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Transplantation of Goat Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells (gMSCs) Help Restore Spermatogenesis in Endogenous Germ Cells-Depleted Mouse Models 被引量:3
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作者 WANG Fang LIU Chao +2 位作者 ZHANG Shan-shan LIU Wei-shuai HUA Jin-lian 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2013年第3期483-494,共12页
Mesenchymal stem cells (MSCs) derived from bone marrow are a well-characterized population of adult stem cells that can be maintained and propagated in culture for a long time with the capacity to form a variety of ... Mesenchymal stem cells (MSCs) derived from bone marrow are a well-characterized population of adult stem cells that can be maintained and propagated in culture for a long time with the capacity to form a variety of cell types. This study investigated the characteristics of dairy goat bone marrow MSCs (gMSCs) and their differentiation potential toward germ cells in vitro, and to test their potential in vivo, these ceils were transplanted into seminiferous tubes of endogenous germ cells-depleted mouse models. The results showed that characteristic gMSC lines were established and a small population of gMSCs transdifferentiated into male germ cell-like cells which expressed Stra8 after induction with retinoic acid (RA), as analysed by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and immunofluorescence. Further, we transplanted the gMSCs into endogenous germ cells-depleted mouse models. A variety of analysis demonstrated that gMSCs might differentiate into male germ cells and helped spermatogenesis in endogenous germ cells depleted mouse models at 30 d after transplantation. The gMSCs could be used as a potential source of cells for reproductive studies and a neoadjuvant therapy for the spermatogenesis anomaly. Moreover, these cells may offer a new strategy for male infertility and an alternative approach for production of transgenic animals. 展开更多
关键词 dairy goat bone marrow mesenchymal stem cells (gmscs SPERMATOGENESIS male germ cells SPERMATOZOA
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Gingival-derived mesenchymal stem cells:An endless resource for regenerative dentistry 被引量:6
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作者 Mohammed E Grawish 《World Journal of Stem Cells》 SCIE CAS 2018年第9期116-118,共3页
The gingiva, the masticatory portion of the oral mucosa, is excised and discarded frequently during routine dental treatments and following tooth extraction, dental crown lengthening, gingivectomy and periodontal surg... The gingiva, the masticatory portion of the oral mucosa, is excised and discarded frequently during routine dental treatments and following tooth extraction, dental crown lengthening, gingivectomy and periodontal surgeries. Subsequent to excision, healing eventually happens in a short time period after gingival surgery. Clinically, the gingival tissue can be collected very easily and, in the laboratory, it is also very easy to isolate gingival-derived mesenchymal stem cells (GMSCs) from this discarded gingival tissue. GMSCs, a stem cell population within the lamina propria of the gingival tissue, can be isolated from attached and free gingiva, inflamed gingival tissu-es, and from hyperplastic gingiva. Comparatively, they constitute more attractive alternatives to other dental-derived mesenchymal stem cells due to the availability and accessibility of gingival tissues. They have unique immunomodulatory functions and well-documented self-renewal and multipotent differentiation properties. They display positive signals for Stro-1, Oct-4 and SSEA-4 pluripotency-associated markers, with some co-expre-ssing Oct4/Stro-1 or Oct-4/SSEA-4. They should be considered as the best stem cell source for cell-based therapies and regenerative dentistry. The clinical use of GMSCs for regenerative dentistry represents an attrac-tive therapeutic modality. However, numerous biological and technical challenges need to be addressed prior to considering transplantation approaches of GMSCs as clinically realistic therapies for humans. 展开更多
关键词 gingival-derived mesenchymal stem cells REGENERATIVE DENTISTRY Lamina propria of the gingivA gingivA stem cell therapy
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可降解甲壳素/壳聚糖支架联合GMSCs来源外泌体对大鼠坐骨神经损伤的修复作用研究
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作者 郑佳欣 李晓飞 《浙江医学》 CAS 2023年第3期229-234,250,I0003,共8页
目的探究可降解甲壳素/壳聚糖支架联合牙龈间充质干细胞(GMSCs)来源外泌体对大鼠坐骨神经损伤的修复作用。方法选择2020年1月至2021年12月金华市中心医院的4名健康志愿者,在拔除智齿的过程中收集1mg牙龈组织进行原代培养GMSCs,采用超速... 目的探究可降解甲壳素/壳聚糖支架联合牙龈间充质干细胞(GMSCs)来源外泌体对大鼠坐骨神经损伤的修复作用。方法选择2020年1月至2021年12月金华市中心医院的4名健康志愿者,在拔除智齿的过程中收集1mg牙龈组织进行原代培养GMSCs,采用超速离心法提取GMSCs来源外泌体,透射电子显微镜(TEM)和Westernblot检测外泌体的囊泡直径和标志蛋白CD9和CD63的表达。24只SD大鼠建立坐骨神经损伤模型后,采用随机数字表法分为支架组、支架+外泌体组和自体移植组,每组8只。支架组在坐骨神经损伤部分加入单纯甲壳素/壳聚糖支架凝胶;支架+外泌体组在坐骨神经损伤部分加入可降解甲壳素/壳聚糖支架+外泌体凝胶复合物;自体移植组采用自体移植的坐骨神经组织治疗。采用坐骨神经功能指数(SFI)评估大鼠坐骨神经结扎术后1、4和8周的运动功能,采用TEM、甲苯胺蓝染色和大体标本组织分析轴突组织的恢复,评估坐骨神经支配的肌肉重量和肌纤维重塑。结果TEM检查显示外泌体呈圆形结构,囊泡直径峰值为102nm。Westernblot分析结果显示外泌体标记CD9和CD63呈阳性。支架+外泌体组术后4、8周的SFI均明显高于支架组(均P<0.05),而自体移植组SFI明显高于支架+外泌体组和支架组(均P<0.05)。支架+外泌体组有髓轴突密度、有髓轴突直径和髓鞘厚度均明显高于支架组(均P<0.05)。但是支架组和支架+外泌体组的有髓轴突密度、有髓轴突直径和髓鞘厚度均明显低于自体移植组(均P<0.05)。支架+外泌体组的腓肠肌湿重比和肌纤维横截面积均明显大于支架组(均P<0.05),自体移植组的腓肠肌湿重比和肌纤维横截面积均明显大于支架组和支架+外泌体组(均P<0.05)。结论可降解甲壳素/壳聚糖支架联合GMSCs来源外泌体可以对鼠坐骨神经的损伤有一定修复作用。 展开更多
关键词 支架 牙龈间充质干细胞 外泌体
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Laminin 332-functionalized coating to regulate the behavior of keratinocytes and gingival mesenchymal stem cells to enhance implant soft tissue sealing
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作者 Lipeng Liu Jing Wang +7 位作者 Ying Li Bing Liu Wei Zhang Weikang An Qing Wang Boya Xu Lingzhou Zhao Chufan Ma 《Regenerative Biomaterials》 SCIE EI 2022年第1期724-738,共15页
Peri-implant epithelial sealing is the first line of defense against external pathogens or stimuli;hence,an essential process to prevent peri-implantitis.Laminin 332(LN332)is the main component of the internal basal l... Peri-implant epithelial sealing is the first line of defense against external pathogens or stimuli;hence,an essential process to prevent peri-implantitis.Laminin 332(LN332)is the main component of the internal basal lamina and participates in peri-implant epithelial sealing by forming hemidesmosomes(HDs)with integrinα6β4.In thiswork,poly(D,L-lactide)(PDLLA)-LN332 composite coating was successfully constructed by a method similar to layer-by-layer assembly,displaying staged LN332 release for as long as 28days.The PDLLA-LN332 composite coating can activate the intracellular PI3K-Akt pathway via binding to cellular integrinα6β4,which can promote adhesion,migration and proliferation of HaCaT cells and further enhance the expression of keratinocyte HD-related molecules,including integrinα6β4,LN332 and plectin.Furthermore,the PDLLA-LN332 composite coating can promote the adhesion,spreading and proliferation of gingival mesenchymal stem cells and accelerate their epithelial differentiation.Therefore,the PDLLA-LN332 composite coating can enhance implant soft tissue sealing,warranting further in vivo study. 展开更多
关键词 PDLLA laminin 332 KERATINOCYTES gingival mesenchymal stem cells soft tissue sealing
原文传递
牙龈间充质干细胞治疗口腔疾病研究进展
5
作者 赵彩桃 谢小美 +3 位作者 尹文 陈蕊 范桢 郝春波 《口腔医学》 CAS 2024年第7期556-560,共5页
牙龈间充质干细胞(gingival mesenchymal stem cells, GMSCs)是存在于牙龈组织固有层内的一群间充质干细胞,它不仅可以从健康的牙龈组织中分离出来,还可以从增生性甚至炎性牙龈组织中分离出来。GMSCs因来源丰富,易于获取,且具有独特的... 牙龈间充质干细胞(gingival mesenchymal stem cells, GMSCs)是存在于牙龈组织固有层内的一群间充质干细胞,它不仅可以从健康的牙龈组织中分离出来,还可以从增生性甚至炎性牙龈组织中分离出来。GMSCs因来源丰富,易于获取,且具有独特的免疫调节特性及多向分化潜能,成为口腔疾病治疗的研究热点。目前已被应用于牙周炎、牙龈萎缩、口腔癌、颌骨缺损、神经修复等口腔疾病的治疗中,该文对近年来GMSCs在口腔疾病中相关应用的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 牙龈间充质干细胞 组织工程 再生医学
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单细胞水平解析人牙龈间充质干细胞异质性 被引量:1
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作者 吴昊 刘紫微 +2 位作者 郑颖 戴雅文 时权 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期325-332,共8页
利用单细胞转录组测序解析牙龈干细胞(gingival mesenchymal stem cells,GMSCs)内部功能亚群及异质性。体外分离培养、鉴定人GMSCs,利用10×scRNA-seq平台对GMSCs进行单细胞测序,根据细胞的基因表达差异进行分群,分析各亚群表面标... 利用单细胞转录组测序解析牙龈干细胞(gingival mesenchymal stem cells,GMSCs)内部功能亚群及异质性。体外分离培养、鉴定人GMSCs,利用10×scRNA-seq平台对GMSCs进行单细胞测序,根据细胞的基因表达差异进行分群,分析各亚群表面标记物表达情况,比较各亚群的细胞周期差异,成骨、成脂、成软骨分化基因表达差异以及基因表达谱差异,并分析各亚群细胞间的相互作用。成功提取到人GMSCs,呈旋涡状贴壁生长。单细胞测序分析结果显示GMSCs由9个细胞亚群构成,高表达表面标记物ENG、NT5E、THY1、ITGB1和CD44,阴性表达CD34、CD14、PECAM1、PTPRC。GMSCs总体G2/M期所占比例为41.59%;亚群6的G2/M期比例最低(16.44%);而亚群2最高(99.08%)。成脂、成软骨、成骨相关基因在9个细胞亚群中的表达不完全相同;9个亚群具有不同的基因表达谱,亚群2/4具有较高的相似性,相对高表达TOP2A、UBE2C、KPNA2、CENPF等基因;亚群5高表达DKK1、KRT7、ID1等基因;亚群9高表达MALAT1、FN1、NEAT1等基因。GO分析显示各个亚群富集不同的通路。亚群9与其他亚群间的通讯最为活跃。单细胞水平研究提示GMSCs存在不同的功能亚群,且各个亚群的增殖能力、基因组表达谱具有异质性。 展开更多
关键词 牙龈干细胞 单细胞测序 细胞亚群 功能异质性
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牙龈间充质干细胞修复创伤性口腔溃疡 被引量:2
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作者 赵力如(指导) 徐书奎 +4 位作者 吴一凡 罗雅娴 尚林林 李雯雯 马文盛(指导) 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第10期1541-1546,共6页
背景:牙龈间充质干细胞具有促进皮肤组织损伤愈合的作用,但其对口腔溃疡是否具有潜在的治疗作用尚未见明确报道。目的:探讨牙龈间充质干细胞在创伤性口腔溃疡愈合中的治疗潜力。方法:21只SD大鼠采用机械联合化学法建立大鼠口腔溃疡动物... 背景:牙龈间充质干细胞具有促进皮肤组织损伤愈合的作用,但其对口腔溃疡是否具有潜在的治疗作用尚未见明确报道。目的:探讨牙龈间充质干细胞在创伤性口腔溃疡愈合中的治疗潜力。方法:21只SD大鼠采用机械联合化学法建立大鼠口腔溃疡动物模型,随机分为2组:溃疡组和牙龈间充质干细胞组,溃疡组11只,牙龈间充质干细胞组10只,牙龈间充质干细胞组于造模第2天在溃疡中心及周围局部注射牙龈间充质干细胞悬液,每只大鼠注射细胞总量为1×10^(6)个,溃疡组注射等量PBS,溃疡组造模后1d取1只大鼠验证溃疡造模是否成功,其余溃疡组及牙龈间充质干细胞组大鼠于造模后3,7 d采用大体观察和组织学方法观察溃疡愈合情况,每组每个时间点5只大鼠。结果与结论:①体外培养的牙龈间充质干细胞呈梭形、纺锤样结构,似成纤维细胞,胞体饱满,具有成骨成脂分化潜能;②采用机械联合化学法可成功进行口腔溃疡造模,溃疡组自然愈合过程中可见第3天溃疡炎症反应最重,第7天可见溃疡面积缩小呈现愈合趋势,但大体观察仍然可见溃疡创面,尚未完全愈合;③造模后第3天,大体观察溃疡组的炎症反应强于牙龈间充质干细胞组,造模后第7天牙龈间充质干细胞组溃疡创面已基本愈合;④造模后第7天,苏木精-伊红染色可见牙龈间充质干细胞组溃疡处可见薄层上皮形成;Masson染色可见牙龈间充质干细胞组胶原形成较溃疡组粗大,且排列更加规则;⑤结果表明,牙龈间充质干细胞在大鼠创伤性口腔溃疡早期具有降低炎症反应的作用,对于口腔溃疡的愈合具有促进作用,其口腔上皮的形成时间更早,且胶原形成较粗大,排列更加规则。 展开更多
关键词 牙龈间充质干细胞 牙龈干细胞 间充质干细胞 口腔干细胞 创伤性口腔溃疡 口腔溃疡 溃疡
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人牙龈间充质干细胞条件培养液对人成纤维细胞生物学功能的影响
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作者 张洁 杨华军 +3 位作者 赵伟 蒋巧平 李敏 胡胜杰 《浙江医学》 CAS 2023年第13期1350-1353,I0003,共5页
目的 观察人牙龈间充质干细胞条件培养液(GMSCs-CM)对人成纤维细胞生物学功能的影响。方法 制备GMSCs-CM,将0(空白对照组)、1、5、10、50、100μg/mL浓度的GMSCs-CM作用于成纤维细胞,采用CCK-8法检测成纤维细胞增殖情况,TUNEL法检测成... 目的 观察人牙龈间充质干细胞条件培养液(GMSCs-CM)对人成纤维细胞生物学功能的影响。方法 制备GMSCs-CM,将0(空白对照组)、1、5、10、50、100μg/mL浓度的GMSCs-CM作用于成纤维细胞,采用CCK-8法检测成纤维细胞增殖情况,TUNEL法检测成纤维细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测在0(空白对照组)、1、10、100μg/mL浓度的GMSCs-CM作用下成纤维细胞的Ⅰ型胶原(COL-1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β(TGF-β)mRNA的表达。结果 GMSCs-CM能明显促进成纤维细胞的增殖。当GMSCs-CM浓度为1μg/mL时促进成纤维细胞增殖的作用最为显著,而对细胞凋亡无明显影响。与空白对照组比较,GMSCs-CM浓度为1μg/mL明显提高成纤维细胞COL-1、PCNA、TGF-β mRNA表达水平(均P<0.05)。结论 GMSCs-CM对成纤维细胞的增殖能力有明显的促进作用,而对细胞凋亡无明显影响,有望用于促进皮肤创面愈合治疗。 展开更多
关键词 牙龈间充质干细胞 成纤维细胞 细胞增殖 细胞凋亡 创面愈合
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人牙龈间充质干细胞条件培养液促进大鼠皮肤创面愈合的实验研究
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作者 张洁 杨华军 +3 位作者 赵伟 蒋巧平 李敏 胡胜杰 《浙江临床医学》 2023年第9期1287-1289,1293,共4页
目的探究人牙龈间充质干细胞条件培养液(GMSCs-CM)对大鼠皮肤创面愈合的影响及作用机制。方法将20只大鼠随机分为GMSCs-CM组和PBS组。建立皮肤切割伤模型后于大鼠皮肤创伤周围4个部位共注射GMSCs-CM或PBS液200μL(15μg/mL),1次/d,连续... 目的探究人牙龈间充质干细胞条件培养液(GMSCs-CM)对大鼠皮肤创面愈合的影响及作用机制。方法将20只大鼠随机分为GMSCs-CM组和PBS组。建立皮肤切割伤模型后于大鼠皮肤创伤周围4个部位共注射GMSCs-CM或PBS液200μL(15μg/mL),1次/d,连续3 d。分别在注射第3、7、14天时观察创面愈合情况,计算创面愈合率。通过HE染色检测病理学改变,免疫组化检测CD31的表达,Western blot检测PCNA、TGF-b1和VEGF蛋白的表达。结果第7、14天时GMSCs-CM组的创面愈合率明显高于PBS组。病理学显示GMSCs-CM组成纤维细胞、胶原纤维及血管增多,炎性细胞浸润增加。免疫组化显示GMSCs-CM组创面CD31染色阳性的细胞数量增多。Western blot显示第3、7、14天创面PCNA、TGF-b1和VEGF蛋白表达量均显著高于PBS组(P<0.05)。结论注射GMSCs-CM可通过上调VEGF和TGF-b1的表达,促进成纤维细胞增殖、毛细血管和肉芽组织的形成,从而加快皮肤创面的愈合。 展开更多
关键词 牙龈间充质干细胞 条件培养基 创面愈合 血管内皮生长因子、转化生长因子β1
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人牙龈间充质干细胞与牙周膜干细胞的性能比较 被引量:6
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作者 杨昊 高丽娜 +3 位作者 安莹 周峻 陈发明 金岩 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2013年第4期326-330,共5页
目的:比较人牙龈间充质干细胞(gingival mesenchymal stem cells,GMSCs)和牙周膜干细胞(periodontalligament stem cells,PDLSCs)的增殖及分化能力。方法:取同一个体的牙龈组织及牙周膜组织进行干细胞的分离培养和鉴定,并对其干细胞基... 目的:比较人牙龈间充质干细胞(gingival mesenchymal stem cells,GMSCs)和牙周膜干细胞(periodontalligament stem cells,PDLSCs)的增殖及分化能力。方法:取同一个体的牙龈组织及牙周膜组织进行干细胞的分离培养和鉴定,并对其干细胞基本性能与增殖、分化能力进行对比分析。结果:GMSCs和PDLSCs均具有良好的间充质干细胞的特性,但其增殖及分化能力存在一定的差异。GMSCs原代细胞培养的成功率较PDLSCs高,增殖能力强,差异具有统计学意义(P<0.05);而分化能力检测结果显示,GMSCs成骨能力明显弱于PDLSCs(P<0.05),成脂能力两组细胞无显著性差异。结论:GMSCs能否代替PDLSCs用于牙周组织再生治疗,尚需要进一步研究。 展开更多
关键词 人类 牙龈间充质干细胞 牙周膜干细胞 增殖 分化
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碱性成纤维生长因子促进牙龈间充质干细胞增殖作用的研究 被引量:3
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作者 方颖 曾素娟 +1 位作者 王旭 葛立宏 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期603-606,共4页
目的:体外研究碱性成纤维生长因子(b FGF)促进牙龈间充质干细胞(GMSCs)增殖的作用。方法:酶消化法获得原代GMSCs,克隆化培养后进行干细胞鉴定。取第4代GMSCs,以含有10%胎牛血清的α-MEM作为基础培养基,分别加入0、0.5、1、5、10、... 目的:体外研究碱性成纤维生长因子(b FGF)促进牙龈间充质干细胞(GMSCs)增殖的作用。方法:酶消化法获得原代GMSCs,克隆化培养后进行干细胞鉴定。取第4代GMSCs,以含有10%胎牛血清的α-MEM作为基础培养基,分别加入0、0.5、1、5、10、20 ng/ml 5种不同浓度b FGF培养1-9 d,用CCK-8法检测细胞增殖。结果:GMSCs可以通过酶消化法获得,具有干细胞特性;0.5-20 ng/ml的b FGF均能促进GMSCs的增殖,在0.5-10 ng/ml范围内促增殖作用随浓度增加和培养时间延长而增强。结论:b FGF对GMSCs增殖能力具有浓度依赖性和时间依赖性促进作用。 展开更多
关键词 碱性成纤维生长因子 牙龈间充质干细胞 间充质干细胞 细胞增殖
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人牙龈干细胞的分离鉴定及基质细胞衍生因子-1对其趋化效应的研究 被引量:3
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作者 杜令倩 杨丕山 葛少华 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期238-243,共6页
目的研究基质细胞衍生因子-1(SDF-1)受体CXCR4在人牙龈干细胞(GMSCs)上的表达及SDF-1对人GMSCs的趋化效应。方法通过有限稀释法分离并培养人GMSCs,检测其表面干细胞标志物的表达情况,测试其克隆形成率及多向分化能力,利用免疫荧光染色... 目的研究基质细胞衍生因子-1(SDF-1)受体CXCR4在人牙龈干细胞(GMSCs)上的表达及SDF-1对人GMSCs的趋化效应。方法通过有限稀释法分离并培养人GMSCs,检测其表面干细胞标志物的表达情况,测试其克隆形成率及多向分化能力,利用免疫荧光染色法检测人GMSCs上SDF-1受体CXCR4的表达,用Transwell细胞培养室检测不同质量浓度SDF-1对人GMSCs的趋化反应,光镜下计数迁移至滤膜下侧面的不同视野的细胞数。结果人GMSCs具有较高的自我更新能力,在体外呈克隆状生长,表达间充质干细胞表面标志物CD44、CD73、CD90、CD105和CD166,而造血干细胞表面标志物CD14、CD34和CD45的表达为阴性。体外诱导培养的人GMSCs能够向成骨细胞及成脂细胞分化,其克隆形成率为21.4%±2.8%。免疫荧光染色显示,人GMSCs表达SDF-1受体CXCR4。SDF-1的质量浓度为100、200 ng·m L-1时,Transwell细胞培养室中迁移的细胞数目(每高倍视野分别为189.3±4.4和164.6±4.9)显著多于空白对照组(每高倍视野47.8±2.5)(P<0.01);使用CXCR4中和抗体处理后,人GMSCs的迁移效应明显受到抑制(每高倍视野降低为29.0±2.4,P<0.01)。结论人GMSCs表达趋化因子SDF-1受体CXCR4,SDF-1对人GMSCs有趋化效应,这种趋化效应可能是通过其特异性受体CXCR4介导的。 展开更多
关键词 基质细胞衍生因子-1 牙龈干细胞 趋化作用
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碱性成纤维生长因子对牙龈间充质干细胞生物学性能的影响 被引量:2
13
作者 方颖 曾素娟 +1 位作者 余湜 葛立宏 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2015年第11期639-644,共6页
目的:体外研究碱性成纤维生长因子(b FGF)对牙龈间充质干细胞(GMSCs)生物学特性的影响。方法:酶消化法获得原代人牙龈间充质干细胞(h GMSCs),并采用有限稀释法进行克隆纯化培养。取第3代h GMSCs,观察5~20 ng/m L不同浓度b FGF对... 目的:体外研究碱性成纤维生长因子(b FGF)对牙龈间充质干细胞(GMSCs)生物学特性的影响。方法:酶消化法获得原代人牙龈间充质干细胞(h GMSCs),并采用有限稀释法进行克隆纯化培养。取第3代h GMSCs,观察5~20 ng/m L不同浓度b FGF对h GMSCs增殖的影响;观察10 ng/m L b FGF对h GMSCs克隆形成能力和ALP活性的影响;通过茜素红染色、油红0染色,观察10 ng/m L b FGF对h GMSCs体外成骨、成脂分化能力的影响,并RT-PCR检测各成骨、成脂分化相关基因的表达水平;同时采用流式细胞术检测10 ng/m L b FGF对h GMSCs表面标志物STRO-1表达的影响。结果:10 ng/m L的b FGF对h GMSCs的增殖、干细胞表面标志物STRO-1的表达、h GMSCs克隆形成率、脂滴形成量以及LPL、PPARγ各成脂基因的表达水平均有明显的促进作用(P〈0.05);但对h GMSCs的ALP活性,及其成骨分化过程中矿化结节的形成量、各成骨相关基因(ALP、OCN、BSP)的表达水平均有明显的抑制作用(P〈0.05)。结论:在一定的培养条件下,b FGF可增加h GMSCs的干细胞表面标志物的表达、促进h GMSCs的增殖能力;并对h GMSCs的多向分化能力起调节作用。 展开更多
关键词 碱性成纤维生长因子(bFGF) 牙龈间充质干细胞 细胞多向分化 细胞增殖
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NF-κB通路对牙龈间充质干细胞分泌炎性因子能力影响的研究 被引量:1
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作者 张洋 刘杰 +4 位作者 石海刚 李晓光 张维 刘娜 徐璐璐 《西南国防医药》 CAS 2016年第5期465-468,共4页
目的探讨炎症作用下NF-κB通路对人牙龈间充质干细胞(GMSCs)分泌炎性因子能力的影响。方法体外分离纯化培养正常组织来源的GMSCs。在相同培养条件下,GMSCs被分成3组。应用梯度浓度TNF-α(0、10、20 ng/ml)诱导12 h。Annexin V-FITC/PI... 目的探讨炎症作用下NF-κB通路对人牙龈间充质干细胞(GMSCs)分泌炎性因子能力的影响。方法体外分离纯化培养正常组织来源的GMSCs。在相同培养条件下,GMSCs被分成3组。应用梯度浓度TNF-α(0、10、20 ng/ml)诱导12 h。Annexin V-FITC/PI双染检测3组间GMSCs凋亡率差异。应用Western blot检测NLK、I-κBα、P-IκBα在NF-κB激活通路中的表达,Real-Time PCR检测TNF-α、IL-1β在GMSCs加入抑制剂BAY 11-7082后基因表达变化。结果凋亡检测显示,GMSCs凋亡率与TNF-α浓度呈正相关(P<0.05);Western blot结果显示,与对照组相比,NLK、I-κBα表达随TNF-α浓度增加而降低(P<0.05),而P-IκBα表达量呈显著增高趋势(P<0.01)。PCR检测结果显示,随外源性TNF-α浓度升高,10 ng/ml组与20 ng/ml组GMSCs的TNF-α与IL-1β基因表达量也显著升高(P<0.01)。TNF-α诱导组加入NF-κB抑制剂BAY 11-7082后检测GMSCs,10 ng/ml组与20 ng/ml组IL-1β与TNF-α基因表达量下降,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GMSCs中NLK在炎性环境下表达量降低,炎性因子可以通过NF-κB通路增强牙龈间充质干细胞中TNF-α和IL-1β的表达。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子-Α 牙龈间充质干细胞 炎症 核转录因子-ΚB
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大麻二酚对人牙龈间充质干细胞体外成骨分化的影响 被引量:1
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作者 王伟峰 李娜 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期762-767,共6页
目的:探讨大麻二酚(CBD)对人牙龈间充质干细胞(hGMSCs)体外成骨分化的影响。方法:体外培养hGMSCs,分别加入不同浓度的CBD处理,CCK-8法检测各组细胞的增殖,茜素红染色检测各组细胞矿化;Real-Time PCR检测细胞成骨分化相关基因(OCN、Col-1... 目的:探讨大麻二酚(CBD)对人牙龈间充质干细胞(hGMSCs)体外成骨分化的影响。方法:体外培养hGMSCs,分别加入不同浓度的CBD处理,CCK-8法检测各组细胞的增殖,茜素红染色检测各组细胞矿化;Real-Time PCR检测细胞成骨分化相关基因(OCN、Col-1、Runx2)mRNA表达水平;Western blot检测Notch信号通路相关蛋白(Notch1、Hes-1),并比较各组细胞碱性磷酸酶(ALP)的活性。结果:CBD能促进hGMSCs增殖(P<0.05);随着CBD给药浓度的增加,hGMSCs茜素红染色逐渐变深,矿化面积增加,ALP活性增强,Col-1、OCN、Runx2 mRNA表达水平逐渐升高,Notch1、Hes-1表达水平升高;DAPT可降低矿化面积和Col-1、OCN、Runx2 mRNA的表达水平。结论:CBD可能是通过激活Notch通路诱导hGMSCs成骨分化。 展开更多
关键词 大麻二酚 牙龈间充质干细胞 成骨分化 NOTCH通路
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炎症作用下Caspase-3/8对人牙龈间充质干细胞凋亡能力影响的研究
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作者 张洋 刘杰 +4 位作者 石海刚 李晓光 张维 刘娜 徐璐璐 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期584-587,共4页
目的:探讨炎症作用下Caspase-3/8对人牙龈间充质干细胞凋亡能力影响的研究,为探索牙龈炎的预防和治疗策略提供理论和实验依据。方法:取20~25岁拔除阻生齿牙切除的无炎症龈瓣和正畸过程中增生的牙龈组织,分离培养正常牙龈间充质干细胞... 目的:探讨炎症作用下Caspase-3/8对人牙龈间充质干细胞凋亡能力影响的研究,为探索牙龈炎的预防和治疗策略提供理论和实验依据。方法:取20~25岁拔除阻生齿牙切除的无炎症龈瓣和正畸过程中增生的牙龈组织,分离培养正常牙龈间充质干细胞(NGMSCs)和炎性牙龈间充质干细胞(IGMSCs)。Annexin V-FITC/PI双染检测相同培养条件下NGMSCs与IGMSCs凋亡率;应用PCR,免疫荧光法检测各组间Caspase-3,Caspase-8因子表达差异。结果:Annexin V-FITC/PI双染检测结果显示相同培养条件下IGMSCs凋亡率(10.44%)〉NGMSCs凋亡率(2.76%)。PCR结果显示IGMSCs组Caspase-3,Caspase-8表达显著高于NGMSCs组(P〈0.01)。IGMSCs组TNF-α,IL-1β基因表达显著高于NGMSCs组(P〈0.01)。结论:Caspase-3/8在牙龈间充质干细胞增殖、凋亡途径中起着重要调控作用。 展开更多
关键词 牙龈间充质干细胞 炎性 凋亡 CASPASE-3 CASPASE-8
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牙龈干细胞对实验性自身免疫性脑脊髓炎的治疗作用
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作者 杨瑞莉 余婷婷 周彦恒 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2017年第2期119-122,共4页
目的:研究牙龈干细胞(Mesenchymal stem cells derived from gingiva,GMSCs)对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的治疗作用,为干细胞治疗自身免疫性脑脊髓炎提供实验依据。方法:通过GMSCs... 目的:研究牙龈干细胞(Mesenchymal stem cells derived from gingiva,GMSCs)对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的治疗作用,为干细胞治疗自身免疫性脑脊髓炎提供实验依据。方法:通过GMSCs与T细胞体外共培养,研究GMSCs对T细胞凋亡、增殖以及向Treg细胞和Th17细胞分化的影响。建立小鼠EAE模型,研究GMSCs对EAE的治疗作用。结果:GMSCs在体外共培养中诱导T细胞凋亡,同时抑制T细胞增殖。GMSCs可以促进Treg细胞分化,而抑制Th17细胞分化。GMSCs注射对小鼠EAE具有治疗作用。机制上GMSCs注射促进EAE小鼠中Treg细胞分化,抑制Th17细胞分化,抑制炎症反应。结论:GMSCs通过促进Treg细胞分化,抑制Th17细胞分化对小鼠EAE具有治疗作用。 展开更多
关键词 牙龈干细胞 免疫调节功能 实验性自身免疫性脑脊髓炎
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丝素改性聚乳酸-羟基乙酸共聚物多孔微球作为牙龈间充质干细胞递送载体的研究 被引量:6
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作者 刘垚杉 吴海林 +3 位作者 贾智 杜博 刘大勇 周志敏 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第11期2419-2426,共8页
利用复乳-溶剂挥发法合成适合细胞三维培养的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)多孔微球,并对其表面进行丝素改性,利用扫描电子显微镜、能谱、红外光谱和X射线衍射等对改性前后PLGA多孔微球的理化特性进行表征.原代培养人牙龈间充质干细胞并... 利用复乳-溶剂挥发法合成适合细胞三维培养的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)多孔微球,并对其表面进行丝素改性,利用扫描电子显微镜、能谱、红外光谱和X射线衍射等对改性前后PLGA多孔微球的理化特性进行表征.原代培养人牙龈间充质干细胞并进行成骨(茜素红染色)成脂(油红O染色)分化鉴定.通过负压混悬法将牙龈干细胞负载于丝素改性的PLGA多孔微球上进行5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷(EdU)细胞增殖及成骨分化研究.结果表明,原代培养的牙龈干细胞具有多向分化潜能,负载在丝素改性的PLGA多孔微球上的细胞有利于细胞增殖.丝素改性的PLGA多孔微球是良好的细胞递送载体,为进一步修复牙槽骨缺损提供了科学依据. 展开更多
关键词 牙龈间充质干细胞 聚乳酸-羟基乙酸共聚物多孔微球 丝素蛋白改性 组织修复
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条件培养液诱导牙龈间充质干细胞分化的体外实验研究 被引量:3
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作者 陈岩 冯妍慧芝 刘宏伟 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2015年第3期167-171,共5页
目的:建立牙龈间充质干细胞(GMSCs)与根端牙胚条件培养液(APTG-CM)的直接共培养体系,检测其体外分化情况。方法:有限稀释法获得单克隆来源的GMSCs,在体外多向诱导分化,检测ALP活性及基因表达(OCN、BSP、ALP、COL-1、CP23)情况。结果 :... 目的:建立牙龈间充质干细胞(GMSCs)与根端牙胚条件培养液(APTG-CM)的直接共培养体系,检测其体外分化情况。方法:有限稀释法获得单克隆来源的GMSCs,在体外多向诱导分化,检测ALP活性及基因表达(OCN、BSP、ALP、COL-1、CP23)情况。结果 :有限稀释法获得的GMSCs可诱导向成骨、成脂肪方向分化。经APTG-CM诱导后,细胞增殖活性和ALP活性均升高;OCN、BSP、ALP、COL-1、CP23基因表达增高。结论:GMSCs经诱导后具备矿化能力;APTG-CM可诱导GMSCs分化,有利于将GMSCs运用于牙周组织工程的研究。 展开更多
关键词 人类 牙龈间充质干细胞 增殖 细胞分化
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EMP对人牙龈间充质干细胞增殖和Ⅰ型胶原合成的影响 被引量:3
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作者 常秀梅 张克荣 +2 位作者 蔡洁琛 齐香薇 王书文 《中国美容医学》 CAS 2015年第8期30-34,共5页
目的:观察釉基质蛋白(enamel matrix proteins,EMPs)对牙龈间充质干细胞(human gingival mesenchymal stem cells,hGMSCs)增殖和Ⅰ型胶原合成的影响。方法:分离培养人牙龈成纤维细胞,免疫细胞化学方法检测其间充质干细胞特性ST... 目的:观察釉基质蛋白(enamel matrix proteins,EMPs)对牙龈间充质干细胞(human gingival mesenchymal stem cells,hGMSCs)增殖和Ⅰ型胶原合成的影响。方法:分离培养人牙龈成纤维细胞,免疫细胞化学方法检测其间充质干细胞特性STRO-1的表达,不同浓度EMPs,25 mg/L(A1组)、50 mg/L(A2组)、100 mg/L(A3组)、200 mg/L(A4组),对照组(A0组)10%FCS的DMEM溶液培养,MTT检测EMPs对细胞增殖活性的影响。免疫细胞化学方法鉴定细胞Ⅰ型胶原合成和图像分析。结果:50~200mg/L表现出促hGMSCs增殖的作用,50 mg/L EMPs即可以显著促进hGMSCs的生长,但以100 mg/L EMPs的促增殖作用最强(与其余各组相比P〈0.01),实验组胶原合成明显强于对照组。其中,100mg/L促 I型胶原(collagen typeⅠ,COLⅠ—合成最明显,且随时间变化。结论:EMP可促进hGMSCs增殖和Ⅰ型胶原合成。 展开更多
关键词 牙龈间充质干细胞 Ⅰ型胶原 增殖
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