目的制备人膜联蛋白 V(Annexin V),应用联肼尼克酰胺(HYNIC)偶联后进行^(99)Tc^m 标记,评价^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 在健康小鼠体内的分布。方法采用基因工程方法构建 Annexin V 的原核载体并诱导其表达,与自行合成的双功能螯合剂 HY...目的制备人膜联蛋白 V(Annexin V),应用联肼尼克酰胺(HYNIC)偶联后进行^(99)Tc^m 标记,评价^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 在健康小鼠体内的分布。方法采用基因工程方法构建 Annexin V 的原核载体并诱导其表达,与自行合成的双功能螯合剂 HYNIC 偶联,并进行^(99)Tc^m 标记。测定^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 的标记率、放化纯,并研究其在健康小鼠体内的生物分布特性。结果 Annexin V在大肠杆菌中获得稳定表达,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及 Western Blot-ting 检测,得到纯度较高的蛋白质。Annexin V 经 HYNIC 偶联后,其^(99)Tc^m 标记率可达90%左右,放化纯>90%。小鼠体内分布结果表明,^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 血液清除迅速,主要从肾脏和肝脏排泄。结论 Annexin V 可在原核生物中稳定表达。其与 HYNIC 偶联后,^(99)Tc^m 标记率和放化纯较高,方法简单,条件温和。展开更多
目的研究^(99)Tc^m-联肼尼克酰胺-膜联蛋白 V(HYNIC-Annexin V)的制备及其在荷瘤小鼠体内生物分布特性和活体显像。方法用双功能螯合剂法,以^(99)Tc^m 标记 Annexin V,经高效液相色谱仪分离纯化并检测产物的标记率、放化纯及稳定性。建...目的研究^(99)Tc^m-联肼尼克酰胺-膜联蛋白 V(HYNIC-Annexin V)的制备及其在荷瘤小鼠体内生物分布特性和活体显像。方法用双功能螯合剂法,以^(99)Tc^m 标记 Annexin V,经高效液相色谱仪分离纯化并检测产物的标记率、放化纯及稳定性。建立荷 S180肉瘤小鼠模型,于20～25g/只昆明种小白鼠右前腋皮下接种 S180肉瘤细胞1周。荷瘤小鼠在环磷酰胺腹膜内化疗72 h 后,尾静脉注射7.4 MBq(200μl)^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V,分别于5、30 min 和1、3、6 h 进行显像和体内生物分布测定。实验结果应用 SPSS 12.0统计软件进行分析。结果 ^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 的标记率达95%,放化纯为99%。荷瘤小鼠注射^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 后6 h 显像,可见肿瘤组织放射性浓聚明显异常。体内生物分布实验示,注射显像剂后6 h 肿瘤组织的放射性摄取最高[每克组织百分注射剂量率(%ID/g)为1.59±0.44],与其他时相比较,差异有显著性(P<0.05)。^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 主要浓聚于肾、肺和肝,经肾脏排泄;其在血液中清除速度快,注射后30 min,血液放射性摄取[(1.59±0.50)%ID/g]较注射后5 min 时[(8.85±2.65)%ID/g]减少80%(P<0.05)。注射显像剂后6 h,肿瘤/肌肉放射性摄取比值(3.73±1.42)高于肿瘤/血液(2.80±0.54)。结论 ^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 活体细胞凋亡显像可应用于荷瘤小鼠模型,其临床应用有待进一步研究。展开更多
目的评价人膜联蛋白 V(H-Annexin V)对血栓的亲和性,对^(99)Tc^m直接标记 H-Annexin V与通过联肼尼克酰胺(HYNIC)螯合标记 Annexin V 进行比较。方法在3种不同的反应条件下,分别用^(99)Tc^mO_4^-直接标记 Annexin V、H-Annexin V 及 HYN...目的评价人膜联蛋白 V(H-Annexin V)对血栓的亲和性,对^(99)Tc^m直接标记 H-Annexin V与通过联肼尼克酰胺(HYNIC)螯合标记 Annexin V 进行比较。方法在3种不同的反应条件下,分别用^(99)Tc^mO_4^-直接标记 Annexin V、H-Annexin V 及 HYNIC-Annexin V,然后测定标记率、稳定性及对兔股动脉血栓模型进行γ显像,比较损伤侧(T,血栓)及对侧(NT)的放射性比值。结果在还原剂足量的情况下,^(99)Tc^mO_4^-直接标记 H-Annexin V 方法简便,反应条件易于控制,^(99)Tc^m-H-Annexin V标记率达95%以上,17 h 后测放化纯仍>80%,血栓显像示动脉损伤处有明显的放射性浓聚,损伤处平均放射性计数为健侧放射性计数的3.714倍。结论 ^(99)Tc^m-H-Annexin V 与血栓具有很好的亲和力,标记率及稳定性高,标记方法较为简单。展开更多
目的探讨^(99)Tc^m 直接标记带有10个连续组氨酸的膜联蛋白 V(Annexin V)衍生物的可行性,研究其在健康小鼠体内的分布和肺癌裸鼠模型凋亡显像。方法直接标记法制备^(99)Tc^m-Annexin V 衍生物,并测产物放化纯、胶体含量及健康小鼠体内...目的探讨^(99)Tc^m 直接标记带有10个连续组氨酸的膜联蛋白 V(Annexin V)衍生物的可行性,研究其在健康小鼠体内的分布和肺癌裸鼠模型凋亡显像。方法直接标记法制备^(99)Tc^m-Annexin V 衍生物,并测产物放化纯、胶体含量及健康小鼠体内不同时间点(5,30 min 和1,2,4,6,12,24 h)的生物分布,DAS 2.0软件拟合计算药代动力学参数。建立荷 H460非小细胞肺癌裸鼠模型,分为紫杉醇诱导化疗组(5只)和未治疗对照组(5只)。紫杉醇诱导化疗后48 h,于裸鼠尾静脉注射^(99)Tc^m-Annexin V 衍生物18.5 MBq,2和4 h 时进行凋亡显像,勾画 ROI 并计算肿瘤与对侧正常组织(T/NT)放射性比值。结果放化纯达(98.01±1.67)%,3 h 后放化纯仍可达(95.45±1.34)%,胶体含量为(3.31±1.37)%。健康小鼠体内分布实验表明肾脏对该示踪剂摄取最高,肝、脾摄取较少。DAS 2.0软件拟合得到时间-放射性曲线符合二室模型特征,分布相半衰期(T_(1/2α))为(21.18±5.95)min,清除相半衰期(T_(1/2β))为(69.32±0.10)min。荷瘤鼠显像示,给药后2 h 即可获得清晰的图像,紫杉醇诱导化疗组2和4 h 的 T/NT 比值为3.85±1.10和4.63±0.97,明显高于对照组(1.60±0.29和1.71±0.43,P<0.01)。结论该Annexin V 衍生物易于^(99)Tc^m直接标记,方法简便,标记物在血液中清除迅速,肝、脾摄取少,易得到高清晰图像。展开更多
目的验证^(99)Tc^m 直接法标记的重组入膜联蛋白 V(^(99)Tc^m-rh-Annexin V)用于早期评价放化疗后肿瘤组织细胞凋亡状态的可行性。方法将小鼠肝癌细胞(Hca-F25)接种于实验小鼠右腋下,8 d 后当肿瘤生长至直径约1 cm 时,将模型鼠分为 A(...目的验证^(99)Tc^m 直接法标记的重组入膜联蛋白 V(^(99)Tc^m-rh-Annexin V)用于早期评价放化疗后肿瘤组织细胞凋亡状态的可行性。方法将小鼠肝癌细胞(Hca-F25)接种于实验小鼠右腋下,8 d 后当肿瘤生长至直径约1 cm 时,将模型鼠分为 A(化疗组,13只)、B(放疗组,10只)、C(荷瘤对照组,12只)3组。其中 A、C 组按注射示踪剂后不同时间(1、4、6 h)各分为3个亚组(A1组3只,A2组4只,A3组6只;C1组3只,C2组4只,C3组5只);A 组接受环磷酰胺单次化疗(按体重150 mg/kg,腹腔内注射),C 组腹腔内注射同等量生理盐水,20 h 后 A、C 组鼠尾静脉注射^(99)Tc^m-rh-Annexin V 3.7MBq(0.5 μg)/只。B 组按不同吸收剂量(2、5、10 Gy)分为3个亚组(B1组4只,B2组3只,B3组3只),放疗后1 h 注射与 A、C 组相同剂量示踪剂,6 h 后显像。小鼠模型显像后即刻处死,取组织(肿瘤、血、肌肉)称重后,测量放射性计数,并计算每克组织百分注射剂量率(%ID/g)及肿瘤(T)/肌肉(M)、T/血液(B)放射性比值,应用流式细胞仪检测细胞凋亡百分率。结果 A、B 组小鼠肿瘤组织中凋亡细胞百分率[(11.16±3.83)%、(17.40±5.20)%]均明显高于 C 组[(2.11±1.51)%,F=56.414、94.748,P<0.001];A2、A3及 B 组肿瘤组织%ID/g 均明显高于 C2及 C3组(F 值分别为14.307、7.074、28.672,P 均<0.05),且与凋亡细胞百分率呈明显正相关(A2、A3组:r=0.813,P=0.002;B组:r=0.780,P=0.004),而 C 组肿瘤组织%ID/g 与凋亡细胞百分率无相关性(r=-0.238,P=0.229)。结论接受放疗或化疗后,小鼠肝癌组织对^(99)Tc^m-rh-Annexin V 的摄取明显增加,且其摄取程度与肿瘤组织内凋亡细胞量呈明显正相关;应用^(99)Tc^m-rh-Annexin V 显像可较准确地反映治疗后早期肿瘤组织细胞凋亡的状态。展开更多
文摘目的制备人膜联蛋白 V(Annexin V),应用联肼尼克酰胺(HYNIC)偶联后进行^(99)Tc^m 标记,评价^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 在健康小鼠体内的分布。方法采用基因工程方法构建 Annexin V 的原核载体并诱导其表达,与自行合成的双功能螯合剂 HYNIC 偶联,并进行^(99)Tc^m 标记。测定^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 的标记率、放化纯,并研究其在健康小鼠体内的生物分布特性。结果 Annexin V在大肠杆菌中获得稳定表达,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及 Western Blot-ting 检测,得到纯度较高的蛋白质。Annexin V 经 HYNIC 偶联后,其^(99)Tc^m 标记率可达90%左右,放化纯>90%。小鼠体内分布结果表明,^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 血液清除迅速,主要从肾脏和肝脏排泄。结论 Annexin V 可在原核生物中稳定表达。其与 HYNIC 偶联后,^(99)Tc^m 标记率和放化纯较高,方法简单,条件温和。
文摘目的研究^(99)Tc^m-联肼尼克酰胺-膜联蛋白 V(HYNIC-Annexin V)的制备及其在荷瘤小鼠体内生物分布特性和活体显像。方法用双功能螯合剂法,以^(99)Tc^m 标记 Annexin V,经高效液相色谱仪分离纯化并检测产物的标记率、放化纯及稳定性。建立荷 S180肉瘤小鼠模型,于20～25g/只昆明种小白鼠右前腋皮下接种 S180肉瘤细胞1周。荷瘤小鼠在环磷酰胺腹膜内化疗72 h 后,尾静脉注射7.4 MBq(200μl)^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V,分别于5、30 min 和1、3、6 h 进行显像和体内生物分布测定。实验结果应用 SPSS 12.0统计软件进行分析。结果 ^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 的标记率达95%,放化纯为99%。荷瘤小鼠注射^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 后6 h 显像,可见肿瘤组织放射性浓聚明显异常。体内生物分布实验示,注射显像剂后6 h 肿瘤组织的放射性摄取最高[每克组织百分注射剂量率(%ID/g)为1.59±0.44],与其他时相比较,差异有显著性(P<0.05)。^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 主要浓聚于肾、肺和肝,经肾脏排泄;其在血液中清除速度快,注射后30 min,血液放射性摄取[(1.59±0.50)%ID/g]较注射后5 min 时[(8.85±2.65)%ID/g]减少80%(P<0.05)。注射显像剂后6 h,肿瘤/肌肉放射性摄取比值(3.73±1.42)高于肿瘤/血液(2.80±0.54)。结论 ^(99)Tc^m-HYNIC-Annexin V 活体细胞凋亡显像可应用于荷瘤小鼠模型,其临床应用有待进一步研究。
文摘目的评价人膜联蛋白 V(H-Annexin V)对血栓的亲和性,对^(99)Tc^m直接标记 H-Annexin V与通过联肼尼克酰胺(HYNIC)螯合标记 Annexin V 进行比较。方法在3种不同的反应条件下,分别用^(99)Tc^mO_4^-直接标记 Annexin V、H-Annexin V 及 HYNIC-Annexin V,然后测定标记率、稳定性及对兔股动脉血栓模型进行γ显像,比较损伤侧(T,血栓)及对侧(NT)的放射性比值。结果在还原剂足量的情况下,^(99)Tc^mO_4^-直接标记 H-Annexin V 方法简便,反应条件易于控制,^(99)Tc^m-H-Annexin V标记率达95%以上,17 h 后测放化纯仍>80%,血栓显像示动脉损伤处有明显的放射性浓聚,损伤处平均放射性计数为健侧放射性计数的3.714倍。结论 ^(99)Tc^m-H-Annexin V 与血栓具有很好的亲和力,标记率及稳定性高,标记方法较为简单。
文摘目的探讨^(99)Tc^m 直接标记带有10个连续组氨酸的膜联蛋白 V(Annexin V)衍生物的可行性,研究其在健康小鼠体内的分布和肺癌裸鼠模型凋亡显像。方法直接标记法制备^(99)Tc^m-Annexin V 衍生物,并测产物放化纯、胶体含量及健康小鼠体内不同时间点(5,30 min 和1,2,4,6,12,24 h)的生物分布,DAS 2.0软件拟合计算药代动力学参数。建立荷 H460非小细胞肺癌裸鼠模型,分为紫杉醇诱导化疗组(5只)和未治疗对照组(5只)。紫杉醇诱导化疗后48 h,于裸鼠尾静脉注射^(99)Tc^m-Annexin V 衍生物18.5 MBq,2和4 h 时进行凋亡显像,勾画 ROI 并计算肿瘤与对侧正常组织(T/NT)放射性比值。结果放化纯达(98.01±1.67)%,3 h 后放化纯仍可达(95.45±1.34)%,胶体含量为(3.31±1.37)%。健康小鼠体内分布实验表明肾脏对该示踪剂摄取最高,肝、脾摄取较少。DAS 2.0软件拟合得到时间-放射性曲线符合二室模型特征,分布相半衰期(T_(1/2α))为(21.18±5.95)min,清除相半衰期(T_(1/2β))为(69.32±0.10)min。荷瘤鼠显像示,给药后2 h 即可获得清晰的图像,紫杉醇诱导化疗组2和4 h 的 T/NT 比值为3.85±1.10和4.63±0.97,明显高于对照组(1.60±0.29和1.71±0.43,P<0.01)。结论该Annexin V 衍生物易于^(99)Tc^m直接标记,方法简便,标记物在血液中清除迅速,肝、脾摄取少,易得到高清晰图像。
文摘目的验证^(99)Tc^m 直接法标记的重组入膜联蛋白 V(^(99)Tc^m-rh-Annexin V)用于早期评价放化疗后肿瘤组织细胞凋亡状态的可行性。方法将小鼠肝癌细胞(Hca-F25)接种于实验小鼠右腋下,8 d 后当肿瘤生长至直径约1 cm 时,将模型鼠分为 A(化疗组,13只)、B(放疗组,10只)、C(荷瘤对照组,12只)3组。其中 A、C 组按注射示踪剂后不同时间(1、4、6 h)各分为3个亚组(A1组3只,A2组4只,A3组6只;C1组3只,C2组4只,C3组5只);A 组接受环磷酰胺单次化疗(按体重150 mg/kg,腹腔内注射),C 组腹腔内注射同等量生理盐水,20 h 后 A、C 组鼠尾静脉注射^(99)Tc^m-rh-Annexin V 3.7MBq(0.5 μg)/只。B 组按不同吸收剂量(2、5、10 Gy)分为3个亚组(B1组4只,B2组3只,B3组3只),放疗后1 h 注射与 A、C 组相同剂量示踪剂,6 h 后显像。小鼠模型显像后即刻处死,取组织(肿瘤、血、肌肉)称重后,测量放射性计数,并计算每克组织百分注射剂量率(%ID/g)及肿瘤(T)/肌肉(M)、T/血液(B)放射性比值,应用流式细胞仪检测细胞凋亡百分率。结果 A、B 组小鼠肿瘤组织中凋亡细胞百分率[(11.16±3.83)%、(17.40±5.20)%]均明显高于 C 组[(2.11±1.51)%,F=56.414、94.748,P<0.001];A2、A3及 B 组肿瘤组织%ID/g 均明显高于 C2及 C3组(F 值分别为14.307、7.074、28.672,P 均<0.05),且与凋亡细胞百分率呈明显正相关(A2、A3组:r=0.813,P=0.002;B组:r=0.780,P=0.004),而 C 组肿瘤组织%ID/g 与凋亡细胞百分率无相关性(r=-0.238,P=0.229)。结论接受放疗或化疗后,小鼠肝癌组织对^(99)Tc^m-rh-Annexin V 的摄取明显增加,且其摄取程度与肿瘤组织内凋亡细胞量呈明显正相关;应用^(99)Tc^m-rh-Annexin V 显像可较准确地反映治疗后早期肿瘤组织细胞凋亡的状态。
