型胃泌素受体的结合特性 ;与CCK -A和CCK -B比较 ,找出不同之处。 方法 12 5Ⅰ标记甘氨酸延伸型胃泌素 ,反相高压液相纯化。用DLD - 1细胞进行受体结合试验 ,检测甘氨酸延伸型胃泌素受体结合试验受金属离子K+、Mg2 +、Al3+及温育温度、时间的影响 ;拮抗剂竞争抑制试验比较各种拮抗剂的作用。 结果金属离子K+、Mg2 +能提高甘氨酸延伸型胃泌素受体的特异结合 ,以10 0mmol/LTrisHCl缓冲液中含 10 0mmol/LK+,2mmol/LMg2 +为最佳 ;缓冲液含二个蛋白酶抑制剂时的最大结合发生在 37℃温育 90min ;没有蛋白酶抑制剂的最大结合发生在 37℃温育 6 0min。甘氨酸延伸型胃泌素受体的结合不被特异性CCK -A受体拮抗剂或特异性CCK -B受体拮抗剂拮抗 ,能被非特异性胃泌素受体拮抗剂benzotript拮抗。结论甘氨酸延伸型胃泌素受体的结合特性不同于CCK -A或CCK -B受体。DLD - 1细胞上的甘氨酸延伸型胃泌素受体既能与甘氨酸延伸型胃泌素结合 ,也能与酰胺化胃泌素结合 ,是一个不同于CCK -A和CCK

胃泌素拮抗剂和活化T淋巴细胞联合应用对结肠癌细胞的杀伤作用

目的:探讨联合应用胃泌素拮抗剂和CD28/CD80单克隆抗体共刺激活化的健康人外周血T淋巴细胞(PBLs)在体外对结肠癌细胞株HT-29的杀伤作用。方法:分离与体外培养外周血PBLs,并用CD28/CD80共刺激活化PBLs;用含活化的PBLs和(或)胃泌素拮抗剂CI-988的RPMI1640培养基培养HT-29细胞。MTT法检测2者对HT-29细胞的杀伤率,并用电镜观察效应细胞杀伤结肠癌细胞株HT-29的超微结构及HT-29细胞的凋亡情况。结果:胃泌素拮抗剂与活化PBLs合用,对结肠癌细胞株HT-29的杀伤率((95.81±1.99)%)大于单用胃泌素拮抗剂((66.36±1.31)%)(P<0.05)。电镜结果显示,效应细胞作用12h肿瘤细胞就发生部分坏死,部分肿瘤细胞可见凋亡。结论:联合应用活化的PBLs和胃泌素拮抗剂CI-988可以提高对结肠癌细胞株HT-29杀伤作用。活化的淋巴细胞杀伤结肠癌细胞可能是通过诱导肿瘤细胞坏死及凋亡2条途径来实现。

CD3和CD28双刺激活化的健康人外周血T淋巴细胞与胃泌素拮抗剂合用对结肠癌细胞的杀伤作用

目的探讨联合应用胃泌素拮抗剂和CD3/CD28单克隆抗体共刺激活化健康人外周血T淋巴细胞(PBLs)在体外对结肠癌细胞株HT-29的影响及杀伤途径。为结直肠癌的过继免疫治疗提供参考。方法外周血T淋巴细胞(PBLs)的分离与体外培养;CD3/CD28共刺激活化外周血T淋巴细胞(PBLs);MTT法检测活化细胞的体外淋巴细胞毒作用,并用流式细胞仪检测结肠癌细胞的凋亡情况。结果用CD28共刺激细胞和CI—988分别处理6d后对结肠癌细胞株HT-29抑制率为66%和47.5%,二者合用后3d和6d抑制率分别为41%和90.5%;较单用任何一种处理对结肠癌细胞株HT-29杀伤作用更强(P<0.01)。流式细胞仪FCM图像可见实验组细胞群坏死比例为30.1%,凋亡细胞占19.2%,而对照组仅有坏死细胞0.22%,凋亡细胞1.6%。结论联合应用胃泌素拮抗剂CI-988可以提高单抗协同诱导的效应细胞对结肠癌细胞株HT-29总体抑制,而坏死细胞进一步增多说明效应细胞是通过诱导肿瘤细胞坏死及细胞凋亡两条途径来实现抑制作用。

胃泌素在结肠癌患者中的表达及其受体拮抗剂对人结肠癌细胞株的抑制作用及其对P38信号转导通路的影响

背景结肠癌(colon cancer,CC)是我国常见消化系统恶性肿瘤,早期缺乏特异性症状诊断率较低,导致患者丧失根治性机会,病死率较高,极大危害患者生命健康.胃泌素主要是由胃肠道G细胞分泌一种激素,与胃泌素受体结合后可刺激胃酸分泌,促进胃肠道黏膜生长.丝裂原活化蛋白激酶是一组能被胃泌素等激素激活的丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶,负责细胞表面与细胞核内部间信号传递.目的分析胃泌素在CC患者中的表达,并探讨其受体拮抗剂对人CC细胞株的抑制作用及对P38信号转导通路的影响.方法将2016-01/2018-10我院病理科30例CC组织标本根据世界卫生组织恶性肿瘤分化程度标准分为低分化标本、中分化标本、高分化标本,采用免疫组化技术检测观察胃泌素在CC组织中表达情况,体外培养人CC细胞株SW480,将细胞分为对照组(不进行任何药物处理)、胃泌素组(分别加入6.25-200.00 mg/L胃泌素进行处理)、丙谷胺组(分别加入8.00-256.00 mg/L丙谷胺进行处理)、胃泌素联合丙谷胺组(加入12.5 mg/L胃泌素与8.00-256.00 mg/L丙谷胺进行处理),统计SW480中胃泌素受体/胆囊收缩素-B受体表达情况,比较各组CC细胞株SW480活力、细胞增殖指数、P38信号转导通路表达情况P38蛋白、磷酸化-P38蛋白、B淋巴细胞瘤-2(B lymphocyte tumor-2,SBcl-2)、细胞凋亡促进基因(BAX).结果CC组织分化程度越高,胃泌素表达阳性率越高;胃泌素组6.25-200.00 mg/L范围内SW480 OD值均高于对照组(P<0.05);胃泌素组12.50 mg/L时SW480 OD值最高(P<0.05);胃泌素组25.00-200.00 mg/L范围内SW480 OD值比较差异无统计学意义(P>0.05);丙谷胺组8.00-256.00 mg/L范围内SW480 OD值比较差异无统计学意义(P>0.05);胃泌素组联合丙谷胺组在12.50 mg/L胃泌素联合16.00 mg/L丙谷胺时,SW480OD值最低,低于对照组(P<0.05),之后随着丙谷胺浓度增加,SW480 OD值比较差异无统计学意义(P>0.05);胃泌素组(12.50 mg/L)细胞增殖指数高于丙谷胺组(16.00 mg/L)、胃泌素组联合丙谷胺组(12.5mg/L+16.00 mg/L)(P<0.05);胃泌素组(12.50 mg/L)P38蛋白、磷酸化-P38蛋白、BAX蛋白低于对照组、丙谷胺组(16.00 mg/L)、胃泌素组联合丙谷胺组(12.5mg/L+16.00 mg/L),Bcl-2蛋白表达高于对照组、丙谷胺组(16.00 mg/L)、胃泌素组联合丙谷胺组(12.5 mg/L+16.00 mg/L)(P<0.05).结论胃泌素可抑制人CC细胞株SW480的凋亡,且在CC组织中的表达与肿瘤分化程度有关,分化程度越高,其表达量越高,胃泌素受体拮抗剂在一定浓度范围内可拮抗胃泌素促增殖效应,其机制与上调P38、磷酸化-P38、BAX表达及下调Bcl-2表达有关.

胃泌素及其受体拮抗剂对人大肠癌细胞株SW480作用的研究

用ＭＴＴ比色分析法和流式细胞术在体外研究了５肽胃泌素（ｐｅｎｔａｇａｓｔｒｉｎ，ＰＧ）及胃泌素受体拮抗剂丙谷胺（ｐｒｏｇｌｕｍｉｄｅ，ＰＧＬ）对人大肠癌细胞株ＳＷ４８０的作用。结果显示：ＰＧ能促进ＳＷ４８０细胞生长；ＰＧＬ单用时对ＳＷ４８０细胞没有影响，当ＰＧ与ＰＧＬ合用时，ＰＧＬ呈剂量依赖地拮抗ＰＧ的作用，ＰＧＬ在３２μｇ／ｍｌ以上时，拮抗作用趋于恒定。提示胃泌素的作用是通过其受体发挥的。ＰＧ促进ＳＷ４８０细胞合成ＤＮＡ、蛋白质，促进ＳＷ４８０细胞从Ｇ０／Ｇ１期过度到Ｓ期和Ｇ２Ｍ期；ＰＧＬ完全拮抗这种作用。

RC-3095对大鼠肺组织纤维化的防治作用及其机制研究

目的探讨胃泌素释放肽受体拮抗剂(RC-3095)对大鼠肺组织纤维化的治疗作用及其作用机制。方法选取SPF级健康成年雄性SD大鼠48只,随机选出12只作为对照组(等量生理盐水),另外36只建立肺组织纤维化模型大鼠,选取其中建模成功的24只采用随机数字表法分为模型组(等量生理盐水)和实验组(RC-3095处理,20μg/d各12只);4周后处死大鼠,采用HE染色观察各组大鼠肺组织病理变化、采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血小板衍生生长因子(PDGF)以及肺组织中胶原蛋白的含量。结果模型组、实验组大鼠的血清TNF-α、PDGF水平均显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组大鼠的血清TNF-α、PDGF水平均显著低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);模型组、实验组大鼠肺组织的Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白均显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组大鼠肺组织的Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白水平均显著低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 RC-3095可以减轻肺组织纤维化大鼠模型的炎症反应水平,降低肺组织中胶原蛋白含量,从而达到治疗肺纤维化的目的。

丙谷胺与生长抑素联合应用调控人胃癌MKN_(45)裸鼠移植瘤生长的研究

研究丙谷胺（ＰＧＬ）及其与生长抑素（ＳＳＴ）联合应用对人胃癌细胞株ＭＫＮ４５裸鼠移植瘤的抑制作用。方法建立人胃癌细胞株ＭＫＮ４５移植瘤的动物模型，观察ＰＧＬ（５００ｍｇ／ｋｇ体重）、ＳＳＴ（２００μｇ／ｋｇ体重）及两者联合应用对胃癌移植瘤的面积、重量、胃癌细胞ＤＮＡ的影响。结果ＰＧＬ组、ＰＧＬ＋ＳＳＴ组移植瘤的面积明显缩小，肿瘤重量明显减轻，胃癌细胞ＤＮＡ指数、平均ＤＮＡ含量及Ｓ期细胞比例明显降低（Ｐ＜０．０５），ＰＧＬ＋ＳＳＴ组更为显著。结论ＰＧＬ能抑制胃癌细胞株ＭＫＮ４５移植瘤的生长，ＳＳＴ能明显增强ＰＧＬ对移植瘤的抑制作用。

胃泌素及其受体拮抗剂对BGC-823细胞骨架微丝结构的作用

目的探讨胃泌素及其受体拮抗剂对人胃癌BGC-823细胞系细胞骨架微丝结构的作用。方法在体外用胃泌素和受体拮抗剂处理胃癌BGC-823细胞系,制备光镜和电镜标本并观察细胞骨架。结果胃泌素组细胞核增大,胞浆内微丝量明显减少,微丝部位不定,不呈束结构紊乱;而胃泌素和受体拮抗剂组胞浆内边缘微丝、中间微丝、核周微丝均明显增多,排列规则并呈束,其结构和数量均大体相似于对照组。结论胃泌素能增强BGC-823细胞系的运动,有促进肿瘤细胞转移的作用,而受体拮抗剂可抑制胃泌素的这种作用。

以胃泌素为靶点治疗肿瘤药物的研究进展

胃泌素为一类胃肠道激素,正常情况下通过结合相应受体发挥促进胃酸分泌与胃肠道粘膜生长作用。近来越来越多的研究表明:过量表达的胃泌素可通过自分泌、旁分泌或内分泌方式,导致多种消化系肿瘤(包括胃癌、肠癌、胰腺癌、食管癌等)的发生发展。因而,胃泌素分子目前已成为治疗相关肿瘤的靶点。本文围绕以胃泌素为靶点治疗肿瘤药物(包括分泌抑制剂、受体拮抗剂与抗胃泌素抗体)的研究进展进行综述,以期为研究者进行后续研究与开发提供参考。