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小鼠单个GV期卵母细胞中ATP8基因的表达分析 被引量:2
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作者 洪灯 宋绪华 +1 位作者 符史干 景雅 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第10期1488-1490,共3页
目的:探讨小鼠GV期卵母细胞线粒体中ATP8(ATP合酶亚基8)基因的表达情况。方法:应用挤压法从卵巢中分离获得生发泡期(germinal vesicle,GV)卵母细胞;用RT-PCR检测GV期单个卵母细胞中ATP8基因的表达:其中cDNA的合成分两种方法进行:一是将G... 目的:探讨小鼠GV期卵母细胞线粒体中ATP8(ATP合酶亚基8)基因的表达情况。方法:应用挤压法从卵巢中分离获得生发泡期(germinal vesicle,GV)卵母细胞;用RT-PCR检测GV期单个卵母细胞中ATP8基因的表达:其中cDNA的合成分两种方法进行:一是将GV期单个卵母细胞直接进行RT合成cDNA,二是先用DNA酶加EcoRⅠ酶祛除mtDNA和核DNA后再进行RT;回收产物构建克隆质粒并测序。结果:1.5%琼脂糖电泳显示、测序结果均表明ATP8基因在GV期卵母细胞中有表达。结论:小鼠GV期卵母细胞特异表达的ATP8基因可能与卵母细胞的正常发育成熟相关。 展开更多
关键词 小鼠 生发泡 卵母细胞 ATP合成酶亚基8
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小鼠GV卵中母源基因的克隆和其中一个基因在植入前胚表达的研究 被引量:1
2
作者 王世鄂 黄威权 +1 位作者 Zeng Fanyi Richard MSchultz 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期417-421,共5页
目的 克隆和筛选小鼠生发泡完整卵母细胞 (GV卵 )中母源基因 ,并检测其中一个基因在植入前不同发育阶段胚中的表达 ,初步了解该基因在卵母细胞发育成熟及早期胚发育中的作用。 方法 应用抑制性消减杂交技术 (SSH) ,以生发泡完整的卵... 目的 克隆和筛选小鼠生发泡完整卵母细胞 (GV卵 )中母源基因 ,并检测其中一个基因在植入前不同发育阶段胚中的表达 ,初步了解该基因在卵母细胞发育成熟及早期胚发育中的作用。 方法 应用抑制性消减杂交技术 (SSH) ,以生发泡完整的卵母细胞为检测子 (tester) ,8 细胞胚为驱赶子 (driver) ,建立GV卵中母源基因的cDNA文库。通过斑点杂交法进一步筛选GV卵中母源基因的cDNA文库 ,对阳性克隆进行序列测定和同源性分析 ;并采用RT PCR方法观察其中 1个阳性克隆的基因在着床前胚的表达。 结果 克隆得到 18个基因的cDNA序列和 8个同源EST序列在GV卵中特异表达 ,包括PeroxiredoxinⅡ基因。RT PCR显示PeroxiredoxinⅡ基因呈阶段性差异表达 ,在GV卵、MⅡ卵、1 细胞胚和 2 细胞胚有表达 ,但从MⅡ卵开始表达下降。而在 4 细胞胚、8 细胞胚、桑椹胚和囊胚中不表达。 结论 PeroxiredoxinⅡ基因是GV卵中母源基因cDNA文库中的一个基因 ,提示该基因在卵母细胞发育成熟和合子基因激活中起一定作用。 展开更多
关键词 生发泡完整卵母细胞 PeroxiredoxinⅡ RT-PCR 抑制性消减杂交 植入前胚
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孕酮诱导非洲爪蟾卵母细胞生发泡破裂(GVBD)试验方法的优化及干扰物质筛查
3
作者 曹闪 楼钦钦 +1 位作者 魏无际 秦占芬 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期90-96,共7页
非洲爪蟾卵母细胞生发泡破裂(GVBD)是生物学上研究卵细胞成熟过程及其机制的良好模型。由于GVBD受激素的调控,曾有研究将孕酮诱导的非洲爪蟾GVBD试验用于内分泌干扰物的筛查。通过预注射人体绒毛膜促性腺激素(HCG)提高非洲爪蟾卵母细胞... 非洲爪蟾卵母细胞生发泡破裂(GVBD)是生物学上研究卵细胞成熟过程及其机制的良好模型。由于GVBD受激素的调控,曾有研究将孕酮诱导的非洲爪蟾GVBD试验用于内分泌干扰物的筛查。通过预注射人体绒毛膜促性腺激素(HCG)提高非洲爪蟾卵母细胞对孕酮的敏感性、缩小个体差异,缩短试验时间等优化GVBD试验方法;并选用甲氧氯作为阳性参照物对优化的方法进行验证,最后用此方法研究了米非司酮、来曲唑、咪鲜胺3种化学物质对孕酮诱导GVBD的影响。结果发现,甲氧氯对GVBD的发生具有明显抑制作用,随着剂量的增加抑制作用增强,显示优化方法的可靠性。米非司酮作为孕酮受体拮抗剂,没有表现出抑制GVBD的效应,证明孕酮诱导爪蟾GVBD并非完全由孕酮受体(PR)介导。同时,来曲唑和咪鲜胺对孕酮诱导爪蟾GVBD没有影响,显示此两种物质在孕酮诱导GVBD过程中不具有内分泌干扰作用。 展开更多
关键词 卵母细胞 生发泡破裂(gvBD) 内分泌干扰物 孕酮 甲氧氯 米非司酮 非洲爪蟾
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哺乳动物GV期卵母细胞玻璃化冷冻研究进展 被引量:2
4
作者 张培培 郝海生 +5 位作者 杜卫华 庞云渭 权国波 赵善江 朱化彬 赵学明 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2020年第8期57-62,共6页
哺乳动物GV期卵母细胞的玻璃化冷冻保存技术为家畜胚胎生物技术提供了卵子库,有利于濒危动物和珍稀野生动物遗传资源的长期保存,是维持物种多样性乃至人类生殖力保存的重要途径。至今,玻璃化冷冻技术已成功用于多种哺乳动物GV期卵母细... 哺乳动物GV期卵母细胞的玻璃化冷冻保存技术为家畜胚胎生物技术提供了卵子库,有利于濒危动物和珍稀野生动物遗传资源的长期保存,是维持物种多样性乃至人类生殖力保存的重要途径。至今,玻璃化冷冻技术已成功用于多种哺乳动物GV期卵母细胞的冷冻保存。与此同时,玻璃化冷冻会对GV期卵母细胞产生的细胞学损伤及表观遗传的影响,成为制约其应用潜力的关键瓶颈。本文综述了近年来哺乳动物GV期卵母细胞玻璃化冷冻的研究进展,并对冷冻损伤及对策进行了系统分析,为哺乳动物GV期卵母细胞玻璃化冷冻的后续研究提供参考。 展开更多
关键词 哺乳动物 gv 卵母细胞 玻璃化冷冻
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Developmental Competence of Frozen-thawed Germinal Vesical Porcine Oocytes by Vitrification Method following Maturation,Fertilization and Culture In Vitro
5
作者 朱淑文 朱秀萍 +3 位作者 张菁 华修国 唐峰 徐动 《Journal of Shanghai Jiaotong university(Science)》 EI 2005年第S1期86-91,共6页
The purpose of this study was to evaluate the viability and subsequent developmental ability of porcine germinal vesicle(GV) oocytes vitrified step-wise exposure to cryoprotectants. Oocytes were transferred to a vit... The purpose of this study was to evaluate the viability and subsequent developmental ability of porcine germinal vesicle(GV) oocytes vitrified step-wise exposure to cryoprotectants. Oocytes were transferred to a vitrification solution composed of 10% ethylene glycol(EG),10% dimethyl sulfoxide(DMSO), 300 g/L-1 Ficoll and 0.5 mol/L-1 sucrose(EDFS40) in a direct manner (non-preequilibrium) or in step-wise manner( single- and two-step preequilibrium). After vitrification and storage in liquid nitrogen, the oocytes were thawed,washed and in vitro maturation, fertilization and culture. In the non-preequilibrium group, the rates of post-thawed oocytes surviving, maturing to metaphase-Ⅱ, cleavage rate and blastocysts rate was significantly lower than that of sigle- and two-step preequilubrium groups(P<0.05). In the single- and two- step groups, the rates of metaphase-Ⅱ stage were 46.8%, 42.7% and 49.7%, respectively, the rates which developed to blastocysts were 10.5%,11.1% and 14.8%, respectivaly. In the non-vitrified control group,the rates of oocytes maturing to metaphase-Ⅱ, developing to blastocysts was significantly higher than that vitrified groups(P<0.05). The present study shows that the vitrification of porcine GV oocytes by a step-wise method involving two-steps preequilibrium may have advantage in maintaining the viability and subsequent production of blastocysts. 展开更多
关键词 VITRIFICATION porcine OOCYTE germinal vesicle(gv) step-wise developmental ability
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14-3-3ε和Cdc25B在小鼠卵母细胞生发泡期阻滞中的作用 被引量:4
6
作者 孟峻 侯艳军 +2 位作者 张永梅 呼格吉乐 韩艳秋 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期215-220,共6页
目的:研究14-3-3ε和Cdc25B对小鼠卵母细胞生发泡(GV)期阻滞作用的影响,为阐明蛋白激酶A/Cdc25B/14-3-3ε通路在小鼠卵母细胞GV期阻滞中发育调控机制奠定基础。方法:在体外将表达载体pcDNA3.1-ZEO-HA14-3-3ε、pcDNA3.1-MYC-Cdc25B-WT、... 目的:研究14-3-3ε和Cdc25B对小鼠卵母细胞生发泡(GV)期阻滞作用的影响,为阐明蛋白激酶A/Cdc25B/14-3-3ε通路在小鼠卵母细胞GV期阻滞中发育调控机制奠定基础。方法:在体外将表达载体pcDNA3.1-ZEO-HA14-3-3ε、pcDNA3.1-MYC-Cdc25B-WT、pcDNA3.1-MYC-Cdc25B-S321A和pcDNA3.1-MYC-Cdc25B-S321D转录成mRNA。超排卵方法获得小鼠GV期卵母细胞,实验分为未注射组、TE缓冲液注射组、14-3-3εmRNA单独注射组、14-3-3εmRNA+Cdc25B-WT(野生型)mRNA共注射组、14-3-3εmRNA+Cdc25B-S321D(模拟磷酸化型)mRNA共注射组、14-3-3εmRNA+Cdc25B-S321A(突变型)mRNA共注射组,收集各组母卵细胞后采用Western blotting法检测外源性14-3-3ε和Cdc25B蛋白表达及Cdc2-Tyr15的磷酸化状态;相差显微镜观察卵母细胞的形态学变化并计数生发泡破裂(GVBD)率。结果:未注射组、TE缓冲液注射组、14-3-3εmRNA单独注射组、14-3-3εmRNA+Cdc25B-WT(野生型)mRNA共注射组、14-3-3εmRNA+Cdc25B-S321D(模拟磷酸化型)mRNA共注射组在显微注射后20h均未发生GVBD(P>0.05);14-3-3εmRNA+Cdc25B-S321A(突变型)mRNA共注射组在显微注射后1、2和3h卵母细胞的GVBD率分别为(5.00±0.68)%、(62.00±3.56)%和(100.00±0.00)%,显微注射后20h到达第2次减数分裂中期(MII)的比例为(79.00±2.80)%,与未注射组和TE缓冲液注射组比较,GVBD率和到达MII的比例均显著升高(P<0.01)。结论:14-3-3ε通过Cdc25B的321位丝氨酸磷酸化和脱磷酸化调控卵母细胞由GV期向GVBD的过渡。 展开更多
关键词 14-3-3ε CDC25B 卵母细胞 生发泡 生发泡破裂 显微注射
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汞对雌性小鼠生殖功能及脏器的影响 被引量:15
7
作者 沈维干 陈彦 +4 位作者 李朝军 季全兰 贡昌春 荀爱华 陈兰 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期75-77,共3页
为探讨汞化合物对脏器及生殖的毒性,采用卵母细胞体外培养、体外受精的方法研究了汞对小鼠脏器系数、卵母细胞成熟和受精能力的影响。结果表明,0.5和1.5mg/kgBW汞对小鼠的肝脏、肾脏有明显的毒性作用,1.5mg/kgBW组还对卵巢有明显的毒性... 为探讨汞化合物对脏器及生殖的毒性,采用卵母细胞体外培养、体外受精的方法研究了汞对小鼠脏器系数、卵母细胞成熟和受精能力的影响。结果表明,0.5和1.5mg/kgBW汞对小鼠的肝脏、肾脏有明显的毒性作用,1.5mg/kgBW组还对卵巢有明显的毒性作用,并能显著降低超排卵的卵母细胞数;汞对体内卵母细胞生发泡破裂没有影响,但可以抑制卵母细胞第一极体的释放,影响卵母细胞的存活率并降低体外受精(IVF)率。结果提示,氯化汞可以影响卵母细胞的成熟,明显破坏卵母细胞的体外受精能力,损伤或降低小鼠的生殖能力。 展开更多
关键词 氯化汞 卵母细胞 生发泡破裂 生殖毒性
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白细胞介素-18在大鼠胚泡植入前后子宫的分布及表达 被引量:4
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作者 张艳 李文献 +3 位作者 陈树林 乔海莲 杨永倩 范光丽 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期98-101,共4页
目的系统研究了白细胞介素-18(IL-18)在大鼠胚泡植入前后子宫中的分布与表达,以探讨IL-18在胚泡植入过程中可能的生理作用。方法免疫组织化学SP法,图像分析法。结果IL-18在胚泡植入前后子宫均有表达,其主要分布于子宫内膜或蜕膜的腔上... 目的系统研究了白细胞介素-18(IL-18)在大鼠胚泡植入前后子宫中的分布与表达,以探讨IL-18在胚泡植入过程中可能的生理作用。方法免疫组织化学SP法,图像分析法。结果IL-18在胚泡植入前后子宫均有表达,其主要分布于子宫内膜或蜕膜的腔上皮细胞、腺上皮细胞及子宫基质细胞或蜕膜细胞,子宫肌层及部分血管内皮细胞也有微弱表达。与非妊娠大鼠相比,妊娠大鼠子宫IL-18的表达明显增加(P<0.05)。随着妊娠的进行,子宫IL-18的表达逐渐递增,并且IL-18在胚泡植入后期的表达显著高于植入前期(P<0.05)。结论IL-18可能参与胚泡植入,与妊娠的建立和维持有关,在妊娠中起重要作用。 展开更多
关键词 白细胞介素-18 子宫 胚泡 植入 免疫组织化学 大鼠
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甲醛对雌性小鼠生殖功能及脏器的影响 被引量:6
9
作者 薛庆於 陈宝定 +3 位作者 吴一丁 朱军 于智勇 沈维干 《生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期27-28,共3页
采用超排卵技术研究甲醛对小鼠卵母细胞的成熟和体外受精以及脏器等的影响。甲醛对小鼠卵母细胞生发泡破裂没有影响,但可以抑制卵母细胞第一极体的释放,影响卵母细胞的存活率和破坏卵母细胞成熟,并可降低体外受精率和超排卵的卵母细胞数... 采用超排卵技术研究甲醛对小鼠卵母细胞的成熟和体外受精以及脏器等的影响。甲醛对小鼠卵母细胞生发泡破裂没有影响,但可以抑制卵母细胞第一极体的释放,影响卵母细胞的存活率和破坏卵母细胞成熟,并可降低体外受精率和超排卵的卵母细胞数量,影响小鼠的正常生殖功能。而且,高剂量的甲醛还对小鼠的肝脏以及卵巢有明显的毒副作用。 展开更多
关键词 甲醛 卵母细胞 生发泡破裂 第一极体 体外受精
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注射hCG后不同时间猪所排卵泡内COC的形态和卵母细胞减数分裂进程 被引量:3
10
作者 孙兴参 伊亚玲 +3 位作者 岳奎忠 马所峰 冯兴军 谭景和 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期327-329,共3页
研究了超排处理注射 h CG后不同时间猪卵丘卵母细胞复合体 (COC)的回收率和形态、卵母细胞减数分裂进程以及 COC形态与生发泡 (GV)染色质构型之间的关系。结果表明 :(1)注射 h CG后 4 h COC的回收率为 5 3.1% ,明显低于注射 h CG后 18、... 研究了超排处理注射 h CG后不同时间猪卵丘卵母细胞复合体 (COC)的回收率和形态、卵母细胞减数分裂进程以及 COC形态与生发泡 (GV)染色质构型之间的关系。结果表明 :(1)注射 h CG后 4 h COC的回收率为 5 3.1% ,明显低于注射 h CG后 18、2 2、2 4 h(71.2 %、76 .5 %、70 .0 % ,P<0 .0 5 ) ;(2 )注射 h CG后 18、2 2、2 4 h收集的 COC分别有98.9%、98.0 %、91.4 %的卵丘已经发生扩展 ,而注射 h CG后 4 h收集的 COC则无一发生卵丘扩展 ;(3)注射 h CG后 4h,有少量卵母细胞开始恢复减数分裂 ,至 18h左右开始发生生发泡破裂 (GVBD) ,到 2 2~ 2 4 h有 5 8.4 %~ 6 0 .0 %的卵母细胞发生 GVBD;(4)外层卵丘扩展、放射冠轻微扩展的卵母细胞处于 GV- 1期的比例 (6 9.6 % )明显高于卵丘完全扩展的卵母细胞 (47.8% )和放射冠部分扩展、卵丘已经脱落的卵母细胞 (2 9.3% ) ,而后 2者发生 GVBD的比例(40 %、4 4 % )则略高于前者 (2 7% )。 展开更多
关键词 HCG 形态 减数分裂进程 生发泡 卵母细胞 染色质构型 卵丘卵母细胞复合体
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日本鳗鲡排卵的人工诱导 被引量:9
11
作者 柳凌 郭峰 +1 位作者 张洁明 鲁大椿 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期49-55,共7页
对日本鳗鲡(Anguillajaponica)卵巢发育的时间与催产率的关系进行研究,对卵母细胞在体内胚泡破裂(GVBD)的发生过程、以及用17α-OHP和17α,20β-DHP诱导日本鳗鲡排卵的方式、时机和催产效果进行观察,结果表明,卵巢发育时间越长,催产率... 对日本鳗鲡(Anguillajaponica)卵巢发育的时间与催产率的关系进行研究,对卵母细胞在体内胚泡破裂(GVBD)的发生过程、以及用17α-OHP和17α,20β-DHP诱导日本鳗鲡排卵的方式、时机和催产效果进行观察,结果表明,卵巢发育时间越长,催产率越低。造成催产率低的原因主要是由于日本鳗鲡在卵母细胞成熟后期,雌鳗个体对催产药物敏感性差异较大,催产时机难以掌握。通过采用适合日本鳗鲡卵母细胞的透明液观察GVBD的发生过程,并根据每个个体GVBD的发生速度,制订适宜的催产方案基本解决了上述难题。本实验采用CP、HCG、17α-OHP或17α,20β-DHP混合催产,使其平均催产率由35 4%分别提高到91 9%和93 0%。17α-OHP和17α,20β-DHP的催产剂量为5mg/(500g)和10mg/(500g)。在(21±0 5)℃水温条件下,催产效应时间分别为15~18h和13~16h。 展开更多
关键词 诱导排卵技术 胚泡破裂(gvBD) 催产率 日本鳗鲡
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三氯化铬对小鼠卵母细胞成熟和体外受精的影响 被引量:5
12
作者 沈维干 陈彦 +3 位作者 李朝军 季全兰 李霖 贡昌春 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期379-382,共4页
采用小鼠卵母细胞体外培养 ,体外受精的方法研究了三氯化铬对小鼠卵母细胞成熟和受精能力的影响 .结果表明 ,三氯化铬可以抑制卵母细胞第一极体的释放 ,降低小鼠超排卵数和卵母细胞的存活率和体外受精率 .对小鼠体内生发泡破裂没有影响 ... 采用小鼠卵母细胞体外培养 ,体外受精的方法研究了三氯化铬对小鼠卵母细胞成熟和受精能力的影响 .结果表明 ,三氯化铬可以抑制卵母细胞第一极体的释放 ,降低小鼠超排卵数和卵母细胞的存活率和体外受精率 .对小鼠体内生发泡破裂没有影响 ,但可以抑制体外培养卵母细胞的生发泡破裂 ;随着在正常培养液中培养时间的延长 ,卵母细胞的第一极体的释放率和体外受精率 (除了 6.0 mg· kg-1组外 )均有显著提高 ,且与对照组相比已经无显著性差异 .结果提示 ,三氯化铬可以破坏卵母细胞的成熟 ,降低卵母细胞的受精能力 。 展开更多
关键词 三氯化铬 卵母细胞成熟 体外受精
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6种金属元素对小鼠卵母细胞成熟和体外受精的影响 被引量:6
13
作者 沈维干 陈彦 +3 位作者 李朝军 李霖 季全兰 贡昌春 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期202-204,共3页
为研究镉、铅、镍、锰、铬、铝元素的生殖毒性 ,采用卵母细胞体外培养、体外受精的方法 ,观察它们对卵母细胞成熟和受精能力的影响。结果显示除了铝外 ,其它各金属元素均可以明显降低小鼠超排卵数 ;6个剂量组均可以抑制卵母细胞的成熟 ... 为研究镉、铅、镍、锰、铬、铝元素的生殖毒性 ,采用卵母细胞体外培养、体外受精的方法 ,观察它们对卵母细胞成熟和受精能力的影响。结果显示除了铝外 ,其它各金属元素均可以明显降低小鼠超排卵数 ;6个剂量组均可以抑制卵母细胞的成熟 ,显著降低卵母细胞第一极体释放率、体外受精率和细胞存活率 ,对体内卵母细胞的生发泡破裂没有影响 ,但是对体外培养卵母细胞的生发泡破裂有明显的抑制作用 (铝组除外 )。结果提示 ,这些金属元素被人体过量吸收后 ,可以破坏育龄妇女卵母细胞正常成熟 ,使受精能力下降 。 展开更多
关键词 金属元素 卵母细胞成熟 体外受精
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褪黑素对FSH诱导的小鼠卵母细胞体外成熟的影响 被引量:4
14
作者 汪建红 曾献春 吕海英 《生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第1期17-19,共3页
 通过次黄嘌呤(HX)阻滞、FSH诱导体外培养模型研究了褪黑素(MT)对小鼠卵母细胞成熟的影响,探讨褪黑素(MT)是否影响小鼠卵母细胞的体外成熟。0.1mg/mL和0.02mg/mL两有效浓度的MT能显著抑制促性腺激素(FSH)诱导的HX阻滞的CEOsGVBD的发生(...  通过次黄嘌呤(HX)阻滞、FSH诱导体外培养模型研究了褪黑素(MT)对小鼠卵母细胞成熟的影响,探讨褪黑素(MT)是否影响小鼠卵母细胞的体外成熟。0.1mg/mL和0.02mg/mL两有效浓度的MT能显著抑制促性腺激素(FSH)诱导的HX阻滞的CEOsGVBD的发生(P<0.05),对PBl的排出虽有一定的抑制作用,但没有统计学意义;MT和次黄嘌呤(HX)对CEOs的自发成熟有协同抑制作用(P<0.01),但在裸卵(DO)自发成熟的阻滞中没有协同效应。MT是调节哺乳动物卵母细胞成熟的重要激素之一,其作用机制可能是通过卵丘细胞实现的。 展开更多
关键词 褪黑素 体外成熟 生发泡破裂 第一极体 小鼠
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银鲫卵母细胞体外诱导成熟技术的建立 被引量:2
15
作者 李志 汪洋 +4 位作者 周莉 李熙银 张晓娟 周剑 桂建芳 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期984-991,共8页
研究以银鲫为材料,根据银鲫(Carassius auratus gibelio)卵母细胞生发泡(Germinal vesicle,GV)边移程度及剥离GV中减数分裂前期染色体的凝集状态,将银鲫Ⅳ时相的卵母细胞分为GV0、GV1、GV2和GV3四个时期;并进一步比较了分别处于这4个时... 研究以银鲫为材料,根据银鲫(Carassius auratus gibelio)卵母细胞生发泡(Germinal vesicle,GV)边移程度及剥离GV中减数分裂前期染色体的凝集状态,将银鲫Ⅳ时相的卵母细胞分为GV0、GV1、GV2和GV3四个时期;并进一步比较了分别处于这4个时期银鲫卵母细胞体外诱导培养的成熟率、卵裂率和孵化率。结果表明,GV1期之后的卵母细胞均可有效进行体外诱导成熟,可正常受精发育,由于GV1期卵母细胞有较长时间用于显微操作,因此GV1期卵母细胞被选为进行体外诱导的最早时期的卵母细胞。以GV1期卵母细胞为研究材料,摸索了银鲫卵母细胞体外诱导成熟的适宜条件:取GV1期的Ⅳ时相卵母细胞,放置于pH 8.5、加有1μg/m L孕酮激素(17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one,DHP)的格氏平衡盐溶液(Gey’s balanced salt solution,GBSS)中,在23℃培养箱中体外诱导12h后,将滤泡膜剥离后再进行人工体外授精,其所获胚胎的孵化率可达55.5%。此外,将体外转录合成的带GFP标签的h2af1o m RNA注射到GV1期卵母细胞,发现经显微操作和体外诱导后不仅可以通过GFP绿色荧光信号活体观察GVBD、受精、卵裂和早期胚胎发育的全过程,而且诱导成熟的卵子仍可正常受精和胚胎发育。研究建立的银鲫卵母细胞体外诱导成熟技术为银鲫和其他鱼类卵母细胞发育过程研究及其相关基因和细胞显微操作提供了技术平台。 展开更多
关键词 银鲫 卵母细胞成熟 体外诱导 生发泡 显微注射
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山羊卵母细胞体外成熟过程中细胞核迁移的研究 被引量:3
16
作者 王雪红 董雅娟 +3 位作者 柏学进 岳福杰 杨恕玲 董方圆 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第C00期412-415,426,共5页
本试验应用传统的醋酸地衣红染色法研究了山羊卵母细胞体外成熟过程中细胞核迁移现象,结果发现成熟分裂从GVBD现象起,其细胞核即由卵母细胞的近中央位置逐渐移向细胞表面,之后同源染色体分开,排出第一极体。卵母细胞成熟后,随着时... 本试验应用传统的醋酸地衣红染色法研究了山羊卵母细胞体外成熟过程中细胞核迁移现象,结果发现成熟分裂从GVBD现象起,其细胞核即由卵母细胞的近中央位置逐渐移向细胞表面,之后同源染色体分开,排出第一极体。卵母细胞成熟后,随着时间的延长,细胞核又逐渐远离第一极体端。试验结果采用面积积分法处理,结果为:0—5.7h山羊卵母细胞处于GV期,持续时间为5.7h;5.7—8.9h为DK期,持续时间为3.2h;8.9—15.9h卵母细胞处于MⅠ期。持续7h;15.9—17.5h为AⅠ期,持续1.6h;17.5—22h为MⅡ期,持续4.5h。 展开更多
关键词 体外成熟 细胞核迁移 面积积分法 山羊 卵母细胞
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雷公藤多甙对小鼠卵母细胞成熟和体外受精的影响 被引量:6
17
作者 王君 于智勇 +1 位作者 薛庆於 沈维干 《生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第5期48-49,66,共3页
采用超排卵技术研究雷公藤多甙(GTW)对小鼠卵母细胞的成熟和体外受精以及脏器等的影响,GTW对小鼠卵母细胞生发泡破裂没有影响,但可以抑制卵母细胞第一极体的释放,影响卵母细胞的存活率并可降低体外受精率和超排卵的卵母细胞数量。GTW可... 采用超排卵技术研究雷公藤多甙(GTW)对小鼠卵母细胞的成熟和体外受精以及脏器等的影响,GTW对小鼠卵母细胞生发泡破裂没有影响,但可以抑制卵母细胞第一极体的释放,影响卵母细胞的存活率并可降低体外受精率和超排卵的卵母细胞数量。GTW可以破坏卵母细胞成熟,降低卵母细胞的体外受精能力,影响小鼠的正常生殖功能。 展开更多
关键词 雷公藤多甙 卵母细胞 生发泡破裂 第一极体 体外受精
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镍对小鼠卵母细胞成熟和体外受精的影响 被引量:3
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作者 沈维干 李朝军 +3 位作者 陈彦 毕春明 张锡然 贡昌春 《生殖医学杂志》 CAS 2000年第6期339-342,共4页
为了研究镍的生殖毒性 ,采用卵母细胞体外培养、体外受精的方法研究镍对小鼠卵母细胞的成熟和体外受精率的影响。结果 :氯化镍对卵母细胞生发泡破裂没有影响 ,但抑制卵母细胞第一极体的排放 ,降低体外受精率 ,并降低卵母细胞的存活率。... 为了研究镍的生殖毒性 ,采用卵母细胞体外培养、体外受精的方法研究镍对小鼠卵母细胞的成熟和体外受精率的影响。结果 :氯化镍对卵母细胞生发泡破裂没有影响 ,但抑制卵母细胞第一极体的排放 ,降低体外受精率 ,并降低卵母细胞的存活率。实验结果提示 ,氯化镍破坏小鼠卵母细胞的减数分裂 ,影响小鼠的生殖功能。 展开更多
关键词 氯化镍 卵母细胞 生发泡破裂 体外受精 小鼠
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卵丘细胞对小鼠卵母细胞体外成熟及其后续发育的影响 被引量:2
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作者 岳顺利 周佳勃 +4 位作者 孙兴参 梁洋 太平 毛冠平 严云勤 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期832-836,共5页
观察了卵丘细胞共培养对小鼠生发泡期部分裸露(PNO)和裸卵(NO)成熟和发育能力的影响;分别用小鼠、大鼠、猪的卵丘细胞与小鼠PNO和NO进行了共培养。检测了小鼠PNO和NO的减数分裂能力、生发泡构型、受精和胚胎发育能力。结果,PNO、NO的减... 观察了卵丘细胞共培养对小鼠生发泡期部分裸露(PNO)和裸卵(NO)成熟和发育能力的影响;分别用小鼠、大鼠、猪的卵丘细胞与小鼠PNO和NO进行了共培养。检测了小鼠PNO和NO的减数分裂能力、生发泡构型、受精和胚胎发育能力。结果,PNO、NO的减数分裂能力显著(P<0.05)低于卵丘完整复合体(COCs)的减数分裂能力。COCs中SN型卵母细胞比率显著高于PNO和NO中SN型卵母细胞比率(P<0.05),大部分PNO和NO的卵母细胞核型为NSN型。与对照组相比,与小鼠或大鼠卵丘细胞共培养的小鼠PNO和NO的减数分裂能力没有显著提高,但是与猪卵丘细胞共培养却可以提高小鼠PNO和NO的减数分裂能力。结果表明,猪卵丘细胞能促进小鼠卵母细胞的体外成熟,但并不影响小鼠卵母细胞的受精和胚胎发育。 展开更多
关键词 体外成熟 卵丘卵母细胞复合体 生发泡破裂
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6-DMAP对小鼠卵母细胞减数分裂启动及孤雌发育作用 被引量:4
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作者 刘红林 范必勤 +2 位作者 汪河海 陈宜峰 王公金 《实验生物学报》 SCIE CAS CSCD 1997年第4期403-406,共4页
小鼠卵泡卵母细胞体外培养过程中加入2 mmol/L 6-DMAP可抑制卵母细胞自发的染色质浓缩和生发泡破裂(GVBD)。源自超排的MⅡ期卵母细胞则能为6-DMAP所激活。hCG注射后18—19h的卵母细胞置于2 mmol/L6-DMAP的CZB溶液中培养0.5 h、1h、2h、... 小鼠卵泡卵母细胞体外培养过程中加入2 mmol/L 6-DMAP可抑制卵母细胞自发的染色质浓缩和生发泡破裂(GVBD)。源自超排的MⅡ期卵母细胞则能为6-DMAP所激活。hCG注射后18—19h的卵母细胞置于2 mmol/L6-DMAP的CZB溶液中培养0.5 h、1h、2h、3h,卵母细胞的激活率分别为26.1%、75.2%、75.8%、77.3%、;卵裂率分别为88.2%、73.2%、67.0%、58.4%。与乙醇激活法相比,6-DMAP处理引起了不同的孤雌激活类型。 展开更多
关键词 小鼠 6-DMAP 卵母细胞 减数分裂 孤雌发育
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