黑豆、半成品和成品淡豆豉中6种异黄酮含量变化比较

目的比较发酵前的黑豆及半成品和成品淡豆豉中大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素和染料木素6种异黄酮的含量变化。方法采用高效液相色谱法测定异黄酮的含量,色谱条件为DiamonsilC_(18)色谱柱(4.6×250 mm,5μm),柱温30℃,检测波长为260 nm,流动相为0.2%醋酸水(A)-甲醇(B),梯度洗脱,流速为1.0 ml/min。结果该方法测定6种异黄酮成分在测定范围内线性良好(r≥0.9993),且回收率符合要求,黑豆经发酵后其中的6种异黄酮含量明显提升,且成品淡豆豉比半成品淡豆豉中含量更多。结论本研究建立的高效液相色谱法能够准确测定淡豆豉中6种异黄酮的含量。发酵可提升黑豆中的异黄酮的含量,且在发酵过程中结合型异黄酮向游离型异黄酮苷元转化。

反相高效液相制备色谱法分离淡豆豉中的大豆苷、黄豆苷、染料木苷

目的:建立一种快速、高效地从淡豆豉的乙醇提取物中分离3种大豆异黄酮苷的方法。方法:采用索氏提取除去脂溶性成分,再经1300型大孔吸附树脂初步分离纯化,分别用水、10%、20%、30%、40%、50%、70%、95%乙醇梯度洗脱,其中对40%乙醇洗脱流分采用反相高效液相色谱法制备,色谱条件:YWG C18柱(10.0 mm×200 mm,10μm),进样量750μl,乙腈-水-冰醋酸(25:75:1,V/V/V)为流动相,流速3.0 m l/m in,检测波长260 nm。结果:快速分离得到大豆苷、黄豆苷和染料木苷,经外标法检测,所得化合物纯度均达到99%以上。结论:该方法操作简便,可重复进样,适用于高纯度大豆异黄酮苷的制备。

高效液相色谱法测定食品中大豆异黄酮含量

建立食品中大豆异黄酮含量测定的高效液相色谱法。样品以甲醇 :水 (80 :2 0 )于 6 5°C水浴中振荡提取 ,氢氧化钠皂化 ,冰醋酸酸化 ,离心过滤后用液相色谱分析。色谱柱为HypsilBDSC18(5 μ ,4 .6× 2 5 0mm )柱 ,梯度洗脱 ,流动相A为水 :甲醇 :冰乙酸 (88:10 :2 ) ,流动相B为 2 %冰乙酸的甲醇溶液 ,流速 0 .4mL/min ,紫外检测波长 2 6 0nm ,柱温 32°C。各组分 (大豆甙 ,黄豆甙 ,染料木甙及其相应甙元大豆黄素 ,黄豆黄素 ,染料木素 )的峰面积与其相应浓度呈良好的线性相关 ,r >0 .9999。以豆奶粉和奶粉为基质 ,六种大豆异黄酮加标回收试验的平均回收率分别为 85 .1% - 138.1%和 6 7.8% - 95 .9% ,RSD分别在 5 .5 % - 17.8%和 1.8% - 9.5 %之间。采用建立的方法测定了黄豆、豆芽、蚕豆、腐竹、豆腐、豆浆、豆奶粉、奶粉等样品中大豆异黄酮含量 ,测定结果令人满意。

反相高效液相色谱法测定大豆籽粒中异黄酮含量的方法研究

大豆异黄酮是一类具有特殊生理活性物质。研究并建立了应用反相高效液相色谱法测定大豆籽粒中黄豆苷、黄豆黄素苷和染料木苷3种异黄酮成分含量的检测方法。同时，运用统计学原理对建立的大豆异黄酮测定方法进行了系统、全面的分析和评价。结果表明：黄豆苷、黄豆黄素苷和染料木苷线性范围分别为1．25～20．0μg·mL^-1、0．625～10．0μg·mL^-1和1．25—20．0μg·mL^-1；回收率范围为97．1％-99．5％；重复性测定的相对相差均低于5％；不同实验室对黄豆苷、黄豆黄素苷和染料木苷测定的相对标准偏差分别为1．15％-3．42％、2．44％-4．84％和1．43％～3．06％。上述结果说明该方法的线性、准确度、精密度、同一实验室重复性和多家实验室的再现性评价结果优良，适合作为国家农业行业标准的制定和实施。

黄豆黄素与黄豆黄苷吸收光谱和荧光光谱的比较研究

研究了黄豆黄素和黄豆黄苷在不同pH条件下的吸收光谱和荧光光谱,从分子结构的角度解释了二者呈现不同光谱特征的原因.黄豆黄素分子基本无荧光.在弱碱性时,黄豆黄素分子发生7-OH质子的电离,导致吸收光谱中320 nm的吸收峰红移至348 nm.采用pH-光度法测得7-OH质子的电离常数pK_(a1)=7. 08±0. 04.黄豆黄素一价阴离子呈现较强荧光,最大激发和发射波长λ_(ex)/λ_(em)分别为334 nm/464 nm,荧光量子产率为0. 049.在碱性溶液中,黄豆黄素4'-OH质子电离,导致吸收光谱中254 nm的吸收峰红移至260 nm,电离常数pK_(a2)=9. 96±0. 01.黄豆黄苷分子基本无荧光.在碱性条件下,黄豆黄苷分子的4'-OH质子发生电离,导致吸收光谱中256 nm的吸收峰红移至280 nm,电离常数p Ka=9. 81±0. 03.黄豆黄苷阴离子基本无荧光,但在热碱性条件下发生γ-吡喃酮环裂解反应而产生较强荧光,λ_(ex)/λ_(em)为288 nm/388 nm,裂解产物的荧光量子产率为0. 056.虽然,黄豆黄苷与黄豆黄素是苷与苷元的关系,但黄豆黄苷不能在热碱性条件下通过糖苷水解转变为黄豆黄素,二者的荧光增强机理存在本质不同.

大豆异黄酮合成的进展

本文综述了染料木黄酮和大豆苷元合成方法的研究进展,包括中间体脱氧安息香的合成,并简要介绍了大豆黄素苷的合成方法.

HPLC法同时测定保健食品中黄豆黄苷以及黄豆黄素的含量

为了建立同时测定保健食品中黄豆黄苷、黄豆黄素两种成分的方法。我们将色谱柱设定为AgilentzorbaxSB-C18(4.6mm×150mm,5μm),流动相通过乙腈-0.1%甲酸对其梯度洗脱,并将检测波长设定成255nm,流速为1mL·min-1。通过实验我们测出黄豆黄苷、黄豆黄素的线性范围以及加样回收率,并且使用此方法进行实检测操作起来较为简单,测定结果也较为精确,可将此方法在保健食品中黄豆黄苷、黄豆黄素两种成分的含量测定以及产品质量控制中多加应用。

基于发酵过程的淡豆豉6种黄酮类成分质量控制研究

目的建立同时测定淡豆豉中大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素、染料木素含量的方法。方法采用高效液相色谱法。采用Phenomenex Luna C 18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.1%甲酸水溶液(梯度洗脱),流速0.8 mL·min^-1,检测波长254 nm,柱温30℃。结果大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素、染料木素分别在0.264~52.8(r=0.999 7)、0.278~55.6(r=0.999 9)、0.242~48.4(r=0.999 6)、0.256~51.2(r=0.999 9)、0.268~53.6(r=0.999 8)、0.256~51.2(r=0.999 7)μg·mL^-1范围内与峰面积呈良好的线性关系;并且大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素、染料木素平均加样回收率分别为98.88%、98.25%、99.34%、101.07%,95.23%和103.39%,RSD范围分别是2.34%、3.12%、2.38%、1.04%、1.86%和1.62%。结论建立的高效液相色谱方法操作简便、稳定、准确且可行,可用于淡豆豉的质量控制。

梯度洗脱高效液相色谱法同时测定大豆异黄酮中大豆苷和黄豆黄苷的含量

目的建立大豆异黄酮中大豆苷和黄豆黄苷的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Phenomenex Luna C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈、水混合体系为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长为260 nm。结果大豆苷在49.3～147.9 mg/L浓度范围内、黄豆黄苷在40.1～120.3 mg/L浓度范围内,与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.999 7和0.999 4。方法平均回收率分别为98.7%(RSD=0.38%)和98.9%(RSD=0.60%)。结论该方法简便、准确,重现性好,可作为大豆异黄酮质量控制方法之一。

4种市售黑豆及成品淡豆豉中异黄酮含量分析

目的比较4种市售黑豆及发酵后淡豆豉中6种异黄酮的含量。方法采用高效液相色谱法测定4种黑豆及发酵后淡豆豉中大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素、染料木素的含量。结果4种黑豆中6种黄酮类成分的含量差异较大,黄心小黑豆中3种黄酮苷类成分含量最高,黄心大黑豆次之,绿心黑豆黄酮苷类成分含量最低;发酵后的淡豆豉中6种黄酮类成分含量也有明显差异,其中以黄心小黑豆中黄酮苷元含量最高,黄心大黑豆次之,绿心黑豆苷元含量最低。结论黄心小黑豆为淡豆豉发酵的较优原料,该结果可为淡豆豉的生产和原料控制提供参考。

淡豆豉化学成分及其体外促成骨细胞增殖活性研究

目的研究淡豆豉(Semen Sojae Praeparatum)的化学成分及其促进大鼠颅骨细胞增殖的活性。方法采用反复硅胶柱色谱、MCI和Sephadex LH-20柱色谱等方法进行分离纯化,并通过化合物的理化性质和波谱数据进行结构鉴定。采用MTT法考察化合物对大鼠颅骨细胞增殖的作用。结果分离得到12个化合物,其中7个黄酮化合物:大豆苷(1),大豆苷元(2),染料木素(3),染料木苷(4),黄豆黄素(5),黄豆黄苷(6),芹菜素(7);3个甾类化合物:β-谷甾醇(8),豆甾醇(9),菜油甾醇(10);2个小分子芳香化合物:丁香醛(11),丁香酸(12)。结论化合物5~11均为首次从淡豆豉中分离得到。5个异黄酮类化合物具有一定的促成骨细胞增殖活性,且在1×10^(-9)~1×10^(-6)mol·L^(-1)内细胞增殖呈现明显的剂量依赖,3个黄酮苷元(大豆苷元、染料木素、黄豆黄素)的促成骨细胞增殖活性优于2个黄酮苷(大豆苷、染料木苷)。

相转移催化合成黄豆黄苷的研究

以4-甲氧基间苯二酚和对羟基苯乙腈通过Hoesch反应制备的7,4′-二羟基-6-甲氧基异黄酮(黄豆黄素)为苷元,以三(3,6-二氧杂庚基)胺(TDA-1)为相转移催化剂,碳酸氢钠/氯化钾体系为碱性介质,研究了黄豆黄素与1-溴-2,3,4,6-O-四乙酰基-α-D-吡喃葡萄糖进行偶联反应制备大豆异黄酮黄豆黄苷的合成工艺,糖苷化反应收率为77%,结构经IR和1HNMR以及元素分析加以确证。

葛花化学成分

目的:研究葛花中的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱、羟丙基聚葡聚糖凝胶及制备液相方法进行分离纯化,经理化和波谱鉴定化合物的结构。结果:从葛花中分离得到了5个异黄酮苷类化合物,6″-O-木糖基黄豆黄苷(6″-O-xylosylglycitin,1),5,6,7,4'-四羟基异黄酮-6,7-二葡萄糖苷(5,6,7,4'-tetrahydroxyisoflavone-6,7-di-O-β-D-glucopyranoside,2),黄豆黄苷(glycitin,3),6″-O-木糖鸢尾苷(6″-O-xylosyltectoridin,4),鸢尾苷(tectoridin,5)。结论:化合物1和3均为在国内首次从野葛花中分离报道,化合物1和2在国内未见从其他植物中分离报道。