粤蓝链霉菌中紫罗兰蓝色素成分的分离与鉴定

为开发微生物源的天然色素作为食品着色剂,对产紫罗兰蓝色素的粤蓝链霉菌在不同培养基中的产色水平进行了测试,对接种量、培养温度、摇床转速、发酵时间4个参数进行了正交优化.利用硅胶柱层析、葡聚糖凝胶柱层析、薄层层析、高效液相色谱等方法分离纯化色素成分,利用核磁共振、质谱等方法测定结构,发现该菌在高氏合成一号培养基中色素产量最高,该培养基是合适的工业化生产基础培养基.优化的培养条件为:接种量5%,培养温度30℃,180r/min振动培养7天.从色素粗提物中纯化出7种单体化合物,分别为榴菌素、榴菌素B、醌茜兰类色素Zg、Zgg、二氢Zg及MM44785和去鼠李糖基MM44785,其中二氢Zg和去鼠李糖基MM44785是2种新化合物.

榴菌素产生菌——链霉菌CPCC 200532中fogacin的分离鉴定

目的对Streptomyces sp.CPCC 200532产生的榴菌素类似物进行分离鉴定。方法 Streptomyces sp.CPCC 200532发酵培养物经乙酸乙酯萃取后,用硅胶板薄层色谱和高效液相色谱对萃取物进行分析;通过质谱和NMR等对榴菌素类似物进行结构鉴定。结果从Streptomyces sp.CPCC 200532中发现了一个榴菌素类似物,结构与fogacin一致。结论从榴菌素产生菌中首次分离得到化合物fogacin;与榴菌素A相比,fogacin显示微弱的抗枯草芽孢杆菌和白色念珠菌活性。

粤蓝链霉菌中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因gra-orf7的功能初探

粤蓝链霉菌是塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室近期发现的能够产生榴菌素的链霉菌新种.在榴菌素生物合成基因簇的左翼存在一个可能的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因gra-orf7.为了解该基因的生理功能,通过PCR-targeting方法构建了粤蓝链霉菌gra-orf7缺失突变株.表型分析结果显示,gra-orf7缺失突变株在菌落形态、产孢能力、孢子形态以及色素(榴菌素)最终产率等方面与野生株均无显著差异,但产色(榴菌素)时间延迟约1h.结果暗示gra-orf7基因编码的STPK在粤蓝链霉菌中可能参与了与榴菌素生物合成有关的上游调控信号的传导,但其具体生理功能和作用机制仍有待进一步研究.

蓝色化合物榴菌素及其类似物的研究现状

化合物榴菌素作为苯并异色烷醌类化合物(BIQ)中的一员,具有抑菌、抗肿瘤、抗生物膜形成等生物活性。该化合物在碱性条件下呈现亮蓝色,在功能性色素领域有潜在应用价值。因榴菌素及其类似物的生物活性及药用价值不断被挖掘,故研究者持续保持对榴菌素及其类似物的研究热度。本文从榴菌素的基本特性、榴菌素的来源、榴菌素的生物合成、榴菌素及其类似物的生物活性等方面进行综述,为榴菌素及其类似物的研究及应用提供支撑。

粤蓝链霉菌榴菌素生物合成基因orf20的功能

【目的】在大肠杆菌中,转录因子SoxR作为胞内氧化还原感应器,参与抗氧化胁迫的全局性调控。粤蓝链霉菌榴菌素生物合成基因簇内存在一个类soxR基因orf20,但其生理功能仍不清楚。【方法】将orf20基因在大肠杆菌中进行表达,分析携带重组质粒的大肠杆菌对百草枯抗性的变化。同时通过修改后的PCR-targeting方法构建粤蓝链霉菌orf20删除的突变株,分析突变株的表型变化和对百草枯抗性水平的变化。【结果】重组ORF20在羧基端含有组氨酸标签,并在大肠杆菌中获得可溶性表达,携带重组质粒pET28b-orf20的大肠杆菌对百草枯的抗性水平显著提高。粤蓝链霉菌orf20删除突变株仍具有产孢能力,生长特性没有改变,对百草枯的抗性水平也没有变化,但榴菌素的产量大幅提高,是野生株的3.3倍。【结论】在大肠杆菌中,orf20基因的编码产物能够被百草枯激活,替代SoxR参与抗氧化胁迫的调控。在粤蓝链霉菌中,orf20基因不参与抗氧化胁迫,而对榴菌素的产生有负调控效应。

一株紫罗兰蓝色素产生菌的分离、鉴定及其活性产物的特性分析

【目的】调查秦巴山地区微生物物种的多样性,建立用于活性产物筛选的微生物代谢产物库和菌种资源库,通过数据库平台进行资源共享。【方法】采用不同的分离方法,分离存在于不同生境的微生物类群,通过形态、生理生化及分子生物手段鉴定菌种,发酵并通过甲醇提取代谢产物。【结果】从本地区土壤样本中分离获得一株产水溶性紫罗兰蓝色素的放线菌Str-4331,在高氏培养基上其气生菌丝为白色,产生水溶性紫罗兰色素,镜检观察孢子丝螺旋形,孢子椭圆形至长圆形,通过形态、生理生化特征初步确定为链霉菌。利用ClustalX对其16S rRNA进行序列比对,用Neighbor-Joining(NJ)构建系统发育树,并用Bootstraping法对其评价。实验结果表明,该菌基因序列与砖红链霉菌(Streptomyces lateritius)LMG 19372基因序列有99%的最高相似性。抑菌试验表明,活性产物具有较强的抗革兰氏阳性细菌活性。色素在水溶液中颜色随着pH的变化而变化。质谱分析显示3个主要化合物,分子量分别为557.68、588.43、485.18 kD,其中分子量为557.68 kD化合物与榴菌素B分子量一致。【结论】根据菌株的16S rRNA序列分析结果,结合菌株的培养特性和生理生化特性,将菌株Str-4331归属为砖红链霉菌(S.lateritius)。该菌种首次在本地区分离到,具有进一步研究开发的价值。