32份板蓝根栽培种质在新疆产区的性状表现

【目的】研究不同板蓝根栽培种质在新疆产区的性状表现,筛选出适宜当地种植的板蓝根优良种质。【方法】收集全国板蓝根产区的32份板蓝根栽培种质,在新疆昌吉回族自治州玛纳斯县种植。以农艺性状和品质性状为指标,分析板蓝根种质在新疆的性状表现。【结果】多数板蓝根栽培种质角果呈浅褐色、倒披针形,长/宽比2.2~5.0,厚度1~3 mm,千粒重6~20 g;叶形多以椭圆型为主,叶缘形多以中、弱的强度为主,叶缘缺刻程度以浅、中为主,花青甙显色情况以4种程度(无、弱、中和强)分布较为均匀,叶长15~25 cm;根长35~45 cm;根粗1.5~2.5 cm。侧根数在4~6个;单根重大多集中在100~150 g,以XJ-1和XJ-2种质表现较佳。各种质间(R,S)-告依春含量存在显著差异,XJ-1和HN-1种质表现优异,侧根数与根长呈极显著负相关关系,与根粗之间呈极显著正相关关系。根重与根粗、侧根数之间呈极显著正相关关系。根粗与根长呈显著负相关关系。【结论】各板蓝根种质在新疆产区性状表现存在差异,HLJ-1在根长、叶长等农艺性状方面表现优异,XJ-1在根重和有效成分含量方面表现出相对优势。

板蓝根注射液特征图谱及其质量相关性研究

建立板蓝根注射液尿苷、鸟苷、(R,S)-告依春、腺苷含量检测方法及指纹图谱研究。采用高效液相色谱法,色谱柱:Eclipse Plus C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),检测波长250 nm,以甲醇(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱(0~3 min,95%B;3~20 min,95%B-90%B;20~40 min,90%B~30%B;40~42 min,30%B~95%B;42~50 min,95%B),流速为1.0 mL/min,柱温箱为30℃,进样量10μL。该实验操作简单、快捷,结果准确,适用板蓝根注射液尿苷、鸟苷、(R,S)-告依春、腺苷含量的测定,建立指纹图谱,对板蓝根注射液进行质量评估。

手性高效液相色谱法测定板蓝根中表告依春和告依春含量

采用Chiralpak IC手性柱(250mm×4.6mm,5μm),建立了正相高效液相色谱测定板蓝根中表告依春(R-告依春)和告依春(S-告依春)含量的方法。考察了流动相组成、流速和柱温对分离度的影响。经优化后的实验条件:以正己烷-异丙醇(体积比为90∶10)为流动相,流速为0.8mL/min;检测波长为245nm,柱温为20℃。在此优化条件下,表告依春和告依春分离度为3.4,检出限为2.0mg/L,在0.02～2.0g/L范围内有良好的线性关系,平均回收率为101%,相对标准偏差(RSD)小于3.0%(n=6)。本方法可将具有抗病毒活性的表告依春与其对映体告依春基线分离并测定,专属性强,能有效控制板蓝根的质量。

HPLC法同时测定复方板蓝根利咽颗粒中6种成分

目的建立同时测定复方板蓝根利咽颗粒（板蓝根、玄参、桔梗、甘草等）水提液中腺苷、（R,S）-告依春、甘草苷、哈巴俄苷、桔梗皂苷D和甘草酸铵6种成分的HPLC法。方法 Agilent Zorbox Eclipse XDB-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈（A）-0.05%磷酸水溶液（B）,梯度洗脱;体积流量为1.0 mL/min;检测波长260 nm（0～10 min）、245 nm（10～14 min）、278 nm（14～34.5 min）、210 nm（34.5～35.5 min）、250 nm（35.5～50 min）;柱温30℃。结果腺苷、（R,S）-告依春、甘草苷、哈巴俄苷、桔梗皂苷D和甘草酸铵的线性范围分别为0.003 7～0.276 0 mg/mL（r=0.999 6）、0.003 4～0.254 7 mg/mL（r=0.999 1）、0.004 9～0.364 4 mg/mL（r=0.999 2）、0.001 4～0.103 7 mg/mL（r=0.999 1）、0.005 5～0.411 9 mg/mL（r=0.999 1）和0.011 0～0.822 0 mg/mL（r=0.999 1）;平均加样回收率（n=6）分别为腺苷98.8%（RSD为1.4%）、（R,S）-告依春97.1%（RSD为1.1%）、甘草苷99.0%（RSD为1.8%）、哈巴俄苷97.3%（RSD为1.1%）、桔梗皂苷D100.0%（RSD为1.7%）、甘草酸铵98.8%（RSD为1.7%）。结论该方法准确可靠,可行性及重复性好,可用于复方板蓝根利咽颗粒的质量控制。

HPLC法同时测定小儿感冒颗粒中4种成分的含量

目的：建立同时测定小儿感冒颗粒中（R，S）-告依春、绿原酸、木犀草苷和异绿原酸A含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为HederaC。流动相为乙腈-0．1％甲酸（梯度洗脱），流速为1．0ml／min，检测波长为254、330、370nm，柱温为40℃，进样量为5ul。结果：（R，S）-告依春、绿原酸、木犀草苷和异绿原酸A的检测质量浓度线性范围分别为6．6～105μg/m1（r=0．9999）、9～140μg／ml（r=0．9999）、9～144μg／m1（，=0．9998）、9～138gg／ml（r=0.9996）；定量限分别为330、450、450、450ng，检测限分别为66、90、90、90ng；精密度、稳定性、重复性试验的RSD〈3％；加样回收率分别为95．01％～98．77％（RSD=1．48％，n=6）、95．14％～98．91％（RSD=1．52％，n=6）、95．11％～97．54％（RSD=0．93％，n=6）、95．58％～99．63％（RSD=1．73％，n=6）。结论：该方法操作简便、结果准确，适用于测定小儿感冒颗粒中（R，s）．告依春、绿原酸、木犀草苷和异绿原酸A的含量。

高效亲和色谱法测定2种中药成分与人血清白蛋白的结合率

采用高效亲和色谱技术(HPAC)对中药成分与人血清白蛋白(H SA)的相互作用进行了研究。首先采用点击化学的方法制备了表面键合有H SA蛋白的硅胶固定相并装填成亲和色谱柱,根据药物在该色谱柱上与空白硅胶柱上的保留时间差计算得到药物与蛋白的结合率。利用该方法测得模型化合物华法令与H SA的结合率与文献中采用超滤法测得的结果基本一致,表明该方法可用于测定药物与H SA的结合率。在此基础上用该方法测定了葛根素和告依春两种中药成分与H SA的相对结合率分别为10.26%和10.20%。同时用超滤的方法测定了葛根素与H SA的结合率为14.25%。结果表明,HPAC可以作为研究药物与蛋白相互作用的一种简便可行的方法,其测定结果与超滤方法一致。

高效液相色谱法同时测定板蓝根药材中5种成分的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定板蓝根药材中尿嘧啶、次黄嘌呤、鸟苷、胸腺嘧啶、（R,S）-告依春5种成分的含量。方法 Hanbon Hedera C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相乙腈（A）-水（B）,线性梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1;检测波长254 nm,柱温30℃。结果尿嘧啶、次黄嘌呤、鸟苷、胸腺嘧啶、（R,S）-告依春的线性范围分别为1.97-39.40 mg·L^-1（r=0.999 9）,1.25-50.00 mg·L^-1（r=0.999 9）,0.25-10.40 mg·L^-1（r=0.999 6）,2.84-56.70 mg·L^-1（r=0.999 9）,0.72-28.80 mg·L^-1（r=0.999 8）;平均回收率分别为99.36%（RSD=0.91%）,99.79%（RSD=1.12%）,100.90%（RSD=1.71%）,98.67%（RSD=1.50%）,99.33%（RSD=0.94%）。结论该方法简便,重复性好,灵敏度高,结果准确可靠,可作为板蓝根质量控制的有效方法。

HPLC法测定板蓝根颗粒中(R,S)-告依春含量的不确定度评定

目的建立HPLC法测定板蓝根颗粒中(R,S)-告依春含量的不确定度评定方法。方法采用HPLC法测定板蓝根颗粒中(R,S)-告依春含量,建立数学模型,分析各因素引起的不确定度,评定各分量不确定度,合成不确定度,并计算测定结果的扩展不确定度。结果扩展不确定度为0.21μg·g-1,最终报告结果为:HPLC法测定板蓝根颗粒中(R,S)-告依春的含量为(50.17±0.21)μg·g-1。结论本法可用于不确定度评定,建立的HPLC测定板蓝根颗粒中(R,S)-告依春的含量测定方法是合理可行的,可用于板蓝根颗粒的质量控制。

HPLC波长切换法测定蓝芩口服液中4种成分的含量

目的建立HPLC波长切换法同时测定蓝芩口服液中(R,S)-告依春、黄芩苷、栀子苷、盐酸小檗碱4种成分的含量。方法采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6mm×50mm,3.5μm)色谱柱,以乙腈(A)-磷酸盐缓冲液(B)(磷酸氢二钠2.3996g溶解于1000ml水中,用磷酸调pH值至3.0)为流动相,梯度洗脱(0~3min,2%A;3~13min,2%~20%A;13~20min,20%~45%A);波长:0~5min,245nm;5~12min,238nm;12~20min,265nm;流速:1.0ml·min^(-1);柱温:30℃;进样量:10μl。结果(R,S)-告依春、栀子苷、黄芩苷、盐酸小檗碱的线性范围分别是0.005 780~0.1156μg(r=0.9997)、0.2251~4.502μg(r=0.9999)、0.1070~2.139μg(r=0.9994)、0.027 29~0.5458μg(r=0.9994);平均加样回收率(n=6)分别为98.53%、97.79%、97.05%、98.78%,RSD分别为1.31%、1.13%、1.23%、0.67%。结论该方法操作简单,快速,重复性好,可用于蓝芩口服液的质量控制。

不同产区板蓝根药材质量考察

对内蒙古、陕西、甘肃、河北、河南、山东、黑龙江7个产地板蓝根进行质量比较,测定了水分、灰分、浸出物和(R,S)-告依春含量。结果表明,不同产区的板蓝根水分含量在8. 86%～11. 72%,陕西产地的含量最低;总灰分含量在3. 55%～7. 00%,山东产地的含量最低;酸不溶性灰分含量0. 14%～0. 62%,山东产地的含量最低;醇溶性浸出物含量在29. 99%～43. 71%,陕西产地的含量最高; HPLC含量测定结果显示(R,S)-告依春含量在0. 444～1. 042 mg/g,河南产地的含量最高。各产地的板蓝根药材的水分、灰分、浸出物和(R,S)-告依春含量均符合标准,实验结果对于农业生产和临床用药有一定的指导意义。

双波长HPLC法同时测定板柴口服液中(R,S)-告依春和绿原酸的含量

目的:建立同时测定板柴口服液中(R,S)-告依春和绿原酸含量的方法。方法:采用双波长高效液相色谱法。色谱柱为Wondasil C18,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(11∶89,V/V),流速为1.0 m L/min,检测波长为245 nm[(R,S)-告依春]、327 nm(绿原酸),柱温为30℃,进样量为10μL。结果:(R,S)-告依春和绿原酸检测质量浓度线性范围分别为4.05~40.51μg/m L(r=0.9999)、29.41~294.05μg/m L(r=0.999 9);定量限分别为3.32、2.45 ng,检测限分别为1.00、0.74 ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<1.0%;加样回收率分别为98.46%~101.06%(RSD=0.98%,n=9)、98.18%~100.78%(RSD=0.86%,n=9)。结论:该方法操作简便,结果准确、灵敏度高、重复性好,可用于板柴口服液中(R,S)-告依春和绿原酸含量的同时测定。

HPLC法同时测定麻杏抗感颗粒中5种成分

目的建立HPLC法同时测定麻杏抗感颗粒(板蓝根、鱼腥草、黄芩等)中5种成分的含有量。方法该药物70%乙醇提取液的分析采用Wondasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.1%磷酸为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温30℃;检测波长245、327、280、250 nm。结果 (R,S)-告依春、绿原酸、黄芩苷、黄芩素、甘草酸分别在0.24~6.05μg/m L(r=0.999 9)、0.70~17.40μg/m L(r=0.999 9)、28.59~714.70μg/m L(r=0.999 6)、1.67~41.65μg/m L(r=0.999 5)、2.59~64.80μg/m L(r=0.999 7)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为99.53%、99.41%、98.66%、98.31%、99.25%,RSD分别为1.02%、1.05%、1.26%、0.85%、1.43%。结论该方法简便准确,重复性好,可用于麻杏抗感颗粒的质量控制。

肝炎康复丸的质量标准研究

目的对肝炎康复丸的质量标准进行研究。方法采用薄层色谱法定性鉴别片剂中的茵陈、板蓝根、郁金;用高效液相色谱法对方中(R,S)-告依春进行含量测定,采用Inertsil ODS-SP C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,甲醇-0.02%磷酸溶液(7∶93)为流动相;检测波长245nm。结果在薄层色谱中可以检出茵陈、郁金、板蓝根,薄层色谱斑点清晰,阴性样品无干扰,专属性强,易于识别;(R,S)-告依春在0.4024～10.06μg(r=0.9999)范围内线性关系良好,平均加样回收率为98.40%,RSD为1.16%(n=6)。结论该方法简便,准确,专属性强,可以有效地控制肝炎康复丸的质量。

HPLC法同时测定舒肝宁注射液中表告依春和腺苷的含量

目的：建立HPLC同时测定舒肝宁中表告依春和腺苷含量的方法。方法：色谱柱为Kromasil C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,柱温30℃,流动相为甲醇和水,梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,检测波长245 nm,进样量为5μL,测定舒肝宁中表告依春和腺苷含量。结果：表告依春在1.197~29.92 mg/L（r=1）范围内线性关系良好,平均回收率为99.83%（RSD=1.98%）;腺苷在3.808~95.20 mg/L（r=1）范围内线性关系良好,平均回收率为99.19%（RSD=1.87%）。结论：本方法结果准确可靠,重复性好,适用于舒肝宁注射液的质量控制。

播种期对板蓝根药用成分含量及药材产量的影响

采用随机区组试验设计,设板蓝根播种期4月1日、4月15日,5月1日、5月15日、6月1日、6月15日、7月1日和7月15日8个处理,10月20日统一收获板蓝根。按照《中国药典2010版》的要求,对板蓝根进行干燥后测产;并对板蓝根药材进行粉碎,利用HPLC法同时测定板蓝根中总核苷类(鸟苷、尿苷、腺苷)和(R,S)-告依春的含量,分析不同播种期对板蓝根总核苷类含量、(R,S)-告依春含量以及药材产量的影响,以确定板蓝根适宜的播种期。结果表明:5月15日播种的板蓝根总核苷类含量(0.176%)最高,4月1日播种的板蓝根(R,S)-告依春含量(0.368%)和产量(0.336 kg/m2)最高。综合比较不同播期下板蓝根总核苷类含量、(R,S)-告依春含量和产量的动态变化,认为板蓝根的适宜播期为4月1日。本研究结果为板蓝根的适时播种及规范化栽培提供了科学依据。

HPLC波长切换法同时测定小儿清热止咳口服液中8种成分的含量

目的:建立HPLC法同时测定小儿清热止咳口服液中8种活性成分的含量。方法:采用HPLC法同时测定小儿清热止咳口服液中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、黄芩苷、黄芩素、甘草苷、甘草酸铵、(R,S)-告依春的含量,采用ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(含0.1%NH4Cl溶液)(B),梯度洗脱,检测波长为210 nm(盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷)和250 nm[甘草苷、甘草酸铵、黄芩苷、黄芩素、(R,S)-告依春],流速1.0 ml·min^-1,柱温30℃,进样量10μl。结果:(R,S)-告依春、盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、黄芩苷、黄芩素、甘草苷、甘草酸铵检测质量浓度的线性范围分别为1.006~20.120,16.730~334.600,19.980~399.500,18.250~365.000,76.000~1 520,26.220~524.500,8.745~174.900,6.532~130.600μg·ml^-1(r为0.999 2~0.999 8);平均加样回收率分别为98.2%,98.4,98.6%,98.2%,100.8%,98.5%,98.3%,98.1%(RSD <2.0%,n=6)。结论:该方法简单、有效、结果准确,可用于小儿清热止咳口服液中上述8种活性成分含量的同时测定。

兰花颗粒质量标准研究

目的建立兰花颗粒的质量标准。方法采用薄层色谱法(TLC)鉴别本制剂中的板蓝根、大青叶和忍冬藤;采用高效液相色谱法(HPLC)测定制剂中(R,S)-告依春的含量,色谱柱为Spursil C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-水(7∶93);检测波长为245nm。结果在选定的薄层色谱条件下,斑点显色清晰,分离效果良好。(R,S)-告依春质量浓度在0.30~2.12μg·mL^(-1)内呈良好的线性关系(r=0.999 7);平均回收率为87.5%,RSD为1.0%(n=9)。结论该方法专属性强、重复性好、简便可行,可用于兰花颗粒的质量控制。

复方板蓝根颗粒中(R,S)-告依春的含量测定

目的：建立复方板蓝根颗粒质量标准,提高高效液相色谱（HPLC）法测定复方板蓝根颗粒中（R,S）-告依春的含量。方法：色谱柱为岛津ODS C18柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相为甲醇-0.05%磷酸溶液（7∶93）,流速为1.0 m L/min,检测波长为245 nm,进样量为10μL。结果：（R,S）-告依春质量浓度在1.57~50.11μg/m L范围内具有良好的线性关系（r=0.999 8,n=6）,平均回收率为98.93%,RSD为1.25%（n=9）,并初步确定（R,S）-告依春的含量限度。结论：本法操作方便、结果准确,精密度好,专属性强,适用于复方板蓝根颗粒中告依春含量的质量控制。

HPLC波长切换法同时测定金嗓散结胶囊中的(R,S)-告依春、羟基红花黄色素A、丹酚酸B、木蝴蝶苷B和木蝴蝶苷A

目的:建立金嗓散结胶囊中(R,S)-告依春、羟基红花黄色素A、丹酚酸B、木蝴蝶苷B和木蝴蝶苷A的同时测定方法。方法:采用HPLC法,应用Agilent HC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以甲醇-乙腈(3∶1)与0.4%磷酸溶液为流动相,进行梯度洗脱;流速为1.0 m L·min^(-1);供试品采用50%甲醇超声提取。结果:(R,S)告依春、羟基红花黄色素A、丹酚酸B、木蝴蝶苷B和木蝴蝶苷A的线性范围分别为4.150~83.00、5.120~102.4、11.07~221.4、4.590~91.80、8.140~162.8μg·m L^(-1),相关系数分别为0.999 2、0.999 9、0.999 4、0.999 7、0.999 5;5种成分分离良好,阴性对测定无干扰,平均加样回收率及相应的RSD分别为99.06%(1.27%)、99.54%(1.15%)、98.19%(0.89%)、97.88%(1.71%)、97.22%(0.99%)。结论:所建立的方法可用于金嗓散结胶囊的质量控制。

HPLC波长切换法同时测定四黄止痢颗粒中5种成分的含量

为了建立和完善四黄止痢颗粒的质量标准,建立HPLC波长切换法同时测定四黄止痢颗粒中大黄素、大黄酸、黄芩苷、甘草酸铵、(R,S)-告依春5个成分的含量方法。采用WondaSil C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈(A)-0.05%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速1 mL/min,变换波长检测[0~10 min,245 nm测定(R,S)-告依春;10~25 min,278 nm测定黄芩苷;25-45 min,254 nm测定甘草酸铵、大黄酸、大黄素]。各待测组分分离度良好;(R,S)-告依春、黄芩苷、甘草酸铵、大黄酸、大黄素5个成分的进样量分别在0.0475~0.475μg(r=0.9993)、0.0678~0.678μg(r=0.9990)、0.2290~2.2900μg(r=0.9994)、0.0165~0.1650μg(r=0.9998)、0.0152~0.1520μg(r=0.9995)与峰面积呈良好的线性关系;加样回收率分别为98.2%(RSD=1.6%)、100.7%(RSD=1.0%)、99.5%(RSD=1.1%)、100.5%(RSD=0.8%)、99.3%(RSD=1.0%)。说明该方法可用于四黄止痢颗粒中多指标成分的质量控制。