延缓毛发生长的动物实验

目的:研究延缓毛发生长的方法。方法:将不同浓度EGF(Epidermal growth factor表皮生长因子)柔性脂质体及EGF普通脂质体分别涂抹于剃毛大鼠皮肤上,观察毛发生长速度。结果:局部外用高浓度EGF柔性脂质体的大鼠的毛发生长速度减慢,与对照组相比差异有非常显著性。结论:局部外用EGF柔性脂质体可能延缓大鼠毛发的生长。

GHK-Cu脂质体的制备与表征及对小鼠生发的影响

目的制备甘氨酰组氨酰赖氨酸-铜(GHK-Cu)脂质体,观察其对脱发模型小鼠毛发生长的影响。方法利用反向蒸发法制备包含GHK-Cu脂质体。将脱发模型小鼠随机分组,各组分别以0.6 mol.L-1GHK-Cu溶液、0.6 mol.L-1GHK-Cu脂质体溶液和纯化水(对照组)涂擦脱毛区,记录小鼠新生毛发生长时间,观察脱毛区病理及组织形态学变化,Western blotting法分析各组小鼠血管内皮生长因子(VEGF)表达差异。结果 GHK-Cu脂质体和GHK-Cu均能促进小鼠毛发生长;与对照组比较,GHK-Cu脂质体和GHK-Cu组小鼠毛囊数目差异有统计学意义。在小鼠毛发完全长出之前,GHK-Cu脂质体和GHK-Cu组小鼠VEGF表达量高于对照组。结论脂质体既能够有效包裹GHK-Cu,又能保持GHK-Cu对小鼠的促生发功效。GHK-Cu脂质体和GHK-Cu均能增加生发初期小鼠皮肤组织VEGF表达。

俄色叶-A毛囊靶向脂质体制备工艺的优化

目的优化俄色叶-A毛囊靶向脂质体的制备工艺。方法薄膜-超声法制备脂质体。以包封率为指标,单因素试验和Box-Behnken效应面法优化制备工艺。结果最佳参数为卵磷脂与胆固醇比例5∶1,卵磷脂与药物比例10∶1,缓冲液用量15 m L。包封率的预测值和实测值分别为91.8%和92.3%。脂质体粒子呈球形,粒径为(162.1±6.3)nm,Zeta电位为(-32.8±7.3)m V。结论该制备工艺简单可行,包封率高。

小鼠KGF基因毛囊特异性表达载体的构建及mESC脂质体悬浮转染条件的优化

旨在构建小鼠角质细胞生长因子(KGF)真核表达载体pCDsR-UKA,通过脂质体转染法转染小鼠胚胎干细胞(mESC),并进一步优化其转染条件,最终获得可以正常生长并稳定表达红色荧光蛋白的转KGF基因的ES细胞。利用RT-PCR技术扩增小鼠KGF基因cDNA并构建表达载体pCDsR-UKA(6.6 kb),经鉴定正确的重组质粒DNA用脂质体包裹后转染mESC。从小鼠成纤维细胞cDNA扩增出891 bp的KGF基因片段与UHS启动子和BGH polyA序列成功重组到pCDsRed2载体中。经酶切和DNA测序验证,插入载体的DNA片段为KGF基因且方向正确。采用脂质体法优化转染条件,mESC最高转染效率达到(34.4±4.1)%。经G418筛选的转基因ES细胞通过PCR鉴定证实外源基因已整合在ES细胞基因组中。成功获得了小鼠KGF基因片段,以及真核表达载体pCDsR-UKA,经优化的脂质体悬浮法转染条件,在六孔板中当DNA与脂质体比例为3∶10时,可获得最佳转染效率且不改变ES细胞的生长状态,经筛选获得了转基因ES细胞克隆。为下一步通过四倍体补偿技术获得ES小鼠提供了转基因ES细胞。

米诺地尔醇质体和脂质体促绒毛生长作用的研究

目的观察米诺地尔脂质体和醇质体对小鼠绒毛生长的影响,为米诺地尔醇质体和脂质体的临床研究提供参考数据。方法本文主要考察小鼠毛长、毛重、毛囊数量、真皮层厚度及角质层结构五个参考指标,精确测量毛长与毛重,取小鼠皮肤组织切片并进行伊红法染色,观察其真皮层厚度是否存在差异,记录毛囊数,采用傅里叶衰减全反射红外光谱(ATR-FTIR)技术,讨论不同剂型对小鼠角质层结构的影响。结果米诺地尔脂质体组小鼠最早长出毛发,其次为米诺地尔醇质体组小鼠、米诺地尔酊剂组小鼠,最后为阴性对照组小鼠,并且米诺地尔脂质体组小鼠的新生毛发的长度及最终毛重、毛囊数量和真皮层厚度都高于其他组,存在显著性差异。结论米诺地尔脂质体促毛发生长作用最为明显,米诺地尔酊剂与米诺地尔醇质体促毛发生长作用差异不明显。