满天星茎腐病中一种新病原菌的分离与鉴定

满天星是当今世界最流行的鲜切花配花之一,茎腐病是满天星的一种常见病害,严重时导致植株枯萎死亡,影响鲜花的观赏性和利用价值,造成一定的经济损失。2021年3月,笔者在云南省昆明市海口镇发现满天星茎腐病,该病主要为害茎基部,表现为茎基部腐烂和萎蔫。为明确其病原,本研究对满天星茎腐病病原菌进行分离与鉴定。柯赫氏法则证明该分离物可造成满天星组培苗和盆栽苗表现出与田间病株相似的症状,经接种后获得的分离物与田间自然发病的分离物一致。通过形态学鉴定,分离物能产生大量致密的气生菌丝,颜色从白色到淡橙色或黄色不等,菌落背面有暗红色色素沉积。显微镜观察发现其分离物的分生孢子呈镰刀形,腹面较平直,背侧呈拱形,具有3~6个隔膜,分生孢子大小为(21.1~57.9)μm×(2.7~5.1)μm(n=100),未见小型分生孢子,形态学上与镰刀菌属病原真菌相似。通过对其ITS基因序列与形态学鉴定,将分离物初步确定为禾谷镰孢复合种(Fusarium graminearum species complex,FGSC),为进一步确定亚种,使用翻译延伸因子(TEF-1α)序列进行测序,发现该分离物与南方镰孢菌(F.meridionale)的同源性达100%。因此结合形态学和分子生物学特征,满天星茎腐病的病原确定为南方镰孢菌。目前国内尚未发现由南方镰孢菌侵染为害满天星茎部的相关研究报道,本研究结果将为防治满天星病害提供重要理论依据。

三倍体满天星试管繁殖技术研究

用试管繁殖的方法研究三倍体满天星繁殖快、成本低、适于生产上应用的组织培养技术。试验结果表明:三倍体满天星在基本培养基MS和WPM上丛生芽诱导均可成功,但以MS较好。芽增殖、分化培养基以改良MS+BA 2mg/L+NAA 0.05mg/L+IBA 0.05mg/L最好;丛生芽抽茎伸长以改良WPM+BA 0.75mg/L+NAA 0.5mg/L+IBA 0.5mg/L为宜;愈伤组织诱导出芽以KT和BA同时配合使用效果最好。具有根原基的试管苗移栽,速度快、成活率高。

满天星组织培养快速繁殖

满天星可以通过组织培养进行大量快速繁殖．其茎段在ＭＳ＋ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ１．０ｍｇ／Ｌ培养基上可产生大量健壮的不定芽，繁殖系数可达１０以上；切下的不定芽在ＭＳ＋ＩＡＡ５．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ培养基上１周内８０％外植体分化出良好的根系；在定植基质中加入杀菌剂并保持一定的湿度，可以明显减少烂苗，提高试管苗的移栽成活率．

生物反应器在满天星快繁中的应用

利用2.5L柱状气升式生物反应器采用接触法进行了满天星(Gypsophila paniculata)增殖培养。结果表明:外植体接种密度(每个反应器接种外植体个数)为35比密度为25和45更有利于满天星的增殖生长,平均每个生物反应器内可获得252株生长健壮的不定苗;光强为90μmol.m-2.s-1对满天星增殖培养最有利,过高的光强对不定芽和株高有抑制作用;通过小孔隙(15μm)的多孔喷头注入0.1vvm空气有利于满天星增殖培养。

满天星生根培养的研究

以满天星小花型品种‘仙女’作为试验材料 ,在MS培养基上加不同浓度的PP333和NAA组合 ,将不定芽平放或直立于培养基上进行培养 ,研究其生根情况。结果表明 :在所有NAA和PP333组合的培养基上 ,平放的不定芽生根速度、生根量和生根率均高于直立的不定芽 ;外源激素浓度以NAA 0 .0 1mg·L- 1+PP3330 .10mg·L- 1为最佳。

满天星不同品种组培苗增殖研究

以云南省农业科学院花卉研究所组培中心继代2代的大花满天星和小花满天星组培瓶苗为试材,以MS+NAA 0.1mg/L+蔗糖3%+琼脂0.65%为基本配方,研究了添加不同浓度的BA(0.1、0.5、1.0、2.0、5.0mg/L)和KT(0.1、0.5、1.0、2.0、5.0mg/L)对其组培苗增殖的影响。结果表明:小花满天星组培苗增殖BA适宜浓度为2.0mg/L、增殖倍数为15倍,KT适宜浓度为1.0mg/L、增殖倍数为8倍;大花满天星组培苗增殖BA适宜浓度为1.0mg/L、增殖倍数为10倍,KT适宜浓度为1.0mg/L、增殖倍数为9倍,该试验可为不同满天星组培苗增殖提供参考。

培养基组成对满天星试管苗增殖的影响

为确立满天星组培快速繁殖和抑制玻璃化苗发生的体系,研究了培养基中氨态氮和硝态氮的比率、总氮含量及MS浓度对满天星增殖生长的影响和培养基中糖的种类及蔗糖浓度对满天星增殖和玻璃化苗发生的影响,结果表明:NH4+/NO3-为20/40mM的MS固有培养基适合满天星大量增殖,且苗的生长状态良好.培养基中氮含量提高至90mM或将MS浓度提高2倍时,能得到大量且健壮的满天星增殖苗.浓度为30g/L的蔗糖对满天星的增殖生长有促进作用,同时抑制玻璃苗的发生.

两种花卉秸秆中温发酵产沼气潜力实验

以满天星秸秆、康乃馨秸秆为实验原料,在(30±1)℃条件下,采用全混合批量式发酵工艺对其进行厌氧发酵实验.实验结果表明,满天星秸秆的产气潜力分别为999 mL/g(TS)和1 118 mL/g(VS),康乃馨秸秆的产气潜力分别为1 384 mL/g(TS)和1 507 mL/g(VS).

观赏植物矮化培养研究

通过试验筛选出适合万寿菊、满天星快速繁殖的培养基.矮壮素可使满天星和万寿菊丛苗数量减少,植株生长明显受抑制,使其节间缩短,叶片增厚,叶色浓绿.矮壮素还有使万寿菊根系发达粗壮,分支较少的作用.500mg/L的矮壮素比较适宜矮化培养,既达到了矮化的效果又不至于阻碍植株正常生长,且试管苗株形紧凑、美观.

满天星扦插繁殖技术研究

以驯化移栽的满天星试管苗为扦插母本，研究了生长素的种类、浓度、处理方式、处理时间及扦插基质、扦插环境等对满天星扦插生根的影响。结果表明：液体生长素比固体生长素（ＮＡＡ生根粉）好，而液体中，ＩＢＡ＋ＮＡＡ（１∶１）最好，ＩＢＡ次之，ＮＡＡ较差一些；生长素的浓度以８００－１０００μｇ·ｇ－１较合适；生长素的处理以浸渍并结合喷雾，效果较好；在４５ｄ以内，随着时间的延长，生根率明显增加；扦插基质可用珍珠岩与草煤土或腐叶土等按１∶１的比例混合；一般扦插还是在大棚中进行为宜，且要保持温度低于３０℃，湿度在８５％以上。

重瓣丝石竹试管苗玻璃化发生原因初探

本文研究了引发重瓣丝石竹（ＧｙｐｓｏｐｈｉｌａｐａｎｉｃｕｌａｔａＬ．）试管苗玻璃化现象发生的若干因素．结果表明，外植体取材部位显著影响玻璃苗发生频率，重瓣丝石竹玻璃苗发生频率以中部茎段最高，远高于顶芽和基部茎段．培养基内较高浓度的细胞分裂素，尤为高浓度ＢＡ５ｍｇＬ－１，是影响玻璃苗发生的主要原因．琼脂浓度，蔗糖及培养温度等对玻璃苗发生率的影响．依培养基中激素的状况而异．添加适量硝酸钾，可以完全抑制玻璃苗的发生．

满天星试管苗与其玻璃化苗的RAPD指纹图谱分析

采用分离群体分组分析法(BSA),用100个随机引物对满天星的正常苗和玻璃化苗进行RAPD分析的结果表明,7个随机引物扩增出多态性差异条带。再用上述7个引物分别对试管苗及其玻璃化苗个体进行DNA的PCR扩增的结果显示,引物J20在2种苗中出现差异条带。

营养液的pH和EC对满天星试管苗水培生根的影响

以满天星试管苗的茎段为外植体,采用MS基本培养基,附加1.0mg/L的6-BA,建立满天星的无菌植株,以继代增殖培养后的单株为材料,研究营养液中pH和EC对试管苗水培生根的影响。结果表明:对满天星幼苗生长和生根的营养液以pH 6处理的幼苗生长及根系发育最佳;高EC浓度较适合满天星的瓶外生根,EC值应调节为2.5mS/cm。

满天星切花周年栽培管理技术

满天星适宜在光照充足、土质疏松的土壤中生长,移栽不宜过深,否则会出现苗茎腐烂.其生长的最适温度是夜温15℃～20℃,昼温22℃～28℃.整个生育期灌水应适当,不宜过多,以免引起徒长,同时应注意对潜叶蝇和根腐病等病虫害的防治.

满天星试管玻璃化苗与正常苗的比较研究

以满天星组培正常苗和玻璃苗为材料,通过生理生化特性、同工酶分析,探讨了满天星试管苗玻璃化发生原因。结果表明:玻璃苗组织含水量较高,为95.8%,而正常苗为91.7%。玻璃苗的各种叶绿素平均含量及可溶性糖和还原糖含量分别为正常苗的14.0%,63.8%和86.9%;而玻璃苗的过氧化物酶(POD)的活性增加,是正常苗的2.6倍。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对酯酶同工酶进行分析结果表明,玻璃苗的酯酶同工酶电泳谱带出现缺失的异常现象,同时其谱带颜色较浅;过氧化物同工酶电泳结果表明玻璃苗与正常苗相比活性增加且谱带增多。

满天星试管苗与玻璃化苗RAPD标记向SCAR标记的转化

以满天星组培所获得的正常苗和玻璃苗为试验材料,将RAPD标记转换为SCAR标记。结果表明,将随机引物在满天星试管苗与玻璃化苗的DNA中扩增得到的特异性片段OPG17-1455,经过回收、克隆、测序、重新设计1对引物将RAPD标记转化为SCAR标记,该SCAR标记只有在玻璃苗个体中出现。

满天星不同外植体离体培养芽形成的研究

本试验研究了满天星不同外植体,不同取材时间及生长调节剂,对芽分化形成的影响。结果表明:以茎尖为外植体,芽诱导率最高可达95 0%,茎段次之,叶片的芽诱导率很低。取材应在5月至6月间,此时芽的诱导效果最好。6-BA和KT分别在(0 1-0 5)mg L及(0 1-1 0)mg L浓度范围内,对芽的产生起促进作用,且以6-BA0 5mg L的效果为好;当6-BA或KT与生长素NAA或IBA配合使用时,可提高芽的诱导率,以NAA0 5mg L+6-BA1 0mg L的效果最优。

满天星切花提前采收贮藏保鲜效应研究

以保鲜剂处理结合低温贮藏方式研究了贮藏时间对提前采收的满天星切花品质的影响.试验结果表明,不经保鲜液处理的满天星切花,生长发育缓慢,衰老进程快,只能短期贮藏;经保鲜液处理的花枝,贮藏期开花率高,瓶插期生活力强,衰老缓慢,可有效贮藏15天.满天星切花经保鲜剂预处理后,于低温条件下结合保鲜剂贮藏是最有效的贮藏措施.提前采收满天星切花是可行的.

满天星切花贮藏保鲜技术研究

在低温条件下,以小花开放率10%～15%的满天星切花为试材,采取湿藏和干藏2种方式,结合预冷和保鲜剂处理,对切花贮藏时间和方式进行了研究。试验结果表明,满天星切花提前采收是可行的,其有效的贮藏保鲜措施应是低温条件下结合保鲜液处理的湿藏。15d内贮藏,可将切花置预处液中预冷后再于清水中贮藏;20d内贮藏,可将切花置预处液中预冷后再于保鲜液中贮藏。

满天星试管苗的生根培养

本实验研究了适于满天星试管苗生根的基本培养基和生长素的种类,浓度.结果表明:1/2MS培养基为生根的最适基本培养基,在培养基中加入0 5mg/L的NAA最有利于根的分化和生长.