鸦胆子油乳对胶质瘤U251作用的研究

目的该实验拟研究鸦胆子油乳注射液对人脑胶质瘤U251细胞生长抑制及诱导细胞凋亡的作用。方法体外培养人脑胶质瘤细胞U251,利用MTT比色法检测鸦胆子油乳注射液对于U251的增殖抑制影响;用流式细胞术(flowcytometry,FCM)分析药物处理前后U251的细胞周期变化;实时荧光定量PCR检测不同处理组中凋亡基因Bcl-2的表达。结果 MTT显示鸦胆子油乳注射液对U251细胞增殖抑制作用呈剂量依赖性,当浓度为10 g.L-1时,对U251细胞增殖的抑制率达到(75.8±2.3)%(P<0.05);流式细胞仪分析显示,用10 g.L-1鸦胆子油乳注射液培养48 h,细胞周期中G1期所占比例增高,S期占细胞周期的比例降低;实时荧光定量PCR结果显示随着鸦胆子油乳注射液的浓度增加凋亡基因Bcl-2 mRNA的表达逐渐减少。与对照组比较P<0.01。结论中药鸦胆子油乳注射液可显著抑制U251胶质瘤细胞细胞增殖及促进其凋亡。

microRNAs224和21对人胶质瘤干细胞存活的影响及相关的分子机制

目的探讨microRNAs 224和21对人胶质瘤干细胞存活的影响及相关的分子机制。方法 q PCR检测恶性胶质瘤样品、人GBM干细胞、人工建立的GBM干细胞系和人体组织中microRNAs的失调表达情况。GBM神经球干细胞系、GBM干细胞系(0822、0308和A172)、人工建立的细胞系U373及永生化人星形胶质细胞分别转染miR-21,miR-224模拟物或抑制剂,然后通过膜联蛋白Ⅴ染色及Caspase 3/7活性检测细胞凋亡,活细胞计数检测细胞生长情况。利用Target Scan生物学软件预测miR-21和miR-224的靶基因,并利用荧光素酶报告检测microRNAs对Bim基因的靶向作用。Western blot检测细胞转染miR-21或miR-224模拟物或抑制剂后对Caspase 3,Caspase 9及Bim蛋白表达的影响。结果 q PCR检测结果表明,GSC、人肿瘤组织和GBM神经球干细胞中,miR-21和miR-224显著上调表达(P<0.05)。细胞凋亡和细胞生长检测结果表明,miR-224和miR-21能调控GSC细胞凋亡和生长。靶基因预测分析Caspase 3,Caspase 9和Bim 3'-UTR序列为miR-224和miR-21潜在的靶基因,荧光素酶实验进一步证实Caspase 3,Caspase9和Bim 3'-UTR序列为miR-224和miR-21的直接靶点。进一步的实验证明,miR-224和miR-21通过直接靶向Caspases和Bim调控细胞生长和凋亡。结论上述结果表明miR-224和miR-21是GSC的凋亡抗性的重要生理驱动因子,其为胶质瘤的治疗提供了新的靶标。

术中超声造影在脑胶质瘤中的应用及预后的研究进展

目的胶质瘤是常见的颅内肿瘤,而手术切除是最常用的治疗方法,手术能否完整切除,尽量减少残余并进行有效评估对胶质瘤的预后有着重要的影响。随着新型造影剂和超声造影技术的不断快速发展,超声造影以其独特的优势在脑胶质瘤手术中的应用前景非常广阔。

脂膜微囊承载紫杉醇靶向性治疗C6胶质瘤的体内外实验研究

目的:在体内外研究脂膜微囊(LCM)承载紫杉醇(Taxol)治疗大鼠颅内C6胶质瘤的机制。方法:体外实验应用紫杉醇-脂膜微囊(Taxol-LCM)或单用LCM处理C6细胞系,采用免疫荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察LCM在肿瘤细胞内的分布特点,用药前后肿瘤细胞形态的改变和细胞内超微结构的变化,动态观察LCM进入细胞的全过程;体内实验建立大鼠C6胶质瘤动物模型12只,成瘤大鼠分为4组:注射LCM-Taxol组、注射LCM组、注射Taxol组及载瘤动物组,每组取一只在最后一次尾静脉注射相应药物后处死,获取大鼠脑组织标本,进行油红O染色,观察LCM在肿瘤位点分布的特点;同时观察不同处理组大鼠的生存期。结果:体外实验表明,Taxol可结合于LCM并被胶质瘤细胞内吞,起到很强的的杀伤肿瘤细胞作用。其内吞过程为LCM先结合于细胞膜表面,后在细胞内重新分布,最终被细胞浆内的酸性成分所降解。体内油红O染色显示,注射LCM-Taxol组肿瘤区域有LCM聚集,胶质瘤明显坏死;而注射LCM组,肿瘤区域有LCM出现,但肿瘤区域无明显坏死;注射Taxol组及载瘤动物组肿瘤区域无明显坏死;生存期结果示,Taxol-LCM组生存期明显长于其他3组,而与其他3组生存期比较差异不明显。结论:LCM可承载Taxol在体内外起到杀伤胶质瘤细胞的作用。

脑恶性胶质瘤的放射治疗

改变剂量分割方式和采用新的放射治疗技术会改善脑恶性胶质瘤局部控制率，生活质量较常规放疗好，但生存期无明显提高。