消癌平注射液联合吉非替尼对耐药非小细胞肺癌H460和H1975裸鼠移植瘤的抑制作用

目的研究消癌平注射液(Xap)联合吉非替尼(Gef)对耐药非小细胞肺癌(NSCLC)细胞H460和H1975裸鼠移植瘤的抑制作用及机制。方法 BALB/c裸鼠皮下接种人NSCLC的H460或H1975细胞,待肿瘤体积达到50~100 mm^3,分别ip给予Xap 5 g·kg^(-1)、ig给予Gef 50 mg·kg^(-1)或Xap+Gef(Xap+Gef组),连续给药21 d。每7 d测量肿瘤体积2~3次,绘制肿瘤增殖曲线,计算肿瘤增殖率,并记录体质量。取肿瘤组织,称取瘤重,计算肿瘤抑制率。免疫组化法和Western蛋白印迹法检测肿瘤组织中血管生成标志物血管内皮生长因子(VEGF)和内皮糖蛋白(CD105)及耐药相关蛋白磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物西罗莫司(雷帕霉素)靶蛋白(mTOR)和磷酸化胞外信号调节激酶(ERK)的表达。结果与模型对照组相比,单用Xap或Gef对H460和H1975裸鼠移植瘤的生长无显著影响,而两药联合能显著抑制裸鼠的瘤体积[H460组:(1103±340)vs(3020±450)mm^3,H1975组:(487±153)vs(1269±161)mm^3,P<0.05]、降低瘤重[H460组:(1.20±0.52)vs(2.78±0.93)g,H1975组:(0.52±0.32)vs(0.92±0.42)g,P<0.05],肿瘤增殖率和抑制率分别为42.1%,43.5%(H460,P<0.01)和43.0%,52.5%(H1975,P<0.01)。与单用Xap或Gef相比,联合用药组能显著性地降低瘤重和肿瘤增殖率,提高肿瘤抑制率(P<0.05)。免疫组化结果表明,单用Xap或Gef对肿瘤血管新生标志物VEGF和CD105及耐药相关蛋白p-PI3K,p-ERK,p-Akt和p-mTOR的表达无影响,而联合用药却能明显降低H460和H1975肿瘤组织中VEGF,CD105,p-ERK,p-Akt和p-mTOR的表达。Western蛋白印迹结果表明,与模型对照组相比,联合用可显著抑制p-PI3K及其下游蛋白p-Akt,p-ERK和p-mTOR蛋白的表达(P<0.01),并且优于单用Xap或Gef(P<0.05)。结论联合Xap可显著提高Gef在H460和H1975裸鼠移植瘤的疗效,该协同作用部分是通过抑制肿瘤血管新生和PI3K及其下游信号分子等耐药相关蛋白的表达实现的。

雷公藤甲素与吉非替尼序贯应用对人肺腺癌细胞H1975存活及凋亡通路的影响

背景与目的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)被用于治疗进展性晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC),然而最初接受TKIs治疗有反应的患者,大都会在10个月左右出现获得性耐药。报告称EGFR基因T790M的突变是产生获得性耐药的主要原因,比例约占50%。本研究旨在探索雷公藤甲素(triptolide,TP)和吉非替尼序贯应用对肺腺癌细胞H1975细胞增殖和凋亡通路的作用。方法 MTT法检测细胞的增殖。等效线图法和联合指数(combination index,CI)法评估雷公藤甲素和吉非替尼序贯作用的效价。流式细胞术检测细胞凋亡和周期分布,Hoechest 33258染色法检测凋亡形态。化学比色发光法检测Caspases的活性。结果等效线图法和联合指数法均显示雷公藤甲素序贯吉非替尼组较其他序贯作用组明显抑制了细胞增殖,增加了细胞的凋亡。细胞周期分布实验结果显示与吉非替尼序贯雷公藤甲素组主要把细胞抑制在G0/G1期相比较,雷公藤甲素序贯吉非替尼组主要把细胞抑制在G2/M期。在肺腺癌H1975中,所有序贯模型组都主要通过活化Caspase-9/Caspase-3来诱导激活细胞凋亡通路。结论先用雷公藤甲素再用吉非替尼治疗模式可能是克服T790M突变耐药的一个新选择。

常规化疗与吉非替尼序贯治疗老年晚期肺腺癌近期疗效观察

目的:观察常规化疗与吉非替尼序贯治疗老年晚期肺腺癌近期疗效及不良反应。方法:选择15例初治老年晚期肺腺癌患者,给予常规化疗序贯吉非替尼治疗:常规化疗,每3周重复,最多不超过6个周期,化疗疗程结束或化疗中出现病情进展后给予吉非替尼治疗,至疾病进展或不良反应不能耐受时停药。观察近期疗效及不良反应。结果:15例患者均可评价疗效,其中完全缓解0例,部分缓解5例(33.3%),疾病稳定7例(46.7%),疾病进展3例(20.0%),有效率33.3%,疾病控制率为80.0%,1年生存率为33.3%。主要不良反应为骨髓抑制、消化道反应及皮疹等。结论:常规化疗与吉非替尼序贯治疗老年晚期肺腺癌疗效确切,安全性较好。

苯丁酸钠和吉非替尼对肺腺癌A549细胞的作用

目的研究组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂苯丁酸钠(Sodium 4-Phenylbu-tyrate,SPB)和EGFR小分子抑制剂吉非替尼单独及联合运用对肺腺癌A549细胞生长及侵袭能力的影响,探讨苯丁酸钠和吉非替尼联用的效果。方法通过MTT法和细胞克隆形成试验法察细胞生长的抑制作用;采用流式细胞术测定细胞周期分布的变化;用transwell小室法检测药物处理前后细胞侵袭力的变化。结果苯丁酸钠和吉非替尼联用时,肺腺癌A549细胞的生长速度明显减慢,细胞周期被阻滞在G0/G 1期,S期细胞数减少;药物处理后肺腺癌A549细胞的侵袭能力降低与对照组、单用药组相比,差异有显著性(P<0.05)。结论组蛋白去乙酰化酶抑制剂苯丁酸钠和EGFR小分子抑制剂吉非替尼联用时有明显的增效作用。

吉非替尼的合成工艺改进

以3-羟基-4-甲氧基苯甲醛为原料,先与N-(3-氯丙基)吗啉缩合,后依次经过醛基转化为氰基、硝化、还原、与3-氯-4-氟苯胺环合等反应合成了抗肿瘤药物吉非替尼,总收率约50%。其结构经1H NMR,MS和元素分析表征。

吉非替尼与常规化疗治疗晚期非小细胞肺癌的疗效观察

目的观察比较吉非替尼与含铂方案的常规化疗治疗晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的疗效.方法选取呼吸科晚期NSCLC患者,常规化疗组22例,吉非替尼组15例,观察治疗效果及不良反应.结果37例可评价疗效的晚期NSCLC患者中,化疗组：CR 0例,PR 4例,SD 8例,PD 10例,缓解率18.18%（4/22）,疾病控制率54.55%（12/22）;吉非替尼组：CR 1例,PR 5例,SD 7例,PD 2例,缓解率40.00%（6/15）,疾病控制率86.67%（13/15）;不良反应主要是骨髓抑制、消化道反应及皮疹,在化疗组和吉非替尼组的发生率分别是72.73%、77.27%、13.64%及6.67%、40.00%、66.67%.结论吉非替尼对晚期NSCLC有良好的疗效,且安全性高,为肺癌的治疗提供了新的途径.

小豆蔻明联合吉非替尼抑制非小细胞肺癌PC9/GR细胞增殖及其作用机制研究

目的探讨小豆蔻明联合吉非替尼对人非小细胞肺癌PC9/GR细胞增殖调亡的影响。方法CCK-8检测吉非替尼和小豆蔻明对PC9/GR增殖抑制作用,同时,分别以IC15浓度的小豆蔻明、IC50浓度的吉非替尼和两药联用(小豆蔻明+吉非替尼)处理细胞,利用划痕实验检测两药单独及联合对PC9/GR细胞转移的影响;流式细胞术检测两药单独及联合对PC9/GR细胞凋亡和周期的影响;Western-blot检测NF-κB和mTOR信号通路相关蛋白及凋亡周期相关蛋白。结果小豆蔻明联合吉非替尼能够显著抑制PC9/GR细胞的增殖,其抑制效率明显高于吉非替尼单独用药,小豆蔻明和吉非替尼联合用药能诱导PC9/GR细胞G2/M期阻滞和凋亡,同时抑制NF-κB和mTOR信号通路。结论小豆蔻明和吉非替尼具有协同抑制PC9/GR细胞增殖作用,其机制可能与小豆蔻明抑制mTOR及NF-κB信号通路导致肿瘤细胞凋亡密切相关。

吉非替尼片的工艺研究和溶出曲线评价

目的对吉非替尼片工艺进行研究,并评价自制片的溶出曲线。方法对关键工艺步骤粉碎、混合、干燥进行研究,拟定吉非替尼片的溶出度测定方法,评价自制制剂和参比制剂的溶出曲线相似性。结果自制制剂和参比制剂的体外溶出相似,样品加速6个月后体外溶出相似。结论吉非替尼片处方设计合理,制备工艺可行,产品稳定性好。