3-氯-6-甲基二苯并[c,f][1,2]硫氮杂卓-11(6H)-酮5,5-二氧化物的合成

以4-氯-2-磺酰氯苯甲酸甲酯为原料,经缩合、甲基化、氢解及环合反应合成噻萘普汀重要中间体3-氯-6-甲基二苯并[c,f][1,2]硫氮杂卓-11(6H)-酮5,5-二氧化物,讨论了缩合反应中傅酸剂吡啶的用量对反应的影响以及氢解反应中氢化钠用量对反应的影响,得到了较优的工艺条件:n(4-氯-2-磺酰氯苯甲酸甲酯)∶n(吡啶)=1∶1.86、n[4-氯-2-(N-甲基-N-苯基-胺磺酰基)-苯甲酸甲酯]∶n(氢化钠)=1∶3。对环合反应条件进行了研究,确定了适宜反应温度为100～110℃。总收率为55.9%,其化学结构经IR、1HNMR、MS得以确证。

1H11内皮细胞株测定血管形成抑制剂的方法研究

目的建立一种检测血管形成抑制剂的体外实验方法。方法１Ｈ１１内皮细胞株为检测细胞，软骨来源的血管形成抑制剂的部分纯化产品为检测物，采用ＭＴＴ比色分析法。以对内皮细胞的抑制率来反映检测物的作用强度，对可能影响实验结果的因素进行探讨。结果检测方法的条件宜为：１Ｈ１１内皮细胞接种浓度１×１０８／Ｌ，每孔接种０．１ｍｌ；内皮细胞生长因子浓度为５０ｍｇ／Ｌ；血管形成抑制剂作用４８ｈ后，加入ＭＴＴ溶液２０μｌ（５ｇ／Ｌ），作用４ｈ后，以二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）作为甲瓒溶解剂，检测波长５７０ｎｍ。结论以１Ｈ１１内皮细胞株为检测细胞，采用ＭＴＴ比色分析法，在稳定的条件下，是检测血管形成抑制剂并进而对其定量分析的一种较好的体外实验方法。

改善SA387Gr11CL1(H)钢焊缝低温韧性的试验研究

某台SA387Gr11CL1(H)钢冷换设备的产品焊接试板在进行力学性能试验时,焊缝-18℃冲击功不合格。通过分析研究和焊接工艺试验,查明了导致焊缝韧性不合格的原因。经过多次热处理试验,确立了适合的热处理工艺,运用于该台设备壳体焊缝中,显著提高了原焊缝的韧性,取得了良好效果。

PMN释放H2O2与CD11b及ICAM-1关系的研究

目的探讨细胞表面粘附分子在呼吸爆发时PMN产生H2O2中的作用。方法用氧化酚红比色法来测定呼吸爆发时H2O2的产生量及CD11b、ICAM-1对此过程的影响。结果LPS激活PMNS后，其H2O2释放量明显增加，（15．3±3．50）μmol／L vs（3．81±0．41）μmol／L，P〈0．005。经CD11b单抗、ICAM-1单抗、CD11b＋ICAM-1单抗预处理后，并没有影响H2O2的释放（P〉0．05）结论在本实验条件下，CD11b、ICAM-1的表达对LPS激活的PMNS释放H2O2不是必需的。

甲型H1N1流感患者外周血细胞变化及相关文献复习

目的通过对我院重症监护病房2009年11～12月收治的3例甲型H1N1流感危重症患者的救治,初步探索甲型H1N1流感病毒对外周血细胞变化的情况及治疗原则。方法对患者给予磷酸奥司他韦150 mg bid治疗,并且采取呼吸支持疗法、抗感染、抗真菌以及对症支持等治疗。粒系统受损导致白细胞减少者,使用重组人粒细胞集落刺激因子150μg皮下注射。红细胞系统受损予以浓缩红细胞或洗涤红细胞输注等治疗。血小板系统受损者,给予白介素-11 4 mg皮下注射,1次/d。静脉滴注5%静注人免疫球蛋白100 mL,1次/d。必要时输注新鲜的血小板。然后将3例甲型H1N1流感危重症患者的外周血细胞变化情况、症状、治疗方法和愈后进行综合分析。结果甲型H1N1流感病毒容易造成外周血细胞改变,尤其是危重症患者的外周血细胞改变更重。3例患者住院时间最短21 d,最长48 d,经治疗后3例患者均康复出院。复查外周血象均恢复正常。结论外周血细胞改变是甲型H1N1流感危重症患者常见的并发症。如处理及时得当,可减少其他并发症的发生,挽救患者生命,并且外周血细胞的损害是可逆的。

低温燃烧合成法制备Ce_(1-x)Pr_xO_2红色纳米稀土颜料

以Ce(NO3)3·6H2O,Pr6O11为主要原料,利用低温燃烧合成法在250℃引燃合成了具有纳米晶粒的Ce1-xPrxO2红色稀土颜料。该稀土颜料在1100℃热处理后,颜色有明显改善。XRD,SEM,EDS,CIE色度分析的研究结果表明,该红色稀土颜料为萤石型固溶体,其晶粒尺寸为17.90nm。

TiO_2/SiO_2催化剂的1-己烯异构化性能研究

以商业粗孔硅胶为载体、钛酸四丁酯为原料制备了负载型TiO2 /SiO2 复合氧化物,分别采用H2SO4 和USY、PREHY、Hβ、SAPO-11等分子筛对其进行改性,并以1-己烯的异构化反应为探针反应,在加氢微反装置上考察了复合氧化物及改性复合氧化物对1 -己烯的异构化性能。结果表明,TiO2 /SiO2 具有比商业Al2O3 更大的酸量和更高的1-己烯骨架异构化选择性;TiO2 /SiO2 经硫酸改性后表面酸量和酸强度有所提高, 1-己烯的骨架异构化性能得到改善;在所用分子筛中,SAPO-11改性的TiO2 /SiO2 具有最高的1-己烯骨架异构化选择性;但同时具有较高的1-己烯缩合-裂解反应选择性。

粘附分子在多形核白细胞释放H_2O_2中的作用

目的:探讨细胞表面粘附分子在呼吸爆发时多形核白细胞(PMN)产生过氧化氢(H2O2)中的作用。方法:用氧化酚红比色法测定呼吸爆发时H2O2的产生量及CD11b、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)对此过程的影响。结果:细菌脂多糖(LPS)激活PMNs后,其H2O2释放量明显增加(15.03±3.50μmol.L-1比3.81±0.41μmol.L-1,P<0.005)。经CD11b单抗、ICAM-1单抗、CD11b+ICAM-1单抗预处理后,并未影响H2O2的释放(P>0.05)。结论:在本实验条件下,CD11b、ICAM-1的表达对LPS激活的PMNs释放H2O2不是必需的。

右美托咪定抑制DEAD/H盒解旋酶11反义核糖核酸1表达调控胶质瘤细胞增殖和凋亡

目的探讨右美托咪定对SHG-44胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法采用0.1 μmol/L(低浓度组)、1.0 μmol/L(中浓度组)和10.0 μmol/L(高浓度组)右美托咪定处理SHG-44胶质瘤细胞(购自中国科学院细胞库)。将si-DEAD/H盒解旋酶11反义核糖核酸1(DDX11-AS1)和pcDNA-DDX11-AS1分别转染至SHG-44胶质瘤细胞并采用10.0 μmol/L右美托咪定处理。采用噻唑蓝(MTT)法、克隆形成实验、流式细胞仪、实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞增殖、克隆形成数、凋亡率、DDX11-AS1、裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)、Caspase-3前体(pro-Caspase-3)表达。采用t检验或单因素方差分析。结果低浓度组、中浓度组和高浓度组SHG-44胶质瘤细胞吸光度(A)490值、克隆形成数、DDX11-AS1和pro-Caspase-3表达依次降低[A490值为1.17±0.05、0.90±0.04、0.55±0.03,克隆形成数为(108.67±3.09)、(82.00±2.45)、(55.00±2.16)个,DDX11-AS1为0.96±0.04、0.68±0.03、0.36±0.02,pro-Caspase-3为0.72±0.04、0.48±0.02、0.24±0.02],凋亡率和cleaved-Caspase-3表达依次升高[凋亡率为(6.38±0.18)%、(16.78±0.71)%、(21.77±0.77)%,cleaved-Caspase-3为0.23±0.01、0.45±0.02、0.64±0.03],差异有统计学意义(F=140.693、198.187、262.395、321.333、611.199、135.429,P<0.05)。si-DDX11-AS1组SHG-44胶质瘤细胞A490值、克隆形成数和pro-Caspase-3表达低于si-NC组SHG-44胶质瘤细胞[0.72±0.03比1.20±0.05、(65.00±2.45)个比(110.33±4.78)个、0.34±0.02比0.73±0.04,t=14.258、14.617、15.105,P<0.05],凋亡率和cleaved-Caspase-3高于si-NC组SHG-44胶质瘤细胞[(18.38±0.53)%比(6.45±0.20)%、0.53±0.02比0.21±0.01,t=36.477、24.787,P<0.05]。高浓度右美托咪定+pcDNA-DDX11-AS1组SHG-44胶质瘤细胞A490值、克隆形成数和pro-Caspase-3表达高于高浓度右美托咪定+pcDNA组[0.98±0.04比0.54±0.03、(93.33±3.09)个比(56.00±2.16)个、0.63±0.03比0.24±0.01,t=15.242、17.150、21.361,P<0.05],凋亡率和cleaved-Caspase-3表达低于高浓度右美托咪定+pcDNA组[(13.93±0.33)%比(21.79±0.72)%、0.34±0.02比0.65±0.03,t=20.189、15.892,P<0.05]。结论右美托咪定通过下调DDX11-AS1表达来抑制胶质瘤细胞增殖并促进其凋亡。

四氯化锆催化合成嘧啶并[4,5-b]喹啉-2,4(1H,3H)-二酮和11H-茚[1,2-b]喹啉-11-酮

以四氯化锆为催化剂,靛红、1,3-二甲基巴比妥酸/1,3-茚二酮在脂肪醇中能够通过多组分串联反应,有效地转化成为相应的稠环化合物嘧啶并[4,5-b]喹啉-2,4(1H,3H)-二酮和11H-茚[1,2-b]喹啉-11-酮,并巧妙地在这些含氮杂环中引入酯基.这些未见文献报道的化合物均通过了1HNMR、13CNMR、IR和HRMS进行了表征,X射线单晶衍射确定了11H-茚并[1,2-b]喹啉-11-酮-10-羧酸乙酯(4q)的结构.这种以简单易得化合物为原料在温和条件下制备上述两类稠环骨架的方法,是对这些稠环骨架已有合成方法的补充,可以有效丰富此类杂环化合物库.

非小细胞肺癌手术前后长链非编码RNA水平变化及其与预后的关系

目的分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者手术前后长链非编码RNA(LncRNAs)水平变化及其与预后的相关性。方法选取2017年4月至2018年5月我院收治的NSCLC患者90例(恶性组)、肺良性肿瘤者54例(良性组)、健康体检者30例(对照组),比较三组血清LncRNA MEG3、LncRNA RAB11B-AS1、LncRNA H19水平,分析NSCLC患者手术前后上述指标变化及与预后的关系。结果恶性组血清LncRNA MEG3水平低于良性组及对照组,LncRNA RAB11B-AS1、LncRNA H19水平高于良性组及对照组(P<0.05);NSCLC患者术后血清LncRNA MEG3水平高于术前,血清LncRNA RAB11B-AS1、LncRNA H19水平低于术前(P<0.05);LncRNA MEG3高表达组总生存时间(OS)较LncRNA MEG3低表达组延长,LncRNA RAB11B-AS1高表达组OS较LncRNA RAB11B-AS1低表达组缩短,LncRNA H19高表达组OS较LncRNA H19低表达组缩短(P<0.05);肿瘤大小、远处转移、TNM分期、LncRNA MEG3低表达、LncRNA RAB11B-AS1高表达、LncRNA H19高表达均为影响NSCLC患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论NSCLC患者手术前后LncRNA MEG3、LncRNA RAB11B-AS1、LncRNA H19水平发生变化,且其与预后均有密切关系,有望成为其分子标志物。

华泽兰质量标准的研究

目的建立华泽兰Eupatorium chinense L.的质量标准。方法观察药材性状和显微特征,TLC法定性鉴别8β(4′hydroxytigloyloxy)10α,14 epoxy 2βhydroxy 1αH,5αH,6βH,7αH guai 3(4),11(13)dien 6,12 olide(HEH),2015年版《中国药典》方法检测水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物、醇溶性浸出物含有量,HPLC法测定HEH含有量。结果华泽兰性状、显微特征可与同属其他植物较好地区分开。TLC斑点清晰,分离度良好。10批样品中水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物、醇溶性浸出物含有量分别不超过11.26%、7.92%、7.92%,以及不低于6.77%、5.41%。HEH在6.25~400μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.9997),平均加样回收率为100.00%,RSD为1.10%。结论该方法专属性好,稳定可靠,可用于华泽兰的质量控制。

缺氧缺血性脑病新生兔细胞粘附分子表达的变化

目的:观察缺氧缺血性脑病(HIE)对新生兔细胞粘附分子表达的影响。方法:采用结扎左颈总动脉后置于低氧状态容器中2h的方法制作HIE模型兔32只,分4组,每组8只,分别于模型制作成功后2h、12h、24h、48h测定中性粒细胞表面细胞粘附分子CD11b、CD18,脑组织细胞粘附分子ICAM-1及血管内皮细胞粘附分子VCAM-1,并与对照组进行比较。结果:HIE组CD11b、CD18,ICAM-1、VCAM-1的表达明显高于对照组,缺氧缺血2h即见表达增强,在24h达到高峰,48h时稍下降,但仍在较高水平,与对照组比较差异有显著性。结论:缺氧缺血性脑病新生兔中性粒细胞CD11b、CD18、脑细胞细胞粘附分子ICAM-1、血管内皮细胞粘附分子VCAM-1表达增强,细胞粘附分子的变化参与HIE的病理生理过程。

C-型凝集素域家族11成员A促进胰岛素分泌改善脂毒性诱导胰岛损伤的研究

目的探讨脂毒性对胰岛C-型凝集素域家族11成员A(Clec11a)表达的影响,重组Clec11a(rClec11a)蛋白对小鼠胰岛、小鼠胰岛β细胞系MIN6细胞及人胰岛β细胞系EndoC-βH1细胞胰岛素分泌的影响。方法免疫荧光染色检测正常小鼠(Con)及高脂饲料喂养的肥胖小鼠(DIO)胰岛Clec11a与胰岛素表达。采用棕榈酸(PA)干预正常小鼠胰岛及MIN6细胞不同时间,Western blot检测Clec11a蛋白表达。将分离的正常小鼠胰岛分为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组及不同浓度rClec11a处理组,检测胰岛素刺激指数(SI)。将分离的正常小鼠胰岛分为载体对照组(Con-Veh组)、Con-PA组和Con-PA+rClec11a组,检测胰岛素SI。将EndoC-βH1细胞分为PBS对照组(EndoC-βH1-PBS组)与rClec11a干预组(EndoC-βH1-rClec11a组)及siRNA-Negtive Con组与siRNA-Clec11a干预组,分别检测高糖刺激后胰岛素分泌。结果DIO小鼠胰岛Clec11a表达低于正常小鼠。小鼠胰岛及MIN6细胞内Clec11a蛋白表达随PA培养时间延长呈先升高后降低趋势(P<0.05)。与Con-PBS组比较,Con 10 rClec11a、Con 100 rClec11a、Con 1000 rClec11a组SI升高(P<0.05)。与Con-Veh组比较,Con-PA组SI降低(P<0.05)。与Con-PA组比较,Con-PA+rClec11a组SI升高(P<0.05)。20 mmol/L高糖刺激30 min后,EndoC-βH1-rClec11a组胰岛素分泌高于EndoC-βH1-PBS组(P<0.05),siRNA-Clec11a组胰岛素分泌低于siRNA-Negtive Con组(P<0.05)。结论高脂培养下胰岛Clec11a表达降低,Clec11a通过促进胰岛β细胞分泌胰岛素,对脂毒性诱导的胰岛损伤发挥保护作用。

幽门螺杆菌疫苗

可观的证据认为H．pylori重建了胃免疫系统。H.pylori对胃上皮细胞的结合给了NF-kB转录因子激活和RANTES、GROa、MIP-1a、MCP-IⅠ?、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-12和TNFa产生的信号。最近的证据显示，控制宿主炎症应答程度的IL-1基因多态性与胃病相关。H.pylori感染上调了CD11b／CD18整合素及其受体、

云南省2009～2015年边境地区麻疹病毒分子流行病学监测

对2009~2015年在云南省边境地区流行的麻疹病毒进行分子流行病学研究,为边境地区麻疹防控策略的制定提供重要的实验室数据。本研究使用Vero/SLAM细胞对云南边境地区麻疹患者中采集的临床标本进行麻疹病毒分离,使用RT-PCR方法扩增阳性病毒核蛋白羧基末端的676个核甘酸,并进行序列测定和分析,随后基于N基因羧基末端450个核苷酸序列进行基因分型以及核苷酸和氨基酸变异分析。云南省自2004年开始开展麻疹病毒学监测,2009~2015年在边境地区共检测到麻疹病毒99株,其中H1a基因型病毒39株(39.4%),为本土流行株;A基因型3株(3.0%),为疫苗相关病例毒株;D9基因型51株(51.5%),D11基因型6株(6.1%),D基因型的比例高达分离毒株的57.6%,均为境外输入的基因型毒株。境外D9和D11型流行株的输入,对边境地区的麻疹疫情防控带来了一定的影响,特别是D9基因型一定时间段内在云南边境形成了持续流行,应引起足够的重视。

云南省麻疹野病毒不同基因型的流行分布状况

目的了解云南省麻疹野病毒不同基因型的流行分布状况。方法用B95a细胞[Epstein-Barr(EB) Virus-Transformed,Marmoset B Lymphoblastoid Cell Line;埃泼斯坦-巴尔病毒转化的绒猴淋巴母细胞]和Vero/SLAM细胞[Vero Cell Transfected to Express the Human Signaling Lymphocyte Activation Molecule(SLAM),淋巴信号激活因子转染的非洲绿猴肾细胞]从麻疹爆发和散发患者的标本中分离麻疹野病毒,用逆转录-聚合酶链反应扩增核蛋白(Nucleoprotein,N)基因羧基末端的676个核苷酸片段,对扩增产物进行核苷酸序列测定。并以N基因羧基末端450个核苷酸序列构建基因亲缘性关系树,进行核苷酸变异分析。结果云南省2004～2011年共分离和检测到46株麻疹病毒及2株病毒核酸,43株为H1基因型,分布于14个县(区)及四川省普格县;4株为d11基因型,分布于边境孟连县及缅甸的班康市;1株为A基因型,来自龙陵县。结论麻疹病毒H1基因型是云南省优势本土基因型,d11基因型是从缅甸输入后连续两年于缅甸接壤的地区发现的麻疹野病毒,A基因型为中国沪191疫苗株相似株。

百令胶囊联合环磷酰胺和醋酸泼尼松治疗肾病综合征的临床研究

目的探讨百令胶囊联合环磷酰胺和醋酸泼尼松治疗肾病综合征的临床疗效。方法选取2015年3月—2016年3月在荆州市中心医院接受治疗的80例肾病综合征患者,根据治疗方案的差别分为对照组(40例)和治疗组(40例)。两组患者均给予降压、利尿、降血脂等常规治疗。对照组静脉注射注射用环磷酰胺,10 mg/kg加入250 m L生理盐水,1次/月;同时口服醋酸泼尼松片,起始剂量为40 mg/d,尿蛋白转阴后维持剂量为10 mg/d。治疗组在对照组基础上口服百令胶囊,5粒/次,3次/d。两组患者均连续治疗2个月。观察两组的临床疗效,同时比较两组治疗前后血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白排泄率(UPE)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、人11去氢血栓烷B2(11-DH-TXB2)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的变化情况。结果治疗后,对照组和治疗组总有效率分别为80.00%、95.00%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者Scr、BUN、24 h UPE、TC、TG、LDL-C明显降低,HDL-C显著升高,同组治疗前后差异有统计学意义(P<0.05),且治疗组降低的更显著(P<0.05)。治疗后,两组患者IL-4、TNF-α、11-DH-TXB2和HMGB1水平均较同组治疗前降低,且治疗组降低的更显著(P<0.05)。结论百令胶囊联合环磷酰胺和醋酸泼尼松治疗肾病综合征疗效显著,可明显改善患者肾功能,减轻炎性反应,具有一定的临床应用推广价值。

暗花金挖耳化学成分研究

目的研究天名精属植物暗花金挖耳Carpesium triste的化学成分。方法利用硅胶色谱和Sephadex LH-20色谱方法进行分离纯化,应用NMR等方法鉴定结构。结果从暗花金挖耳全草中分离得到8个化合物,其中包括2个倍半萜类化合物,分别鉴定为4α-羟基-9β,10β-环氧-1βH,5αH-愈创木-11(13)-烯-8α,12-内酯(1)、天名精内酯酮(2);6个甾醇类化合物,分别鉴定为豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(3)、豆甾醇(4)、5α,8α-环二氧-24(S)-甲基麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(5)、5α,8α-环二氧-24(S)-甲基麦角甾-6,9(11),22-三烯-3β-醇(6)、β-谷甾醇(7)和β-胡萝卜苷(8)。结论以上8个化合物均为首次从暗花金挖耳中分离得到,其中化合物1的13C-NMR数据为首次报道。