人参皂苷Rg_1和Rh_1抗肿瘤作用的研究

目的 :研究人参皂苷 Rh1及其前体 Rg1的整体及离体抗肿瘤作用。方法 :整体实验 4种小鼠移植性肿瘤 :小鼠宫颈癌 - 1 4( U14 )、艾氏腹水癌 ( EAC)、肉瘤 - 1 80 ( S180 )和肝癌腹水型 ( Hep A)腋部皮下接种 ,于接种 1 0 d内 ,每天给药 1次 ,计算各给药组肿瘤抑制率。离体抗肿瘤实验用 3种瘤株 :A375 - S2、T98G 和 He La。结果 :人参皂苷 Rg1( 2 0 0 mg·kg-1,灌胃 )和 Rh1( 4 0和2 0 mg· kg-1,腹腔注射 )对 U14 均具有明显的抑制作用 ( P<0 .0 1 ) ;人参皂苷 Rh1在较高剂量( 4 0 mg·kg-1)时 ,对 EAC也有明显抑制作用 ( P<0 .0 1 )。但人参皂苷 Rg1和 Rh1对 S180 和 Hep A无抗肿瘤作用。离体实验证明 ,Rg1对 He La细胞的增殖有明显的抑制作用 ,Rh1高剂量组( 1 0 0 mg· L-1)对 3种肿瘤细胞均有明显抑制作用。结论 :人参皂苷 Rh1较其前体

人参皂苷Rg_1及其肠内菌代谢产物Rh_1对小鼠免疫细胞功能的影响

目的 初探人参皂苷Rg1 及其肠内菌代谢产物Rh1 对正常小鼠免疫功能的影响。方法 用Rh1 与Rg1 分别处理脾T细胞 ,B细胞及腹腔巨噬细胞 (Mφ) ;MTT比色法测T和B细胞增殖能力 ;中性红比色法测Mφ的吞噬功能 ;Griess法测Mφ释放NO的水平。 结果 Rh1 能促进脾细胞增殖、下调ConA诱导的T细胞增殖 ;Rh1 与Rg1 对LPS诱导的B细胞增殖均无明显作用 ;Rg1 和Rh1 能提高Mφ的吞噬能力和促进NO的释放。 结论 Rg1 及其代谢产物Rh1 可共同作用于T细胞和Mφ而产生免疫调节作用。

高效液相色谱法同时测定三七总皂苷中人参皂苷Rg_1、Re、Rb_1与三七皂苷R_1含量

目的建立高效液相色谱法同时测定三七总皂苷中人参皂苷Rg1、Re、Rb1与三七皂苷R1的方法。方法采用高效液相色谱法 ,固定相为氨基键合相 ,流动相为乙腈 水 ( 81∶1 9,V∶V) ,检测波长2 0 3nm。结果三七总皂苷中人参皂苷Rg1、Re、Rb1和三七皂苷R1与其他成分分离良好 ,保留时间分别约为 5 7min、8 9min、2 5 1min和 9 9min。人参皂苷Rg1在 80～ 2 80mg/L(r =0 9992 )、Re在 2 0～ 1 80mg/L(r=0 9993 )、Rb1在 95～ 2 85mg/L(r=0 9991 )、三七皂苷R1在1 8～ 1 4 6mg/L(r=0 9991 )内线性关系良好 ,人参皂苷Rg1、Re、Rb1和三七皂苷R1的回收率分别为 99 1 %、98 4 %、98 6%和 97 1 % ,RSD分别为 2 1 %、2 0 %、2 2 %、2 8%。

肠内菌群对人参皂苷Rg_1的代谢转化作用的研究

目的 :通过离体和整体实验研究大鼠及人的肠道内细菌对人参皂苷Rg1的代谢作用。方法 :用薄层层析及电喷雾质谱检测Rg1的代谢产物。结果 :Rg1在大鼠体内被代谢成一对同分异构体 (Rh1及F1)及苷元 [2 0(S)Protopanaxatriol,Ppt]。但在人的肠道内 ,则代谢物为Rh1及苷元。结论 :Rg1在人和大鼠肠内菌作用下均被代谢 ,但沿不同的代谢途径进行代谢。在大鼠体内 ,代谢模式为 :Rg1Rh1(F1)Ppt ;在人体内 ,代谢模式为Rg1Rh1Ppt。

西洋参冠瘿组织培养及其人参皂苷Re和人参皂苷Rg_1的产生

考察了培养基组成、培养时间、接种量、pH值、肌醇浓度等对冠瘿组织生长及其人参皂苷含量的影响 ;用HPLC检测了冠瘿组织中人参皂苷Re和人参皂苷Rg1 的含量。高压纸层析电泳证实 ,根癌农杆菌Ti质粒上的T DNA片段已整合进入植物细胞核基因组中。在考察的 6种培养基中 ,White培养基最适合人参皂苷Rg1 的累积(0 0 95 % ) ,MS培养基最适合人参皂苷Re的累积 (0 194 % )。以MS为基本培养基培养 36d、32d时人参皂苷Re和人参皂苷Rg1 累积含量最高 (分别为 0 14 7%和 0 0 6 1% ) ;接种量为 4g、2g (FW flask) ,有利于人参皂苷Re和人参皂苷Rg1的累积 ;培养基pH 5 8时人参皂苷Re含量最高 (0 184 % ) ,培养基pH 5 6时人参皂苷Rg1 累积量最高 (0 0 5 4 % ) ;肌醇浓度为 0 0 5g L时 ,能促进人参皂苷Re合成 (0 182 % ) ,浓度为 0 30g L时 ,有利于人参皂苷Rg1 累积 (0 0 5 5 % )。

HPLC法同时测定三七总皂苷中人参皂苷Rg_1与Rb_1的含量

目的 建立 HPL C同时测定三七总皂苷中人参皂苷 Rg1 与 Rb1 的方法。方法 采用 HPL C法 ,以茶碱为内标 ,氨基键合相为固定相 ,流动相为乙腈 -水 (80∶ 2 0 ) ,检测波长 2 0 3nm。结果 三七总皂苷中人参皂苷 Rg1 和 Rb1与其他成分分离良好 ,保留时间分别约为 5 .7和 2 1.5 min。人参皂苷 Rg1 在 80～ 2 80μg/ m L (r=0 .9995 ) ,Rb1 在80～ 2 4 0 μg/ m L(r=0 .9993)线性关系良好 ,Rg1 和 Rb1 加样回收率分别为 97.1%和 98.4 %,RSD分别为 2 .4 4 %和 2 .35 %(n=9)。结论 本法操作简便 ,准确 ,重现性好 ,可用于人参及三七的质量控制。

参麦注射液中人参皂苷Rg_1和Re药代动力学研究

目的 研究参麦注射液中人参皂苷Rg1和Re人体药代动力学。方法 采用已建立的LC/MS/MS法同时测定人血浆中人参皂苷Rg1和Re浓度,并计算其药代动力学参数。结果 人参皂苷Rg1和Re线性范围为 1 023 -1 023μg·L-1和 1 05-1 050μg·L-1,方法回收率在 99% -105%和 99% -104%,日内、日间RSD值均小于 15%。参麦注射液 60mL经静脉滴注后人参皂苷Rg1和Re的药时曲线均符合二房室开放模型,T1 /2α分别为 0 28h和 0 10h,T1 /2β分别为 2 1h和 1 2h。结论 该法简便、灵敏、特异,适用于血浆中人参皂苷Rg1和Re浓度的测定。参麦注射液中人参皂苷Rg1和Re在人体内血药浓度较低,分布和消除速度较快,药代动力学行为符合二房室模型。

人参皂苷Rg_1、甲壳胺和转化生长因子β_1对人牙周膜细胞增殖和分化功能的作用

目的 :探讨人参皂苷Rg1、甲壳胺 (Chi)和转化生长因子 β1(TGF β1)对原代培养的人牙周膜细胞增殖和分化功能的影响。 方法 :用原代培养的人牙周膜细胞 ,采用噻唑蓝 (MTT)比色法、酶动力学方法、放射免疫法和流式细胞仪检测人参皂苷Rg1(0 .0 1μmol/L)、不同浓度Chi(0 .0 5 g/L、0 .1g/L、0 .2 g/L)、不同浓度TGF β1(0 .5 μg/L、1μg/L、2 μg/L)和单纯DMEM培养液 (对照组 )对人牙周膜细胞增殖、碱性磷酸酶 (ALP)活性、骨钙素分泌和细胞凋亡的影响。 结果 :①与对照组比较除TGF β1(0 .5 μg/L、2 μg/L)组和Chi(0 .2 g/L)组第 7天外 ,TGF β1、Chi各浓度组及人参皂苷Rg1组在 3、5、7天均能明显增强牙周膜细胞的增殖能力 (P <0 .0 5 )。②TGF β1、Chi各浓度组及人参皂苷Rg1组细胞裂解液中ALP活性均明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。③ 7天时 ,除Chi(0 .2 g/L)组外 ,其他各组骨钙素分泌均明显强于对照组 (P <0 .0 5 ) ;2 1天时 ,人参皂苷Rg1(0 .0 1μmol/L)组明显高于其他各组 (P <0 .0 5 )。④TGF β1(1μg/L)组、Chi(0 .1g/L)组和人参皂苷Rg1(0 .0 1μmol/L)组细胞凋亡百分率与对照组比较均明显降低 (P<0 .0 1)。 结论 :与TGF β1一样 ,Chi及人参皂苷Rg1有促进牙周膜细胞增殖的作用 。

人参皂苷-Rg_1对中性粒细胞与血小板之间粘附的影响

目的 探讨人参皂苷 - Rg1 对大鼠血小板与中性粒细胞之间粘附及颈动脉血栓形成的影响。方法 采用Charlton等方法评价人参皂苷 - Rg1 对电刺激大鼠颈动脉血栓形成的作用 ;应用玫瑰花结试验观察对大鼠血小板与中性粒细胞之间粘附的影响。结果 2 5 m g/ kg人参皂苷 - Rg1 使血栓形成时间从对照组的 ( 18.7± 1.8) m in延长到( 3 6.4± 2 .1) min ( P<0 .0 5 ) ;显著降低凝血酶激活的血小板与中性粒细胞间的粘附率 ,其 IC50 为 81.2μm ol/ L。结论 人参皂苷 - Rg1 具有较强的抗血栓的作用 。

HPLC法同时测定腰息痛胶囊中3种活性成分含量

目的 建立HPLC法同时测定腰息痛胶囊中的三七皂苷R_(1)、人参皂苷Rg_(1)、人参皂苷Rb_(1)的含量。方法 采用Omini MP C_(18)(4.6 mm×200 mm,5μm)为色谱柱;流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;流速为0.7 ml/min;检测波长为203 nm;柱温为25℃。结果 三七皂苷R_(1)、人参皂苷Rg_(1)、人参皂苷Rb_(1)分别在40.402~1010.500,40.480~1012.000,41.480~1037.000μg范围内呈线性关系(r<0.99);平均加样回收率分别为97.8%,97.5%,98.7%(RSD<2.0%,n=6);精密度、重复性等试验均符合规定。结论 此法简便易行、结果科学,可为中西药复方制剂腰息痛胶囊中的3种皂苷类成分定量控制提供技术依据。

超高速液相测定西洋参中人参皂苷Rg_1、Re、Rb_1的含量研究

目的:建立测定西洋参中人参皂苷Rg_1、Re、Rb_1含量的超高速液相色谱法。方法:采用Waters Acquity UPLC BEHC_(18)(100 mm×2.1 mm,1.7μm)柱分离,以甲醇-水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.2ml·min^(-1),柱温为35℃,在203 nm处检测。结果:人参皂苷Rg_1、Re、Rb_1在测定范围内有良好的线性关系,其平均回收率为97.36%～99.23%,RSD为1.16%～1.39%(n=6)。结论:本法操作简便,准确度高,重复性好,可作为西洋参质量控制方法之一。

氮酮对人参皂苷Rg_1和米诺地尔透皮吸收的影响

目的 :探讨氮酮作为人参米诺地尔复方制剂促渗剂的适当浓度 .方法 :应用透皮扩散装置 ,采用离体小鼠背部皮肤作为屏障 ,以生理盐水为接受介质 ,研究不同浓度的氮酮对人参米诺地尔复方制剂透皮吸收的影响 ,利用反相高效液相色谱法测定人参米诺地尔复方制剂的累积透皮量 .结果 :人参米诺地尔复方制剂 2 4h累积透皮量分别为 :人参皂苷Rg1 0 ,1 0 ,30 ,5 0 ,70 ,90mL/L氮酮组为 (0 .2 6± 0 .0 2 ) ,(3.4 7±0 .1 6 ) ,(3.98± 0 .2 3) ,(4 .5 4± 0 .73) ,(2 .36±0 .1 1 ) ,(1 .6 5± 0 .0 8)mg/L ;米诺地尔 0 ,1 0 ,30 ,5 0 ,70 ,90mL/L氮酮组为 (8.87± 0 .1 8) ,(1 1 .2 1± 0 .2 0 ) ,(1 2 .73±0 .36 ) ,(1 1 .72± 0 .36 ) ,(7.2 2± 1 .2 9) ,(4 .6 5± 0 .2 6 )mg/L .结论 :在离体小鼠皮肤 ,氮酮作为促渗剂的最佳浓度为 30mL/L .

RP-HPLC梯度法测定血塞通滴丸中三七皂苷R_1、人参皂苷Rb_1及人参皂苷Rg_1的含量

目的 :用高效液相色谱梯度洗脱法同时检测血塞通滴丸中三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg13种皂苷含量的方法 ,为制定质量标准中含量测定方法及含量限度提供了依据。方法 :用大连SpherisorbC18分析柱 ,乙腈 水线性梯度洗脱 ,0～ 15min(2 0∶80 - 4 0∶6 0 ) ,流速 1.0mL·min-1,检测波长 2 0 3nm。结果 :R1,Rf1和Rb1线性范围分别为 1.0 2～ 9.18μg ,4 .8～ 4 3.4 μg和 4 .6～ 4 1.6 μg。该方法回收率R1为 10 1.0 % (RSD =3.18% ) ,Rb1为 10 0 .0 % (RSD =1.19% ) ,Rg1为 99.5 % (RSD =3.0 2 % )。结论 :HPLC梯度洗脱法能将多种皂苷很好地分离检测 ,提高了时效 ,减少了误差 ,结果表明该方法准确可靠 ,重现性好 。

复方益血胶囊中人参皂苷Rg_1定量分析方法研究

目的 :建立复方益血胶囊中人参皂苷Rg1的定量分析方法。方法 :高效液相色谱法 ,采用μBondpackC18柱 ,以乙腈 /水 (2 3 / 77)为流动相 ,流速 1.0ml/min ,检测波长为 2 0 3nm ,柱温 3 0 .0℃ ,灵敏度 :0 .0 2AUFS。结果 :人参皂苷Rg1含量在 0 .3 85～ 4.62 0 μg/ml呈良好的线性关系 ,平均回收率 98.14% ,RSD 1.62 %。 结论 :本法简便、分离及重复性好 ,可作为该产品的质量控制方法。

HPLC法测定三七不同饮片中人参皂苷Rg_1含量

目的 :比较加工炮制对三七不同饮片中人参皂苷Rg1含量的影响。方法 :采用高效液相色谱法 ,色谱柱为C18柱 ,流动相 :乙腈 水溶液 (2 5 :75 ) ;流速 :0 .7mL·min-1;检测波长 :2 0 3nm ,柱温为 2 5℃。结果 :各样品中 ,以三七粉中人参皂苷Rgl含量为高。加样回收率为 95 .5 3% ,RSD为 2 .11% ,相关系数r =0 .9999。结论

人参皂苷Rg_(3)对人晶状体上皮细胞氧化应激损伤的影响

目的探讨人参皂苷Rg_(3)对过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤的改善作用及对核转录因子E2相关因子2(nuclear factor E2 related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶-1(heme oxygenase 1,HO-1)信号通路的调节作用。方法用不同浓度人参皂苷Rg_(3)处理过氧化氢诱导的SRA01/04细胞,用噻唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞存活率。将第3代对数生长期SRA01/04细胞随机分为正常组、氧化损伤组(用200μmol∙mL^(−1)过氧化氢处理)、人参皂苷Rg_(3)低剂量组和人参皂苷Rg_(3)高剂量组(分别用40、80μg∙mL^(−1)人参皂苷Rg_(3)处理6 h,更换培养基后用200μmol∙mL^(−1)过氧化氢处理12 h),用MTT法检测细胞存活率,用流式细胞仪检测细胞凋亡率,用试剂盒检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidase,GSH-Px)的含量,用蛋白印迹法检测Nrf2、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelch like epichlorohydrin related protein 1,Keap1)和HO-1蛋白的相对表达量。结果与0μg∙mL^(−1)人参皂苷Rg_(3)组比较,10、20、40、80μg∙mL^(−1)人参皂苷Rg_(3)组的细胞存活率逐渐升高(P<0.05)。与正常组比较,氧化损伤组的细胞存活率、SOD和GSHPx含量以及Nrf2、Keap1和HO-1蛋白相对表达量降低,细胞凋亡率和MDA含量升高(P<0.05);与氧化损伤组比较,人参皂苷Rg_(3)低剂量和人参皂苷Rg_(3)高剂量组的细胞存活率、SOD和GSH-Px含量以及Nrf2、Keap1和HO-1蛋白的相对表达量升高,细胞凋亡率和MDA含量降低(P<0.05);人参皂苷Rg_(3)低剂量和人参皂苷Rg_(3)高剂量组各项指标水平变化规律相同,人参皂苷Rg_(3)高剂量组更显著(P<0.05)。结论人参皂苷Rg_(3)可抑制过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞凋亡,减轻氧化应激损伤,其可能是通过激活Nrf2/HO-1信号通路发挥调节作用的。

HPLC-ELSD测定三七胶囊中人参皂苷Rg_1和Rb_1

目的 :研究三七胶囊的质量标准。方法 :应用HPLC ELSD对三七胶囊中的活性成分人参皂苷Rg1和Rb1的含量进行测定。结果 :人参皂苷Rg1在 1.3 μg～ 6.5μg范围内呈现良好的线性关系 (r =0 .9994) ,平均回收率为 98.3 0 % ,RSD为 1.2 0 % (n =5)。人参皂苷Rb1在 1.0 μg～ 5.0 μg范围内呈现良好的线性关系 (r =0 .9996) ,平均回收率为 97.12 % ,RSD为 1.17% (n =5)。结论 :该方法简便 ,快速 ,重现性好 。

人参皂甙Rb_1、Rg_1、Re和Rh_1对HeLa细胞的影响

本研究应用细胞化学及ＭＴＴ法，测定人宫颈癌细胞（ＨｅＬａ）在人参皂甙Ｒｂ１、Ｒｇ１、Ｒｅ、Ｒｈ１作用３～５ｄ后，细胞增殖和细胞化学含量的变化。结果表明，四种人参单体皂甙与人参根总皂甙作用相似，可以抑制ＨｅＬａ细胞的增殖，降低ＨｅＬａ细胞内多糖（ＰＡＳ）、葡萄糖６磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤＨ）、葡萄糖６磷酸酶（Ｇ６Ｐａｓｅ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）和琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）的含量。本文提示，不同的人参单体皂甙均可以降低癌细胞的增殖和代谢活性，但Ｒｅ、Ｒｈ１的作用更显著。

人参皂苷Rg_1对β-淀粉样肽(25-35)侧脑室注射所致小鼠学习记忆障碍的改善作用及其机制

目的 观察人参皂苷Rg1对 β 淀粉样肽 [β AP ,(2 5 - 35 ) ]所致小鼠拟阿尔茨海默 (AD)学习记忆功能障碍的改善作用及其作用机制。方法 小鼠侧脑室注射凝聚态 β AP 4nmol,次日 ,ipRg15和 10mg·kg-1,10d后 ,测试各组被动回避、空间学习记忆能力 ,及皮层、海马组织胆碱乙酰转移酶 (ChAT)和乙酰胆碱酯酶 (AchE)活性变化。结果人参皂苷Rg1可明显改善 β AP所致小鼠被动回避、空间学习记忆能力及皮层海马组织ChAT活性的下降。β AP对小鼠AchE活性无显著性影响 ,但与对照、模型组相比 ,Rg1明显抑制AchE活性。结论 Rg1对 β AP(2 5 - 35 )所致的小鼠学习记忆障碍有显著改善作用 ,其对胆碱能系统的影响是Rg1重要作用机制之一。

人参皂甙Rg_1,Re对β-淀粉样蛋白诱导原代培养海马及皮质神经元损伤的保护作用

目的 :研究人参皂甙 Rg1 ,Re对β-淀粉样蛋白 (β- AP)诱导原代培养海马及皮质神经元损伤的影响。方法 :测定神经元细胞培养上清中的乳酸脱氢酶 ( L DH)释放度来检测细胞的受损程度。 结果 :经终浓度为 0 .4μmol/ L 的 β- AP诱导损伤 12h,神经元细胞培养上清中的 L DH释放度明显升高 ;人参皂甙 Rg1 ,Re在 10 ,2 0 μmol/ L 浓度时均能使 L DH的释放度显著减少。 结论 :两种人参皂甙在一定剂量范围内能对抗 β- AP诱导的神经元损伤 。