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人骨形态发生蛋白6(hBMP6)在毕赤酵母中的分泌表达
被引量:
1
1
作者
米东
杨爽
+4 位作者
胡芬
张杰
乔玉欢
杜君
朱天慧
《南开大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期24-27,共4页
以重组质粒pcDNA6A-BMP6为模板PCR扩增hBMP6成熟肽cDNA编码序列,将该序列克隆到酵母分泌表达表达载体pPIC9K中.重组质粒pPIC9K-hBMP6经SacI酶切线性化,电击转化毕赤酵母GS115,PCR法筛选阳性转化子,利用梯度浓度G418筛选到七株高拷贝整...
以重组质粒pcDNA6A-BMP6为模板PCR扩增hBMP6成熟肽cDNA编码序列,将该序列克隆到酵母分泌表达表达载体pPIC9K中.重组质粒pPIC9K-hBMP6经SacI酶切线性化,电击转化毕赤酵母GS115,PCR法筛选阳性转化子,利用梯度浓度G418筛选到七株高拷贝整合的阳性转化子。用甲醇进行诱导表达,SDSPAGE及Western-blot检测结果表明hBMP6成熟肽以分子量约为34和18 kD两种不同糖基化修饰的单体形式存在,具有良好的免疫原性.
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关键词
毕赤酵母
BMP6
PPIC9K
分泌表达
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职称材料
题名
人骨形态发生蛋白6(hBMP6)在毕赤酵母中的分泌表达
被引量:
1
1
作者
米东
杨爽
胡芬
张杰
乔玉欢
杜君
朱天慧
机构
南开大学医学院分子遗传实验室
出处
《南开大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期24-27,共4页
基金
国家自然科学基金(30700471)
国家自然科学基金(30640029)
文摘
以重组质粒pcDNA6A-BMP6为模板PCR扩增hBMP6成熟肽cDNA编码序列,将该序列克隆到酵母分泌表达表达载体pPIC9K中.重组质粒pPIC9K-hBMP6经SacI酶切线性化,电击转化毕赤酵母GS115,PCR法筛选阳性转化子,利用梯度浓度G418筛选到七株高拷贝整合的阳性转化子。用甲醇进行诱导表达,SDSPAGE及Western-blot检测结果表明hBMP6成熟肽以分子量约为34和18 kD两种不同糖基化修饰的单体形式存在,具有良好的免疫原性.
关键词
毕赤酵母
BMP6
PPIC9K
分泌表达
Keywords
Pichia pastoris
hbmp6
pPIC9K
expression and secretion
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人骨形态发生蛋白6(hBMP6)在毕赤酵母中的分泌表达
米东
杨爽
胡芬
张杰
乔玉欢
杜君
朱天慧
《南开大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
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