3.0TMR动脉自旋标记与动态磁敏感对比增强灌注技术在脑胶质瘤术前分级中的对照研究

目的:对照研究动脉自旋标记(arterial spin labeling,ASL)与动态磁敏感对比增强(dynamic susceptibility con-trast-enhanced,DSC)灌注成像技术在脑胶质瘤中的灌注特点,探讨ASL在脑胶质瘤术前分级中的临床应用价值。方法:使用3.0T MR成像系统对23例脑胶质瘤患者(术后病理证实高级别胶质瘤17例,低级别胶质瘤6例)术前行常规扫描外,加扫ASL及DSC灌注检查,测量肿瘤实质部分最大肿瘤血流量(maximal tumor blood flow,TBFmax)以及对侧白质、对侧灰质、对侧半球的血流量(cerebral blood flow,CBF)。结果:23例脑胶质瘤患者,两种灌注方法均获得了一致的灌注结果,TBFmax/对侧白质CBF、TBFmax/对侧灰质CBF及TBFmax/对侧半球CBF的各比值在ASL和DSC两种技术之间的差异无明显统计学意义(P>0.05),但在高、低级别胶质瘤之间的差异均有统计学意义(P<0.05)。在ASL法中,TBFmax/对侧白质CBF、TBFmax/对侧灰质CBF及TBFmax/对侧半球CBF分别取阈值为3.06、0.46和1.31时,其敏感性分别为100%、88.2%和100%,特异性分别为83.3%、83.3%和100%。结论:ASL在评估脑胶质瘤血流灌注方面与DSC之间有相似的敏感性,具有可重复性高、完全无创性等优点,同时有助于术前对脑胶质瘤进行分级评判。

小RNA干扰骨桥蛋白抑制人U251细胞的体外生长与侵袭

目的：研究慢病毒载体介导的骨桥蛋白（OPN） RNA干扰对人U251神经胶质瘤细胞体外生长和侵袭的影响,并探讨其对神经胶质瘤生长、侵袭的可能机制.方法：应用本实验室已构建并鉴定的OPN特异性短发卡RNA慢病毒表达载体（LV-OPN shRNA）感染U251神经胶质瘤细胞.RT-PCR检测干扰前、后U251细胞OPN mRNA的表达;免疫印迹法检测干扰前、后U251细胞OPN、MMP-2、MMP-9、uPA蛋白表达;MTT法检测细胞增殖能力的变化;Transwell体外侵袭实验检测细胞侵袭能力的变化;细胞划痕实验观察细胞迁移能力的变化.结果：与未感染组、空载体感染组相比,LV-OPN shRNA感染组OPN mRNA、OPN蛋白及MMP-2、MMP-9、uPA蛋白表达均明显下降;LV-OPN shRNA感染组细胞增殖、侵袭能力及迁移能力也明显下降.结论：慢病毒载体介导的骨桥蛋白RNA干扰在体外能抑制U251细胞OPN mRNA和蛋白表达, 进而抑制U251细胞在体外的生长及侵袭,因此可以推测OPN是促进胶质瘤增殖和侵袭的基因之一,为胶质瘤的治疗提供新的靶点.

GSK-3β抑制剂对U251胶质瘤细胞的增殖抑制

目的探讨GSK-3β抑制剂(LiCl)对人脑胶质瘤U251细胞株增殖作用,为下一步治疗脑胶质瘤提供临床治疗靶点。方法应用MTT法,HE染色法以及免疫组化方法来观察LiCL对人胶质细胞瘤株U-251增值的抑制作用、量效关系。结果LiCL对人胶质瘤细胞有明显的抑制作用,其药物作用时间为24、48h的IC50分别为138.98mg/ml、53.15mg/ml,且呈良好的量效关系,抑制作用与浓度呈正相关。结论LiCL是有效的、能抑制胶质瘤细胞生长的药物。

锌指蛋白Zfx在人脑胶质瘤中的表达与意义

背景与目的:X染色体耦联锌指蛋白(Zfx)是锌指蛋白超家族中的一员,是胚胎干细胞和成体干细胞自我更新的共同分子基础。本研究探讨Zfx在人脑胶质瘤中的表达及其与脑胶质瘤的发生和恶性程度的关系有待探讨。方法:收集52例经病理证实的脑胶质瘤肿瘤标本和8例正常脑组织标本,根据病理结果对脑胶质瘤标本进行分组,通过实时定量PCR、免疫组织化学和Westernblot等方法对标本中Zfx的mRNA和蛋白表达进行检测,应用统计学方法对正常脑组织和不同恶性程度脑胶质瘤中Zfx的表达进行分析。结果:免疫组化染色结果显示,Zfx主要表达于细胞核。脑胶质瘤中Zfx的mRNA和蛋白表达均高于其在正常脑组织中的表达,在不同病理分级的脑胶质瘤中Zfx的表达水平有差异,Zfx的表达水平随脑胶质瘤的恶性程度增高而增高。结论:Zfx的mRNA和蛋白在脑胶质瘤中高表达,与脑胶质瘤的恶性程度呈正相关,它有可能是脑胶质瘤抗凋亡、恶性增殖的一个关键性的调控因子。

蛋白酶体抑制剂MG-132对体外人U87胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨蛋白酶体抑制剂MG-132对体外人U87胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法分别以不同浓度（0、2.5、5、10和20μmol/L）的MG-132培养U87胶质瘤细胞,通过四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测不同培养时间（12、24、48、72 h）对U87胶质瘤细胞增殖的影响,流式细胞仪分析MG-132对U87胶质瘤细胞凋亡的影响,HE染色观察细胞形态学变化。结果通过与正常对照组比较,2.5-20μmol/L浓度的MG-132在12、24、48及72 h均可抑制U87细胞增殖并诱导其凋亡,并在一定范围内呈时间和剂量依赖性;各亚组与对照组差异具有统计学意义（P〈0.05）;形态学检查呈现凋亡细胞的特征。结论MG-132可抑制U87胶质瘤细胞增殖并诱导其凋亡,在一定范围内呈时间和剂量依赖性。

WWOX基因在脑胶质瘤中的表达

目的探讨抑癌基因WWOX在胶质瘤发生发展中的作用以及与胶质瘤病理分级的关系。方法采用半定量RT-PCR方法检测31例胶质瘤手术切除标本和3例正常脑组织WWOX mRNA的表达情况,用琼脂糖凝胶电泳PCR产物,凝胶图像分析系统检测基因的相对量。最后实验数据采用SAS软件行χ2检验,分析WWOX mRNA的表达与胶质瘤病理分级的关系。结果31例胶质瘤组织中共有17例(54.8%)发生WWOX基因表达缺失,3例正常脑组织均无基因表达缺失。胶质瘤组织和正常脑组织中WWOX mRNA失表达水平存在明显差别(P<0.05)。各病理分级组间WWOX mRNA失表达水平无明显差别(P>0.05)。结论WWOX mRNA在胶质瘤中表达缺失率较高,且胶质瘤组织和正常脑组织中WWOX mRNA失表达水平存在明显差别(P<0.05)。但恶性程度高的胶质瘤组织与恶性程度低的胶质瘤组织WWOX mRNA失表达水平无明显差异,这表明WWOX基因缺失或低表达在胶质瘤发生过程中起重要作用,但可能对胶质瘤的进一步发展作用不明显。

血清MCP-1、IL-6、TNF-α联合检测在脑胶质瘤治疗中的临床价值

目的：探讨血清单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）联合检测在脑胶质瘤治疗中的临床价值。方法：93例脑胶质瘤患者术后肿瘤病理分级为：Ⅰ级21例、Ⅱ级26例、Ⅲ级22例、Ⅳ级24例,将Ⅰ～Ⅱ级设为低级别组,Ⅲ~Ⅳ级设为高级别组,同时选择同期40例健康人设为健康组,观察胶质瘤不同病理分级血清MCP-1、IL-6、TNF-α水平及低级别、高级别胶质瘤手术前后血清MCP-1、IL-6、TNF-α水平。结果 ：（1）胶质瘤病理分级Ⅰ～Ⅳ及健康组血清MCP-1、IL-6、TNF-α水平两两比较显示差异均有统计学意义（P〈0.05）。各指标表达水平从高到低分别为：MCP-1：健康组〉Ⅰ级〉Ⅱ级〉Ⅲ级〉Ⅳ级,IL-6：Ⅳ级〉Ⅲ级〉Ⅱ级〉Ⅰ级〉健康组,TNF-α：Ⅰ级〉Ⅱ级〉Ⅲ级〉Ⅳ级〉健康组。person分析结果显示,胶质瘤病理分级与血清MCP-1、IL-6、TNF-α水平水平均存在明显相关（P〈0.05）,相关系数分别为-0.881、0.783、-0.814。（2）受试者工作曲线（ROC）区分脑胶质瘤低级别与高级别的效力,MCP-1、IL-6、TNF-α的曲线下面积（AUC）分别为0.853、0.783、0.802,敏感度分别为92.37%、83.56%、87.32%,特异度分别为88.37%、88.42%、84.26%,准确率分别为80.74%、71.98%、75.78%。3种指标联合评估时,AUC为0.956,敏感度、特异度、准确率分别为97.45%、98.32%、95.77%。（3）术后14d,低级别组和高级别组MCP-1较本组术前明显上升而IL-6、TNF-α均明显下降（P〈0.05）,其中低级别组各指标与健康组已无明显差异（P〉0.05）,高级别组MCP-1仍低于健康组而IL-6、TNF-α仍高于健康组（P〈0.05）。结论：血清MCP-1、IL-6、TNF-α表达水平与脑胶质瘤病理分级存在明显相关,联合检测可明显提高低级别/高级别脑胶质瘤的早期诊断能力,同时或可用于评价手术治疗效果。

大鼠胶质瘤动物模型建立及肿瘤PCNA表达的观察

目的建立稳定的大鼠颅内胶质瘤动物模型及观察增殖细胞核抗原(PCNA)在肿瘤中的表达。方法在体外培养C6细胞,借用立体定向仪将C6细胞接种于大鼠右侧尾状核区,观察大鼠生存状态,分别在接种后9、15及21天处死,解剖各组荷瘤大鼠,进行组织病理学检查并检测不同时期胶质瘤PCNA的表达。结果此模型胶质瘤生长特性及组织学特征与人类极为相似,不同时期胶质瘤中PCNA均呈高表达,接种后9天组尤其明显。结论该方法建立的胶质瘤模型成瘤率高、重复性好,PCNA在各期均高表达说明胶质瘤增殖活跃。

磁共振弥散张量成像在脑胶质瘤手术前后的临床应用价值

目的探讨3．0TMRI弥散张量成像（DTI）技术显示胶质瘤与相邻脑白质纤维束解剖关系在手术前后中的临床应用价值。方法对24例脑胶质瘤患者行常规MRI及DTI检查，原始数据采集后传人工作站，应用Functool软件进行图像分析处理，分别获得各自的部分各向异性图（FA图）、彩色编码张量图及脑白质纤维束图；并测定8例高级别胶质瘤肿瘤病灶区、灶周水肿区及正常白质区的平均弥散系数（MD值）、各向异性指数图（FA值）。分析肿瘤与相邻脑白质纤维束的解剖关系，并对患者手术前后的临床症状进行评价。结果16例Ⅰ～Ⅱ级胶质瘤推移相邻脑白质纤维束，患者术后临床症状明显改善；8例Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤浸润破坏相邻脑白质纤维束，患者术后临床症状未明显改善。肿瘤病灶区和灶周水肿区与正常白质区的MD值比较差异有统计学意义（P〈0．05），而肿瘤病灶区与灶周水肿区的MD值比较差异无统计学意义（P〉0．05）；3个区域的FA值比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论磁共振DTI技术可在活体清晰、无创、直观地显示脑胶质瘤与周围脑白质纤维束的关系，DTI的MD值和FA值可区分高级别胶质瘤肿瘤病灶区、灶周水肿区及正常白质区。DTI技术对脑胶质瘤术前治疗方案的确定以及手术风险和患者临床预后的预测具有重要的应用价值。