2022-2023年山东省A(H1N1)pdm09流感病毒HA、NA基因变异特征分析

目的 了解山东省2022-2023流感监测年度分离的A(H1N1)pdm09亚型流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因的变异特征,为流感的防控提供科学依据。方法 从流感监测网络实验室分离的流感毒株中按地市随机选取14株A(H1N1)pdm09亚型流感毒株,以WHO推荐的当季疫苗株为参考进行全基因组测序,并采用荧光法开展神经氨酸酶抑制(neuraminidase inhibition,NI)实验以评估药物敏感性。结果 山东省2022-2023年度分离的A(H1N1)pdm09流感病毒属于6B.1A分支中的5a.2a进化簇,核苷酸序列比对分析显示,HA和NA基因与2021-2023年度北半球疫苗株A/Victoria/2570/2019的亲缘关系较为接近,同源性分别为98.5%~98.7%和98.8%~99.1%。氨基酸序列分析显示,HA蛋白有20个位点发生了氨基酸序列变异,并发现1株病毒可能发生抗原漂移,有3株病毒发生了HA蛋白糖基化位点的缺失。NA酶相关重要位点未发生变异。NI实验显示,所测流感毒株均对抗流感病毒药物敏感。结论 所监测毒株与疫苗株整体同源性很高,但氨基酸存在一定程度变异,今后有必要持续开展流感病毒基因变异特征监测以了解流感流行的风险,以及评价基因变异对流感疫苗和治疗药物效果的影响。

HA380血液灌流与血液滤过治疗脓毒症相关凝血功能障碍的疗效研究

脓毒症是ICU患者常见的一种严重的器官功能障碍,是由多种感染因素引起的人体免疫功能失调,导致过度的全身炎症反应,进而诱发凝血功能障碍,即脓毒症相关凝血功能障碍(SAC),其特点是凝血反应增强、抗凝-纤溶途径受损[1],并可引起多器官功能障碍,凝血激活的程度和调节,影响患者预后[2]。严重者可进展为弥散性血管内凝血,导致死亡。有研究表明,早期连续血液净化治疗可以改善脓毒症患者凝血功能指标[3];HA380血液灌流可以降低人体内的炎症反应,改善微循环障碍,降低器官功能损害[4]。为此,本研究对二者的临床效果进行了观察比较。

血液灌流(HA380)联合血液净化(CVVH)治疗在脓毒症患者中的临床研究

探讨血液灌流(HA380)联合血液净化(CVVH)在脓毒症治疗中的临床优势与效果。方法 自入住滨州市人民院患者中按照纳入标准和排除标准选择脓毒症患者40例,分为对照组20和观察组20例,观察组患者在常规治疗基础上行血液灌流(HA380)+CVVH方案治疗,对照组患者行常规脓毒症诊疗+CVVH方案治疗,比较两组患者在治疗前后的炎症指标水平以及病情危重程度(SOFA评分和APECHEII评分)各指标的改善情况以及28天死亡率等,并进行统计学分析。结果 治疗前,两组炎症指标(PCT、TNF-α和IL-6)和预后(APACHEⅡ和SOFA)等相关指标对比差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组炎症指标(PCT、IL-6和TNF-α)、预后的指标(SOFA和APACHEⅡ)均有所降低,且观察组变化幅度大于对照组(P<0.05)。28天死亡率无差别。结论 HA380串联CVVH治疗模式比单纯CVVH治疗模式在治疗脓毒症方面更能降低患者体内的炎症介质水平,改善血流动力学和增加组织器官灌注,减轻全身感染症状,最终改善患者病情严重程度。

表达H7N9亚型禽流感病毒HA蛋白的重组血清4型禽腺病毒构建及其免疫效果评估

为构建H7N9亚型禽流感病毒和血清4型禽腺病毒(FAdV-4)的二联疫苗候选株,试验通过CRISPR/Cas9和Cre-Loxp系统,以课题组前期构建的表达EGFP蛋白的重组病毒FAdV4-EGFP为载体,构建能够稳定表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素(HA)蛋白的重组血清4型腺病毒;并通过PCR、间接免疫荧光试验(IFA)、Westernblot试验以及SPF鸡保护性试验等方法,探究此重组病毒体外生物学特性并评估其为鸡提供的保护力。结果显示:研究成功构建能稳定表达H7N9禽流感亚型病毒HA蛋白的重组血清4型腺病毒,命名为FAdV4-H7;FAdV4-H7能在LMH细胞高效复制,并能在LMH细胞传代15次后仍能稳定表达HA蛋白;FAdV4-H7不仅高度致弱,而且能诱导机体产生高滴度针对H7N9亚型禽流感病毒HI抗体和FAdV-4的中和抗体,能为SPF鸡提供足够保护来抵抗致死性FAdV-4感染。研究表明,试验成功构建了重组病毒FAdV4-H7,为H7N9亚型禽流感病毒和FAdV-4的联防联控提供了二联苗候选疫苗株。

HA280免疫吸附在重度活动性系统性红斑狼疮治疗中的作用

目的:探究HA280免疫吸附配合激素、环磷酰胺、羟氯喹治疗重度活动性系统性红斑狼疮的疗效及安全性。方法:选取32例重度活动性系统性红斑狼疮患者为研究对象,根据治疗方法不同将患者分为吸附组与对照组,每组各16例。对照组进行激素、环磷酰胺、羟氯喹等常规治疗;吸附组在此基础上应用HA280免疫吸附治疗,两组患者疗程均为6个月。对比分析两组患者的免疫球蛋白、补体、疾病活动度、激素累积剂量的变化情况。结果:治疗6个月后,吸附组IgG、IgA及总球蛋白下降水平、C3、C4回升及SLE活动度降低水平均高于对照组(P<0.05);治疗后,吸附组的达标用时小于对照组(P<0.05);激素累积量小于对照组(P<0.05)。结论:HA280免疫吸附联合激素、环磷酰胺、羟氯喹治疗重度活动性系统性红斑狼疮的疗效显著,更能快速控制病情活动度、及早达标,并可减少激素的累积剂量,减少相关副作用。

H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白在水稻胚乳中的表达及其纯化

为制备H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白并评估其免疫原性,利用水稻表达系统表达H5N1亚型禽流感病毒重组HA蛋白。首先构建了重组植物表达载体pCAMBIA1300-HA,该载体具有GT13特有启动子、信号肽SP和终止子,有利于外源基因在水稻中表达。之后将重组质粒pCAMBIA1300-HA通过电转化法导入根癌农杆菌EHA105中,筛选出阳性菌落并侵染水稻愈伤组织。经过暗培养、潮霉素筛选、分化、生根、成苗,采用CTAB法提取水稻叶片DNA,PCR鉴定结果显示,HA基因已插入到水稻基因组中,重组HA基因大小为4660 bp。将阳性植株移植到大田中,4个月后收获水稻种子,提取水稻胚乳蛋白,Western blot鉴定结果表明,HA蛋白在水稻胚乳中成功表达。重组HA蛋白通过Q阴离子层析、疏水层析和凝胶过滤层析三步分离纯化,其纯度达到90%以上。最后将纯化后的重组HA蛋白与ISA 50V佐剂混合并乳化制成疫苗,免疫小鼠,小鼠血清具有较高的特异性抗体水平,表明重组HA蛋白免疫原性较好。综上,成功构建了H5N1亚型禽流感病毒HA重组蛋白的水稻表达系统,并分离纯化获得了高纯度和免疫原性良好的重组HA蛋白。

HA/H_(2)O_(2)体系对磺胺噻唑降解的机理与效能

以盐酸羟胺/过氧化氢(HA/H_(2)O_(2))作为研究体系,考察其对于磺胺噻唑(STZ)的降解效能。文章考察了HA初始浓度、H_(2)O_(2)初始浓度、STZ初始浓度、pH、天然有机物(NOM)、阴离子(SO_(4)^(2-)、Cl-和NO_(3)^(-))对STZ降解的影响。结果表明:在pH值=3.0的条件下,HA/H_(2)O_(2)体系对STZ具有高效的降解效果,当HA的物质的量浓度由2 mmol/L增加到10 mmol/L时,对STZ的去除率从56.06%增加到85.26%;当H_(2)O_(2)的物质的量浓度从2 mmol/L增加到10 mmol/L时,对STZ的去除率从58.96%增加到85.26%,当STZ的物质的量浓度从2μmol/L增加到10μmol/L时,对STZ的去除率从98.72%降低到71.86%。随着pH的增大,STZ的去除率逐渐降低,在pH值>7的条件下对STZ的去除率可以忽略不计。向反应体系中分别投加5 mmol/L的SO_(4)^(2-)和5 mmol/L的NO_(3)^(-)都可以有效促进STZ的降解,而5 mmol/L的Cl^(-)则会抑制STZ的降解。当向体系中投加小于5 mg/L的NOM则对STZ的降解的影响可以忽略不计。测定了体系中共有17种降解产物,并推测STZ通过取代反应、羟基化反应等方式逐步被降解。通过明亮发光杆菌发光值变化分析降解过程中溶液毒性的变化,测定发现STZ降解过程中急性毒性不高。实际水体试验结果表明,HA/H_(2)O_(2)系统对二级出水中的荧光类物质具有较好的降解效果。

PRP联合HA治疗膝骨性关节炎疗效及安全性的Meta分析

目的探讨富血小板血浆(PRP)联合透明质酸(HA)关节内注射与PRP单独注射相比的疗效和安全性,为膝骨性关节炎(KOA)的治疗提供循证策略。方法查阅PubMed、Web of Science、中国知网(CNKI)、万方数据库,检索建库初到2021年10月公开发表的文献。纳入已发表的随机对照实验(RCT)或队列研究。研究对象为KOA患者,实验组为PRP联合HA关节内注射,对照组为PRP或HA关节内注射。对纳入RCT研究使用Cochrane手册风险评估工具进行质量评价,队列研究使用Newcastle-Ottawa Scale进行质量评价,用RevMan5.3软件对结局指标进行Meta分析。结果纳入10篇文献,共1110例患者,其中PRP组467例,PRP+HA组450例,HA组193例。Meta分析结果显示,PRP+HA组在治疗6个月后视觉模拟评分(VAS,MD:-0.31;95%CI(-0.60~-0.03);P=0.03)、西大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(WOMAC)评分(MD:-2.81;95%CI(-4.48~-1.13);P=0.001)、Lequesne指数(MD:-1.46;95%CI(-2.01~-0.90);P<0.00001)均显著优于PRP组;两组并发症发生率无统计学意义(RD:0.00;95%CI(-0.03~0.04);P=0.97)。结论PRP联合HA治疗KOA具有良好的临床治疗效果。基于此Meta分析,与单纯关节内注射PRP相比,PRP联合HA可提高治疗6个月后的WOMAC评分、VAS评分和Lequesne指数评分。在并发症发生率方面,两种治疗方案的安全性相似。

共表达膜结合型与可溶性H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白的重组基因Ⅶ型新城疫病毒的构建及免疫效果评价

旨在构建能高效稳定表达H9N2 AIV的HA蛋白的重组基因Ⅶ型新城疫病毒,有望开发抗新城疫和H9N2亚型禽流感病毒的二联疫苗,为控制H9N2 AIV和NDV提供新的防御思路,对NDV疫苗载体的构建和优化有重要的参考意义。利用反向遗传技术,以rDHN3-mF为骨架,在病毒基因组的P和M之间的非编码区插入全长膜结合HA和另外一个带有截短跨膜结构域的可溶性HA蛋白,获得了能高效稳定表达H9N2 AIV的HA蛋白的基因Ⅶ型NDV减毒株重组病毒rDHN3mF-HA和rDHN3mF-2HA。通过鸡胚接种、Western blot、血凝效价(HA)及平均鸡胚致死时间(MDT)等试验来检测重组病毒的稳定性以及生物学特性,将重组病毒以10~6 EID_(50·)只^(-1)剂量免疫7日龄SPF鸡并测定血凝抑制(HI)抗体,在免疫后28 d对各组进行攻毒保护试验。结果显示:重组病毒在鸡胚中连续传至十五代后HA基因无突变发生;Western blot证明重组病毒可稳定高效地表达特异性的HA蛋白;重组病毒的生长曲线说明了重组病毒与亲本毒株具有相似的复制特性和低毒力特征;重组病毒免疫组的SPF鸡均能产生针对NDV或者H9N2 AIV的特异性HI抗体;攻毒保护试验结果:重组病毒均能对攻毒后的鸡产生100%保护效果;喉、肛拭子检测结果说明重组病毒可显著减少NDV与H9N2 AIV的体外排毒;气管与肺qPCR检测结果显示攻毒后3 d, rDHN3mF-2HA较rDHN3mF-HA更显著地降低了脏器中H9N2 AIV含量。本研究成功构建了共表达膜结合型与可溶性H9N2亚型禽流感HA蛋白的基因Ⅶ型重组NDV,为H9N2 AIV和NDV的一种新型重组基因工程二联活载体疫苗的研制与应用奠定了基础。

基于磁控溅射的PEEK表面HA涂层构建及其生物安全性评估

目的:基于磁控溅射技术在PEEK表面构建羟基磷灰石(HA)涂层,并系统评估该方法的生物安全性。方法:磺化PEEK以增加结合面积,并利用磁控溅射技术在其上构建HA涂层;通过扫描电镜结合能谱分析检测构建效果;通过细胞黏附实验、细胞骨架荧光染色以及扫描电镜来评估细胞层面安全性;通过SD大鼠全身毒性评估材料在体安全性;通过金黄地鼠黏膜刺激实验评估材料口腔应用安全性。结果:利用上述技术可在PEEK表面成功构建具有梯度形貌的HA涂层;该涂层可促进细胞黏附、伸展与增殖;且无全身毒性,对动物体重与体内重要脏器HE染色均无显著性影响(P>0.05);同时该涂层在一定程度上减轻了单纯磺化带来的口腔黏膜刺激。结论:基于磁控溅射技术可稳定制备HA涂层,并满足临床应用的生物安全性需求。

表达H9亚型禽流感病毒HA基因的重组火鸡疱疹病毒构建及应用

为构建表达H9亚型禽流感病毒HA基因的重组火鸡疱疹病毒(herpesvirusofturkey,HVT),以连续覆盖HVT全基因组的Fosmid文库为基础,利用Red/ET同源重组技术和Gateway LR克隆技术,将优化的携带Pec复合启动子的HA基因插入到HVT复制非必需区HVT053与HVT054位点处的95318~95319nt之间,获得了表达H9亚型禽流感病毒HA基因的重组HVT(rHVT-H9-HA株),并对构建的毒株进行鉴定。结果显示,成功构建了含有HA基因的入门质粒pEntr-HA,通过Gateway克隆的LR反应将含有HA基因的表达盒转移到黏粒pFosC DEST的第53和54号基因之间形成pFosC HA;提取5个黏粒后,转染次代CEF细胞获得拯救重组病毒rHVT-H9-HA株。连续传代和动物试验结果表明,rHVT-H9-HA株毒价高,遗传稳定,可以克服母源抗体干扰,免疫持续期长,能够提供针对H9亚型禽流感的保护;同时也实现了一针防两病,效果明显优于灭活疫苗。本研究为H9亚型禽流感病毒重组HVT活载体疫苗的研制提供了技术支撑。

高性能免热处理铝合金HA1-H的特性与一体式压铸实践

HA1-H是自主研发的一款免热处理压铸铝合金,在铸态条件下即可获得优良的综合力学性能,适用于一体式压铸大型薄壁件。本文总结了HA1-H合金的特性,以及压铸生产过程中的问题点及应对措施。

盛夏狂欢夜!武汉欢乐谷HOHA音乐节开幕

6月29日晚,武汉欢乐谷HOHA音乐节燃动开幕!首发特邀嘉宾——亚洲音乐组合GARNiDELiA武汉首演开唱,主唱美依礼芽MARiA与作曲家特酷toku登台,默契演绎神曲《极乐净土》,现场气氛热烈、高潮不断。当天,玛雅海滩也正式开启加长营业,三期“杉林奇遇”全新升级打造BIUBIU水枪派对,日夜放肆造浪。

SWSL0607HA电动液驱剪叉式高空作业平台

山河智能新近推出自主研发的SWSL0607HA型电动液驱剪叉式高空作业平台,该机型最大作业高度为6.5 m,平台载重为240 kg,在现有技术上实现了新的突破。SWSL0607HA采用交流泵电机+液压马达驱动的组合配置,收藏状态长为1.45 m,高度为2.09 m,整机质量为940 kg,整机外形小巧且质量轻,使用场合广泛。

NOKHA村社区中心设计,沙漠中的文化绿洲

在印度拉贾斯坦邦的比卡内尔县,树荫是一种珍贵的商品,因为这里一年中的大部分时间里都被灼热的阳光笼罩。在这样的景观中,出现了希望和创新的灯塔--NOKHA村社区中心。对于NOKHA村以及邻近143个村庄的居民来说,社区中心不仅是一座建筑,更是知识、艺术和联系的生命线。从前,该地区的大多数公立学校都没有图书馆,学生们只能在附近的树下学习。

HA380血液灌流治疗高甘油三酯急性胰腺炎清除炎症因子和血脂的临床研究

分析为高甘油三酯急性胰腺炎患者提供HA380血液灌流治疗的临床意义。方法 本次研究的时间制定为2023年3月至2024年3月,收录60例高甘油三酯急性胰腺炎患者作为研究样本,入院时间不同分为两组,研究组:30例、HA380血液灌流治疗(入院时间:2023年10月至2024年3月);常规组:30例、HA330血液灌流治疗(入院时间:2023年3月至2023年9月),对比两组患者的差异性。结果 研究组患者的炎性因子水平控制效果、血脂水平改善效果、生活质量、治疗效果等均高于常规组(p均<0.05)。结论 为高甘油三酯急性胰腺炎患者提供HA380血液灌流治疗,这种方式获得的效果更明显。

HA集团成为“携手促进可持续发展倡议”新成员

HA在可持续发展战略方面取得了又一关键性的全球里程碑——成为“携手促进可持续发展倡议”的正式成员。自2023年10月18日起,HA集团成为“携手促进可持续发展倡议”(Tf S)的全球50名成员之一。作为加入该倡议的铸造工业化学品公司,成员资格由该倡议联盟和独立审核机构对其可持续性的实践情况进行认证。“携手促进可持续发展倡议”是化工行业的一个联盟组织,成立于2011年。其目标是针对化工行业的可持续性发展进行有效评定,制定标准量化透明,从而为更多的公司和供应商实施长期可持续性的采购行动。

探讨HA380串联连续性静脉-静脉血液透析滤过治疗脓毒症的临床效果

探讨脓毒症连续性静脉-静脉血液透析滤过(Continuous VenoVenous HemoDiaFiltration,CVVHDF)串联HA380血液灌流治疗的临床效果。方法 筛选2022年12月到2024年03月入住我院重症医学科40例脓毒症患者,依据不同治疗方案分为基础组20例和联合组20例。结果 本次试验中,联合组治疗后炎性指标水平显著更低,与基础组差异性较大(P<0.05);联合组治疗后生命体征与基础组相比更加平稳(P<0.05);联合组治疗后组织灌注改善效果更优,与基础组差异性较大(P<0.05);联合组治疗后急性生理与慢性健康评分(Acute Physiology and Chronic Health Evaluation,APACHE)低于基础组(P<0.05)。基础组、联合组病死率差异较小(P>0.05)。结论 CVVHDF串联HA380血液灌流治疗脓毒症效果显著,能够显著抑制炎性因子、缓解系统性感染和提高患者组织、脏器供氧能力以及稳定生命体征,促进患者病情显著改善,降低患者病死率。

长春市2016—2020监测年度甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)基因特征分析

目的分析长春市2016—2020年度甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)基因特征,了解其变异情况及遗传进化特征。方法选取2016—2020年度甲型H1N1流感病毒分离株109株,PCR扩增HA基因并进行序列测定;利用生物信息学软件对分离株的HA基因进行进化和变异分析。结果长春市109株分离株与疫苗株A/California/07/2009的HA蛋白相比均有S84N、S162N和I216T共同的氨基酸位点变异,且有1株发生了HA蛋白D222N位点突变,提示此毒株可引起患者下呼吸道症状。109株病毒株的HA基因之间核苷酸同源性为96.9%~100%,氨基酸同源性为97.2%~100%。在进化树分析上,都属于6B.1大分支,并且随着时间的推移,HA在基因进化树上离早期疫苗株A/California/7/2009越来越远,同一年份里也有毒株位于不同的小分支内。结论长春市2016—2020年度甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)基因在不断的变异中,应持续进行监测,为预防甲型H1N1流感大流行提供参考。

脑胶质瘤组织Pax3、P4HA1、Rac1基因表达与全切术后复发的关系及意义

目的探讨组织配对盒基因3(Pax3)、脯氨酰4-羟化酶亚基α1(P4HA1)、Rac GTP酶激活蛋白酶1(Rac1)基因表达与脑胶质瘤全切术后复发关系及意义。方法选取2019年3月至2021年6月80例脑胶质瘤全切术患者,根据术后1年是否复发分为复发组、未复发组,比较2组基线资料、组织Pax3、P4HA1、Rac1基因表达,采用Logistic分析脑胶质瘤全切术后复发的相关因素,采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)分析组织Pax3、P4HA1、Rac1基因表达预测复发的价值,并比较不同Pax3、P4HA1、Rac1基因表达水平患者术后复发时间。结果复发组病理分级、术后辅助治疗情况与未复发组比较,差异有统计学意义(P<0.05);复发组组织Pax3 mRNA、P4HA1 mRNA、Rac1 mRNA表达高于未复发组(P<0.05);校正了病理分级、术后辅助治疗情况后,Pax3 mRNA、P4HA1 mRNA、Rac1 mRNA仍是复发的独立相关危险因素(P<0.05);Pax3 mRNA、P4HA1 mRNA、Rac1 mRNA及三者联合预测复发的ROC下面积(area under the curve,AUC)依次为0.840、0.825、0.828、0.940;Pax3 mRNA、P4HA1 mRNA、Rac1 mRNA高水平患者复发时间短于低水平患者(P<0.05)。结论脑胶质瘤组织中Pax3 mRNA、P4HA1 mRNA、Rac1 mRNA表达与全切术后复发及复发时间有关,联合检测可作为早期预测术后复发的一个可靠方案,既能保证高复发风险人群治疗的充分性,又能减少低复发风险人群治疗相关的不良反应,从而最大化患者受益。