蒙药复方沙棘颗粒剂中甘草酸单铵盐、总黄酮的含量测定

目的:建立蒙药复方沙棘颗粒剂中甘草酸单铵盐、总黄酮的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,以乙腈-0.05%磷酸溶液(38∶62)为流动相,体积流量为1.0 mL/min,进样量为10μL,在252 nm波长下测定甘草酸单铵盐含量;利用紫外可见分光光度法,以芦丁为对照品,在510 nm波长下检测蒙药复方沙棘颗粒剂总黄酮含量。结果:甘草酸单铵盐对照品在0.053~0.530μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,Y=11.003X+0.0031,r=1,平均回收率为105.9%,RSD=1.22%(n=6);芦丁对照品在2.0~80.0μg/mL范围内与吸光度值呈良好的线性关系,线性回归方程为Y=11.537X+0.0014,r=0.9999,平均回收率为99.20%,RSD值为0.54%(n=6)。结论:该方法操作简便,准确,具有良好的精密度、重复性和稳定性,适用于蒙药复方沙棘颗粒剂的质量控制。

桂枝汤标准汤剂及配方颗粒中芍药苷、肉桂酸和甘草酸铵的含量对比研究

目的采用高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-DAD)测定桂枝汤标准汤剂与桂枝汤配方颗粒中芍药苷、肉桂酸和甘草酸铵三种成分的含量并进行对比。方法采用JADE-PAK KPEC-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,柱温35℃,流速1.0 ml/min。结果芍药苷、肉桂酸和甘草酸铵分别在2.57~51.44μg/ml、2.00~40.19μg/ml、2.66~53.26μg/ml浓度范围内有良好的线性关系(r2值分别为0.9998、0.9997和0.9999),检测限(RSN=3)分别为0.086μg/ml、0.033μg/ml和0.177μg/ml;精密度RSD为0.65%、0.33%和0.41%;平均回收率为96.2%、98.6%和96.4%。结论桂枝汤标准汤剂中的芍药苷与肉桂酸含量高于配方颗粒,而甘草酸铵的含量低于配方颗粒。本研究能为中药煎煮工艺提供技术参考,为规范配方颗粒临床用药和统一配方颗粒质量提供理论依据。

高效液相色谱法测定复方甘草酸苷胶囊甘氨酸与蛋氨酸含量及溶出度

目的建立非衍生化的高效液相色谱(HPLC)法直接测定复方甘草酸苷胶囊中甘氨酸和蛋氨酸含量及溶出度。方法含量测定采用强酸性离子交换树脂为填充剂的SHIM-PACK AMINO-NA柱(6 mm×100 mm,5μm);流动相为0.3 mol·L^(-1)磷酸二氢钠-无水乙醇(95:5);检测波长205 nm;流速0.4 mL·min^(-1)。溶出度测定以水为溶出介质;篮法;转速100 r·min^(-1);45 min取样,取样后采用含量测定项下方法测定溶出量。结果含量测定项下甘氨酸平均回收率99.3%,RSD=0.7%;蛋氨酸平均回收率100.7%,RSD=0.2%;线性关系均良好。溶出度项下甘氨酸平均回收率99.7%,RSD=0.7%;蛋氨酸平均回收率100.3%,RSD=0.3%;溶出液在12 h内稳定;国内11批样品45 min平均溶出量均>90%。结论该方法简便、准确,绿色环保,可为下版《中华人民共和国药典》复方甘草酸苷胶囊标准修订中含量测定和溶出度方法提供科学依据。

乌拉尔甘草地下部分生长分布格局及其对甘草酸含量的影响

目的 :探索野生乌拉尔甘草地下部分生长分布特点及其与甘草酸含量之间的关系 ,为揭示甘草酸的积累规律以及科学利用和保护野生甘草资源提供理论依据。方法 :通过对单株野生甘草地下部分的解析调查以及不同器官、不同年龄、不同部位、不同粗度药材的甘草酸含量测定 ,系统地研究了野生甘草地下部分生长分布格局与甘草酸含量之间的关系。结果 :一株完整的甘草地下部分由种子根、不定根、水平地下茎和垂直地下茎以及吸收根组成 ;2年生以下水平地下茎的甘草酸含量较低 ;直径 0 .5cm以下的不定根甘草酸含量较低 ;水平地下茎和不定根与垂直地下茎之间甘草酸含量存在显著差异 (P <0 .0 5 ) ,而水平地下茎与不定根之间差异不显著。结论 :甘草以水平地下茎为纽带 ,将不定根、垂直地下茎和吸收根连接成 1个庞大的地下网络系统 ;其器官类型、生长年龄、根系粗度以及生长部位在一定程度上都影响着甘草酸含量的积累 ,不定根和垂直地下茎的分布格局影响着水平茎中甘草酸的分布。

密度对甘草苗生长及甘草酸含量的影响

目的：通过对甘草密度效应的研究，揭示由各种密度所形成的群体个体之间相互作用的规律。方法：对不同密度条件下的甘草个体和群体的物候特性、生长状况、生物量积累和分配、甘草酸含量等进行研究。结果：密度对甘草的物候特性及生长状况有一定的影响。在一定密度范围内，甘草株高速生期的起止时间随密度增大逐渐提前，速生期持续时间逐渐缩短。甘草个体生物量随着密度的增大而减少，而群体生物量则随着密度的增大而增加。甘草单株根、茎、叶生物量分配比例分别为65．02％，19．55％，15．43％，根、茎、叶生物量的RSD分别为0．57％，0．49％，0．76％。较低密度处理的甘草甘草酸质量分数在0．52％～0．59％，而最高密度处理的甘草甘草酸仅为0．29％。结论：在一定范围内，密度与甘草侧枝和地下茎萌发的时间、复叶上的小叶数量、株高和地径生长量、芦头粗度、侧根数量、单株根和枝叶量、单株生物产量及甘草酸含量成负相关，与甘草群体生物产量成正相关。

高效液相色谱法同时测定甘草中甘草酸和甘草苷的含量

目的测定甘草中甘草酸和甘草苷的含量。方法采用反相高效液相色谱法，DENALI C18色谱柱（VYDAC 238DE5415，120A，5μm，4．6mm×150mm），梯度洗脱，流动相A：H2O，流动相B：1．5％HAc—MeOH．流速1．0ml·min^-1，检测波长在32．2min从330nm换为252nm，从35min换为330nm，柱温40℃。结果甘草苷的浓度在10—50μg·ml^-1之间与峰面积线性关系良好，平均回收率为99．97％，方法精密度RSD=0．12％（n=5），甘草酸的浓度在50-90μg·ml^-1。之间与峰面积线性关系良好，平均回收率为100．25％，方法精密度RSD=0．13％（n=5）。结论该方法可用于甘草中甘草酸和甘草苷的同时含量测定。

栽培甘草群体中不同单株甘草酸的含量差异研究

目的通过测定相同生长环境下栽培甘草不同单株甘草酸含量差异,探讨其变异机制,找到高含量变异个体,为优质甘草的品种选育提供初步依据。方法随机选取同一地块相同生长年限的甘草100株,采用高效液相色谱法测定了该100株个体甘草主根的甘草酸含量。按《中国药典》对甘草酸的含量标准规定的2%为界,将数据分为高含量甘草酸组及低含量甘草酸组。结果100株甘草的主根中的甘草酸含量最高的个体达到4.941%,最低的为1.201%,RSD为27.77%。高低含量两个组甘草酸含量差异性显著(P<0.0001)。结论随机筛选的栽培甘草单株间甘草酸含量存在变异,推测其为遗传因素导致。高低含量组甘草酸含量具有显著性差异,说明相同环境下甘草含量变异很大,则可以在高含量组中选取优良单株,以甘草酸为指标选育甘草优良品种。

不同附加物对甘草悬浮培养细胞中甘草酸积累的影响

目的:研究醋酸钠、苯丙氨酸、亮氨酸对甘草细胞悬浮培养中甘草酸积累的影响。方法:在培养的第0天,向培养基中加入各种附加物,甘草酸的含量分析采用高效液相色谱法。结果:较低浓度的醋酸钠(0.1 mmol.L-1)可以较明显的促进甘草细胞中甘草酸的积累,其含量为对照组的2.40倍。当苯丙氨酸添加浓度由0.1 mmol.L-1增加到2 mmol.L-1时,细胞中甘草酸的含量逐渐提高。2 mmol.L-1的苯丙氨酸使甘草酸的含量达到14.10μg.g-1,为对照组的3.60倍。添加0.1 mmol.L-1亮氨酸使甘草酸的含量提高了2.24倍。随着亮氨酸添加浓度的增加,甘草细胞中甘草酸的含量逐渐降低,添加2 mmol.L-1亮氨酸对甘草酸积累有明显的抑制作用。结论:甘草细胞悬浮培养中,适量的添加醋酸钠、苯丙氨酸及亮氨酸等附加物是提高细胞中甘草酸含量的有效方式之一。

HPLC法同时测定茵胆平肝胶囊中6种成分的含量

目的:建立同时测定茵胆平肝胶囊中绿原酸、栀子苷、龙胆苦苷、阿魏酸、黄芩苷、甘草酸铵含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Wonda Sil TM-C18,流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为0.8 m L/min,检测波长分别为325 nm(绿原酸和阿魏酸)、250 nm(栀子苷和甘草酸铵)、275 nm(龙胆苦苷和黄芩苷),柱温为30℃。结果:绿原酸、栀子苷、龙胆苦苷、阿魏酸、黄芩苷、甘草酸铵检测进样量线性范围分别为0.087~3.480μg(r=0.999 8)、0.201~8.040μg(r=0.999 7)、0.200~8.000μg(r=0.999 5)、0.016~0.640μg(r=0.999 9)、0.105~4.200μg(r=0.999 9)、0.028~1.120μg(r=0.999 5);定量限分别为1.31、0.75、1.14、1.25、0.94、0.98 ng,检测限分别为0.87、0.67、0.96、0.93、0.60、0.88 ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;加样回收率分别为99.9%~101.9%(RSD=0.7%,n=6)、98.7%~100.9%(RSD=0.9%,n=6)、98.1%~101.5%(RSD=1.4%,n=6)、98.5%~101.3%(RSD=1.3%,n=6)、98.5%~101.7%(RSD=1.2%,n=6)、98.2%~101.4%(RSD=1.2%,n=6)。结论:该方法简便、结果准确,适用于茵胆平肝胶囊中绿原酸、栀子苷、龙胆苦苷、阿魏酸、黄芩苷、甘草酸铵含量的同时测定。

高效液相色谱法同时测定甘草中甘草酸、甘草苷、异甘草素的含量

目的建立同时测定甘草中甘草酸、甘草苷和异甘草素含量的方法。方法采用高效液相色谱法对甘草粉末的67%甲醇提取物进行分析。用C18反相色谱柱,1%磷酸水-乙腈梯度洗脱,对不同色谱峰分别采用248、276、360、370nm紫外波长检测。结果甘草酸的回归方程为Y=1×106X+16220,r2=1;甘草苷的回归方程为Y=2×106X+49444,r2=0.9995;异甘草素的回归方程为Y=1×107X+4.4667,r2=1。甘草酸、甘草苷和异甘草素的加样回收率分别为98.01%、102.63%、98.18%。结论本方法准确、稳定、可靠,可用于甘草中甘草酸、甘草苷和异甘草素3种成分的同时测定。

HPLC法同时测定清心莲子饮中黄芩苷及甘草酸铵两种成分的含量

建立高效液相色谱方法,以清心莲子饮中黄芩苷以及甘草酸铵两种成分为研究对象,对其进行含量测定;采用Elite C18色谱柱,以不同的溶剂作为流动相,结果两种成分的R2均大于0.9990,测定的含量分别为34.9566和4.6613mg·剂^(-1);实验仪器及测定方法结果良好,适用于清心莲子饮中黄芩苷以及甘草酸铵的含量测定,为该制剂的质量控制提供了依据。

HPLC法测定甘草酸二铵肠溶胶囊的含量

目的建立甘草酸二铵肠溶胶囊含量测定的HPLC法。方法色谱柱Lichrospher ODS,流动相为甲醇-水-四氢呋喃-5%醋酸铵(5:9:3:4),流速为1.0ml.min-1,柱温为25℃,检测波长为252nm。结果甘草酸二铵与辅料及溶剂峰分离良好,线性范围为1～100μg.ml-1(r=0.9999,n=5),加样回收率为99.3%,RSD为1.12%。结论HPLC法专属性强,方法简便,可用于甘草酸二铵肠溶胶囊的含量测定。

HPLC法测定甘黄燥湿洗液中盐酸小檗碱和甘草酸铵的含量

目的建立HPLC法测定甘黄燥湿洗液中盐酸小檗碱和甘草酸铵的含量测定方法。方法以Kromasil C18为色谱柱,采用两套流动相系统。盐酸小檗碱的流动相为乙腈-0.5%三乙胺水溶液（磷酸调pH3.5）（25∶75）,检测波长265 nm;甘草酸铵的流动相为甲醇-0.2 mol.L^-1乙酸铵溶液-冰醋酸（64∶36∶1）,检测波长250 nm。结果盐酸小檗碱与甘草酸铵的线性范围分别为9.71-116.52 mg.L^-1（r=0.9 993）和11.15-133.80 mg.L^-1（r=0.9 997）;平均回收率分别为99.79%（RSD=1.84%）和100.47%（RSD=1.97%）。结论本法操作简便,重复性好,结果准确可靠,可用于该制剂的质量控制。

甘草酸对小鼠安替比林及醋氨酚代谢的影响

目的研究甘草酸是否诱导小鼠肝细胞增殖及其对安替比林和醋氨酚代谢的影响。方法给小鼠甘草酸５０ｍｇ·ｋｇ－１或等量注射用水灌胃７ｄ后，比较两者间安替比林和醋氨酚有关药代动力学参数及肝ＤＮＡ含量和肝／体重比的差异。结果与对照组相比，甘草酸组小鼠安替比林Ｔ１２缩短４５３％，ＣＬ增加４３６％（Ｐ＜００５）；醋氨酚Ｔ１２延长５４６％，ＣＬ降低２９３％（Ｐ＜００５），尿液葡萄糖醛酸醋氨酚含量减少１１８％（Ｐ＜００５）；肝ＤＮＡ含量及肝／体重比无明显改变。结论甘草酸能诱导小鼠安替比林代谢，抑制醋氨酚代谢。

国产与进口复方甘草酸苷片的质量评价

目的考察国产与进口复方甘草酸苷片的质量。方法采用高效液相色谱法测定3个主成分的含量及有关物质,采用桨法测定溶出度,并计算累积溶出百分率。结果国产复方甘草酸苷片的各项质量指标均符合药典要求。结论国产与进口复方甘草酸苷片的各项质量指标无明显差异。

黄芩汤颗粒剂中黄芩苷、甘草酸及芍药苷的含量测定研究

目的:测定黄芩汤颗粒剂主要成分的含量。方法:采用高效液相色谱法测定处方黄芩中的黄芩苷,甘草中的甘草酸和白芍中的芍药苷含量,以Kromasil C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,应用0.05%磷酸和乙腈梯度洗脱并进行方法学考察。结果:高效液相色谱法测出在黄芩苷3.6~57.60μg·mL^(-1),r=0.9996;甘草酸在4.16~52μg·mL^(-1),r=0.9999;芍药苷在2.85~22.8μg·mL^(-1),r=0.9999范围内呈良好的线性关系,黄芩苷、甘草酸及芍药苷的平均回收率分别为96.31%,97.69%和97.27%;RSD分别为1.29%,1.03%和1.29%。结论:建立的含量测定方法简便、重现性好,可用于黄芩汤颗粒剂的质量控制。

反相高效液相色谱法测定复方甘草甜素片三组分的含量

目的: 建立测定复方甘草甜素片中甘草酸单铵盐及两种氨基酸含量的方法。方法:采用 RP HPLC法测定复方甘草甜素片三组分的含量。流动相为乙腈∶0.025 mol/L NaAC DMF(40∶60,v/v),固定相为 ZORBAXSB C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),双波长检测,检测波长 256 nm和 360 nm。结果: 甘草酸单铵盐在 40ng/ml^300μg/ml范围和两种氨基酸在 20 ng/ml~ 120μg/ml 范围线性相关良好( r = 0. 999 6, r = 0. 999 7,r =0.999 8),回归方程为Y =14 318X +724.64, Y = 265 416X, Y = 142 768X -5 023, 平均回收率分别为98.41%(RSD=1.80%)、101.36%(RSD=1.20%)和101.56%(RSD=2.05%)。结论: HPLC法测定复方甘草甜素片中三组分简便、准确、重现性好,可作为该制剂质量检验的定量方法。

甘草酸二胺对大鼠脑出血后脑水肿的疗效研究

目的观察甘草酸二胺对大鼠脑出血(Intracerebra lhemorrhage,ICH)后脑水肿的疗效。方法参照Rosenberg等报道的方法制备大鼠脑出血模型,术后24h对大鼠进行头颅磁共振(Magnetic resonance,MR)扫描,判断脑出血模型制作是否成功,将模型制作成功大鼠随机分为脑出血模型组、甘草酸二胺治疗组,另设假手术组,所有大鼠第5天MR扫描后处死,采用干湿重法测定大鼠脑组织含水量,用ELISA法测定脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)的表达水平。结果脑出血模型组大鼠脑含水量、脑组织中TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显高于假手术组,甘草酸二胺治疗组脑含水量、TNF-α、IL-1β、IL-6较模型组明显下降(P<0.01)。磁共振扫描显示模型组血肿血肿周围水肿范围明显增大,甘草酸二胺治疗组血肿周围未见明显水肿。结论甘草酸二胺能减轻大鼠脑出血后脑水肿,其机制可能与减轻炎症反应有关。

HPLC测定注射用复方甘草甜素中的甘草甜素

目的测定注射用复方甘草甜素的主药和有关物质。方法采用HPLC法,用DiamonsilTMC18色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-2%冰醋酸(35:65);流速1.0 ml.min-1;检测波长254 nm;柱温30℃;进样量10μl。结果甘草甜素与其相邻杂质峰能完全分离,40.4～808.0μg.ml-1线性关系良好(r=0.9999)。结论所用方法简便、准确、专属性好,可用于注射用复方甘草甜素的含量测定及有关物质的检查。

檀桂胃宁颗粒的质量标准

目的建立檀桂胃宁颗粒的质量控制方法。方法采用TLC法对方中檀香和肉桂进行定性鉴别;采用HPLC法对处方中甘草酸的含量进行定量检测,色谱条件:色谱柱为Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.2 mol.L-1醋酸铵溶液-冰醋酸(体积比为60∶40∶1),流速为1.0 mL.min-1;检测波长为250 nm。结果薄层色谱鉴别方法专属性强,重现性好,阴性对照无干扰;含量测定检查中甘草酸与其他组分分离良好,线性范围为0.156 8～1.568 0μg,r=0.999 8,平均回收率为99.69%,RSD为0.58%。结论薄层色谱方法简便快捷,结果可靠;HPLC含量测定方法可用于檀桂胃宁颗粒中甘草酸的测定。