LncRNA HCG18通过靶向miR-140-3p/PD-L1通路对鼻咽癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨长非编码(lncRNA)HCG18通过微小RNA-140-3p(miR-140-3p)/程序性死亡受体配体1(PD-L1)对鼻咽癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法 选择人鼻咽癌CNE2细胞、人正常鼻黏膜上皮细胞HNEpC细胞,将CNE2细胞分为HCG18组、pcDNA3.1组、sh-HCG18组、sh-NC组、miR-140-3p组、miR-NC组、miR-140-3p inhibitor组、Scramble组、HCG18+miR-NC组、HCG18+miR-140-3p组、miR-140-3p inhibitor+sh-NC组及miR-140-3p inhibitor+sh-PD-L1组。用CCK-8检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭及迁移能力,Western blot检测PD-L1蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测lncRNA HCG18、miR-140-3p及PD-L1 mRNA水平,生物信息学、双荧光素酶报告实验分析lncRNA HCG18、miR-140-3p及PD-L1的靶向关系。结果 CNE2细胞lncRNA HCG18、PD-L1蛋白及其mRNA表达水平高于HNEpC细胞,miR-140-3p表达水平低于HNEpC细胞(P <0.05)。上调lncRNA HCG18或下调miR-140-3p后CNE2细胞增殖、细胞迁移与侵袭能力增强,PD-L1蛋白、PD-L1 mRNA水平升高(P <0.05);下调lncRNA HCG18或上调miR-140-3p后CNE2细胞增殖、细胞迁移与侵袭能力降低,PD-L1蛋白、PD-L1 mRNA水平降低(P <0.05)。miR-140-3p与lncRNA HCG18、PD-L1均有靶向关系。上调miR-140-3p表达可逆转上调lncRNA HCG18对CNE2细胞增殖、迁移与侵袭的促进作用;沉默PD-L1可逆转下调miR-140-3p对CNE2细胞增殖、迁移与侵袭的促进作用。结论 过表达lncRNA HCG18可通过海绵化miR-140-3p,上调PD-L1表达,促进CNE2细胞增殖、迁移与侵袭。

茯苓多糖通过LncRNA HCG11/miR-539-3p调控肝癌细胞自噬、化疗耐药的机制

目的:探讨茯苓多糖(Poria cocos polysaccharide,PCP)对肝癌细胞增殖、自噬和化疗耐药的影响及机制。方法:对数期HepG-2/DDP细胞随机分组:对照组、PCP组(7.5、15、30μg/mL PCP)、shNC组、HCG11siRNA组(转染50 nmol/L HCG1干扰序列)、pcDNA组(转染2μg pcDNA)、pcDNA3.1-HCG11组(转染2μg pcDNA3.1-HCG11)、PCP组(30μg/mL)和PCP+pcDNA3.1-HCG11组(转染2μg pcDNA3.1-HCG11+30μg/mL PCP)。MTT检测肝癌细胞耐药情况和抑制率,Western blot检测Beclin-1、LC3Ⅰ和LC3Ⅱ水平,实时荧光定量PCR(Real time quantitative PCR,qRT-PCR)检测细胞株中LncRNA HCG11和miR-539-3p的水平,双荧光素酶报告实验检测LncRNA HCG11和miR-539-3p的靶向关系,裸鼠成瘤实验验证体内瘤体的瘤重、瘤体积及自噬相关蛋白水平。结果:4~128μg/mL PCP抑制HepG-2/DDP细胞增殖,7.5、15、30μg/mL的PCP能显著降低HepG-2/DDP细胞中MRP1、P-gp、Beclin-1、LC3Ⅱ的水平,下调HCG11水平,增加miR-539-3p的表达水平(P<0.01);与对照组比较,HCG11 siRNA组HepG-2/DDP细胞HCG11相对表达水平、IC_(50)(顺铂)、Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著降低,miR-539-3p水平和抑制率(顺铂)显著增加(P<0.01);与PCP组比较,PCP+pcDNA3.1-HCG11处理组HCG11相对表达水平显著升高,Belin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著增加(P<0.01);在不同浓度的顺铂处理下,与PCP组比较,PCP+pcDNA3.1-HCG11组抑制率显著降低(P<0.01);与PCP组比较,PCP+HCG11 shRNA组肿瘤体积和肿瘤重量显著降低,Belin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平显著下调(P<0.05)。结论:PCP能通过LncRNA HCG11/miR-539-3p调控耐药和自噬,并影响肝癌细胞的增殖。

HCG扳机次日血清HCG水平的影响因素及其与临床结局的关系

目的 探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕过程中人绒毛膜促性腺激素(HCG)扳机次日血清HCG水平的影响因素及其与临床结局的关系。方法 回顾性分析2020年1月至2022年12月在昆明市第一人民医院生殖遗传中心行IVF-ET助孕的253例不孕症患者资料,根据扳机次日血清HCG水平分为4组,A组:HCG<50 IU/L,8例;B组:50 IU/L≤HCG<100 IU/L,73例;C组:100 IU/L≤HCG<150 IU/L,90例;D组:HCG≥150 IU/L,82例。分析体重指数(BMI)、扳机日雌二醇、扳机日直径≥14 mm卵泡数对扳机次日血清HCG水平的影响,以及扳机次日血清HCG水平的高低与临床结局的关系。结果 BMI在各组间差异有统计学意义(P <0.05)。BMI与扳机次日血清HCG水平的线性回归系数-11.896(P <0.05),呈明显的负相关。4组获卵率、成熟(MII)卵率、正常受精率比较差异有统计学意义(P <0.05),余观察指标差异无统计学意义(P> 0.05),但优质胚胎率、胚胎种植率、临床妊娠率随HCG水平的升高有增加的趋势。结论 扳机后次日血清HCG水平对获卵率、MII卵率、正常受精率有显著的影响,可能影响优质胚胎率、临床妊娠率、胚胎种植率。BMI是影响扳机次日血清HCG水平的重要因素,应根据BMI的高低个性化的给予HCG扳机剂量。

肿瘤标志物CA125,CA199,HE4及血HCG在卵巢恶性肿瘤中的表达与临床进展研究

卵巢恶性肿瘤是威胁女性身心健康的常见多发病,在妇科肿瘤中死亡率最高,故探究卵巢恶性肿瘤诊断或判断预后的生物标志物或血清学标志物,成为临床工作的一项重要研究领域。已有较多有关研究及文献报道,讨论血清肿瘤标志物CA125,CA199,HE4在卵巢恶性肿瘤中的表达与研究进展。近年,血HCG对于卵巢恶性肿瘤的影响也受到了关注。实验发现,血HCG,血HCG的产物可作为诊断卵巢恶性肿瘤的依据。另有实验证明,血HCG可刺激离体的卵巢恶性肿瘤细胞生长。或者,血HCG与卵巢恶性肿瘤上的HCG受体结合,直接或间接调控其生长。

拮抗剂方案中HCG扳机日直径16~18 mm卵泡比例对PCOS患者IVF-ET结局的影响

目的探讨拮抗剂方案中人绒毛膜促性腺激素(HCG)扳机日直径16~18 mm卵泡比例对接受拮抗剂方案的多囊卵巢综合征(PCOS)患者体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的影响。方法回顾性分析2016年1月至2021年12月于南京医科大学附属妇产医院行IVF-ET助孕的PCOS患者的临床资料。根据HCG扳机日双侧卵巢直径16~18 mm卵泡比例以三分位法将患者分为三组,该比例<0.43为A组(262例),0.43~0.56为B组(267例),≥0.56为C组(247例)。比较三组一般临床资料、超促排卵周期情况、胚胎发育情况、体外受精周期后首次冻融胚胎移植(FET)情况以及妊娠、围产期结局。结果B组基础促黄体生成素(LH)、基础LH与基础促卵泡激素(FSH)比值显著高于A组和C组,差异有统计学意义(P<0.05)。A组促性腺激素(Gn)使用总量高于B组和C组,HCG扳机日雌二醇(E_(2))水平低于B组、C组,差异有统计学意义(P<0.05)。B组和C组获卵数、2原核(PN)数、卵裂数、囊胚形成数以及可移植胚胎数高于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。C组囊胚形成率高于A组和B组,高评分囊胚率高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。三组移植胚胎数、移植胚胎天数、内膜准备方案及内膜厚度比较差异无统计学意义(P>0.05)。三组胚胎着床率、生化妊娠率、临床妊娠率、流产率、活产率、妊娠期糖尿病发生率及妊娠期高血压发生率等比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论在拮抗剂方案中,HCG扳机日直径16~18 mm卵泡比例可反映卵母细胞发育潜能,当该比例≥0.56时可获得较好的获卵数、2PN数、卵裂数、囊胚形成数以及可移植胚胎数,在一定程度上可作为PCOS患者HCG扳机时机的参考指标,但该比例并不影响后续首次FET的妊娠结局。

LncRNA HCG18/miR-125b/TP53调控牙髓干细胞向神经元细胞分化的研究

目的旨在探讨LncRNA HCG18通过负调控miR-125b上调TP53对人牙髓干细胞(DPSCs)向神经元样细胞分化的影响。方法从正畸牙拔除术中获取的前磨牙中分离人DPSCs,将DPSCs诱导分化为神经元样细胞。qRT-PCR检测分化过程不同阶段HCG18、miR-125b的表达。在DPSCs细胞中转染oe-HCG18、pcTP53、miR-125b mimic及阴性对照,以qRT-PCR及WB方法检测各组Nestin、β-Ⅲtubulin、NSE的mRNA和蛋白,高尔基染色法评定各组树突棘密度以检测神经元发育情况。结果与未经诱导的DPSCs相比,DPSCs诱导分化组细胞的Nestin在分化期间先增高后降低,NSE、β-Ⅲtubulin及miR-125b表达水平逐渐升高,HCG18水平下调(P<0.05)。HCG18能抑制DPSCs向神经元样细胞分化,而miR-125b mimic能部分逆转HCG18对DPSCs神经分化的抑制,TP53能部分逆转miR-125b mimic对DPSCs神经分化的影响。结论HCG18能够通过负调控miR-125b激活TP53,抑制人DPSCs向神经元样细胞分化。

GnRH-a联合HCG对多囊卵巢综合征疗效

目的:分析促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)联合人绒毛膜促性腺激素(HCG)治疗多囊卵巢综合征(PCOS)患者的疗效,并探讨相关机制。方法:将80例PCOS患者分为两组,即观察组和对照组,均接受来曲唑治疗,对照组刺激排卵方案为单用HCG,观察组则为HCG+GnRH-a,观察用药后子宫内膜厚度、获卵数、成熟卵子数、优势卵泡数及血清促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、孕激素(P)水平,比较用药前后尿LH波动情况,并统计排卵人数、单个促排周期妊娠率、未破裂卵泡黄素化(LUFS)发生率、卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率。结果:观察组PCOS患者成熟卵泡数量、优势卵泡数量及血清FSH、LH含量均高于对照组(P<0.05),子宫内膜厚度、获卵数、血孕激素水平比较无统计学意义(P>0.05);观察组排卵率高于对照组,LUFS发生率、OHSS发生率均低于对照组(P<0.05)。结论:GnRH-a联合HCG治疗PCOS是可行的,能显著提高排卵率,且能控制OHSS等并发症发生率。

经阴道彩超联合血清ADAM12-S、β-HCG、孕酮检测在异位妊娠诊断中的应用

目的 分析经阴道彩超联合血清解整合素-金属蛋白酶12(ADAM12)、人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、孕酮检测在子宫异位妊娠(EP)诊断中的作用。方法 收集2018年1月至2023年1月四川省安岳县人民医院收治的94例EP患者(EP组),选取本院同期产检正常宫内妊娠孕妇90名(正常妊娠组)。对比两组阴道彩超及ADAM12-S、β-HCG、孕酮检测结果,分析经阴道彩超、ADAM12-S、β-HCG、孕酮与临床诊断结果的一致性,分析四者联合及单独检测对子宫异位妊娠诊断的效能。结果EP组子宫内膜厚度小于正常妊娠组,阻力指数值高于正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05);EP组ADAM12-S、β-HCG、孕酮水平均低于正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05);经阴道彩超、ADAM12-S、β-HCG、孕酮联合诊断与临床诊断结果一致性高(Kappa值=0.869);经阴道彩超检测对EP诊断灵敏度、特异度分别为85.12%、84.44%;ADAM12-S诊断EP分别为77.65%、81.11%;β-HCG诊断分别为71.77%、75.56%;孕酮诊断EP分别为74.46%、78.89%;四者联合诊断EP灵敏度、特异度分别为95.74%、91.11%,高于四者单独诊断。结论 阴道彩超、血清ADAM12-S、β-HCG、孕酮联合检测可有效提高对EP诊断效能,对于尽早诊断子宫异位妊娠具有重要意义。

PAPP-A、Free-β-HCG与子痫前期的相关性分析

目的 探讨妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)、游离β-人绒毛膜促性腺激素(Free-β-HCG)与子痫前期的相关性。方法 收集2021年1月至2023年1月548例有妊娠结局且孕期行血清学筛查孕妇的临床资料。依据是否发生子痫分为子痫前期组与正常孕妇组,分析两组孕妇一般资料及血清学筛查指标。结果 子痫前期组孕妇PAPP-A低于正常孕妇组,差异有统计学意义(P<0.05);而子痫前期组孕妇Free-β-HCG与正常孕妇组比较,差异无统计学意义(P<0.05);PAPP-A、Free-β-HCG用于筛查子痫前期的ROC曲线下面积为0.603、0.548。结论 血清学筛查指标PAPP-A与子痫前期密切相关,其可作为预测子痫前期发生的指标。

母体产前血清AFP、Freeβ-HCG、uE3检测对筛查胎儿染色体异常的临床价值

目的探讨产前母体血清甲胎蛋白(AFP)、游离β绒毛膜促性腺激素(Free-β-HCG)、雌三醇(uE3)检测对筛查胎儿染色体异常的临床价值。方法选取我院2021年9月—2023年3月100例高风险孕妇进行无创DNA检测,根据染色体状态分为阳性组、阴性组。对比2组孕12周时血清AFP、Freeβ-HCG、uE3及NT值水平,Logistic回归分析血清各指标对胎儿染色体异常的影响因素;ROC分析孕12周时血清各指标联合检测对胎儿染色体异常的预测价值。结果阳性组孕12周时血清AFP、uE3均低于阴性组、血清Freeβ-HCG及NT值均高于阴性组(P<0.05);分析认为孕12周时血清AFP、uE3为胎儿染色体异常的保护因素、Freeβ-HCG及NT值为胎儿染色体异常的危险因素(P<0.05);ROC分析孕12周时检测母体血清AFP、Freeβ-HCG、uE3水平对预测胎儿染色体异常的AUC分别为0.654、0.673、0.664,其联合检测对预测胎儿染色体异常的AUC为0.717。结论产前母体血清AFP、Freeβ-HCG、uE3联合检测在胎儿染色体异常的筛查中均具有较高的预测价值,3者联合检测的预测效能更高,可广泛应用于早期临床筛查中。

LncRNA HCG22在皮肤鳞癌组织和细胞中的表达及意义

目的 研究HCG22在皮肤鳞癌(SSCC)患者血清中的表达水平,探讨其对宫颈癌诊断及高危HPV感染预测的临床价值。方法 纳入2018年12月至2021年2月收治的125例SSCC患者,其中包括78例高危型HPV(HR-HPV)患者,同时选取76例健康人群作为对照。RT-qPCR检测SSCC患者和对照受试者血清中HCG22的表达,ROC曲线分析HCG22对SSCC的诊断效能。根据SSCC患者血清中HCG22表达水平的中位值将SSCC患者分为HCG22低表达组和高表达组,分析其与SSCC患者临床指标的相关性。分析HCG22与SSCC患者的病理指标的相关性。Logistics多因素回归分析HCG22是否与高危型HPV感染SSCC具有独立相关性。结果 和健康受试者相比,SSCC患者血清中HCG22表达显著降低,其诊断SSCC的ROC曲线下面积(area under the curve, AUC)为0.9394,截点值为0.3850,灵敏度88.18%,特异度92.00%。HR-HPV阳性SSCC患者血清HCG22表达显著高于HR-HPV阴性SSCC患者,HCG22诊断SSCC为HR-HPV阳性的ROC曲线下面积为0.7381,截点值为0.3150,灵敏度83.33%,特异度68.09%。HCG22表达水平与临床分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移、浸润肌层深度、高危型HPV(HR-HPV)感染显著相关(P<0.05),且HCG22与皮肤鳞癌高危型HPV感染具有独立相关性(P<0.05)。结论 HCG22在高危型HPV感染皮肤鳞癌患者血清中低表达,其与皮肤鳞癌高危型HPV感染具有独立相关性,对皮肤鳞癌高危型HPV感染具有一定的辅助诊断价值。

LncRNA HCG18影响鼻咽癌细胞PD-L1表达及CD8^(+)T细胞的杀伤功能研究

目的:探究LncRNA HCG18调控CD8^(+)T细胞抗鼻咽癌细胞的功能及机制。方法:qRT-PCR检测鼻咽癌组织及癌旁组织HCG18表达以及人鼻黏膜上皮细胞HNEpC和人鼻咽癌细胞系CNE1、CNE2、HONE-1、HNE-2中HCG18表达。CNE1细胞分为si-HCG18组、si-NC组、si-HCG18^(+)PD-L1组,HNE-2细胞分为HCG18组、Vector组和HCG18^(+)sh-PD-L1组,上述各组CNE1细胞和HNE-2细胞分别与CD8^(+)T细胞共孵育24h(si-HCG18^(+)CD8^(+)T组、si-NC+CD8^(+)T组、si-HCG18^(+)PD-L1+CD8^(+)T组、HCG18^(+)CD8^(+)T组、Vector+CD8^(+)T组和HCG18^(+)sh-PD-L1+CD8^(+)T组),酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测共孵育体系中INF-γ、TNF-α、IL-2浓度,细胞毒性试剂盒检测肿瘤细胞裂解率。Western blot检测PD-L1蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证HCG18与miR-20b-5p的靶向关系,miR-20b-5p与PD-L1的靶向关系。结果:鼻咽癌组织中HCG18表达显著高于癌旁组织,CNE1、CNE2、HONE-1、HNE-2细胞中HCG18表达均显著高于HNEpC细胞(P<0.05)。si-HCG18组CNE1细胞中PD-L1表达显著低于si-NC组(P<0.05),HCG18组HNE-2细胞PD-L1表达显著高于Vector组(P<0.05),相比于si-NC+CD8^(+)T组,si-HCG18^(+)CD8^(+)T组共孵育体系中INF-γ、TNF-α、IL-2浓度显著增加(P<0.05),CNE1细胞裂解率显著增加(P<0.05),相比于si-HCG18^(+)CD8^(+)T组,si-HCG18^(+)PD-L1+CD8^(+)T组共孵育体系中INF-γ、TNF-α、IL-2浓度显著降低(P<0.05),CNE1细胞裂解率显著降低(P<0.05)。相比于Vector+CD8^(+)T组,HCG18^(+)CD8^(+)T组共孵育体系中INF-γ、TNF-α、IL-2浓度显著降低(P<0.05),HNE-2细胞裂解率显著降低(P<0.05),相比于HCG18^(+)CD8^(+)T组,HCG18^(+)sh-PD-L1+CD8^(+)T组共孵育体系中INF-γ、TNF-α、IL-2浓度显著增加(P<0.05),HNE-2细胞裂解率显著增加(P<0.05)。miR-20b-5p为HCG18靶基因,PD-L1为miR-20b-5p靶基因。结论:HCG18上调鼻咽癌细胞PD-L1表达并且抑制CD8^(+)T细胞的抗肿瘤活性。

HCG对人子宫内膜细胞VEGF表达调控的初步研究

目的:探讨人子宫内膜细胞体外培养模型中,HCG对VEGF表达的调控作用和机制。方法:采用机械分离加梯度离心法分别获得腺上皮与基质细胞进行体外原代细胞混合培养;实验设对照组、HCG组(对照组使用常规DF/12培养液提取总蛋白;HCG组在DF/12培养液中加终浓度为20U/ml HCG)。采用Q-PCR测定子宫内膜细胞中VEGF mRNA表达水平。免疫组化或荧光法进行LH-R和VEGF蛋白质定位表达,Western blot法测定蛋白半定量表达。结果:子宫内膜腺上皮与基质细胞均存在LH/HCG-R和VEGF蛋白表达。HCG对子宫内膜细胞VEGF蛋白的峰值作用时间点为24h。与对照组相比,20IU/ml HCG体外干预24h后,子宫内膜细胞VEGF mRNA和蛋白质水平均显著上调(Q-PCR:1 vs 2.0132±0.6024;WB:0.4069±0.1897 vs 0.7781±0.1651)(P均<0.05)。结论:成功建立了人子宫内膜细的体外培养模型,并完成HCG的干预实验。HCG与HCG/LH-R结合后上调子宫内膜细胞VEGF的基因和蛋白质水平表达。

促甲状腺素、25-羟基维生素D水平、TPOAb、HCG在妊娠期糖尿病合并亚临床甲减患者中的表达及临床意义

目的:探讨促甲状腺激素(TSH)、25-羟基维生素D[25(OH)D]、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、绒毛膜促性腺激素(HCG)在妊娠期糖尿病(GDMD)合并亚临床甲减(SCH)患者中的表达及临床意义。方法:选取本院2023年5月至2024年5月于本院就诊的186例GDM患者作为观察组,根据是否合并SCH分为合并组、单纯GDM组,选择同期健康体检的150例孕妇作为对照组。采集研究对象基线资料,采用电化学发光免疫分析仪检测孕晚期的TPOAb、TSH,HCG水平采用酶联免疫法检测25(OH)D水平。比较三组临床特征及实验室指标比较;采用多元线性回归分析GDM患者发生SCH的影响因素;采用Pearson分析SCH患者TSH、25(OH)D、TPOAb、HCG之间相关性;对比三组不良妊娠结局。结果:186例GDM患者中,合并SCH组73例(39.25%),单纯GDM组113例(60.75%)。三组FPG、2hPGHbAlc、TSH、25(OH)D、TPOAb、HCG对比有差异(P<0.05)。线性回归分析结果显示TSH、25(OH)D、TPOAb、HCG为GDM患者发生SCH的独立影响因素(P<0.05)。Spearman分析显示,TSH、25(OH)D、TPOAb、HCG两两之间均存在相关性(P<0.05)。三组剖宫产、产后出血、胎膜早破、早产发生率对比有差异(P<0.05)。结论:GDM合并SCH患者不良妊娠结局风险较高,而TSH、25(OH)D、TPOAb、HCG可用于GDM合并SCH疾病诊断及鉴别,并为不良妊娠结局预防提供方向。

孕早期产前筛查指标PAPP-A、F-βhCG的MoM值变化与不良妊娠结局的相关性

目的探讨孕早期血清产前筛查指标妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)、游离β人绒毛膜促性腺激素(F-βhCG)的中位数倍数(MoM)值变化与不良妊娠结局的相关性。方法回顾性分析2021年1月4日—2022年12月20日在湖南省人民医院生殖医学中心进行早孕期产前筛查1447例孕妇,排除双胎、拒绝随访及有家族病史或孕前体检有异常的孕妇,最终将在孕9~13^(+6)周进行产前筛查的871例孕妇选为研究对象,比较不同妊娠结局孕妇的PAPP-A、F-βhCG的MoM值差异;并将PAPP-A、F-βhCG的MoM值的正常异常范围分组,正常范围为PAPP-A MoM≥0.5,0.25≤F-βhCG MoM≤2,异常范围为PAPP-A MoM<0.5,F-βhCG MoM<0.25,F-βhCG MoM>2,比较不同组间不良妊娠结局的发生情况。结果流产、早产、先兆子痫、妊娠期高血压的PAPP-A MoM值低于正常妊娠孕妇(P<0.05);流产、甲状腺功能减退症的F-βhCG MoM值低于正常妊娠孕妇(P<0.05),产后出血的F-βhCG MoM值高于正常妊娠孕妇(P<0.05);PAPP-A MoM<0.5组不良妊娠结局的发生率明显高于PAPP-A MoM≥0.5组(P<0.05),F-βhCG MoM<0.25组不良妊娠结局的发生率明显高于0.25≤F-βhCG MoM≤2组(P<0.05);PAPP-A MoM值与分娩孕周呈正相关(r=0.07,P=0.045)。结论孕早期血清产前筛查指标PAPP-A MoM值变化在预测流产、早产、先兆子痫、妊娠期高血压及分娩孕周方面有一定意义;F-βhCG MoM值变化在预测流产、产后出血和甲状腺功能减退症方面有一定的意义。

hCGβ与鼠补体片段C3d的连接及其在真核细胞中的表达

目的:构建含新型分子佐剂C3d的hCGβ真核细胞表达质粒,以提高hCGβ的免疫原性。方法:用pcr方法在hCGβ cDNA3’端引入BamHI位点,然后利用酶切位点的互补性,与C3d3 cDNA连接,构建了pBS-hCGβ-C3d3质粒,最后插入真核细胞表达质粒pcDNA3的CMV启动子下游,以产生pcDNA3-hCGβ-C3d3。将此融合质粒转染瞬时表达系统 COS-7细胞表达相应产物。其无血清培养上清液用免疫亲和层析法纯化重组蛋白。Raji细胞免疫细胞化学技术鉴定表达产物准确性。结果:真核细胞瞬时表达系统 COS-7细胞经转染了pcDNA3-hCGβ-C3d3质粒后,可分泌hCGβ重组蛋白。1.0×105个 COS-7细胞转染了pcDNA3-hCGβ-C3d3质粒,经72h培养后,可产生152ng的hCGβ重组蛋白,且表达量随时间延长而增高。在有血清培养基中的分泌量明显高于无血清培养基。同时,用Raji细胞免疫细胞化学分析表达产物显示,纯化的表达产物既有C3d结合受体活性,亦有hCGβ抗原性。结论:利用新型分子佐剂C3d与hCGβ的连接,构建了pc-DNA3-hCGβ-C3d3真核细胞表达质粒,为提高hCGDNA免疫避孕疫苗的免疫原性及抗生育作用奠定了基础。

hCGβ-C3d3融合蛋白免疫BALB/c小鼠及其抗血清对hCG诱导鼠子宫增重的抑制效应

目的:通过分子佐剂C3d3增强hCGb避孕疫苗的免疫原性。方法:采用分子生物学技术以phCMV1为载体分别构建分泌型、带有6个组氨酸纯化标签的真核表达质粒phCMV1-6His-hCGb-C3d3和phCMV1-6His-hCGb,在CHO细胞中获得稳定、高效表达的重组蛋白,并用镍柱和凝胶过滤层析对其进行分离、纯化。分别用hCGb-C3d3融合蛋白和单用hCGb间隔4周两次免疫生育期雌性BALB/c小鼠,ELISA测定血清中抗hCGb抗体滴度,并对各组小鼠产生的抗血清拮抗hCG诱导的小鼠子宫增重效应进行比较。结果:C3d3使hCGb蛋白疫苗的免疫原性增强1 995倍,hCGb-C3d3融合蛋白免疫小鼠产生的抗血清具有很强的抑制小鼠子宫增重作用。结论:通过分子佐剂C3d3可以大幅提高机体对hCGb的体液免疫应答能力,hCGb-C3d3融合蛋白免疫小鼠产生的抗血清对hCG的生物学作用具有更强的抑制效应。

血清HCG和孕酮水平检验在早期先兆流产中的诊断价值

目的探究血清人绒毛膜促性腺激素(HCG)和孕酮水平检验对早期先兆流产的临床诊断价值。方法选取80例早期先兆流产患者为观察组,同期80例健康孕妇为对照组,两组均进行血清HCG和孕酮水平检验,对比分析诊断效能。结果观察组血清HCG检出率为88.75%,孕酮水平检出率是91.75%,均低于联合检出率的98.75%(P<0.05),而血清HCG和孕酮水平检出率无统计学差异(P>0.05)。观察组患者血清HCG和孕酮水平低于对照组(P<0.05)。结论血清HCG和孕酮水平检验都能够检出早期先兆早产,但联合运用效果更佳,能提高诊断效能,减少临床误诊和漏诊,值得临床推广与应用。

PMSG+HCG的定时输精方案在经产母猪中试验研究

为探索定时输精中PMSG+HCG对断奶母猪受胎率、产仔数以及母猪分娩后断奶发情是否存在的影响,试验将120头经产二元杂母猪,胎次在2胎及以上,且体况良好、无阴道炎症的母猪随机分成2组,每组60头。对照组不进行激素处理,采用自然发情鉴定后配种;试验组采用采用PMSG+HCG定时输精程序处理,统计分析2组的参繁母猪受胎率、产仔数和断奶后发情情况。结果表明,对照组的参繁受胎率为78.33%,试验组参繁受胎率为91.67%,2组间的参繁受胎率差异显著。对照组分娩总仔数为581头,窝均产仔数(12.36±3.40)头,试验组分娩总仔数为691头,窝均产仔数(12.79±3.38)头,2组间的窝均产仔数差异不明显,但试验组窝均产仔数t值大于对照组,说明试验组在窝均产仔数比对照组存在优势。对照组断奶后自然发情率为88.89%,试验组断奶后自然自情率为90.38%,试验组与对照组均无明显差异。

应用FSH及HCG药物对乏情后备母猪及断奶母猪的疗效试验

为了探索在母猪定时输精技术中激素类药物的使用对于母猪生产成绩的影响,该文应用促卵泡生成素(FSH)及绒毛膜促性腺激素(HCG)药物对乏情后备母猪及断奶母猪进行疗效试验。试验共分2个组,A组为药物处理组,B组为空白对照组,A组给予断奶后母猪或乏情后备母猪烯丙孕素饲喂结束后的24h、96h分别肌注FSH药物与HCG药物;B组仅饲喂烯丙孕素,然后进行定时输精。配种结束后在同一条件下饲养管理,最终观察母猪的受胎情况和分娩情况。试验结果表明,激素处理组的乏情后备母猪的配种受胎率提高3.26%,窝均总仔提高0.35头,窝均健仔提高0.13头;激素处理组的断奶母猪配种率提高7.14%,配种受胎率提高2.86%,窝均总仔提高1.18头,窝均健仔提高1头。从本试验看,乏情后备母猪及断奶母猪使用FSH与HCG处理,可获得好的生产成绩,该技术可在种猪场推广应用。