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Identification of ABA-responsive genes in rice shoots via cDNA macroar- ray 被引量:6
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作者 FANGLIN SHOULINGXU 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2003年第1期59-68,共10页
Phytohormone abscisic acid (ABA) was critical for many plant growth and developmental processesincluding seed maturation, germination and response to environmental factors. With the purpose to detectthe possible ABA r... Phytohormone abscisic acid (ABA) was critical for many plant growth and developmental processesincluding seed maturation, germination and response to environmental factors. With the purpose to detectthe possible ABA related signal transduction pathways, we tried to isolate ABA-regulated genes throughcDNA macroarray technology using ABA-treated rice seedling as materials (under treatment for 2, 4, 8 and12 h). Of 6144 cDNA clones tested, 37 differential clones showing induction or suppression for at least onetime, were isolated. Of them 30 and 7 were up- or down-regulated respectively. Sequence analyses revealedthat the putative encoded proteins were involved in different possible processes, including transcription,metabolism and resistance, photosynthesis, signal transduction, and seed maturation. 6 cDNA clones werefound to encode proteins with unknown functions. Regulation by ABA of 7 selected clones relating to signaltransduction or metabolism was confirmed by reverse transcription PCR. In addition, some clones werefurther shown to be regulated by other plant growth regulators including auxin and brassinosteroid, which,however, indicated the complicated interactions of plant hormones. Possible signal transduction pathwaysinvolved in ABA were discussed. 展开更多
关键词 水稻 ABA敏感基因 脱落酸 植物激素 鉴定 CDNA阵列 信号转导
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西北地区草地贪夜蛾种群遗传多样性分析及治理策略
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作者 张大为 陈靖 +3 位作者 魏玉红 惠娜娜 郭致杰 罗进仓 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期312-320,共9页
旨在明确甘肃省草地贪夜蛾的入侵来源,并制定科学有效的防控对策。基于mtCOI基因分子标记分析中国草地贪夜蛾不同生态区8个省12个地理种群276个样品的遗传多样性指数、遗传分化系数及基因流等。结果表明,甘肃省草地贪夜蛾种群的单倍型... 旨在明确甘肃省草地贪夜蛾的入侵来源,并制定科学有效的防控对策。基于mtCOI基因分子标记分析中国草地贪夜蛾不同生态区8个省12个地理种群276个样品的遗传多样性指数、遗传分化系数及基因流等。结果表明,甘肃省草地贪夜蛾种群的单倍型多样性指数和平均核苷酸差异数分别为0.133~0.157与0.133~0.317,均低于中国周年繁殖区广东、广西、云南种群的0.157~0.819与1.033~7.705;所有种群的Tajima’s D中性检验和Fu’s F检验结果均为负值,表明草地贪夜蛾入侵中国后经历了明显的种群扩张事件。四川种群与其他种群遗传分化显著,62个种群间存在中等程度以上的基因交流。陕西略阳、陕西宁强、甘肃徽县、甘肃成县种群的有效迁入个体数和有效迁出个体数之和分别为11 860.66、11 708.65、10 878.66和10 379.32,在中国草地贪夜蛾的基因交流过程中具有中继站的作用,表明陕南汉水谷地为中国草地贪夜蛾西线北迁入侵西北的主要通道。 展开更多
关键词 mtCOI基因 草地贪夜蛾 遗传多样性 遗传分化 基因流
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TGF-β2和geneX对BrdU标记骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化的作用 被引量:5
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作者 胡正雄 李彪 +3 位作者 蓝天 杨毅 王晓东 龚跃昆 《昆明医科大学学报》 CAS 2016年第2期10-14,共5页
目的研究TGF-β2和gene X对Brd U标记的骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化作用的影响.方法采用全骨髓贴壁培养法分离骨髓间充质干细胞,传代并鉴定,设实验组和空白对照组,实验组分4组:A组:Brd U标记后的BMSCs组;B组:Brd U标记后的BMSCs+TGF... 目的研究TGF-β2和gene X对Brd U标记的骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化作用的影响.方法采用全骨髓贴壁培养法分离骨髓间充质干细胞,传代并鉴定,设实验组和空白对照组,实验组分4组:A组:Brd U标记后的BMSCs组;B组:Brd U标记后的BMSCs+TGF-β2组;C组:Brd U标记后的BMSCs+gene X组;D组:Brd U标记后的BMSCs+gene X+TGF-β2组.空白对照组为Brd U标记后的单纯BMSCs加入基础培养基避光培养.诱导培养后观察骨髓间充质干细胞生长形态、检测生长动力学(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)、碱性磷酸酶(ALP)和钙定量、进行细胞Von-Kossa法染色,观察成骨分化作用.结果 (1)4组BMSCs吸光度值(OD)分析比较显示:细胞组间差异有统计学意义(P<0.05);(2)各组BMSCs成骨诱导后碱性磷酸酶(ALP)和钙定量检测结果显示:细胞组间差异有统计学意义(P<0.05);(3)进行细胞Von-Kossa法染色,D组可见大量钙结节;C组可见较多钙结节;B组可见部分钙结节;A组可见少量钙结节;空白对照组未见钙结节.结论 (1)TGF-β2可促进骨髓间充质干细胞的增殖和诱导其向成骨细胞分化;(2)gene X可促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,且在细胞因子TGF-β2联合作用下成骨分化作用更明显. 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 TGF-Β2 gene X 细胞增殖 成骨分化
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蜻蜓凤梨AfFT3基因克隆及功能鉴定
4
作者 荆永琳 王小冰 +3 位作者 李俊国 陈浪欣 杨庆全 徐立 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期411-421,共11页
【目的】克隆蜻蜓凤梨成花素基因AfFT3,并鉴定其生物学功能,为深入解析凤梨科植物开花分子机制提供理论依据。【方法】克隆AfFT3基因,利用生物信息学软件进行序列分析,并通过实时荧光定量PCR探究其在低温(18℃)、常温(25℃)和高温(35℃... 【目的】克隆蜻蜓凤梨成花素基因AfFT3,并鉴定其生物学功能,为深入解析凤梨科植物开花分子机制提供理论依据。【方法】克隆AfFT3基因,利用生物信息学软件进行序列分析,并通过实时荧光定量PCR探究其在低温(18℃)、常温(25℃)和高温(35℃)及外源乙烯处理下的表达情况,采用农杆菌浸花法将AfFT3基因转入拟南芥,观察转基因植株表型,通过异源表达预测其生物学功能。通过酵母单杂交试验初步鉴定其启动子与AfEIN3蛋白的互作关系。【结果】从蜻蜓凤梨中克隆获得AfFT3基因全长570 bp,编码区(CDS)序列为465 bp,编码154个氨基酸残基,蛋白分子量为17.3 kD,为稳定的亲水性蛋白,无跨膜螺旋区,含有PKC、PKA、cdc2、INSR和GSK3等多个蛋白激酶磷酸化位点。同源序列比对发现,AfFT3蛋白中有2个氨基酸残基^(138)Trp和^(140)Gln突变为^(138)Met和^(140)Glu。系统发育分析结果显示,该蛋白属于PEBP家族的FT-like蛋白亚家族,与TFL-like亚家族的亲缘关系较近。与对照(大棚正常条件下栽培植株)相比,高温和低温处理下AfFT3基因在蜻蜓凤梨中的相对表达量显著(P<0.05,下同)或极显著(P<0.01,下同)升高。在高温、常温和低温条件下,使用外源乙烯处理后,AfFT3基因在蜻蜓凤梨中的相对表达量均较对照显著或极显著升高,在常温处理下其相对表达量最高。共获得6个转基因拟南芥株系(L_(1)~L_(6)),其中转基因株系L_(3)和L_(6)较转空载体拟南芥和野生型拟南芥延迟抽薹8 d。通过分段扩增获得AfFT3基因启动子3段序列(AfFT3-P1、AfFT3-P2和AfFT3-P3),长度分别为390、1077和552 bp,通过酵母单杂试验推测启动子序列AfFT3-P1和AfFT3-P3可与AfEIN3蛋白发生互作。【结论】高温、低温胁迫和乙烯均不同程度诱导AfFT3基因的高效表达,但在高温和低温条件下乙烯对AfFT3基因的表达诱导效果较常温有所降低,其转基因株系延迟抽薹,说明AfFT3基因参与调控蜻蜓凤梨开花过程,且响应温度和乙烯信号。 展开更多
关键词 蜻蜓凤梨 AfFT3基因 开花 温度 乙烯 功能鉴定 启动子
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miR-30c-5p对人绒毛滋养层细胞线粒体自噬、间充质转化及PEG10水平影响
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作者 许文方 黄官友 +2 位作者 杨朝 徐文杰 赵孝梅 《解剖学研究》 CAS 2024年第2期103-109,131,共8页
目的探讨miR-30c-5p对人绒毛滋养层细胞线粒体自噬、间充质转化及PEG10水平影响。方法人绒毛滋养层细胞HTR-8/SVneo分为空白组(HTR-8/SVneo细胞正常培养)、低氧组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养)、miR-30c-5p mimics组(HTR-8/SVneo细胞低氧... 目的探讨miR-30c-5p对人绒毛滋养层细胞线粒体自噬、间充质转化及PEG10水平影响。方法人绒毛滋养层细胞HTR-8/SVneo分为空白组(HTR-8/SVneo细胞正常培养)、低氧组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养)、miR-30c-5p mimics组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染miR-30c-5p mimics)、NC-mimics组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染NC-mimics)、miR-30c-5p inhibitor组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染miR-30c-5p inhibitor)、NC-inhibitor组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染NC-inhibitor)。qRT-PCR检测各组细胞miR-30c-5p表达;Transwell小室检测细胞侵袭数目;划痕试剂盒检测细胞划痕愈合率;相关试剂盒检测ROS水平;免疫印记检测PEG10、Parkin、PINK1蛋白水平。结果空白组、低氧组、miR-30c-5p mimics组、NC-mimics组、miR-30c-5p inhibitor组及NC-inhibitor组的miR-30c-5p表达分别为1.00±0.00、1.00±0.00、1.61±0.15、1.03±0.13、0.75±0.08及0.96±0.10,差异有统计学意义(F=45.750,P<0.05);与空白组相比,低氧组HTR-8/SVneo细胞侵袭数目、划痕愈合率、PEG10、Parkin、PINK1降低,ROS升高,差异均有统计学意义(P<0.05);低氧组与NC-mimics组、NC-inhibitor组比较上述指标,差异均无统计学意义(P>0.05);与低氧组相比,miR-30c-5p mimics组细胞侵袭数目、划痕愈合率、PEG10、Parkin、PINK1降低,ROS升高,差异均有统计学意义(P<0.05),miR-30c-5p inhibitor组细胞侵袭数目、划痕愈合率、PEG10、Parkin、PINK1升高,ROS降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论抑制miR-30c-5p可加快低氧状态下的人绒毛滋养层细胞侵袭及迁移,并通过促进线粒体自噬降低ROS表达,机制与抑制PEG10水平相关。 展开更多
关键词 人绒毛滋养层细胞 线粒体自噬 miR-30c-5p 间充质转化 父系表达基因10
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我国禽传染性支气管炎病毒分子流行病学研究进展
6
作者 高明燕 姜逸 +4 位作者 程旭 俞燕 范建华 贾雪波 孟闯 《中国家禽》 北大核心 2023年第12期87-94,共8页
禽传染性支气管炎(Infectious bronchitis,IB)是由禽传染性支气管炎病毒(Infec-tiousbronchitisvirus,IBV)引起的雏鸡和成年鸡呼吸系统以及泌尿生殖道组织损伤和病变的急性、高度接触性疾病。虽然临床上广泛使用疫苗免疫防控该病,但由于... 禽传染性支气管炎(Infectious bronchitis,IB)是由禽传染性支气管炎病毒(Infec-tiousbronchitisvirus,IBV)引起的雏鸡和成年鸡呼吸系统以及泌尿生殖道组织损伤和病变的急性、高度接触性疾病。虽然临床上广泛使用疫苗免疫防控该病,但由于IBV基因组存在频繁的变异和重组,导致新基因型和血清型不断出现,从而造成我国鸡IB未能得到有效控制。文章详细介绍了基于IBVS1基因系统发育学建立的分型方法以及我国流行的IBV4个基因型、18个分支的来源、传播和流行现状,为IB防控和疫苗研发提供参考。 展开更多
关键词 禽传染性支气管炎病毒 分子流行病学 S1基因序列系统发育学分析 基因重组
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自发性蛛网膜下腔出血患者内皮型一氧化氮合酶基因突变与不良预后的相关性
7
作者 伊德尔 张春声 +1 位作者 张勇 范玉红 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2023年第7期729-732,共4页
目的研究自发性蛛网膜下腔出血患者内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因突变与不良预后的相关性。方法选取2019年10月至2022年10月巴彦淖尔市医院收治的240例自发性蛛网膜下腔出血患者。采用TaqMan法检测eNOS基因rs1799983位点多态性,分析eNO... 目的研究自发性蛛网膜下腔出血患者内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因突变与不良预后的相关性。方法选取2019年10月至2022年10月巴彦淖尔市医院收治的240例自发性蛛网膜下腔出血患者。采用TaqMan法检测eNOS基因rs1799983位点多态性,分析eNOS基因rs1799983位点基因型与不良预后的关系。根据不良预后情况将患者分为良好组167例和不良组73例,比较2组患者临床资料,采用多因素logistic回归分析影响不良预后的危险因素。结果eNOS基因rs1799983位点存在3种基因型:GG(156例)、GT(58例)、TT(26例),G和T等位基因频率分别为77.08%和22.92%。并发症发生率为30.42%。GG基因型的并发症发生率显著低于GT+TT基因型(25.64%vs39.29%,P<0.05);不良组发热比例显著高于良好组(26.03%vs11.98%,P<0.01)。不良组Hunt-Hess分级Ⅰ~Ⅱ级、Fisher分级Ⅰ~Ⅱ级比例低于良好组(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,发热、Hunt-Hess分级、Fisher分级、eNOS基因rs1799983位点基因型均是不良预后的影响因素(P<0.05,P<0.01),其中发热、Hunt-Hess分级Ⅲ~Ⅴ级、Fisher分级Ⅲ~Ⅳ级、eNOS基因rs1799983位点基因型GT+TT增加并发症的发生风险(P<0.05)。结论eNOS基因rs1799983位点多态性与自发性蛛网膜下腔出血患者不良预后密切关联,其中G→T突变增加患者不良预后风险。 展开更多
关键词 蛛网膜下腔出血 一氧化氮合酶 预后 数据相关性 突变 基因
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牛溶血性曼氏杆菌可视化LAMP检测方法的建立
8
作者 刘宁宁 易萍 +2 位作者 郭爱珍 胡长敏 陈颖钰 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期32-37,共6页
为建立一种能够快速、高效检测牛溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica)的可视化LAMP检测法,利用LAMP引物设计软件,以溶血性曼氏杆菌保守基因lktC序列设计内引物、外引物及环引物,对其反应温度、Mg^(2+)浓度、dNTPs浓度等条件进行优化... 为建立一种能够快速、高效检测牛溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica)的可视化LAMP检测法,利用LAMP引物设计软件,以溶血性曼氏杆菌保守基因lktC序列设计内引物、外引物及环引物,对其反应温度、Mg^(2+)浓度、dNTPs浓度等条件进行优化,并检测了方法的敏感性、特异性及实用性。结果显示,该方法在68.2℃、6 mmol/L Mg^(2+)、1.6 mmol/L dNTPs条件下达到最佳,40 min内完成检测并可通过肉眼判定结果,对细菌的最低检测限为6.7×10^(-1)cfu/μL,对lktC重组质粒的最低检测限为7.9×10^(2)copies/μL,敏感性高;与15种病原均不发生交叉反应,特异性好;对背景清晰小鼠肺组织样本检测结果显示该方法实用性良好,且优于普通PCR方法。表明该方法可快速、高效检测牛溶血性曼氏杆菌。 展开更多
关键词 环介导等温扩增(LAMP) lktC基因 溶血性曼氏杆菌 可视化检测 综合防控
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油棕病毒诱导的基因沉默体系的建立及优化
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作者 李萌晗 王威 +1 位作者 邹积鑫 李东栋 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期259-264,共6页
为开展油棕油脂代谢调控相关基因鉴定研究,以油棕八氢番茄红素脱氢酶基因(phytoene desaturase gene,PDS)作为报告基因,探索以病毒载体TRV为载体在油棕胚状体上应用病毒诱导基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)的可能性,并对... 为开展油棕油脂代谢调控相关基因鉴定研究,以油棕八氢番茄红素脱氢酶基因(phytoene desaturase gene,PDS)作为报告基因,探索以病毒载体TRV为载体在油棕胚状体上应用病毒诱导基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)的可能性,并对油棕胚状体VIGS体系的相关参数进行优化。结果显示:以EHA105为菌种、侵染菌液OD_(600)=0.5、侵染时间5 min、乙酰丁香酮(AS)质量浓度20 mg/L、共培养48 h、侵染后培养时间为12 d能取得最佳的基因沉默效果。在此基础上,利用优化后的VIGS体系对油棕二酰甘油酰基转移酶基因(diacylglycerol acyltransferase gene,DGAT)进行沉默,取得了预期的基因沉默效果。 展开更多
关键词 油棕 胚状体 病毒诱导的基因沉默体系 遗传转化 八氢番茄红素脱氢酶
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籼型温敏核不育水稻叶绿素突变体的诱变及其初步研究 被引量:26
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作者 夏英武 刘贵付 +2 位作者 舒庆尧 蒋荣花 谢嘉华 《核农学报》 CAS CSCD 1995年第3期129-133,共5页
用60Coγ射线辐照粑型温敏核不育系2177S,获得了一批常见的叶绿素突变体。M2代按苗计,叶绿素总突变频率为0.262%,其中只有4.50%可以存活并遗传,从中筛选出33个综合性状优良的籼型温敏核不育叶绿素突变系。... 用60Coγ射线辐照粑型温敏核不育系2177S,获得了一批常见的叶绿素突变体。M2代按苗计,叶绿素总突变频率为0.262%,其中只有4.50%可以存活并遗传,从中筛选出33个综合性状优良的籼型温敏核不育叶绿素突变系。经鉴定,这些叶绿素突变受基因控制,比较稳定,有的只在苗期表达并逐渐转为正常,有的则在全生育期表达。与2177S相比,农艺性状都有不同程度变化,但温敏不育特性基本不受影响。遗传分析表明,所有的突变体与亲本正反交时,杂种F1均为绿色植株,杂种F2群体中,正常绿色株与对应叶绿素突变株分离比值符合3:1。证明这类突变是由1对隐性细胞核基因所控制。 展开更多
关键词 籼型温敏核不育 水稻 叶绿素 突变体 诱变
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假性软骨发育不全、多发性骨骺发育不良的分子遗传学研究进展 被引量:7
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作者 王晶晶 郭奕斌 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期537-542,共6页
假性软骨发育不全(pseudoachondroplasia,PSACH)和多发性骨骺发育不良(multiple epiphyseal dysplasia,MED)均为骨发育不良性疾病的家族成员之一,它们的遗传方式和临床表型都具有异质性的特点,二者均由软骨低聚物基质蛋白(cartilage oli... 假性软骨发育不全(pseudoachondroplasia,PSACH)和多发性骨骺发育不良(multiple epiphyseal dysplasia,MED)均为骨发育不良性疾病的家族成员之一,它们的遗传方式和临床表型都具有异质性的特点,二者均由软骨低聚物基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)基因突变所致。COMP是血小板凝血酶敏感蛋白(thrombospondin,TSP)家族的成员之一,它在骨骼的发育过程中起着重要的作用,文章着重就COMP的结构与功能、COMP基因的突变类型、检测方法及其与两病的相关性的最新进展作一综述。 展开更多
关键词 假性软骨发育不全 多发性骨骺发育不良 软骨低聚物基质蛋白 基因突变 基因诊断
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成人乙肝基因疫苗接种效果Meta分析与成人接种的必要性 被引量:37
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作者 武桂英 赵新平 +1 位作者 赵耐青 龚幼龙 《中国卫生统计》 CSCD 北大核心 2005年第6期359-361,共3页
目的评价成人接种乙肝基因疫苗后的免疫效果。方法文献检索符合本研究分析条件的成人乙肝基因疫苗接种免疫效果论文10篇,5篇为实验对照研究,5篇为平行对照研究,用抗HBs的转阳率作为效果指标;采用Meta分析中的固定效应模型(General Varia... 目的评价成人接种乙肝基因疫苗后的免疫效果。方法文献检索符合本研究分析条件的成人乙肝基因疫苗接种免疫效果论文10篇,5篇为实验对照研究,5篇为平行对照研究,用抗HBs的转阳率作为效果指标;采用Meta分析中的固定效应模型(General Variance-Based法)和随机效应模型(Der Si monian and Laird法)统计方法进行分析。结果实验对照研究论文经Meta分析,公共OR的估计值为2·842,95%的可信区间为(1·329,4·354),实验组和对照组的抗HBs转阳率差别有统计学意义;平行对照研究论文经Meta分析,公共OR的Mantel-Haeszel估计值为0·6592,相应的95%的可信区间为(0·5435,0·7994),男性组和女性组的抗HBs转阳率差别有统计学意义。结论成人接种乙肝基因疫苗的免疫仍有较好效果,加强对中青年人群的乙肝疫苗接种宣传,控制人群HBsAg感染率。 展开更多
关键词 乙肝基因疫苗 成人 免疫效果 META分析
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二氢黄酮醇-4-还原酶在花青素合成中的功能及调控研究进展 被引量:12
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作者 李亚丽 李欣 +4 位作者 肖婕 李瑞玲 杨华丽 孙勃 汤浩茹 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期187-196,共10页
植物色素主要有花青素、类胡萝卜素和生物碱类色素三大类,其中花青素是决定大部分被子植物组织或器官颜色的重要色素。花青素通过类黄酮途径合成,该途径是生物学上研究较多且较为清楚的代谢途径之一。近年来的研究表明,在该途径中除了... 植物色素主要有花青素、类胡萝卜素和生物碱类色素三大类,其中花青素是决定大部分被子植物组织或器官颜色的重要色素。花青素通过类黄酮途径合成,该途径是生物学上研究较多且较为清楚的代谢途径之一。近年来的研究表明,在该途径中除了查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)、查尔酮异构酶(chalcone isomerase,CHI)和黄烷酮-3-羟化酶(flavanone-3-hydrolase,F3H)起着关键作用外,二氢黄酮醇-4-还原酶(dihydroflavonol 4-reductase,DFR)对花青素的合成也至关重要。DFR可催化3种二氢黄酮醇和2种黄烷酮生成5种不同的花青素前体,且DFR基因家族不同成员对各个底物的催化效率不同,因此它在一定程度上决定着植物中花青素的种类和含量,从而影响植物组织或器官的颜色。该文对近年来国内外有关DFR在花青素合成过程中的生物学功能与调控,包括DFR的特征、作用机制和系统进化以及环境、转录因子和一些结构基因与DFR的关系等方面的研究进展进行了综述,以期为DFR今后的研究和利用基因工程改变植物组织或器官的颜色提供理论依据。 展开更多
关键词 二氢黄酮醇-4-还原酶 花青素 环境 激素 结构基因 转录因子
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广西不同时期IBV分离株S1基因高变区Ⅰ的遗传变异分析 被引量:22
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作者 韦正吉 韦平 +3 位作者 磨美兰 李孟 韦天超 李康然 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期126-132,共7页
对广西1985-2007年间分离到的22株传染性支气管炎病毒(IBV)的S1基因高变区I(HVRI)进行序列测定,并与发表的其他IBV参考株及鸽子分离的冠状病毒株的基因序列进行比较和分析。系统进化关系显示毒株可分为5个基因群,其中有16个广西... 对广西1985-2007年间分离到的22株传染性支气管炎病毒(IBV)的S1基因高变区I(HVRI)进行序列测定,并与发表的其他IBV参考株及鸽子分离的冠状病毒株的基因序列进行比较和分析。系统进化关系显示毒株可分为5个基因群,其中有16个广西分离株属第1群,它们与鸽子冠状病毒分离株的氨基酸序列同源性较高,与Massachusetts(Mass)型疫苗株的同源性较低。有15个分离株在33-34位和34~35之间分别有4个和3个氨基酸残基的插入,GX-NN6在33~34位和34~35位之间则均有4个氨基酸残基的插入;GX-YL1、GX-NN2与常用的Mass型疫苗株的亲缘关系最近,同属于第Ⅱ群;GX-G、GX-XD与日本同一时期分离的毒株JP Miyazaki 89亲缘关系最近,属于第Ⅲ群;GX-YL6、GX-NN7与欧洲毒株4/91亲缘关系较近,属于第V群。结果表明广西存在着多种类型IBV毒株的流行,毒株S1基因HVRI碱基的突变或插入比较普遍,可导致其氨基酸序列的变化,绝大部分毒株与目前常用的Mass型疫苗株的亲缘关系较低。同一时期的分离株同源性较高,但无明显的地域性差异。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 分离株 S1基因高变区I 序列测定 遗传变异 基因型
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cagA基因缺失的中国幽门螺杆菌突变菌株的构建及鉴定 被引量:6
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作者 黄志刚 段广才 +1 位作者 范清堂 黄学勇 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2006年第33期3190-3194,共5页
目的:构建cagA基因缺失的中国幽门螺杆菌突变株.方法:运用基因同源重组方法将卡那霉素抗性基因(kmR)连接到PCR扩增cagA基因两端区域产生的2个基因片段之间,并共同插人到pBluescriptSKⅡ(-)载体的多克隆位点中,构建出带卡那霉素抗性标志... 目的:构建cagA基因缺失的中国幽门螺杆菌突变株.方法:运用基因同源重组方法将卡那霉素抗性基因(kmR)连接到PCR扩增cagA基因两端区域产生的2个基因片段之间,并共同插人到pBluescriptSKⅡ(-)载体的多克隆位点中,构建出带卡那霉素抗性标志的缺失突变载体pBs-cagA-mutant.将突变载体转化到含完整cagA基因的突变受体MEL-Hpylori27菌株中.卡那霉素筛选出cagA基因缺失的中国幽门螺杆菌突变株,并经PCR和DNA测序鉴定.结果:构建的突变载体经限制性内切酶酶切分析显示,产生的条带与设计结果完全一致.PCR方法扩增突变株cagA,kmR基因显示,cagA基因已被完整敲除掉,DNA测序证实筛选得到了cagA基因缺失的幽门螺杆菌突变株.连续培养25代后证实,幽门螺杆菌突变株具有良好稳定性.结论:首次成功构建出1株中国人来源的、cagA基因缺失的幽门螺杆菌突变株. 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 CAGA基因 缺失表达 突变体
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消减抑制杂交及其在肿瘤研究中的应用 被引量:5
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作者 梁莉 丁彦青 石益民 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第9期997-1000,共4页
消减抑制杂交(suppressionsubtractivehybridization,SSH)是最近提出的一种以抑制PCR为基础的差异显示基因克隆技术。该方法具有简便易行、特异性高、能分离出丰度较低的特异性片段等优点,并已成功应用于肿瘤、发育生物学、免疫调控等... 消减抑制杂交(suppressionsubtractivehybridization,SSH)是最近提出的一种以抑制PCR为基础的差异显示基因克隆技术。该方法具有简便易行、特异性高、能分离出丰度较低的特异性片段等优点,并已成功应用于肿瘤、发育生物学、免疫调控等方面的研究,本文简述其原理、方法、及在肿瘤研究中的应用进展,并对其方法的优缺点和应用前景进行分析。 展开更多
关键词 消减抑制杂交 肿瘤 基因克隆 特异性片段 CDNA
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血管内皮生长因子对猪心肌侧枝血管生成的作用 被引量:9
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作者 张端珍 盖鲁粤 +3 位作者 陈以旺 范瑞云 文应峰 董蔚 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期183-187,共5页
为检测血管内皮生长因子165(VEGF165)能否促进冠状动脉侧枝血管形成,实验在成功制作小型猪慢性心肌缺血模型后,将以复制缺陷重组腺病毒为载体的人VEGF165互补脱氧核糖核酸[(cDNA)Ad-VEGF165]直... 为检测血管内皮生长因子165(VEGF165)能否促进冠状动脉侧枝血管形成,实验在成功制作小型猪慢性心肌缺血模型后,将以复制缺陷重组腺病毒为载体的人VEGF165互补脱氧核糖核酸[(cDNA)Ad-VEGF165]直接注入左回旋支(LCX)分布的缺血心肌内,以心电图门控单光子发射计算机断层摄影和离体冠状动脉造影检测冠状动脉侧枝形成、心肌灌注和功能变化。结果显示,与对照组和自身给予Ad-VEGF165前比较,给予Ad-VEGF165四周后心肌缺血面积(P<0.01)和最大缺血程度(P<0.01)明显减小,左心室射血分数(P<0.01)和LCX区局部心室壁运动(P<0.05)明显改善,治疗组侧枝血管生成明显多于对照组(P<0.05),表明Ad-VEGF165能诱导心肌侧枝血管形成并改善心肌灌注与运动功能。 展开更多
关键词 内皮生长因子 基因治疗 缺血性心脏病 血管生成 心肌功能 侧枝循环
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风疹病毒JR23株E1包膜糖蛋白基因的表达分析 被引量:3
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作者 王志玉 薛永磊 +2 位作者 王小凡 王桂亭 宋艳艳 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期278-280,共3页
To construct the eukaryot ic expression system of E1 glycopr otein of rubella virus(RV)JR23 str ain and to study the biological an d immunological properties of the expressed product,the E1 gene was amplified by RT-PC... To construct the eukaryot ic expression system of E1 glycopr otein of rubella virus(RV)JR23 str ain and to study the biological an d immunological properties of the expressed product,the E1 gene was amplified by RT-PCR,sequenced and recombinated with the pBluescript ⅡSK+ vectorThe recombinated vecto r was co-transfected into BHK21 ce ll with vaccinia virus which carri es the gene of T7 RNA polymeraseT he expressed protein was characteri zed with hemadsorption,immunohisto chemistry and indirect immunofluor escence stainingThe results showe d that the recombinated vector,pBS K+-RV E1,was proved containing E1 gene by enzyme digestion and seque ncingThe expressed protein could be detected both in cytoplasm amd on membrane of the transfected cel ls by hemadsorption,immunohistoche mistry and indirect immunofluoresc enceThe E1 protein mainly focused in cytoplasm near the nucleusThes e data proved that the expression vector,pBSK+-RV E1,was successfull y constructed and the glycoprotein E1 of RV JR23 strain was effective ly expressed in BHK21 cell culture This study provides foundations f or studies on the relationships be tween structure and function of RV gene,between structure and functio n of RV proteins,and on the subuni t vaccine of rubella 展开更多
关键词 风疹病毒 JR23株 E1包膜糖蛋白 基因 表达 免疫反应性
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番石榴酸对INS-1胰岛β细胞增殖、胰岛素合成与分泌的促进作用及其机制分析 被引量:9
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作者 叶开和 王婧茹 +4 位作者 马锦锦 王小康 张晓琦 叶文才 叶春玲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1681-1687,共7页
目的考察番石榴酸(guavenoic acid,GA)对 INS-1胰岛β细胞增殖、细胞内胰岛素含量及分泌功能的影响,并探讨其可能的作用机制。方法培养 INS-1胰岛β细胞,给予GA(0.3、1、3、10、30 n·L^-1),并设空白对照组、溶媒对照组(... 目的考察番石榴酸(guavenoic acid,GA)对 INS-1胰岛β细胞增殖、细胞内胰岛素含量及分泌功能的影响,并探讨其可能的作用机制。方法培养 INS-1胰岛β细胞,给予GA(0.3、1、3、10、30 n·L^-1),并设空白对照组、溶媒对照组(0.1% DMSO)、分泌模型组及阳性药组(150 nmol·L^-1格列苯脲含1‰DMSO),药物作用48 h。应用 MTT 法检测药物对 INS-1的影响。使用酸醇提取液提取细胞中胰岛素,用放射免疫法检测药物对 I 细胞增殖 NS-1细胞内胰岛素含量的影响。分别用5.6、16.7 mmol·L^-1葡萄糖干预细胞1 h建立基础胰岛素分泌模型(BIS)、高糖刺激胰岛素分泌模型(GSIS),用放射免疫法测定药物对 INS-1细胞胰岛素分泌的影响,结果以总蛋白量校正。荧光定量 PCR 法检测药物对INS-1细胞内胰岛素基因、PDX-1、MafA mRNA 表达的影响。结果与溶媒对照组比较,GA 能明显地促进 INS-1胰岛细胞的增殖(P <0.01)并能明显增加 INS-1细胞内胰岛素含量(P <0.01),0.3~30 nmol·L -1 GA 对 BIS 及 GSIS 均有明显促进作用(P <0.05或 P <0.01),0.3~30 nmol·L^-1 GA 明显地上调 Insulin mRNA 的相对表达(P <0.01)。3、30 nmol·L^-1 GA 明显地上调 PDX-1 mRNA 的相对表达(P <0.01)。3、30 nmol·L^-1 GA 能明显地上调 MafA mRNA 的相对表达(P <0.01)。结论GA 能促进 INS-1胰岛β细胞增殖;增加细胞内胰岛素含量与分泌量,可能与其上调 Insulin、PDX-1、MafA 基因表达有关。 展开更多
关键词 番石榴酸 INS-1胰岛β细胞 增殖 胰岛素合成 胰岛素分泌 基因表达
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肾透明细胞癌组织中EGFR的表达及其19外显子突变检测的临床意义 被引量:1
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作者 居红格 李峰 《包头医学院学报》 CAS 2014年第4期6-8,共3页
目的:探讨肾透明细胞癌组织和正常组织中表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)的表达以及19外显子突变的情况。方法:采用免疫组化S-P法检测38例肾透明细胞癌患者的肿瘤和正常组织中EGFR的表达情况,通过基因测序检... 目的:探讨肾透明细胞癌组织和正常组织中表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)的表达以及19外显子突变的情况。方法:采用免疫组化S-P法检测38例肾透明细胞癌患者的肿瘤和正常组织中EGFR的表达情况,通过基因测序检测19外显子突变情况。结果:EGFR在肾透明细胞癌阳性表达率为66%(25/38),在肾正常组织中表达为16%(6/38),EGFR在肾癌组织和正常组织中的表达间差异有统计学意义(P<0.05);3例EGFR表达阳性的肾癌病例中出现19外显子第2 256位碱基T缺失突变。结论:EGFR在肾癌组织中出现高表达,部分肾癌病例存在19外显子缺失突变,提示EGFR在肿瘤的发生和进展中起着重要作用,同时为临床靶向治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 肾透明细胞癌 免疫组化 基因突变 基因测序
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