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葡萄扇叶病毒的ELISA检测技术 被引量:11
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作者 谷洪仓 严敦余 +2 位作者 刘焕庭 朱汉城 郭兴启 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 1994年第1期82-86,共5页
本文是关于葡萄扇叶病毒ELISA检测技术的报告。采用L.pink的方法提纯病毒,制备了兔抗血清和小鼠腹水抗体,效价分别达1:51200和1:5×10 ̄6,特异性较强。经间接双抗体夹心ELISA检测GFV提纯病毒最... 本文是关于葡萄扇叶病毒ELISA检测技术的报告。采用L.pink的方法提纯病毒,制备了兔抗血清和小鼠腹水抗体,效价分别达1:51200和1:5×10 ̄6,特异性较强。经间接双抗体夹心ELISA检测GFV提纯病毒最低浓度为3ng/ml。对葡萄的根、幼叶和嫩茎抽提液检测结果一致,稀释倍数1:20。 展开更多
关键词 葡萄 葡萄扇叶病毒 检测 elisa
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葡萄微茎尖培养及葡萄扇叶病毒的ELISA和探针检测 被引量:8
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作者 张玉满 田砚亭 罗晓芳 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期54-58,共5页
在建立‘藤稔’等5个葡萄品种离体培养快速繁殖体系的基础上,通过热处理和微茎尖脱毒培养获得了再生植株;并经过PAS-ELISA和长臂光敏生物素标记GFLV-CP基因cDNA探针检测.结果表明白天38℃夜晚35℃处理脱除... 在建立‘藤稔’等5个葡萄品种离体培养快速繁殖体系的基础上,通过热处理和微茎尖脱毒培养获得了再生植株;并经过PAS-ELISA和长臂光敏生物素标记GFLV-CP基因cDNA探针检测.结果表明白天38℃夜晚35℃处理脱除GFLV效果最佳;多次继代培养也有脱除GFLV的作用.从而首次获得了‘藤稔’、‘红地球’、‘9307’3个葡萄品种的脱除GFLV的试管苗.PAS-ELISA与探针平行检测的结果还表明。 展开更多
关键词 葡萄 热处理 微茎尖培养 elisa 探针检测
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我国葡萄主栽区卷叶病相关病毒种类的检测分析 被引量:11
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作者 裴光前 董雅凤 +2 位作者 张尊平 范旭东 任芳 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期463-468,I0001,共7页
田间调查200个葡萄品种,结果82个品种表现葡萄卷叶病症状,其中欧亚种群表现葡萄卷叶病症状的品种最多,发病率最高,发病症状最重;欧美杂种发病率和严重度均比欧亚种群低;未发现美洲种群的品种表现葡萄卷叶病症状。从58株表现卷叶病的葡... 田间调查200个葡萄品种,结果82个品种表现葡萄卷叶病症状,其中欧亚种群表现葡萄卷叶病症状的品种最多,发病率最高,发病症状最重;欧美杂种发病率和严重度均比欧亚种群低;未发现美洲种群的品种表现葡萄卷叶病症状。从58株表现卷叶病的葡萄上采集休眠枝条进行卷叶病毒ELISA和RT-PCR检测,葡萄卷叶病毒-1,2,3,4,5和7(GLRaV-1,2,3,4,5和7)等6种葡萄卷叶病毒的检出率分别为20.7%,17.2%,62.1%,3.4%,5.2%和15.5%。回收PCR产物进行克隆和序列分析,并将测序结果提交至GeneBank。以葡萄卷叶病毒HSP70基因序列构建系统进化树分析其进化关系,GLRaV-1、3和7,GLRaV-2、4和5分别聚为2大类,其中GLRaV-1和3,GLRaV-4和5在各自的聚类中关系更近。 展开更多
关键词 葡萄卷叶病毒 田间调查 elisa RT-PCR 进化树
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葡萄A病毒四川分离物的外壳蛋白基因克隆与原核表达 被引量:12
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作者 王建辉 刘晓 +7 位作者 席德慧 袁澍 蒋彧 杨辉 杜俊波 张中伟 陈克玲 林宏辉 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期967-972,共6页
葡萄A病毒(Grapevine virus A,GVA)是葡萄病毒属(Vitivirus)的典型种,在世界葡萄产区广泛分布。采集10株‘藤稔’葡萄成熟枝条,使用6种葡萄病毒ELISA试剂盒检测发现,10个样本中有6个感染4种不同的葡萄病毒。以GVA的ELISA阳性植... 葡萄A病毒(Grapevine virus A,GVA)是葡萄病毒属(Vitivirus)的典型种,在世界葡萄产区广泛分布。采集10株‘藤稔’葡萄成熟枝条,使用6种葡萄病毒ELISA试剂盒检测发现,10个样本中有6个感染4种不同的葡萄病毒。以GVA的ELISA阳性植株为材料进行RT—PCR扩增,首次获得了GVA四川分离物SL10的完整外壳蛋白基因(CP),该基因全长597bp。将其与GenBank收录的15个GVA分离物的CP序列进行比对和构建系统进化树,把不同地理起源的GVA分离物分成两个变异组,其中Ⅰ组包括3个分离物(与Ⅱ组的其他分离物只有75.9%~80.1%的序列同一性);其余的13个分离物组成Ⅱ组(组内分离物具有84.4%~99.5%的序列同一性)。构建了GVACP的原核表达质粒PET-30-GVAcp并转化BL21菌株,经IPTG诱导,目的基因得到了大量表达。 展开更多
关键词 葡萄 葡萄A病毒 elisa RT—PCR 外壳蛋白基因 原核表达
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间接酶联免疫吸附试验检测葡萄扇叶病毒的研究和应用 被引量:6
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作者 郭德银 李知行 蔡文启 《果树科学》 CSCD 北大核心 1991年第4期215-218,共4页
采用蛋白A抗体夹心和异种动物抗体夹心两种间接酶联免疫吸附试验(ELISA)直接检测葡萄叶片和试管苗中的葡萄扇叶病毒,使试验程序简化,灵敏度与双抗体夹心ELISA直接法相当或较高。检测结果表明,经检测的103样品,其中田间品种扇叶病毒带毒... 采用蛋白A抗体夹心和异种动物抗体夹心两种间接酶联免疫吸附试验(ELISA)直接检测葡萄叶片和试管苗中的葡萄扇叶病毒,使试验程序简化,灵敏度与双抗体夹心ELISA直接法相当或较高。检测结果表明,经检测的103样品,其中田间品种扇叶病毒带毒率高达74.3%,热处理试管苗为5.6%,国外引进的脱毒品种(系)也有17.7%带毒。 展开更多
关键词 葡萄 病毒 检测 扇叶病毒 elisa
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甘肃葡萄扇叶病毒和卷叶病毒的检测 被引量:3
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作者 谭雪莲 马静芳 曹孜义 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2005年第1期65-68,共4页
采用 DAS-ELISA 检测方法对甘肃地区的葡萄主要品种进行扇叶病毒和卷叶病毒的调查和测定。结果表明,这两种病毒病在甘肃地区的主要葡萄产区均有发生。兰州地区和一些老的葡萄产区葡萄带病毒病较严重。通过对比植株下部枝条的幼叶、幼茎... 采用 DAS-ELISA 检测方法对甘肃地区的葡萄主要品种进行扇叶病毒和卷叶病毒的调查和测定。结果表明,这两种病毒病在甘肃地区的主要葡萄产区均有发生。兰州地区和一些老的葡萄产区葡萄带病毒病较严重。通过对比植株下部枝条的幼叶、幼茎、老叶和老茎病原的检测结果,说明植株下部幼嫩组织是卷叶病毒最适的检测部位。 展开更多
关键词 葡萄 扇叶病毒 卷叶病毒 DAS—elisa
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A蛋白酶联免疫吸附法检测葡萄卷叶病毒的研究用离体微嫁接法快速检测苹果潜隐病毒 被引量:8
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作者 何水涛 周厚成 +1 位作者 刘崇怀 卢其真 《落叶果树》 2001年第2期1-4,共4页
研究了用A蛋白酶联免疫吸附检测法 (PAS -ELISA)检测葡萄卷叶病毒的程序 ,提出了A蛋白、酶标A蛋白、抗体的适宜工作浓度及样品粗提液稀释倍数。通过对感病植株的幼叶、幼茎、老叶、老茎的检测研究 ,规范了PAS -ELISA检测技术。应用该技... 研究了用A蛋白酶联免疫吸附检测法 (PAS -ELISA)检测葡萄卷叶病毒的程序 ,提出了A蛋白、酶标A蛋白、抗体的适宜工作浓度及样品粗提液稀释倍数。通过对感病植株的幼叶、幼茎、老叶、老茎的检测研究 ,规范了PAS -ELISA检测技术。应用该技术 ,对国家果树种质资源圃郑州葡萄圃的 39份种质及郑州地区栽培的品种进行了检测 ,保存品种的带毒率 76 .9% ,抗逆性较强的东亚种群带毒率 55.6 % ,郑州地区栽培品种葡萄带毒率为 4 5.0 %。 展开更多
关键词 葡萄病毒 PAS-elisa 葡萄卷叶病毒 检测方法
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High-Sensitivity Detection of Fruit Tree Viruses UsingBacterial Magnetic Particles 被引量:9
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作者 Ji-Feng Chen Ying Li +3 位作者 Zhen-Fang Wang Ji-Lun Li Wei Jiang Shao-Hua Li 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2009年第4期409-413,共5页
Prunus necrotic ring spot virus (PNRSV) and grapevine fanleaf virus (GFLV) were detected by fluoroimmunoassay using bacterial magnetic particles (BMPs), and a double antibody sandwich enzyme linked immunosorbent... Prunus necrotic ring spot virus (PNRSV) and grapevine fanleaf virus (GFLV) were detected by fluoroimmunoassay using bacterial magnetic particles (BMPs), and a double antibody sandwich enzyme linked immunosorbent assay (DAS-ELISA). For the fluoroimmunoassay, fluorescein isothiocyanate labeled anti-PNRSV antibody or anti-GFLV antibody was conjugated onto BMPs of Magnetospirillum gryphiswaldense MSR-1. With this method, a very low minimum antigen concentration (1×10^6 dilution of the original sample concentration) could be detected. Using DAS-ELISA, the minimum antigen detection concentration was the original sample concentration. Thus, comparing these two methods, a BMP-based method could increase the sensitivity up to six orders of magnitude (10^6) higher than an ELISA-based method of detection PNRSV and GFLV. 展开更多
关键词 bacterial magnetic particle detection sensitivity elisa FLUOROIMMUNOASSAY grapevine fanleaf virus prunus necrotic ring spot virus.
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