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不同生长速度的雌性罗氏沼虾肌肉组织转录组测序分析 被引量:1
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作者 姜建萍 曾兰 +6 位作者 吕敏 杨学明 蒋和生 蒋钦杨 卢小花 陈泳先 黄光华 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期735-742,共8页
【目的】鉴定筛选出与罗氏沼虾生长性状相关的候选基因及信号通路,为揭示其生长发育的分子调控机制提供参考依据。【方法】以同一全同胞家系雌性罗氏沼虾中不同生长速度的个体为试验材料,采用Illumina HiSeqTM 2500进行转录组测序,经过... 【目的】鉴定筛选出与罗氏沼虾生长性状相关的候选基因及信号通路,为揭示其生长发育的分子调控机制提供参考依据。【方法】以同一全同胞家系雌性罗氏沼虾中不同生长速度的个体为试验材料,采用Illumina HiSeqTM 2500进行转录组测序,经过滤、质控后利用Trinity进行拼接组装获得Unigenes,并在数据库(Nr、Nt、KO、Swiss-Prot、Pfam、GO、KOG和KEGG)中进行功能注释,通过DESeq2进行快速生长组与慢速生长组间的差异表达基因(DEGs)分析,运用GOseq和KOBAS进行GO富集分析和KEGG通路分析,采用MISA进行SSR位点挖掘。【结果】罗氏沼虾肌肉组织转录组测序共计获得321706038条Raw reads,经过滤筛选得到310075274条Clean reads,拼接组装后得到38969条Unigenes;18160条(46.60%)Unigenes成功注释在Nr、Nt、KO、Swiss-Prot、Pfam、GO、KOG和KEGG 8个数据库中。经DEGs分析,快速生长组与慢速生长组间共鉴定到DEGs 937个,其中上调表达基因235个,下调表达基因702个。937个DEGs分别富集到230个GO条目和21条KEGG信号通路中,包含氨基糖和核苷酸糖代谢(Amino sugar and nucleo-tide sugar metabolism)、糖酵解/糖质新生(Glycolysis/Gluconeogenesis)、氧化磷酸化(Oxidative phosphorylation)等信号通路。此外,在38969条Unigenes中共鉴定到22476个SSRs。【结论】不同生长速度的雌性罗氏沼虾肌肉转录组测序分析共筛选出937个DEGs,主要富集在氨基糖和核苷酸糖代谢、糖酵解/糖质新生、氧化磷酸化等信号通路上,在罗氏沼虾的生长发育过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 肌肉 生长性状 差异表达基因 转录组测序
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Sequence variations of the S7 ribosomal protein gene in primitive cyprinid fishes: Implication on phylogenetic analysis 被引量:5
2
作者 Wang, XZ He, SP Chen, YY 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2002年第19期1638-1643,共6页
Cyprinidae is the largest fish family in the world and contains about 210 genera and 2010 species. Appropriate DNA markers must be selected for the phylogenetic analyses of Cyprinidae. In present study, the 1st intron... Cyprinidae is the largest fish family in the world and contains about 210 genera and 2010 species. Appropriate DNA markers must be selected for the phylogenetic analyses of Cyprinidae. In present study, the 1st intron of the S7 ribosomal protein (r-protein) gene is first used to examine the relationships among cyprinid fishes. The length of the 1st intron obtained by PCR amplification ranges from 655 to 859 bp in the 16 cyprinid species investigated, and is 602 bp in Myxocyprinus asiaticus. Out of the alignment of 925 nucleotide sites obtained, the parsimony informative sites are 499 and occupy 54% of the total sites. The results indicate that the 1st intron sequences of the S7 r-protein gene in cyprinids are rich in informative sites and vary remarkably in sequence divergence from 2.3% between close species to 66.6% between distant species. The bootstrap values of the interior nodes in the NJ (neighbor-joining) and MP (most-parsimony) trees based on the present S7 r-protein gene data are higher than 展开更多
关键词 S7 RIBOSOMAL protein gene phylogeny CYPRINIDAE se-quence variations intron.
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耐异烟肼结核分枝杆菌及其katG与inhA基因突变的研究 被引量:19
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作者 陈杨 陈玲 +5 位作者 张泓 王建华 李娜娜 李开伦 甘辛 张建勇 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期788-792,共5页
目的探讨耐异烟肼临床分离结核分枝杆菌与其katG及inhA基因突变的相关性。方法对87例临床肺结核患者痰标本进行培养、鉴定及药物敏感性试验,提取菌落DNA、PCR扩增katG和inhA基因片段,并对所有扩增片段进行序列分析。结果 87例菌株经鉴... 目的探讨耐异烟肼临床分离结核分枝杆菌与其katG及inhA基因突变的相关性。方法对87例临床肺结核患者痰标本进行培养、鉴定及药物敏感性试验,提取菌落DNA、PCR扩增katG和inhA基因片段,并对所有扩增片段进行序列分析。结果 87例菌株经鉴定均为结核分枝杆菌,30(34.5%)例为耐异烟肼菌株,57(65.5%)例异烟肼敏感菌株。30例耐异烟肼株中,18(60%)株出现katG和(或)inhA基因突变。在突变株中,9(50%)株为katG单基因突变,5(27.8%)株为inhA单基因突变,4(22.2%)株为katG和inhA双基因联合突变。两个新突变位点(Val230Met和Pro232Gln)为首次发现,已被美国,欧洲和日本的基因库收录。结论该研究证实结核分枝杆菌katG和inhA基因突变与耐异烟肼相关,为进一步研究异烟肼的抗菌机制奠定了基础。 展开更多
关键词 耐异烟肼 结核分枝杆菌 聚合酶链式反应 序列分析 基因突变
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可移动遗传元件:耐药基因的载体 被引量:38
4
作者 翁幸鐾 糜祖煌 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期389-397,共9页
细菌通过各种可移动遗传元件(质粒、转座子、整合子、噬菌体、插入序列共同区等),以基因水平转移的方式从其它细菌获得外源性耐药基因,整合在自身基因组上而产生获得性耐药。本文主要阐述各种可移动遗传元件介导获得性耐药的机制,理解... 细菌通过各种可移动遗传元件(质粒、转座子、整合子、噬菌体、插入序列共同区等),以基因水平转移的方式从其它细菌获得外源性耐药基因,整合在自身基因组上而产生获得性耐药。本文主要阐述各种可移动遗传元件介导获得性耐药的机制,理解可移动遗传元件在耐药性发展和传播上的作用,是设计和执行干预方法来减少细菌感染威胁的前提条件。本文还介绍了一种新发现的可移动遗传元件:基因转移因子,它与细菌耐药基因水平转移的关系值得研究。 展开更多
关键词 获得性耐药 基因水平转移 质粒 转座子 整合子 噬菌体 插入序列共同区 基因转移因子
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透明颤菌(沈阳株)血红蛋白基因克隆与序列分析 被引量:3
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作者 张志强 吴琼 +4 位作者 王洪军 孙艳 冯立 王立强 吴益民 《生物技术》 CAS CSCD 2005年第6期1-2,共2页
目的:以透明颤菌(Vitreoscilla)基因组DNA为模板,扩增透明颤菌血红蛋白基因(vgb)。方法:采用PCR与基因重组技术,将PCR产物插入到克隆载体PET28a中,测序应用DNA测序仪。结果:获得了约0.5kb DNA片段,测序结果与已发表的透明颤菌血红蛋白... 目的:以透明颤菌(Vitreoscilla)基因组DNA为模板,扩增透明颤菌血红蛋白基因(vgb)。方法:采用PCR与基因重组技术,将PCR产物插入到克隆载体PET28a中,测序应用DNA测序仪。结果:获得了约0.5kb DNA片段,测序结果与已发表的透明颤菌血红蛋白基因核苷酸序列比较,同源性为97%。结论:所扩增的DNA片段确认是透明颤菌血红蛋白基因。 展开更多
关键词 透明颤菌 血红蛋白基因 序列分析
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龙眼生长素应答因子基因克隆及其在体胚中的表达分析 被引量:7
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作者 李惠华 赖钟雄 +1 位作者 苏明华 林玉玲 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期2383-2389,共7页
以龙眼胚性愈伤组织为材料,采用RT-PCR结合RACE法克隆生长素应答因子基因(auxin response fac-tor,即DL-ARF1),运用生物信息学方法对序列进行分析,并通过实时荧光定量PCR法研究其在龙眼体细胞胚胎发生过程中的表达。结果表明:DL-ARF1基... 以龙眼胚性愈伤组织为材料,采用RT-PCR结合RACE法克隆生长素应答因子基因(auxin response fac-tor,即DL-ARF1),运用生物信息学方法对序列进行分析,并通过实时荧光定量PCR法研究其在龙眼体细胞胚胎发生过程中的表达。结果表明:DL-ARF1基因的mRNA全长序列为2 695bp(GenBank登录号GQ923778),包含2 046bp开放阅读框,163bp 5′非编码区(5′UTR),486bp 3′非编码区(3′UTR);推定的氨基酸序列含681个氨基酸,与其它植物ARF基因相似性达40%~81%。DL-ARF1基因可能属于转录抑制因子,在龙眼体胚的各阶段均有表达,整个变化趋势呈双峰形,在胚性愈伤Ⅱ(Stage 2)中的表达量最高。 展开更多
关键词 龙眼 胚性愈伤组织 生长素应答因子(ARF) 基因克隆 序列分析 实时荧光定量PCR法
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猪ifitm基因克隆及其序列和组织表达分析 被引量:3
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作者 张玉娟 赵婷 +5 位作者 徐朝 于琨 马倩 李超燕 郑文明 许君 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期359-363,388,共6页
为了研究ifitm基因的功能,本研究从猪肾PK15细胞中克隆了猪的3个ifitm c DNA序列,分析了猪ifitm1、ifitm2和ifitm3基因的染色体定位及其与其他物种基因序列的同源关系,并对不同ifitm在不同组织的表达进行分析和检测。结果显示,猪ifitm... 为了研究ifitm基因的功能,本研究从猪肾PK15细胞中克隆了猪的3个ifitm c DNA序列,分析了猪ifitm1、ifitm2和ifitm3基因的染色体定位及其与其他物种基因序列的同源关系,并对不同ifitm在不同组织的表达进行分析和检测。结果显示,猪ifitm和人、鼠ifitm具有相同的基因和蛋白结构,进化上与牛ifitm高度同源,ifitm1和ifitm3在脾、肾、心、肝等组织中大量表达,而ifitm2只在脾和肾中检测到表达,在其他组织中的表达量相对较小。猪ifitm基因的克隆、生物信息学及组织表达分析为进一步研究其在猪细胞中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 干扰素刺激基因 猪干扰素诱导的跨膜蛋白 基因克隆 基因序列 组织表达差异
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三个花生二酰甘油酰基转移酶基因的克隆与序列分析 被引量:2
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作者 迟晓元 雷永 +6 位作者 陈娜 王通 王冕 陈明娜 潘丽娟 杨珍 禹山林 《花生学报》 2014年第4期1-12,共12页
二酰甘油酰基转移酶在植物油脂合成途径中具有重要的作用。本研究通过构建花生种子全长cDNA文库,结合大规模EST测序和RACE克隆等方法,从花生中克隆得到了三个DGAT基因,分别命名为AhDGAT1-1、AhDGAT1-2和AhDGAT3-3。其中AhDGAT1-1全长为2... 二酰甘油酰基转移酶在植物油脂合成途径中具有重要的作用。本研究通过构建花生种子全长cDNA文库,结合大规模EST测序和RACE克隆等方法,从花生中克隆得到了三个DGAT基因,分别命名为AhDGAT1-1、AhDGAT1-2和AhDGAT3-3。其中AhDGAT1-1全长为2020bp,ORF为1539bp,理论分子量为58.6036kD,理论等电点为8.83;AhDGAT1-2全长为2553bp,ORF为1581bp,理论分子量为60.6598kD,理论等电点为8.94;AhDGAT3-3全长为1377bp,ORF为1023bp,理论分子量为36.911kD,理论等电点为8.17。将这三个基因在GenBank上注册,注册号分别为KC736068,KC736069和KC736067。 展开更多
关键词 DGAT 花生 基因克隆 序列分析
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胸膜肺炎放线杆菌荚膜多糖输出基因部分序列的克隆鉴定、序列拼接和分析应用 被引量:1
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作者 肖国生 曹三杰 +4 位作者 段丽丽 文心田 肖驰 马晓平 杨利 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期325-329,共5页
用设计的引物对胸膜肺炎放线杆菌1、3、6、9型标准株的荚膜多糖输出部分基因序列进行了扩增,克隆,测序,分别获得4个型的部分cpxDC基因序列和3型的部分cpxD基因序列。对克隆序列和GenBank中已知序列进行序列拼接,分别拼接出1、3、6... 用设计的引物对胸膜肺炎放线杆菌1、3、6、9型标准株的荚膜多糖输出部分基因序列进行了扩增,克隆,测序,分别获得4个型的部分cpxDC基因序列和3型的部分cpxD基因序列。对克隆序列和GenBank中已知序列进行序列拼接,分别拼接出1、3、6型的荚膜输出cpxD基因全序列。通过基因序列分析发现,胸膜肺炎放线杆菌1、3、5、6、9型荚膜多糖输出基因已知序列间的同源性很高,达89%~99.88%。1、3、5、6型cpxD基因的推导氨基酸序列间的同源性为93%~99%。在cpxDC基因的保守区内设计出1对种特异性引物,对胸膜肺炎放线杆菌进行鉴定和检测,结果从8个标准型菌株和3株分离株中均扩出约720bp的阳性片段,其他6种能引起猪呼吸道疾病的细菌均呈阴性。所建立的PCR方法最低检出量为10Pg,最适模板量为5ng(50ptL)。试验结果表明,胸膜肺炎放线杆菌不同血清型间的荚膜多糖输出基因存在着高度的保守性。设计出的种特异性引物能用于胸膜肺炎放线杆菌的检测和鉴定。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆茵 荚膜多糖输出基因 克隆鉴定 序列拼接 PCR
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四株抗金属肽的单克隆抗体可变区基因的克隆和序列测定 被引量:2
10
作者 韩丽英 杨立宏 +1 位作者 陈常庆 苏成芝 《第四军医大学学报》 1995年第6期409-413,共5页
作者从化学合成的一种金属离子螫合的四肽的四株单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取RNA,反转录成cDNA。利用合成的寡核苷酸引物扩增了抗体的轻、重链可变区基因,并克隆人质粒。随机挑取阳性克隆各一个进行核苷酸序列分析。序列表明... 作者从化学合成的一种金属离子螫合的四肽的四株单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取RNA,反转录成cDNA。利用合成的寡核苷酸引物扩增了抗体的轻、重链可变区基因,并克隆人质粒。随机挑取阳性克隆各一个进行核苷酸序列分析。序列表明克隆的基因除一个轻链外均可编码小鼠抗体的轻、重链可变区。 展开更多
关键词 抗体酶 金属肽 单克隆抗体 基因 核苷酸 序列
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萎蔫酸铜离子络合物、镉离子络合物的抗结核活性及对结核分枝杆菌基因表达的影响
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作者 王娟 黄宇虹 +6 位作者 陈伊 李研 彭毅 潘嘉慧 王军 林永成 赖小敏 《中国防痨杂志》 CAS 2012年第4期224-228,共5页
目的研究海洋微生物代谢产物萎蔫酸金属铜离子络合物与镉离子络合物体外抗结核活性,以及对Mtb H37Rv基因表达的影响。方法应用纸片扩散法(Kind-Bauer,K-B法)初步鉴定萎蔫酸铜离子络合物、萎蔫酸镉离子络合物的抗结核活性,重复实验3次;... 目的研究海洋微生物代谢产物萎蔫酸金属铜离子络合物与镉离子络合物体外抗结核活性,以及对Mtb H37Rv基因表达的影响。方法应用纸片扩散法(Kind-Bauer,K-B法)初步鉴定萎蔫酸铜离子络合物、萎蔫酸镉离子络合物的抗结核活性,重复实验3次;绝对浓度间接法测定萎蔫酸铜离子络合物、萎蔫酸镉离子络合物的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),重复实验确定更准确的MIC;Mtb cDNA芯片检测萎蔫酸铜离子络合物、萎蔫酸镉离子络合物处理Mtb组与溶剂对照处理Mtb组表达差异的基因,重复实验一次。结果萎蔫酸铜离子络合物、萎蔫酸镉离子络合物在卡介苗(BCG)平板抑菌圈直径分别为(30.4±0.6)mm、(30.0±0.8)mm。萎蔫酸铜离子络合物抗Mtb H37Rv的MIC为10μg/ml;对耐多药结核分枝杆菌,萎蔫酸镉离子络合物MIC为7.5μg/ml,低于S(MIC=25μg/ml)和RFP(MIC=25μg/ml);对Mtb临床分离株(0907961,耐S和EMB),萎蔫酸铜离子络合物的MIC(10μg/ml)低于S(S的MIC为20μg/ml),萎蔫酸镉离子络合物的MIC(5μg/ml)均低于S(MIC=20μg/ml)、EMB(MIC=6.4μg/ml)。Mtb cDNA芯片检测发现萎蔫酸铜离子络合物处理组与溶剂对照组比较,有差异表达的基因总数为23条,其中已知功能基因有10条;萎蔫酸镉离子络合物处理组与溶剂对照组比较,有差异表达的基因总数为28条,其中已知功能基因有11条。这些存在差异的基因功能涉及核苷酸、脂质、能量、辅酶、氨基酸代谢,DNA的复制、转录、翻译、翻译后修饰以及细胞膜的生物合成等。结论萎蔫酸铜离子络合物与萎蔫酸镉离子络合物具有较好的体外抗结核活性,尤其对部分耐药菌株的抑制作用甚至优于抗结核一线用药,可作为抗结核药物的前导化合物;运用基因芯片所探究出的差异表达的基因为进一步深入研究其抗菌作用机制提供了一定的实验依据。 展开更多
关键词 镰刀菌酸 配合物 抗结核药 寡核苷酸序列分析 基因表达
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狂犬病毒aG株糖蛋白膜外区基因克隆和序列分析 被引量:1
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作者 明文玉 黎孟枫 +1 位作者 朱家鸿 候云德 《广东药学院学报》 CAS 1995年第3期146-151,共6页
本文应用聚合酶链反应(PCR)技术获得了狂犬病毒ac株(RVaG)糖蛋白膜外区基因克隆并进行了序列分析。测出其核苷酸序列与其他株相应区序列的同源性在90.12%(CVS/aG)到93.03%(SADB19/aG)之间... 本文应用聚合酶链反应(PCR)技术获得了狂犬病毒ac株(RVaG)糖蛋白膜外区基因克隆并进行了序列分析。测出其核苷酸序列与其他株相应区序列的同源性在90.12%(CVS/aG)到93.03%(SADB19/aG)之间,推导氨基酸序列的同源性在91.41%(CVS/aG)到93%,23%(PV/aG)之间,经分析发现成熟肽推导氨基酸第182位和183位的替代,导致了乙酰胆碱受体(AChR)结合序列的构象改变,可能是造成RVaG毒力减弱的分子基础。 展开更多
关键词 狂犬病毒 糖蛋白基因 聚合酶链反应 基因克隆
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弓形虫主要表面抗原基因的克隆 被引量:17
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作者 陈晓光 刘国章 +2 位作者 徐帆 王 章 江静波 《第一军医大学学报》 CSCD 1994年第2期114-117,共4页
根据弓形虫主要表面抗原(P30)的基因序列合成了一对引物,应用聚合酶链反应技术从弓形虫中国分离株(zsl)中,扩增了P30的编码基因。序列测定显示该基因序列与国际标准弓形虫株(RH)的P30基因序列几乎完全一致。扩增... 根据弓形虫主要表面抗原(P30)的基因序列合成了一对引物,应用聚合酶链反应技术从弓形虫中国分离株(zsl)中,扩增了P30的编码基因。序列测定显示该基因序列与国际标准弓形虫株(RH)的P30基因序列几乎完全一致。扩增的P30基因被克隆到质粒pBV220中。SDS-PAGE和免疫印迹分析显示,P30基因在大肠杆菌中不仅有表达,且表达产物具有特异的免疫反应性。 展开更多
关键词 表面抗原 基因 克隆 弓形体
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Real-time embedded software testing method based on extended finite state machine 被引量:6
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作者 Yongfeng Yin Bin Liu Hongying Ni 《Journal of Systems Engineering and Electronics》 SCIE EI CSCD 2012年第2期276-285,共10页
The reliability of real-time embedded software directly determines the reliability of the whole real-time embedded sys- tem, and the effective software testing is an important way to ensure software quality and reliab... The reliability of real-time embedded software directly determines the reliability of the whole real-time embedded sys- tem, and the effective software testing is an important way to ensure software quality and reliability. Based on the analysis of the characteristics of real-time embedded software, the formal method is introduced into the real-time embedded software testing field and the real-time extended finite state machine (RT-EFSM) model is studied firstly. Then, the time zone division method of real-time embedded system is presented and the definition and description methods of time-constrained transition equivalence class (timeCTEC) are presented. Furthermore, the approaches of the testing sequence and test case generation are put forward. Finally, the proposed method is applied to a typical avionics real- time embedded software testing practice and the examples of the timeCTEC, testing sequences and test cases are given. With the analysis of the testing result, the application verification shows that the proposed method can effectively describe the real-time embedded software state transition characteristics and real-time requirements and play the advantages of the formal methods in accuracy, effectiveness and the automation supporting. Combined with the testing platform, the real-time, closed loop and automated simulation testing for real-time embedded software can be realized effectively. 展开更多
关键词 real-time system real-time embedded software for- mal method extended finite state machine (EFSM) testing se- quence test case.
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花生中促丝裂原蛋白活化激酶6a(AhMAPK6a)的克隆与表达分析
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作者 袁茂丽 张朝昕 +3 位作者 藏旭阳 石书兵 张智猛 高文伟 《花生学报》 北大核心 2016年第3期1-7,共7页
促丝裂原蛋白活化激酶(MAPK)是一类保守的丝氨酸/苏氨酸(Ser/Thr)蛋白激酶,是一类植物对逆境胁迫反应途径中的关键家族基因。本研究利用已经构建的花生种子全长cDNA文库,以拟南芥MAPK序列为模板,结合大规模EST测序和RACE克隆等方法,从... 促丝裂原蛋白活化激酶(MAPK)是一类保守的丝氨酸/苏氨酸(Ser/Thr)蛋白激酶,是一类植物对逆境胁迫反应途径中的关键家族基因。本研究利用已经构建的花生种子全长cDNA文库,以拟南芥MAPK序列为模板,结合大规模EST测序和RACE克隆等方法,从花生中克隆得到了一个MAPK基因,命名为AhMAPK6a,并在GenBank上注册,注册号为KP329549。其cDNA序列全长1492bp,开放阅读框(ORF)含有1191bp,编码一条含有397个氨基酸的蛋白序列。不同物种中MAPK基因的氨基酸序列比对发现,该基因含有典型的Ser/Thr保守基序,与拟南芥、大豆、本生烟的同源性分别为86%、94%和90%。不同组织部位的荧光定量(qPCR)分析表明,该基因在叶片中的表达量最高,其次在根中,在茎、花、子叶和下胚轴中的表达量极低,表明该基因可能在花生的根和叶的生长发育中发挥较大作用。在脱落酸(ABA)和聚乙二醇(PEG)胁迫下,表达量发生明显变化,可以推测该基因在干旱胁迫反应中发挥重要作用。 展开更多
关键词 促丝裂原蛋白活化激酶基因 花生 基因克隆 表达分析
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1例卵巢功能低下合并平衡易位患者的遗传学分析
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作者 傅文婷 李铭臻 +1 位作者 钟文谣 王柏贤 《中国优生与遗传杂志》 2024年第7期1431-1434,共4页
目的 对1名卵巢功能低下患者进行遗传学分析,探讨低深度全基因组测序在鉴定染色体结构异常方面的应用价值。方法 应用染色体常规G显带、低深度全基因组测序染色体结构畸变检测(LCWGS-CAT)对外周血染色体核型进行分析鉴定。结果 患者外... 目的 对1名卵巢功能低下患者进行遗传学分析,探讨低深度全基因组测序在鉴定染色体结构异常方面的应用价值。方法 应用染色体常规G显带、低深度全基因组测序染色体结构畸变检测(LCWGS-CAT)对外周血染色体核型进行分析鉴定。结果 患者外周血核型结果提示为46,X,t(X;9)(q22;q13);全基因组测序结果显示患者2号染色体在201397512~201557259之间的序列发生了重复,重复区域包含卵巢功能低下(POI)的重要致病基因SGO2。结论 染色体平衡易位携带者可能会存在位于重排断裂点区域之外的微缺失或微重复,准确判断其致病性非常重要,需经全基因组测序等技术进行精准分析。 展开更多
关键词 卵巢功能低下 染色体结构异常 SGO2基因 全基因组测序
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Thymidine kinase gene mutation leads to reduced virulence of pseudorabies virus 被引量:2
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作者 Pan, ZS Zhang, CY +1 位作者 Ding, JH Min, P 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2001年第23期1972-1975,共4页
To explore correlation between the tk gene structure of pseudorabies virus (PRV) and its virulence, to study the effect of the gene mutation on PRV biological properties, and to investigate mechinism of reduced virule... To explore correlation between the tk gene structure of pseudorabies virus (PRV) and its virulence, to study the effect of the gene mutation on PRV biological properties, and to investigate mechinism of reduced virulence, thymidine kinase (TK)-deficient mutant of pseudorabies virus strain Hubei (PRV HB) was isolated by selection for resistance to 5-bromodeoxyuridine. The tk genes of PRV HB and its TK mutant were cloned and sequenced. 1587 base pairs of the tk gene and flanking regions of wild-type (wt) virus were sequenced, which included an open reading frame (ORF) of 1098 bp encoding a protein of 366 amino acids. The ORF contained two 137-bp repeated sequences, which were connected by an adenosine. 1458 bp of the tk and flanking regions of TK- mutant were sequenced. Analysis of the tk gene sequence of TK mutant indicated that one of 137 bp repeated sequence and the connecting adenosine in the tk gene of the wt virus was deleted and a repeated sequence of 8 nucleotides (GCGCGCC) was inserted. All 展开更多
关键词 PSEUDORABIES virus THYMIDINE kinase NUCLEOTIDE se- quence amino acid sequence TK mutant.
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On essential topics of BYY harmony learning: Current status, challenging issues, and gene analysis applications 被引量:4
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作者 Lei XU 《Frontiers of Electrical and Electronic Engineering in China》 CSCD 2012年第1期147-196,共50页
As a supplementary of [Xu L. Front. Electr. Electron. Eng. China, 2010, 5(3): 281-328], this paper outlines current status of efforts made on Bayesian Ying- Yang (BYY) harmony learning, plus gene analysis appli- ... As a supplementary of [Xu L. Front. Electr. Electron. Eng. China, 2010, 5(3): 281-328], this paper outlines current status of efforts made on Bayesian Ying- Yang (BYY) harmony learning, plus gene analysis appli- cations. At the beginning, a bird's-eye view is provided via Gaussian mixture in comparison with typical learn- ing algorithms and model selection criteria. Particularly, semi-supervised learning is covered simply via choosing a scalar parameter. Then, essential topics and demand- ing issues about BYY system design and BYY harmony learning are systematically outlined, with a modern per- spective on Yin-Yang viewpoint discussed, another Yang factorization addressed, and coordinations across and within Ying-Yang summarized. The BYY system acts as a unified framework to accommodate unsupervised, su- pervised, and semi-supervised learning all in one formu- lation, while the best harmony learning provides novelty and strength to automatic model selection. Also, mathe- matical formulation of harmony functional has been ad- dressed as a unified scheme for measuring the proximity to be considered in a BYY system, and used as the best choice among others. Moreover, efforts are made on a number of learning tasks, including a mode-switching factor analysis proposed as a semi-blind learning frame- work for several types of independent factor analysis, a hidden Markov model (HMM) gated temporal fac- tor analysis suggested for modeling piecewise stationary temporal dependence, and a two-level hierarchical Gaus- sian mixture extended to cover semi-supervised learning, as well as a manifold learning modified to facilitate au- tomatic model selection. Finally, studies are applied to the problems of gene analysis, such as genome-wide asso- ciation, exome sequencing analysis, and gene transcrip- tional regulation. 展开更多
关键词 Bayesian Ying-Yang (BYY) harmonylearning harmony functional automatic model selec-tion Gaussian mixture hidden Markov model (HMM)gated temporal factor analysis hierarchical Gaussianmixture manifold learning semi-supervised learning semi-blind learning genome-wide association exome se-quencing analysis gene transcriptional regulation
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玉米大斑病菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因克隆和表达分析
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作者 张淑红 张运峰 +1 位作者 武秋颖 范永山 《玉米科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期67-73,共7页
利用RT-PCR技术克隆玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)的GAPDH基因StGAPDH。该基因c DNA全长1014 bp,编码337个氨基酸;蛋白质分子量36505.44,理论pI值6.72,属弱酸、亲水、稳定蛋白,无跨膜结构域和信号肽。亚细胞定位于细胞质、线粒体... 利用RT-PCR技术克隆玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)的GAPDH基因StGAPDH。该基因c DNA全长1014 bp,编码337个氨基酸;蛋白质分子量36505.44,理论pI值6.72,属弱酸、亲水、稳定蛋白,无跨膜结构域和信号肽。亚细胞定位于细胞质、线粒体和细胞核的概率分别为43.5%、30.4%和21.7%;氨基酸序列高度保守,在亲缘关系上与玉米小斑病菌(Bipolaris maydis)和水稻胡麻斑病菌(Bipolaris oryzae)最近。荧光定量PCR分析表明,在病菌接种抗病玉米自交系3 d时,StGAPDH基因表达量显著高于接种5~10 d(P<0.05);接种感病玉米自交系时,接种10 d的StGAPDH基因表达量显著高于接种3~7 d(P<0.05)。 展开更多
关键词 玉米 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 玉米大斑病菌 基因克隆 序列分析 表达分析
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目标基因测序技术检测后纵韧带骨化致病基因突变 被引量:5
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作者 陈欣 孙宇 +8 位作者 张凤山 潘胜发 王少波 张立 刁垠泽 周非非 赵衍斌 刘晓光 刘忠军 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期270-273,共4页
[目的]建立目标基因测序技术,对后纵韧带骨化(ossification of the posterior longitud inalligament,OPLL)患者的11个已知致病基因进行突变筛查,探讨OPLL与致病基因突变的关系。[方法]提取6例OPLL患者外周血全基因组DNA,利用Gen... [目的]建立目标基因测序技术,对后纵韧带骨化(ossification of the posterior longitud inalligament,OPLL)患者的11个已知致病基因进行突变筛查,探讨OPLL与致病基因突变的关系。[方法]提取6例OPLL患者外周血全基因组DNA,利用GenCap目标基因捕获技术(北京迈基诺公司),设计骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic pro—tein2,BMP2)、骨形态发生蛋白-4(bone morphogenetic protein4,BMP4)、骨形态发生蛋白-9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)、Ⅺ型胶原蛋白以(collagen type XI alpha 2,COLllA2)、Ⅵ型胶原蛋白理1(collagen type VIM pha1,COL6A1)、核苷酸焦磷酸酶(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 1,ENPPl)、成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)、成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFRl)、成纤维细胞生长因子受体2(fibroblast growth factor receptor2,FGFR2)、转化生长因子一β3(transforming growth factor beta3,TGFB3)和转化生长因子一8受体2(transforming growth factor beta receptorII,TGFBR2)基因外显子区域特异性捕获探针,与基因组DNA文库进行杂交,将目标基因组区域的DNA片段进行富集后,再利用illumina hiseq2000第二代测序仪进行测序,通过数据分析,确定突变位点,对选定的突变位点用Sanger测序法进行验证。[结果]设计合成的目标基因特异性捕获探针可有效地捕捉并富集基因组DNA的目标靶片段。目标区域平均测序深度为426.85~976.15,99.30%-100%目标区域覆盖度。在1例患者中发现COL6A1基因的1个错义突变,此位点检测结果与Sanger测序结果完全一致。[结论]目标基因测序技术成功发现了OPLL患者的致病基因突变。该方法快速而有效,对深入研究OPLL的分子病因学有重要意义。 展开更多
关键词 后纵韧带骨化 致病基因 目标基因测序
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