马立克病病毒囊膜糖蛋白E基因的克隆及序列分析

用聚合酶链式反应 (PCR)技术 ,从中国广西分离的马立克氏病病毒 (MDV)N株和G2 株基因组DNA中 ,扩增出MDV糖蛋白E(gE)抗原基因片段的 1 5 0 0bp编码序列。将PCR扩增产物在KpnⅠ和HindⅢ位点克隆进 pUC1 8质粒载体中 ,以Dig标记的gEPCR产物作为探针做斑点杂交及酶切分析筛选到含MDVgE基因的目的重组质粒 pMNE、pMG2 E。通过酶切位点分析显示 ,两毒株的 gE基因内部酶切位点与MDV GA国际标准强毒株的酶切位点基本一致。对重组 pMNE、pMG2 E质粒进行部分序列测定 ,并用DNAStar软件分析 ,结果表明 :插入序列与发表的GA株gE基因序列具有高度同源性 ,gE基因为高度保守基因。

淋巴瘤细胞膜P糖蛋白、信号转导与转录激活因子3及bcl-2表达水平与化疗耐药的相关性

目的探讨淋巴瘤细胞膜P糖蛋白（P—gP）、细胞胞内信号转导与转录激活因子3（STAT3）、bcl-2、白细胞介素（IL）-6及IL-10表达水平与淋巴瘤患者化疗耐药的相关性。方法对疑诊淋巴瘤的18例患者，手术活检淋巴结，应用流式细胞术（FCM）测定细胞膜P—gP、胞内STAT3、抗凋亡蛋白bcl-2、细胞因子IL-6及IL-10表达水平，前瞻性研究与化疗疗效的关系。其中，化疗耐药组10例，化疗敏感组8例，以10例炎性淋巴结增生为正常对照。结果化疗耐药组P—gP和bcl-2表达水平均高于化疗敏感组（P=0．01和P=0．039），而STAT3、IL-6及IL-10表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）。淋巴瘤细胞膜P—gP表达水平高于炎性淋巴结增生（P=0．01），STAT3表达水平明显低于炎性淋巴结增生（P=0．04），淋巴瘤与炎性淋巴结增生bcl-2、IL-6及IL-10表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）。结论bcl-2、P—gP表达水平的高低与恶性淋巴瘤化疗疗效密切相关，STAT3参与了淋巴瘤细胞的信号转导，是否参与了多药耐药信号转导尚不能肯定，而胞内IL-6、IL-10的表达与化疗疗效未见相关。