纸纤维固定木瓜蛋白酶的研究及应用

利用纸纤维为载体,制备高活性的固定化木瓜蛋白酶并应用于抗HCG抗体的水解.利用戊二醛交联法,制备固定化木瓜蛋白酶,并通过一系列优化,得到最佳固定化条件,包括pH﹑给酶量﹑温度﹑戊二醛体积分数,将制备的固定化木瓜蛋白酶应用于抗HCG抗体水解并制备F(ab′)2片段.研究表明:反应温度为40℃时,固定化酶在pH 5.0,0.01mol/L的醋酸缓冲液条件下,给酶量为46mg/g载体,戊二醛体积分数为0.01%时,固定化酶的酶活达到最高19 250U/g,相对于优化前1 940U/g提高了近10倍,成功应用于抗HCG抗体水解制备F(ab′)2片段:经SDS-PAGE电泳检测,F(ab′)2片段达到电泳纯.ELISA反应检测表明:片段仍保留较高的活性,效价为1∶12 000.

抗滋养细胞膜抗体、人绒毛膜促性腺激素抗体与体外受精-胚胎移植结局的关系

目的探讨抗滋养细胞膜抗体(ATA)、人绒毛膜促性腺激素(hCG)抗体对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠结局的影响。方法选择2002年1月至2007年7月在本生殖医学中心由于不明原因性不育、女方输卵管因素和(或)男方轻度少弱精子症因素不育而接受IVF-ET治疗的妇女140例,其中持续妊娠妇女65例作为对照组,反复种植失败31例、生化妊娠丢失26例及临床妊娠丢失18例妇女作为研究组。比较研究组和对照妇女各不育因素所占比例;血清ATA、抗hCG抗体阳性率。结果研究组中不明原因性不育明显高于对照组(P<0.01);研究组ATA阳性率显著高于对照组(P<0.01);研究组中生化妊娠组和临床妊娠丢失组hCG抗体阳性率无显著性差异(P>0.05),但显著高于对照组和反复种植失败组(P>0.05)。结论自身免疫异常所致的ATA可干扰整个妊娠过程,hCG抗体的存在能增加IVF-ET临床妊娠流产率和生化妊娠流产率。