慢性乙型肝炎病理舌苔形成与唾液、血清h-EGF含量变化的关系

目的研究慢性乙型肝炎患者舌苔变化与唾液、血清表皮生长因子(h-EGF)含量变化及舌苔上皮细胞表皮生长因子受体(h-EGFR)的关系,探讨唾液血清h-EGF在乙肝病理舌苔形成中的作用。方法选取128例慢性乙型肝炎患者为研究对象,以15例其它消化系统疾病、15例其它系统疾病及15例健康人做对照组,放免法检测受试者唾液、血清h-EGF含量,免疫组化法检测舌苔上皮细胞h-EGFR表达,观察并记录病理舌象进行分析。结果与正常对照组相比,病理厚苔组唾液、血清h-EGF含量明显升高(P<0.01)。乙肝组白厚(腻)苔、黄腻苔舌h-EG FR表达增强,唾液、血清h-EG F含量明显升高,与其它对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论慢性乙肝病理舌苔的形成与唾液h-EGF含量的改变有关。

Anti-hEGFR轻、重链共表达及高表达细胞株快速筛选

为实现h EGFR全长抗体(anti-h EGFR)轻、重链共表达以及建立快速、高效筛选方法并获得共表达细胞株。采用分子克隆技术获得重链和轻链基因,将之连入peedual真核表达载体;经GS-Neo加压及流式细胞术筛选获得稳定表达细胞株;通过protein A亲和层析技术纯化出目标抗体;应用cck-8法、Annexin V/PI法以及q PCR技术检测anti-h EGFR对A431细胞增殖、凋亡影响。SDS-PAGE分析结果显示,纯化后抗体纯度为95.0%、分子质量约为150 ku。cck-8试验中不同浓度anti-h EGFR对A431细胞增殖均有极显著抑制作用,且与商品化Cetuximab效果相近;anti-h EGFR与Cetuximab均可诱导A431细胞产生凋亡,作用效果相近,均达极显著。全长抗体轻、重链的共表达,省去分别表达的重组过程,保证抗体天然结构;GS-Neo双加压结合流式筛选,实现阳性细胞株快速、高效分离;建立省时、高效抗体共表达平台,为抗体类药物真核构建及筛选提供新思路。

尼妥珠单抗不同给药时序对人肺癌细胞系的放射增敏作用

目的:探讨尼妥珠单抗不同加药时间对A549、Calu-6人肺癌细胞系的放射增敏作用及发生机制方法:采用人肺癌细胞系A549、Calu-6体外培养作为研究对象。Western blot法检测细胞系EGFR表达尼妥珠单抗不同给药分组:尼妥珠单抗放疗前24h组,放疗同时加药组,放疗后24 h加药组。MTT法及克隆形成法检测尼妥珠单抗对两种细胞系的细胞毒性作用和放射增敏作用;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡和细胞周期分布;Western blot法检测P21、Bax、Bcl-2、phospho-DNA-PK、Akt和pAkt相关蛋白的表达结果:尼妥珠单抗作用于A549细胞24h后的IC20值、IC50值分别为(1.13±0.37)、(24.78±1.25)μg/mL,放疗前、放疗中和放疗后给药的放射增敏比分别为2.02、1.77、1.39。放疗前加药组观察到更高的凋亡率和G_2/M期的阻滞同时,本组P21、Bax、Bcl-2、phospho-DNA-PK和pAkt表达的改变也较其它组明显尼妥珠单抗作用于Calu-6细胞24 h后的IC20值、IC50值分别为(2.42±1.26)、(51.15±2.41)μg/mL。放疗前,放疗中和放疗后给药的放射增敏比分别为1.23、0.99、0.91。放疗前加药组凋亡率和G_2/M期的阻滞比例最高。放疗前给药组P21、Bax、Bcl-2、phospho-DNA-PK和pAkt表达改变较其它组明显。结论:尼妥珠单抗对A549、Calu-6细胞均有抑制增殖作用、不同加药时序影响放射增敏效应。

胃癌组织EGFR和COX-2的表达与幽门螺杆菌感染关系

目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)、环氧化酶-2(COX-2)在胃癌组织中的表达及其相关性,并探究它们与幽门螺杆菌(H.pylori)感染的关系。方法:采用免疫组化EnVision两步法检测47例胃癌组织及相应的20例癌旁组织EGFR、COX-2的表达;用快速尿素酶诊断法和13C呼气试验两种方法检测胃癌患者H.pylori感染状况。结果:胃癌组织中EGFR、COX-2的阳性表达率均明显高于癌旁组织(P<0.01);EGFR、COX-2在胃癌中表达呈正相关(P<0.05)。有H.pylori感染的胃癌组织中EGFR、COX-2的阳性表达率较未感染的胃癌组织中高(P<0.01)。结论:EGFR、COX-2在胃癌组织中高表达且有相关性,H.pylori感染可能上调胃癌组织中EGFR、COX-2的表达。

anti-EGFR scFv-FTH1/AP1-FTH1纳米粒子的构建及其治疗哮喘小鼠的应用

采用基因工程方法分别将抗表皮生长因子受体(EGFR)的单链抗体(anti-EGFR scFv)和靶向白介素-4-受体(IL-4R)的AP1短肽分别修饰到铁蛋白重链亚基(FTH1)的N端,再通过蛋白表达、体外混合复性后成功制备了anti-EGFR scFv-FTH1/AP1-FTH1双靶向纳米粒子。结果表明:该纳米粒子能正确组装成铁蛋白的特征笼状结构,粒径为(13.2±1.3)nm。在哮喘小鼠模型中发现该纳米粒子能有效抑制哮喘多种症状,且在缓解气道高反应方面的效果优于单靶向anti-EGFR scFv-FTH1/FTH1纳米粒子。

H型高血压早期肾损伤患者UAlb/Cr、eGFR、SCr、Cys-C的表达及意义

目的研究H型高血压早期肾损伤患者尿清蛋白/肌酐(UAlb/Cr)、肾小球滤过率估计值(eGFR)、血肌酐(SCr)、胱抑素C(Cys-C)的表达及意义。方法对2015年7月至2016年6月该院收治的130例H型高血压患者进行分析。根据肾小球率过滤(GFR)分为高血压肾功能正常组62例(GFR≥90mL/L)和高血压肾损伤组73例(GFR<90mL/L)。使用胶乳免疫比浊法检测Cys-C水平,肌氨酸氧化酶法检测UAlb/Cr、SCr水平,MDRD公式计算eGFR。比较两组研究对象UAlb/Cr、eGFR、SCr、Cys-C表达情况,对UAlb/Cr、eGFR的危险因素进行Logistic回归分析。结果高血压肾功能正常组的UAlb/Cr、SCr、Cys-C水平低于高血压肾损伤组(P<0.05),eGFR水平高于高血压肾损伤组(P<0.05)。年龄、病程、同型半胱氨酸、舒张压(DBP)与UAlb/Cr存在密切关联性(P<0.05)。年龄、病程、同型半胱氨酸与eGFR存在密切关联性(P<0.05)。结论 UAlb/Cr、eGFR、SCr、Cys-C的水平和H型高血压早期肾损伤患者存在着密切关联性。

黄葵胶囊联合吗替麦考酚酯治疗IgA肾病的临床研究

目的探讨黄葵胶囊联合吗替麦考酚酯治疗IgA肾病的临床效果。方法选取2015年3月—2018年3月四川省甘孜州人民医院收治的IgA肾病患者81例,随机分成对照组(40例)和治疗组(41例)。对照组餐后2h口服吗替麦考酚酯胶囊,3粒/次,2次/d。治疗组在对照组基础上餐后30 min口服黄葵胶囊,5粒/次,3次/d。两组均连续治疗12周。观察两组患者临床疗效,同时比较治疗前后两组患者24 h尿蛋白定量(24 h UPQ)、尿沉渣红细胞(RBC)计数、血清肌酐(Cr)、肾小球滤过率(eGFR)值、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白介素-6(IL-6)、免疫球蛋白A(IgA)、补体C3、IgA/C3水平。结果治疗后,对照组和治疗组临床有效率分别为75.0%、92.7%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组24 h UPQ、尿沉渣RBC计数和血清Cr水平较治疗前均显著降低(P<0.05),eGFR值显著升高(P<0.05),且治疗组这些肾功能相关指标明显优于对照组(P<0.05)。治疗后,两组血清hs-CRP、IL-6、IgA水平和IgA/C3比值均显著下降(P<0.05),血清补体C3浓度显著上升(P<0.05),且治疗组hs-CRP、IL-6、IgA、补体C3、IgA/C3水平明显优于对照组(P<0.05)。结论黄葵胶囊联合吗替麦考酚酯治疗IgA肾病可明显改善患者肾功能,减轻炎性损伤,下调血中IgA表达水平,抑制补体系统异常激活,延缓肾脏损伤。