HMGB-1和RAGE在重型颅脑外伤术后颅内感染患者脑脊液中的表达及意义

目的分析高迁移率族蛋白B-1(HMGB-1)与晚期糖基化终产物受体(RAGE)在重型颅脑外伤术后颅内感染患者脑脊液中的表达及临床意义。方法选取我院重症医学科2014年7月—2016年5月收治的重型颅脑外伤术后拟诊颅脑感染患者62例,根据是否发生术后颅内感染将患者分成颅内感染组46例与非颅内感染组16例。采用酶联免疫吸附法检测两组脑脊液中HMGB-1、RAGE的水平和降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)、乳酸(LA)、腺苷脱氨酶(LDH)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、IL-15水平。结果颅内感染组脑脊液HMGB-1为(224.67±75.48)ng/ml,RAGE为(160.32±42.17)ng/ml,均明显高于非颅内感染组,差异均有统计学意义(P<0.01)。两组患者脑脊液PCT、CRP、LA、LDH、IFN-γ、IL-1β、IL-4、IL-10、IL-15水平比较差异无统计学意义(P>0.05);颅内感染组患者IL-6、IL-8、IL-12、TNF-α水平高于非颅内感染组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论重型颅脑外伤术后颅内感染患者脑脊液HMGB-1和RAGE表达水平升高,脑脊液HMGB-1和RAGE检测对术后颅内感染具有一定的诊断价值。

MALDI-TOF质谱准内标法及其用于rhTPO复杂糖一致性研究

采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)准内标法准确测定重组人血小板生成素(rhTPO)仿制药和原研药中4类糖修饰的相对含量,并进行样本间和批间一致性比较。结合多种切糖酶逐步切除rhTPO的N-糖、唾液酸和O-糖;以牛血清白蛋白(BSA)为标准品,与样本非混合点靶;采用MALDI-TOF质谱准内标法检测,分别获得各样本完整含糖分子量及不同层次切糖后分子量;通过分子量差值计算4类糖修饰的相对含量;最后比较仿制药与原研药样本间和批间一致性。以BSA多电荷峰对rhTPO切糖前后的MALDI-TOF质谱测定值进行准内标法校正,BSA多电荷峰之间相对标准偏差(RSD)均≤0.075%,批间RSD为0.001%~0.004%,方法误差均<0.01%。rhTPO仿制药N-糖、O-糖唾液酸、O-糖和糖化糖的相对含量分别约为24.6%、2.9%、9.0%和5.1%,批间一致性良好,且总糖含量与文献值一致;rhTPO原研药N-糖、O-糖唾液酸、O-糖和糖化糖的相对含量分别约为25.6%、2.9%、7.9%和3.5%,总糖含量较文献值偏低。与rhTPO原研药相比,仿制药糖基化糖相对含量基本一致,糖化糖含量有差异。rhTPO糖化糖研究未见文献报道,其差异是不同厂家rhTPO之间差异的重要因素,主要由发酵工艺差异导致。