miR-150靶向AOC3调控绵羊前体脂肪细胞分化的研究

旨在通过探究miR-150与AOC3的靶标关系,揭示miR-150在广灵大尾羊前体脂肪细胞分化过程中的作用机制。本研究以3只5日龄发育正常且健康的广灵大尾羊公羊为试验材料,采用qPCR方法检测广灵大尾羊皮下、肾周和尾部脂肪组织中miR-150的表达量;采集广灵大尾羊的尾部脂肪组织并分离绵羊前体脂肪细胞;通过细胞免疫荧光技术鉴定细胞纯度;利用生物信息学软件预测和双荧光素酶报告试验验证miR-150与AOC3的靶标关系;转染miR-150 mimics和inhibitors并检测AOC3和成脂分化标志基因的表达情况;构建并转染绵羊AOC3基因的过表达和干扰载体至绵羊前体脂肪细胞,利用qPCR和Western blotting检测miR-150与AOC3在广灵大尾羊前体脂肪细胞分化中的表达规律;油红O染色检测成脂能力,上述试验方法均设立3个生物学重复。结果表明,miR-150在3个不同部位脂肪组织中尾部脂肪表达量最高,差异极显著(P<0.001)。与对照组相比,过表达miR-150后,AOC3基因和成脂标志基因的表达显著下调(P<0.05),且脂滴生成减少,抑制了绵羊前体脂肪细胞分化;抑制miR-150后,结果相反。miR-150与AOC3的3′-UTR存在结合位点,miR-150极显著降低了AOC3野生型的相对荧光活性(P<0.001)。过表达AOC3后,成脂分化标志基因的表达极显著上调(P<0.01),脂肪细胞产生了更多脂滴,AOC3促进了绵羊前体脂肪的分化;干扰AOC3后,结果相反。本研究表明,miR-150与AOC3的3′-UTR存在结合位点,在绵羊前体脂肪细胞分化的过程中,miR-150与AOC3的表达量呈负相关性,miR-150通过靶向AOC3抑制脂肪分化,研究结果为microRNAs(miRNAs)在分子水平上的研究提供了一定的理论依据。

广灵大尾羊断奶羔羊育肥效果研究

为了解广灵大尾羊的羔羊育肥效果,以期为提高养殖户的经济效益提供技术支撑,于2011年5月8日至7月7日对广灵大尾羊和蒙系羊的4月龄断奶羔羊采用全舍饲育肥方式进行60 d育肥试验。结果表明,广灵大尾羊的4月龄断奶羔羊育肥期的始质量、末质量、增质量和日增质量分别为25.31,43.27,17.95 kg,299.23 g,蒙系同龄羔羊分别为24.94,39.61,14.67 kg,244.49 g;经Excel统计分析和t检验,2个品种的羔羊育肥期的末质量、增质量和日增质量均达极显著差异(P<0.01)。试验结果表明,育肥是增加养羊经济效益的有效措施,且广灵大尾羊的羔羊有很好的育肥效果。

两种脂尾型绵羊血清中降钙素和骨钙素水平动态分析

为了探讨骨钙素(OC)和降钙素(CT)在小尾寒羊和广灵大尾羊两种地方优良脂尾型绵羊品种中的动态水平,采用放射性免疫分析法,测定了两种绵羊4,6,8,10,12月龄时血清CT和OC的水平及同一品种不同性别绵羊血清CT和OC水平。结果表明:广灵大尾羊血清CT水平显著高于小尾寒羊,而OC水平没有差异;小尾寒羊血清OC水平具有明显性别差异,而CT在两个品种均无显著性别差异;血清OC水平相比CT而言,在不同月龄小尾寒羊和广灵大尾羊中均呈现显著动态变化。说明CT和OC在两种绵羊血清中水平的动态变化与二者生长发育与代谢规律基本相符,可以作为实践监测指标之一。