荒漠植物花花柴HTR基因家族表达模式及其增强细菌抗逆性分析

【目的】荒漠植物花花柴具有耐盐碱、耐高温等优异的广谱抗逆性,是新疆珍贵的天然抗逆植物种质资源。挖掘花花柴耐极端温度和耐盐基因,系统分析其在高温、低温和高盐胁迫下表达模式以及抗逆性,对于利用该基因增强作物抗逆性、稳产性、丰产性,促进荒漠植物基因资源的发掘利用都具有重要意义。【方法】采用盆栽花花柴幼苗进行不同时长的高温(45℃)、低温(4℃)和高盐(400 mmol/L Na^(+))胁迫处理,采集幼苗的根、茎、叶组织,利用RT-PCR等技术克隆花花柴HTR基因家族(KcHTRs),分析KcHTRs基因表达情况,同时通过原核表达体系分析其抗逆性以及表达蛋白质的最佳诱导条件。【结果】(1)从荒漠植物花花柴高温转录组数据中筛选并克隆了KcHTR基因家族的7个成员,通过构建原核表达载体并诱导表达,明确其cDNA长度在708~789 bp之间,所表达的蛋白质分子量在27~29 kD之间;(2)发现在大肠杆菌BL21最适生长温度37℃下该家族蛋白的最佳诱导表达体系:OD600为0.8,IPTG诱导浓度为0.5 mmol/L,诱导时间为8~10 h;(3)通过对重组大肠杆菌的模拟高温、低温、盐胁迫处理,结果显示KcHTRs能够在一定程度上增强宿主对高温、低温和高盐的耐受性。【结论】KcHTRs具有优异的广谱抗逆性,主要具有耐极端温度的抗逆性,且能够积极响应花花柴植株应对逆境胁迫。

茵陈蒿汤对代谢相关脂肪性肝病小鼠“肠TPH1-肝HTR2A轴”的影响

目的基于肠TPH1-肝HTR2A轴探讨茵陈蒿汤防治MAFLD的作用机制。方法24只C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、茵陈蒿汤组,每组8只。模型组、茵陈蒿汤组小鼠采用高脂饲料喂饲,12周后,茵陈蒿汤组给予茵陈蒿汤灌胃,每日1次,连续4周。采用HE染色和油红O染色观察肝脏组织病理变化,检测血清HDL-C、LDL-C、TC、TG、AST、ALT和5-HT含量,肝脏TC、TG、DAG、PLC含量,小肠TPH1、SERT及肝脏HTR2A、SREBP-1c、GPAT1、FASN mRNA水平,小肠TPH1、SERT及肝脏HTR2A、PKC-ε、P-PI3K、P-AKT、P-mTOR、SREBP-1c、GPAT1、FASN蛋白表达。结果对照组肝细胞排列整齐,无明显脂肪变性;模型组肝细胞体积肿胀,有明显脂肪变性;与模型组比,茵陈蒿汤组肝细胞脂肪变性显著减少。相较于对照组,模型组肝脏脂质沉积显著升高,茵陈蒿汤显著改善肝脏脂质沉积。与对照组比,模型组肝脏TG和TC水平显著升高(P<0.05);血清AST、ALT、HDL-C、LDL-C、TG、TC水平显著升高(P<0.05);血清5-HT及肝脏DAG、PLC水平显著升高(P<0.05);小肠TPH1及肝脏HTR2A、SREBP-1c、GPAT1、FASN mRNA表达水平显著升高,小肠SERT mRNA表达水平显著降低(P<0.05);小肠TPH1及肝脏HTR2A、PKC-ε、P-PI3K、P-AKT、P-mTOR、SREBP-1c、GPAT1、FASN蛋白表达水平显著升高,小肠SERT蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组比,茵陈蒿汤组肝脏TG和TC水平显著降低(P<0.05);血清AST、ALT、HDL-C、LDL-C、TG、TC水平显著降低(P<0.05);血清5-HT及肝脏DAG、PLC水平显著降低(P<0.05);小肠TPH1及肝脏HTR2A、SREBP-1c、GPAT1、FASN mRNA表达水平显著降低,小肠SERT mRNA表达水平显著升高(P<0.05);小肠TPH1及肝脏HTR2A、PKC-ε、P-PI3K、P-AKT、P-mTOR、SREBP-1c、GPAT1、FASN蛋白表达水平显著降低,小肠SERT蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论茵陈蒿汤可能通过肠TPH1-肝HTR2A轴调节肝脏TG合成,从而抑制MAFLD发生发展。

荒漠植物花花柴耐高温相关基因HTR的克隆及表达模式分析

非生物胁迫是导致作物减产甚至植株死亡的重要因素。在所有非生物胁迫因子中,温度是影响植物生长发育的重要因子之一。本研究从荒漠植物花花柴高温胁迫转录组数据中筛选出HTR基因家族,为深入探究该基因家族的结构和功能,克隆了花花柴KcHTRs基因家族的8个成员,重点分析了KcHTR3、KcHTR4基因在高温胁迫下的表达模式。结果发现KcHTR3全长780 bp,编码259个氨基酸,KcHTR4全长771 bp,编码256个氨基酸,KcHTR3、KcHTR4于45℃处理4 h时,在叶器官中表达量最高,两个基因的表达均呈高-低-高的趋势,表明植物在应对高温胁迫时表现出耐受-响应-适应的能力,这为荒漠植物抗逆基因资源的挖掘与利用提供了研究基础。

HMGA1对TGF-β1诱导HTR-8/SVneo细胞上皮间质转化的影响

目的研究高迁移率蛋白A1(HMGA1)对HTR-8/SVneo细胞中转化生长因子β1(TGF-β1)诱导所致上皮间质转化(EMT)过程中的作用。方法将HMGA1的小分子干扰RNA(siRNA)转染进人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo,将细胞分为空白对照组、阴性对照+lipofectamine 3000组、lipofectamine 3000组、阳性对照+lipofectamine 3000组、HMGA1 SiRNA-1+lipofectamine 3000组、HMG1 SiRNA-2+lipofectamine 3000组、HMG1 siRNA-3+lipofectamine 3000组,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹法,检测各组的HMGA1基因和蛋白表达,筛选出沉默效率最佳的siRNA;TGF-β1诱导HTR-8/SVneo发生EMT,研究TGF-β1对EMT过程的影响;使用筛选后的siRNA与TGF-β1共同作用,检测HMGA1、N-cadherin、E-cadherin的表达情况;加入TGF-β1用于诱导细胞,探究PI3K/AKT和NF-κB通路相关蛋白的表达状况;利用PI3K/AKT和NF-κB通路抑制剂阻断通路,研究HMGA1在通路介导下EMT过程的作用机制。结果HMGA1 siRNA-1组沉默效果最佳,可用于后续实验;与空白对照组相比,TGF-β1组E-cadherin蛋白表达水平降低,N-cadherin蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);干扰HMGA1表达可以阻止TGF-β1诱导HTR-8/SVneo细胞发生EMT;TGF-β1诱导后,通路相关蛋白p-AKT、AKT、NF-κB表达量均增加,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);加入通路抑制剂后,HMGA1的表达量主要受PI3K/AKT通路的影响,而NF-κB通路的抑制剂对HMGA1的影响较小。结论HMGA1在TGF-β1诱导的HTR-8/SVneo细胞EMT过程中发挥着重要作用,而且TGF-β1主要通过PI3K/AKT通路调控HMGA1的表达,进而促进细胞发生EMT。

PEG10对人类绒毛滋养层细胞系HTR-8/Svneo细胞增殖和凋亡影响的初步研究

目的初步研究父系表达印记基因PEG10低表达对人类绒毛滋养层细胞系HTR-8/Svneo细胞增殖和凋亡的影响。方法构建4组PEG10干扰载体[si-898、si-1854、si-1951及对照(si-NC)],然后转染到HTR-8/Svneo细胞株并进体外培养,si-NC组为对照组。流式细胞术检测HTR-8/Svneo细胞的细胞周期和细胞凋亡,qRT-PCR检测Cytochrome C、Caspase3、Bid、Bak、Bax及Cyclin D1 mRNA的表达情况,MTT法检测细胞增殖活力。结果与对照组比较,转染3组siRNA片段均能显著抑制PEG10基因的表达(P<0.05),其中si-898、si-1854抑制作用更显著(P<0.01)。转染si-898或si-1854的HTR-8/Svneo细胞Cytochrome C、Caspase3、Bid、Bak、Bax mRNA的表达显著升高(P<0.01),而Cyclin D1 mRNA的表达显著降低(P<0.05),并且细胞凋亡率也显著高于对照组(P<0.05)。MTT法检测细胞增殖活力显示,与对照组相比,干扰PEG10基因后细胞在48 h和72 h的增殖活力也显著降低(P<0.05)。流式细胞术检测显示,干扰PEG10基因后细胞周期阻滞在G1期。结论干扰PEG10基因能诱导人类绒毛滋养层细胞系HTR-8/Svneo细胞凋亡,降低细胞增殖活力,阻止细胞周期从G1期到S期的转化进程,导致细胞周期阻滞。

阿司匹林对缺氧诱导人HTR-8/SVneo滋养细胞凋亡及sFlt-1、HIF-1α表达的影响

目的:探讨阿司匹林对缺氧诱导人HTR-8/SVneo滋养细胞凋亡及可溶性类fms酪氨酸激酶-1(sFLT-1)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的影响。方法:人HTR-8/SVneo滋养细胞分为正常对照组、缺氧模型组(2%O_(2)、5%CO_(2)、93%N_(2))、阿司匹林低(0.05mmol/L)、中(0.1mmol/L)、高剂量组(0.2mmol/L);培养结束后,MTT法测定细胞活力,流式细胞仪测定细胞凋亡水平及细胞周期,血清培养基基质胶培养测定细胞血管形成能力,RT-PCR法及蛋白印记法测定细胞sFlt-1、HIF-1α水平。结果:缺氧模型组OD值、存活率、血管形成能力、HIF-1α mRNA和蛋白表达均低于正常对照组及阿司匹林各剂量组,但随着阿司匹林剂量增上述各指标逐渐降低;缺氧模型组凋亡率、G1期、sFlt-1 mRNA和蛋白表达均高于正常对照组和阿司匹林各剂量组,但随着阿司匹林剂量增加凋亡率、G1期、sFlt-1 mRNA和蛋白表达逐渐升高(均P<0.05)。结论:低剂量阿司匹林可促进缺氧环境下HTR-8/SVneo细胞增殖、血管形成,抑制细胞凋亡。其机制可能与低剂量阿司匹林能抑制缺氧环境下HTR-8/SVneo细胞sFlt-1表达,促进HIF-1α表达有关。

化瘀消癥颗粒含药血清对HTR-8/SVneo增殖侵袭迁移及FGA、ITGB3表达的影响

目的研究化瘀消癥颗粒含药血清对人绒毛膜滋养层细胞(HTR-8/SVneo)增殖、侵袭、迁移以及纤维蛋白原α链(fibrinogen alpha chain,FGA)、整合素β3(integrinβ3,ITGB3)表达的影响。方法CCK8法检测化瘀消癥颗粒含药血清干预HTR-8/SVneo细胞的增殖情况;Transwell、细胞划痕分别检测化瘀消癥颗粒含药血清(低、中、高浓度组)对HTR-8/SVneo细胞侵袭、迁移的影响;qRT-PCR检测FGA、ITGB3 mRNA表达;Western blot检测FGA、ITGB3蛋白表达。结果化瘀消癥颗粒含药血清高、中、低浓度组对HTR-8/SVneo细胞活性具有明显抑制作用。与对照组相比,各剂量化瘀消癥颗粒含药血清组对HTR-8/SVneo细胞增殖活性均有不同程度的抑制作用(P<0.05);不同剂量HTR-8/SVneo细胞穿过Transwell小室滤过膜数量均低于空白组,其中低剂量组HTR-8/SVneo细胞穿膜率最低(P<0.05)。化瘀消癥颗粒含药血清组FGA、ITGB3蛋白表达下调;低浓度化瘀消癥颗粒含药血清组FGA和ITGB3 mRNA表达下调,中、高浓度化瘀消癥颗粒含药血清组ITGB3 mRNA表达下调。结论化瘀消癥颗粒可能通过调控FGA/ITGB3通路抑制HTR-8/SVneo细胞粘附力,从而达到降低细胞活性的目的。

端粒酶hTR和hTRT在肿瘤中的表达及意义

目的 :探讨端粒酶hTR、hTRT基因表达在人肿瘤中的意义 ,并与 p5 3蛋白改变相比较 ,评估其对肿瘤临床诊断的价值。方法 :用原位杂交及免疫组化技术检测了 115例恶性肿瘤、6 0例良性及癌前病变中hTR和hTRT的表达 ,并与 p5 3基因蛋白改变相比较。结果 :hTR、hTRT在人恶性肿瘤中的平均检出率分别为 81%、83%。在转移性癌中两者均为 10 0 %的阳性率 ,而在慢性肝炎伴肝硬化中hTR、hTRT分别可见 5 0 %、6 0 %的弱阳性表达 ,其他良性病变及癌前病变均为阴性。p5 3蛋白在人恶性肿瘤中的平均阳性率为 4 9 6 % :在良性病变及癌前病变均为阴性。结论 :恶性肿瘤中hTR和hTRT明显高于 p5 3的检出率 ,且在良恶性病变中的表达差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,并提示端粒酶hTR、hTRT与癌的生物学行为有密切关系 ,端粒酶基因hTR、hTRT的原位杂交检测可以作为一个比 p5 3更好的肿瘤诊断的新标记物。

端粒酶基因hTRT和hTR在胃癌组织中的表达及其意义

目的 :探讨端粒酶基因 h TRT和 h TR在胃癌组织中的表达及其意义。方法 :用原位杂交技术检测 48例胃癌组织、1 0例正常胃粘膜组织中端粒酶基因的表达。结果 :48例胃癌组织中 h TRT和 h TR阳性表达分别为 79.2 %和 85 .4% ;1 0例正常胃粘膜组织中除1例 h TR弱阳性表达外均为阴性表达 ,胃癌组织与正常胃粘膜组织中 h TRT、h TR的表达均有显著性差异。结论 :端粒酶基因 h TRT和 h TR在胃癌中均为高表达 ,且 h TRT和 h TR有相关性 。

膀胱移行细胞癌癌旁组织中hTR、hTRT的表达及其意义

目的 :探讨膀胱移行细胞癌癌旁组织中hTR、hTRT基因的表达及其与复发的关系。方法 :采用原位杂交的方法对 6 1例膀胱移行细胞癌及癌旁组织中hTR、hTRT基因进行检测。结果 :6 1例膀胱移行细胞癌癌旁组织中hTR、hTRT基因的阳性表达分别是 2 1%、2 5 % ;10例复发者癌旁组织中hTR、hTRT基因阳性表达分别是 7例、8例 ,无复发的 5 1例中hTR、hTRT基因阳性表达分别是 6例、7例 ,具有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :检测膀胱移行细胞癌癌旁组织中hTR、hTRT基因的表达 ,可作为判断肿瘤的复发潜能指标。

hTR与hTRT在口腔黏膜白斑与口腔癌中的表达及相关性

目的探讨端粒酶基因(hTR与hTRT)在口腔黏膜白斑、口腔癌的表达关系及两者表达相关性。方法应用原位杂交法检测hTR与hTRT在48例口腔黏膜白斑(轻度增生12例,中度增生18例,重度增生18例)、口腔癌32例中的表达。结果在口腔黏膜白斑轻、中、重度不典型增生组织中hTR与hTRTmRNA表达率分别为8·3%,16·7%,72·2%;8·3%,22.2%,66·7%;口腔癌中端粒酶基因hTR与hTRTmRNA表达率为90·6%,87·5%;口腔黏膜白斑的轻、中度不典型增生中的表达对比无显著差异(P>0·05);轻、中度不典型增生与重度不典型增生的表达对比有显著性差异(P<0·05);轻、中度不典型增生与口腔癌的表达对比有显著性差异(P<0·05);但重度不典型增生与口腔癌hTR与hTRT在组织中的表达对比无显著差异(P>0·05)。结论端粒酶基因hTR与hTRT的表达与增生的程度有关。hTR与hTRT在口腔黏膜组织中表达具有一致性。端粒酶的激活可能与口腔癌的发生有关。

坤宁安对围绝经期抑郁大鼠模型海马5-HTR1A和5-HTR2A受体亚型mRNA表达的影响

目的:观察坤宁安对围绝经期抑郁模型大鼠海马5HTR1A、5HTR2A受体亚型mRNA表达的影响。方法:采用孤养结合慢性轻度不可预见性应激造模法,观测围绝经期抑郁大鼠模型海马5HTR1A、5HTR2A受体亚型mRNA表达的变化。结果:抑郁模型组大鼠海马的5-HTR1A受体亚型mRNA表达降低(P<0.05),5-HTR2A受体亚型mRNA表达水平增高(P<0.05);坤宁安可使大鼠5-HTR1A受体亚型mRNA表达上调,使大鼠5-HTR2A受体亚型mRNA表达下调。结论:坤宁安影响抑郁模型大鼠海马5HTR1A、5HTR2A受体亚型mRNA的表达,可能是其治疗围绝经期抑郁症的机理之一。

hTR与hTRT在宫颈上皮非典型增生与宫颈癌中的表达及其相关性

目的探讨端粒酶基因（hTR与hTRT）在宫颈黏膜上皮非典型增生与宫颈癌中的表达及其相关性。方法应用原位杂交法检测端粒酶基因（hTR与hTRT）在56例宫颈黏膜上皮非典型增生（轻度增生12例,中度增生26例,重度增生18例）,宫颈癌32例中的表达。结果在宫颈黏膜上皮轻、中、重度非典型增生组织中hTR与hTRTmRNA表达率分别为8.3%、11.5%、88.9%、8.3%、7.7%、83.3%;宫颈癌中端粒酶基因hTR与hTRTmRNA表达率分别为90.6%、87.5%。宫颈黏膜上皮的轻、中度非典型增生中的表达对比差异无统计学意义（P〉0.05）;轻、中度非典型增生与重度非典型增生的表达对比差异有统计学意义（P〈0.05）;轻、中度非典型增生与宫颈癌的表达对比差异有统计学意义（P〈0.05）;但重度非典型增生与宫颈癌hTR与hTRT在组织中的表达对比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论端粒酶基因hTR与hTRT的表达与增生的程度有关。hTR与hTRT在宫颈黏膜组织中的表达具有一致性。端粒酶的激活可能与宫颈癌的发生有关。

反义hTR对人胃癌细胞株SGC-7901恶性表型的逆转作用

目的 探讨反义hTR基因转染对胃癌细胞系SGC 790 1恶性表型的逆转作用及其在肿瘤基因治疗中的价值。方法 构建包含端粒重复序列模板区的反义hTR基因真核表达载体 ,用脂质体法将其转染至胃癌细胞系SGC 790 1,比较观察反义hTR基因转染后 790 1细胞的hTRRNA表达、端粒酶活性、体外生长增殖特性和裸鼠体内致瘤能力的变化。结果 反义hTR基因转染的 790 1细胞hTRRNA表达和端粒酶活性明显降低、体外生长增殖能力降低、接触抑制恢复、细胞凋亡率增加、软琼脂集落形成能力和裸鼠体内致瘤能力完全消失。结论 反义hTR基因转染能使 790 1细胞的端粒酶活性明显下调并逆转其恶性表型 ,提示端粒酶是肿瘤治疗的较理想靶点 ,端粒酶抑制剂具有良好的临床应用前景。

参芪扶正注射液联合hTR反义核酸对白血病小鼠骨髓细胞端粒酶活性及凋亡的影响

目的观察参芪扶正注射液联合hTR反义核酸对急性白血病小鼠骨髓细胞端粒酶活性及细胞凋亡的影响。方法选取近交系8～12周龄DBA-2雄性小鼠尾静脉注射L1210淋巴细胞白血病株建立白血病小鼠模型,随机分为空白对照组及治疗组,治疗组分别给予参芪扶正注射液、参芪联合放射、参芪联合hTR反义核酸、参芪联合hTR反义核酸及放射治疗,疗程结束后活杀部分小鼠,采用端粒重复扩增(TRAP)-ELISA方法检测治疗后小鼠骨髓细胞的端粒酶活性,采用AnnexinV-FITC及PI双染,FACScan流式细胞术定量检测细胞凋亡率,观察各组小鼠骨髓细胞端粒酶活性、细胞凋亡率的变化。结果成功建立L1210/DBA-2白血病小鼠模型,检测到白血病小鼠的骨髓细胞端粒酶活性较正常小鼠明显升高,细胞凋亡率较正常小鼠下降;经参芪扶正注射液以及联合治疗后,各组小鼠骨髓细胞端粒酶活性明显下降,细胞凋亡率升高,以参芪联合hTR反义核酸及放射治疗组疗效最为显著,与其他各组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论急性白血病骨髓细胞端粒酶活性高表达可能是其治疗的靶点;参芪扶正注射液联合hTR反义核酸可通过下调端粒酶活性水平,促进白血病细胞的凋亡,对白血病小鼠放疗有一定增敏效应。

RNA干扰hTR基因对膀胱尿路上皮癌BIU-87细胞株端粒酶活性的影响

目的:探索RNA干扰(RNAi)hTR基因对膀胱尿路上皮癌BIU-87细胞株端粒酶活性的影响,为膀胱尿路上皮癌基因治疗提供新的途径及依据。方法:构建以hTR基因为靶点的RNA干扰装置PhTR-siRNA,对其进行筛选和鉴定;检测PhTR-siRNA对BIU-87细胞的生物学效应,包括抑制BIU-87细胞的生长情况、端粒酶活性检测、实时定量PCR(RealTime-PCR)验证hTR变化。结果:PhTR-siRNA干扰hTR基因后膀胱尿路上皮癌BIU-87细胞株的生长受到抑制,明显抑制端粒酶活性,实时定量PCR验证hTR基因明显减少。结论:RNA干扰hTR基因能明显抑制膀胱尿路上皮癌BIU-87细胞株的生长,可作为一种膀胱尿路上皮癌的基因治疗方法。

HTR-PM蒸汽发生器入口结构对流量分配影响的数值研究

针对高温气冷堆核电站示范工程（HTR-PM）蒸汽发生器实验模型的一回路流量分配进行了数值模拟研究。用Gambit前处理软件建立了数值计算模型并进行网格化处理，通过Fluent流体力学计算软件对没有遮流板和添加不同角度遮流板情况下换热组件出口流量分配均匀性进行模拟分析，结果表明垂直角度的遮流板能够最优地改善流量分配均匀性。同时根据腔体内流速分布，可知由于遮流板的缓冲作用，能够有效缓冲气流对蒸汽发生器内传热管的冲击。计算结果证实了蒸汽发生器内部结构的改进能够改善一回路流量分配均匀性，为-PM蒸汽发生器的设计提供了指导。

反义hTR抑制人胰腺癌P3细胞系端粒酶活性和增殖的研究

设计针对端粒酶RNA模板序列并经硫代磷酸修饰的正义、反义和随机序列寡核苷酸 ,以正常人成纤维细胞作对照 ,观察其对人胰腺癌细胞端粒酶活性和细胞生长增殖的影响作用以及对正常细胞是否有毒副作用。结果表明 :针对hTR模板区的反义寡核苷酸能降低胰腺癌P3细胞端粒酶活性 ,抑制细胞生长 ,促进细胞周期改变并诱导细胞发生凋亡 ,而且对正常细胞没有明显的毒副作用。因此我们认为利用反义技术封闭hTR基因很可能成为治疗肿瘤的安全、有效手段之一。

hTR-siRNA腺病毒的构建及其体外抗肿瘤的初步研究

目的:构建RNA干扰(RNAi)腺病毒,通过体外实验观察其抑制肿瘤细胞中人端粒酶RNA(hTR)基因表达、降低瘤细胞中的端粒酶活性、以及促进肿瘤细胞凋亡等作用。方法:首先用一种新的体外连接法构建腺病毒Ad-hTR-siR-NA,表达靶向hTR的小干扰RNA分子(siRNA),用100MOI的重组腺病毒感染不同的肿瘤细胞系,再用TRAP-ELISA法测定细胞端粒酶活性、Real-timePCR测定hTR的mRNA水平、流式细胞术(FCM)测定肿瘤细胞凋亡率及人端粒酶反转录酶(hTERT)的蛋白变化。结果:感染了Ad-hTR-siRNA的肿瘤细胞的端粒酶活性明显降低,其中以HeLa细胞降低最明显,其端粒酶活性抑制率达到58.87%,hTR的mRNA表达下调70.21%,细胞凋亡率为29.7%,但hTERT的蛋白表达并不被阻断。结论:Ad-hTR-siRNA可以有效、特异地抑制hTR基因表达,诱导体外培养的肿瘤细胞凋亡,具有抗肿瘤活性;此结果提示Ad-hTR-siRNA在肿瘤基因治疗方面具有潜在的应用价值。

HTR-10堆芯球流运动的唯象学DEM模拟

清华大学研发的lOMW高温气冷堆（HTR10）是国际上重要的先进实验反应堆，球流运动的研究具有基础性地位。通过唯象的方法对HTR10堆芯的球流运动进行了离散元数值模拟，通过已由实验验证的计算程序，采用与HTR-10堆芯1：1的计算模型，计算了27000个元件单元的运动，包括不同摩擦系数厂和不同底部锥角A下的球流运动。结果表明：在HTR-10堆芯设计条件下，球流运动较均匀，堆芯底部不存在滞留区；f越大或A越大，堆芯球流越均匀，表现出更好的整体性向下运动；当厂达到0．8上限时，HTR-10堆芯球流依然保持了整体性运动，底部无任何被滞留的球。本工作对进一步优化球床式高温气冷堆堆芯设计具有重要意义。