中枢疲劳恢复期大鼠海马GDNF、GFRα-1mRNA及其蛋白表达的动态变化特征

目的:探讨大鼠海马组织胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)、GDNF家族受体α-1信使RNA(GDNF?family receptorα-1mRNA,GFRα-1mRNA)及其蛋白表达在中枢疲劳后恢复期不同时相的动态变化特征。方法:雄性2月龄SD大鼠32只,随机分为对照组(C组,n=8)、实验组(E组,n=24);E组进行7周疲劳模型运动后,又随机分为运动后即刻组(E0组,n=8)、恢复期12 h组(E1组,n=8)、恢复期24 h组(E2组,n=8)。C组正常笼养,E组进行7周递增负荷跑台训练。经7周疲劳模型运动后即刻,C组和E0组腹腔注射10%水合氯醛糖浆(0.3m L/100g)麻醉后取海马组织,用于测定5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、多巴胺(dopamine,DA)、GDNF、GFRα-1mRNA及其蛋白表达;E1组和E2组分别在恢复期12 h、24 h做上述同样取材和测试。结果:1)大鼠经7周递增负荷跑台训练后即刻,海马组织5-HT升高(P<0.01),DA下降(P<0.01),DA/5-HT下降(P<0.05)。2)运动后即刻海马组织GDNF、GFRα-1mRNA相对表达率和GDNF、GFRα-1平均蛋白表达水平升高;恢复期12 h高于C组和E0组(P<0.01);恢复期24 h降低并低于E1组(P<0.01)。结论:1)经7周疲劳模型运动后大鼠已经出现中枢疲劳。2)运动性中枢疲劳后大鼠海马组织GDNF、GFRα-1mRNA及其蛋白表达水平上升,提示GDNF和GFRα-1可能参与了中枢疲劳恢复的神经生物学调控过程。

GDNF及其受体GFRα1在小儿肾母细胞瘤中的表达及意义

目的研究胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)及GDNF受体α1(GFRα1)在小儿肾母细胞瘤中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学法检测GDNF及其受体GFRα1在30例小儿肾母细胞瘤组织及16例瘤旁正常肾组织病理石蜡标本中的表达。结果 GDNF在肾母细胞瘤中的阳性表达率高于瘤旁正常肾组织(66.7%vs6.3%),GFRα1在肾母细胞瘤中的阳性表达率高于瘤旁正常肾组织(63.3%vs 6.3%);两者在上皮型和胚芽成分强烈表达,在间叶成分表达较弱。GDNF及其受体GFRα1在不同组织分型、临床分期及有无淋巴结转移的患者间表达差异无统计学意义。结论肾母细胞瘤中GDNF及其受体GFRα1的高表达可能与肿瘤的发生密切相关。

胶质细胞源性神经营养因子受体α1基因在小鼠生精恢复过程中的表达变化

目的 :探讨胶质细胞源性神经营养因子受体α1 (GFRα1 )基因在小鼠生精恢复过程中的表达变化及其与精原干细胞自增殖和分化的关系。方法 :间隔 2 4d 2次腹腔注射白消安建立小鼠生精恢复过程的动物模型 ,第二次给药后随机分为 1 ,2 ,3,4 ,6 ,8,1 0周 7组 ,于相应时点及给药前取材 ,进行光镜和电镜研究 ,半定量逆转录聚合酶链反应和原位杂交检测。结果 :在生精恢复过程的第 1～ 2周 ,GFRα1mRNA的表达较给药前增强 ,其差异分别有显著 (P <0 .0 5 )和非常显著 (P <0 .0 1 )意义 ,其中第 2周达高峰 ,为 (1 0 4 .72± 2 4 .4 0 ) % ;第 3～ 4周 ,GFRα1mRNA的表达较给药前减弱 ,其差异也分别有显著 (P <0 .0 5 )和非常显著 (P <0 .0 1 )意义 ,其中第 4周达低谷 ,为(2 0 .77± 4 .2 5 ) % ;之后逐渐上升 ,于第 1 0周恢复至正常水平。GFRα1mRNA主要由未分化精原细胞表达。结论 :GFRα1在小鼠生精恢复过程中以剂量相关性调控着胶质细胞源性神经营养因子信息传入 ,从而调控着精原干细胞的去向 :高剂量时诱导其增殖 。

先天性巨结肠与微小核糖核酸-145-5p异常表达的关系

目的探讨先天性巨结肠(HSCR)组织中Zeste基因增强子人类同源物2(EZH2)、微小核糖核酸(miR)-145-5p、胶质细胞源性神经营养因子受体alpha1(GFRα1)之间的调控关系。方法选取湖南省儿童医院2016年3月至2018年6月收治的24例HSCR患儿痉挛段结肠组织为HSCR组,同期18例因新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)手术治疗患儿的坏死结肠组织为NEC组作为对照。实时定量聚合酶链反应检测HSCR组和NEC组结肠组织内miR-145-5p及GFRα1的表达水平,荧光素酶活性实验检测GFRα1与miR-145-5p的关系。之前研究检测的EZH2蛋白水平与miR-145-5p表达水平做相关性分析。采用实时定量聚合酶链反应检测神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y转染EZH2过表达质粒后miR-145-5p的表达水平。两组比较采用独立样本t检验,使用Pearson进行相关性分析,多组数据使用One-way ANOVA进行单因素方差分析,并使用LSD检验进行两两比较。结果HSCR组miR-145-5p水平明显高于NEC组[5.62±2.04比1.11±0.48,t=9.169,P<0.01],GFRα1 mRNA水平明显降低(0.39±0.18比1.00±0.37,t=-7.001,P<0.01),且miR-145-5p表达水平与GFRα1表达水平呈明显负相关(r=-0.676,P<0.01)。荧光素酶活性实验证实GFRα1为miR-145-5p的靶基因。EZH2蛋白水平与miR-145-5p表达水平呈明显负相关(r=-0.56,P<0.01)。EZH2过表达组miR-145-5p的表达显著低于质粒对照组(0.33±0.07比1.02±0.13,t=7.264,P<0.01)。结论HSCR患儿病变结肠组织中EZH2-miR-145-5p-GFRα1调节轴失衡是HSCR发生的重要原因。

胶质细胞源性神经营养因子及其受体与疼痛

胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)是转化生长因子β(transforminggrowth fartor-β,TGF-β)超家族成员,具有多种重要的生物学活性,不仅特异性地促进多巴胺能神经元的存活,还对外周神经系统及非神经系统具有广泛的作用。文中就近年来对GDNF及其受体在神经系统中的作用,特别是痛觉调制中作用的国内外研究进展作一综述。