尼妥珠单抗不同给药时序对人肺癌细胞系的放射增敏作用

目的:探讨尼妥珠单抗不同加药时间对A549、Calu-6人肺癌细胞系的放射增敏作用及发生机制方法:采用人肺癌细胞系A549、Calu-6体外培养作为研究对象。Western blot法检测细胞系EGFR表达尼妥珠单抗不同给药分组:尼妥珠单抗放疗前24h组,放疗同时加药组,放疗后24 h加药组。MTT法及克隆形成法检测尼妥珠单抗对两种细胞系的细胞毒性作用和放射增敏作用;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡和细胞周期分布;Western blot法检测P21、Bax、Bcl-2、phospho-DNA-PK、Akt和pAkt相关蛋白的表达结果:尼妥珠单抗作用于A549细胞24h后的IC20值、IC50值分别为(1.13±0.37)、(24.78±1.25)μg/mL,放疗前、放疗中和放疗后给药的放射增敏比分别为2.02、1.77、1.39。放疗前加药组观察到更高的凋亡率和G_2/M期的阻滞同时,本组P21、Bax、Bcl-2、phospho-DNA-PK和pAkt表达的改变也较其它组明显尼妥珠单抗作用于Calu-6细胞24 h后的IC20值、IC50值分别为(2.42±1.26)、(51.15±2.41)μg/mL。放疗前,放疗中和放疗后给药的放射增敏比分别为1.23、0.99、0.91。放疗前加药组凋亡率和G_2/M期的阻滞比例最高。放疗前给药组P21、Bax、Bcl-2、phospho-DNA-PK和pAkt表达改变较其它组明显。结论:尼妥珠单抗对A549、Calu-6细胞均有抑制增殖作用、不同加药时序影响放射增敏效应。

尼妥珠单抗联合X射线照射对肺腺癌细胞A549的作用

目的:探讨表皮生长因子(Epidermal growth factor receptor,EGFR)受体抑制剂尼妥珠单抗(h-R3)联合X射线照射,对肺腺癌细胞系的A549细胞的作用。方法:肺腺癌细胞系A549细胞常规培养48 h后,分为对照组,单纯h-R3组,单纯照射组,h-R3联合照射组。h-R3组分别以终浓度0.5、5、50、100、1 000 μg/mL处理后继续培养24 h.照射组采用Varian-6MV直线加速器X射线照射2、4、8、10Gy后继续培养24 h;h-R3联合照射组在照射前以50 μg/mL浓度h-R3处理后继续培养24 h。收集各组细胞进行甲基噻唑基四唑(MTT)法检测。测定细胞的光密度值(Optical Density,OD),绘制细胞存活情况,并在倒置显微镜下观察细胞形态变化。结果:对照组A549细胞的OD值为0.7867±0.0764,不同浓度h-R3组的OD值分别为0.793 6±0.0846,0.823 4±0.0688,0.760 3±0.057 3,0.790 2+0.063 7,0.820 8±0.0770,与对照组比较无明显差异(P>0.05);不同剂量照射组OD值分别为0.246 0±0.023 1,0.330 8±0.0336,0.343 0±0.0281,0.3175±0.0307,明显低于对照组(P<0.05);50 μg/mL浓度h-R3联合不同剂量照射组OD值分别为0.192 3±0.014 6,0.231 8±0.020 6,0.293 0±0.024 3,0.193 7±0.021 8,与单纯照射组相比,其OD值均明显减少(P<0.01);h-R3联合照射组的A549细胞形态变化明显,存活细胞数明显少于单纯照射组。结论:尼妥珠单抗(h-R3)单独应用对A549细胞的生长增殖未见明显抑制作用,但增强了照射对A549细胞的生长抑制作用,其放射增敏的作用机制值得进行分子生物学水平的深入研究。

抗表皮生长因子受体单克隆抗体h—R3联合放疗治疗晚期鼻咽癌的Ⅱ期临床研究

目的 观察h-R3与放疗联合治疗晚期鼻咽癌的疗效和不良反应。方法 采用随机对照设计，共7个治疗中心参加了这项研究。符合入组标准的晚期鼻咽癌患者随机分为单放组和联合治疗组，两组患者均接受单纯根治性放射治疗，总剂量70～76Gy，联合治疗组同时给予h-R3治疗，剂量为100mg／次，静脉滴注，每周给药1次。结果 共137例患者入组，其中单放组67例，联合治疗组70例。联合治疗组治疗结束、治疗后第5周和第17周时的肿瘤完全缓解（CR）率，在全分析集（ITT集）分别为65．63％、87．50％和90．63％，在符合方案集（PP集）分别为67．21％、90．16％和93．44％，均显著高于单放组。联合治疗组治疗后第17周时，在ITT集和PP集的有效率均为100．00％，均显著高于单放组（90．91％和92．31％）。治疗前后两组间Karnofsky评分差异无统计学意义，联合治疗组患者体重恢复情况明显好于单放组。与h-R3相关的主要不良反应是发热（4．28％）、血压下降（2．86％）、恶心（1．43％）、头晕（2．86％）、皮疹（1．43％）。h-R3对血常规和生化指标无显著影响，并且未增加放疗的副作用。结论 h-R3联合放疗可显著提高晚期鼻咽鳞癌患者的疗效，药物不良反应轻微，对治疗晚期鼻咽癌有很高的临床应用价值。