D(E/')TECTION DE LA MUTATION DU G(E/')NE HMLH1 DANS LE CANCER COLO-RECTAL PAR(E/')LECTROPHOR(E/')SE CAPILAI-LRE ASSOCI(E/')E (A/') LA FLUORESCENCE LASER-INDUITE

Objectif L＇objectif de ce travail est d＇etablir une méthode d＇analyse du polymorphisme de la conformation monochaine （ PCMC ）, capable de détecter la mutation ponctuelle du géne hMLH1 dans le cancer colique en utilisant l＇ l ctrophor se capillaire associée a it la fluorescence laser-induite （FLI-EC）. Méthodes Les exons 12 du gdne hMLH1 du sang périphérique de 42 patients de cancer colo-rectal sporadique et 20 sujets sains témoins sont amplifies par la PCR. Le PCMC des produits du PCR est analysé par FLI-EC. Les échantillons anormaux ont été confirmés par séquen age EC. Les effets de la concentration du milieu （ LPA ） , de la temperature de séparationéet du voltage de séparation sur le comportement de EC ont été aussi etudiés. Résultats L＇analyse de PCMC par la methode FLI-EC a retrouvé une mutation hétérozygote chez 4 des 42 patients. La mutation ponctuelle de Tl l51A a été objectivée par la séquen age EC de ces échantillons, aucune mutation n＇a été retrouvée chez les 20 sujets sains témoins. La séparation des pics d＇ADN monochainaux a été facilitée par une légdre augmentation de la concentration de LPA （4%-6%）, une légdre baisse de la temperature de séparation （20℃） et une légére élévation du voltage de séparation （9kV）. Conclusion Une concentration adequate de LPA, une temperature de séparation appropriée et un voltage de séparation bien approprié améliorent considérablement l＇efficacité du FLI-EC. L＇application de cette méthode pour détecter la mutation ponctuelle du géne hMLH1 est d＇une rapiditY, d＇une efficacité, et d＇uneéreproductivit consid rables. Cette méthode de réalisation facile reste trés prometteur pour le dépistage rapide et massive des mutations génétiques.

Clinicopathological features of typical and nontypical hereditary non-polyposis colorectal cancer and their germline mutation of hMLH_1 and hMSH_2

Objective To study the clinicopathological features of the Chinese hereditary non-polyposis colorectal cancer and its germline mutation of hMLH1 and hMSH2. Methods Thirteen typical Chinese hereditary non-polyposis colorectal carcinoma (HNPC) C kindreds and 19 nontypical HNPCC families were registered and followed up. The germline mutation of the hMLH1 and hMSH2 of 12 index cases of 6 typical and 6 nontypical NHPCC were screened by PCR-SSCP. Samples with abnormal mobility were sequenced direcdy. Results The average age of typical HNPCC was 47, no difference existed between sexs. Location of the tumors of typical HNPCC represented 44.7% on the right half colon and non-typical HNPCC 65. 8% on the rectum. The rate of the metachronos cancer was 11.5%. The 3 - , 5 - and 10 -year survival rate was 64. 0%, 45. 3% and 31. 2% respectively. Among 12 cases, 8 showed abnormal mobility. Except for an intron polymorphinism, six exons abnormalities were found in 5 of 12 proband. Sequencing showed 4 missense,7

Infrequent microsatellite instability mutator phenotype in Chinese hepatocellular carcinomas

Objective: In order to elucidate the molecular mechanisms that might be responsible for hepatocarcinogenesis, we examined microsatellite instability (MSI), mismatch repair gene hMLH1 mutation and methylation in hepatocellular carcinoma. Methods: Fifty-two cases of surgically resected sporadic hepatocellular carcinoma (HCC) were studied. hMLH1 mutation was examined by two-dimensional electrophoresis and DNA sequencing; hMLH1 methylation was determined by methylation-specific PCR(MSP); and MSI at BAT26 was analyzed by PCR-based methods. Results: MSI at BAT26 was found in 3 of 52 cases (5.8%) of the tumors analyzed. No hMLH1 mutation or hypermethylation was found in these 52 cancerous tissues. No correlation existed between MSI and clinico-pathological characteristics of the patients. Conclusion: Our results suggest that MSI at BAT26 is rarely associated with carcinogenesis of chinese HCC. The genesis of sporadic HCC may occur in an alternative pathway that is probably different from MSI pathway.