化疗后残存乳腺癌组织中乳腺癌耐药蛋白、P-糖蛋白的表达及其与癌干细胞的相关性

目的通过对比化疗前乳腺癌组织和化疗后残存乳腺癌组织中乳腺癌耐药蛋白(ABCG2)、P-糖蛋白(P-gp)表达差异,探讨其与乳腺癌干细胞(BCSCs)的相关性。方法免疫组织化学检测化疗前乳腺癌组织和化疗后残存乳腺癌组织ABCG2、P-gp及BCSCs标志物CD44及CD24蛋白的表达;免疫荧光检测"BCSCs微球体"细胞中CD44及CD24蛋白表达;有限稀释法检测"BCSCs微球体"细胞单克隆形成能力;Western blot检测"BCSCs微球体"细胞ABCG2、P-gp、CD44及CD24蛋白的表达。结果与化疗前乳腺癌组织相比,化疗后残存乳腺癌组织ABCG2、P-gp表达与CD44蛋白表达呈正相关(χ2=41.34,r=0.83;χ2=22.81,r=0.61);而其与CD24蛋白表达呈负相关(χ2=-21.25,r=0.72;χ2=-17.26,r=0.65);差异均有统计学意义(P<0.05)。化疗后残存乳腺癌组织中"BCSCs微球体"直径明显增加,且化疗后BCSCs含量是化疗前BCSCs含量的2.5倍;Western blot显示化疗后残存乳腺癌组织"BCSCs微球体"细胞ABCG2、P-gp及CD44蛋白表达明显升高(P<0.05),而CD24蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论化疗赋予残存乳腺癌组织"癌干细胞样"特征,导致乳腺癌多药耐药产生。

紫红薯糖蛋白体外抗氧化活性研究

研究紫红薯糖蛋白的体外抗氧化活性。使用水提醇沉方法、Sevage法除游离蛋白,用DEAE-52纤维素层析及SephadexG-75纯化制备糖蛋白。采用超氧阴离子自由基(O-2.)、羟基自由基(·OH)、1,1-二苯基-2-苯肼自由基(DPPH.)清除率测定法及还原力测定法评价紫红薯糖蛋白体外抗氧化活性。糖蛋白在0～640μg/mL内,均具有明显的抗氧化活性,随着质量浓度的增加活性增强;其中在紫红薯糖蛋白的质量浓度为640μg/mL时,对超氧阴离子自由基(O-2.)清除作用达到69.80%;对羟基自由基(.OH)的清除作用达到73.29%。

MDR1基因C3435T多态性对替米沙坦稳态血药浓度及降压疗效的影响

目的:探讨多药耐药基因MDR1 C3435T(exon 26)位点基因多态性对替米沙坦在原发性高血压患者中的稳态血药浓度及降压疗效的影响。方法:采用聚合酶链反应(PCR)和限制性内切酶片段多态性(RFLP)的方法对连续30 d每天口服40 mg替米沙坦的61名高血压患者的MDR1C3435T位点进行基因分型。使用高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)测定高血压患者的稳态血药浓度,使用水银血压计测量治疗前、后高血压患者的血压值。比较不同基因型间高血压患者的稳态血药浓度及降压疗效的差异。结果:在61例中老年原发性高血压患者中,MDR1 C3435T CC型纯合子的频率为39.34%,TT型纯合子的频率为11.48%,CT型杂合子的频率为49.18%,MDR1C3435T位点等位基因发生率在健康人群和高血压患者间差异无统计学意义。3种基因型高血压患者的稳态血药浓度及降压有效率间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:MDR1 C3435T位点的基因多态性与高血压患者的稳态血药浓度及降压疗效间无相关性。

狂犬病病毒糖蛋白、核蛋白融合基因原核质粒的构建与表达

试验将编码狂犬病病毒糖蛋白、核蛋白融合基因克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建狂犬病病毒原核表达质粒。将该质粒转化到大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达出约2.09×104D的狂犬病病毒糖/核融合基因编码的蛋白质。Western-blotting检测结果表明,该融合蛋白质具有免疫原性。

血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂的进展与临床评价

目的:本文介绍血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂的进展与评价。方法:采用国内、外文献综述方法。结果及结论:作为抗血小板药中的一支奇葩,血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂进展十分迅速,对膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体选择性高,在治疗血栓、急性心肌梗死、急性冠脉综合征、非ST段抬高心肌梗死者方面展现了良好的治疗前景。

血小板膜糖蛋白在新疆汉族及哈萨克族脑梗死患者中表达的差异及临床探讨

目的探讨血小板膜糖蛋白a-颗粒膜蛋白(CD62p)在新疆汉族及哈萨克族脑梗死患者表达上的差异情况及临床意义。方法将汉族及哈萨克族脑梗死患者各80例分成两组,并设立两种民族健康对照组100例。用流式细胞仪检测CD62p的表达率。结果脑梗死组CD62p表达均显著高于健康对照组,汉族脑梗死及哈萨克族脑梗死之间亦有差异。结论脑梗死患者血栓的形成与血小板活化密切相关。

特异miRNA抑制核因子-κB基因转录对肝癌多药耐药的逆转作用

目的探讨特异性miRNA抑制核因子-κB（NF-κB）转录对肝癌多药耐药（MDR）的逆转效果。方法分析肝癌细胞及其耐药株（HepG2／ADM）和肝细胞（L02）中P-糖蛋白（P—gp）、NF-κB的表达；构建与筛选特异性NF-κB miRNA质粒，并转染肝癌细胞HepG2和HepG2／ADM，以Westernblot测定P-gp及NF-κB浓度，以荧光定量聚合酶链反应检测其基因表达；以细胞计数试剂盒法检测细胞增殖情况及药物对细胞增殖的影响；以流式细胞术、Annexin-V—PE／7-ADD双染法观察细胞周期与凋亡情况。两组均数比较采用t检验，多组间均数比较采用方差分析。结果肝癌细胞经阿霉素处理后P-gD表达及NF—KB磷酸化水平增高。在24、48h和72h时，HepG2／ADM细胞耐药指数（IC50=4．166，1．522，1．380，单位μmol／L），分别是HepG2细胞（IG50=0．489，0．221，0．224，单位μmol／L）的8．519，6．874和6．166倍。HepG2／ADM细胞mdrlmRNA和NF-κB mRNA的相对表达水平（Act值）为3．310±0．154和2．580±0．040，明显高于HepG2细胞的0．084±0．038和0．607±0．032垆值均〈0．01）。特异性miRNAl转染HepG2／ADM细胞后，mdrl mRNA（2-△△ct）为0．326±0．011，显著低于阴性组的0．804±0．057（t=14．262，P〈0．01），伴胞内总NF—κBp65、胞核NF—κB磷酸化p65和P—gP表达水平明显下降（P〈0．01），癌细胞增殖抑制、G1期阻滞，凋亡增加。结论MDR1／P-gp异常表达与MDR密切相关，以特异miRNA干预NF—κB活化，可明显抑制MDR1／P-gp基因转录，对肝癌MDR具有逆转作用。