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Microcalorimetric Studies of the Toxic Action of La^(3+) on Halobacterium Halobium R1 Growth 被引量:1
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作者 刘鹏 刘义 +4 位作者 谢之雄 陈酉贵 赵儒铭 沈萍 屈松生 《Chinese Journal of Chemistry》 SCIE CAS CSCD 2003年第6期693-697,共5页
A microcalorimetric technique was used to evaluate the influence of La 3+ on Halobacterium halobium R1 growth. By means of LKB 2277 bioactivity monitor, ampoule method at 37 ℃, the thermogenic curves of H... A microcalorimetric technique was used to evaluate the influence of La 3+ on Halobacterium halobium R1 growth. By means of LKB 2277 bioactivity monitor, ampoule method at 37 ℃, the thermogenic curves of Halobacterium halobium R1 growth were obtained. In order to analyze the results, the maximum power P m and the growth rate constants k were determined, showing that values of P m and k are linked to the concentration of La 3+ . Addition of low concentration of La 3+ can cause a decrease of the maximum heat production and growth rate constant. However, high concentration of La 3+ may promote growth of Halobacterium halobium R1, but at much higher concentration of La 3+ , the growth of Halobacterium halobium R1 is inhibited again. For comparison, the shapes of Halobacterium halobium R1 cell were observed by means of transmission electron microscope. According to the thermogenic curves and TEM photos of Halobacterium halobium R1 under different conditions, it is clear that metabolic mechanism of Halobacterium halobium R1 growth is changed with the addition of La 3+ . 展开更多
关键词 halobacterium halobium R1 MICROCALORIMETRY ther mokinetics METABOLISM La 3+
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Microcalorimetric Studies on Gene Promoter Function of Cloned DNA Fragements from Halobacterium halobium J7 Plasmid pHH205 in Escherichia coli TG1
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作者 雷克林 侯汉娜 +2 位作者 刘义 叶学成 沈萍 《Chinese Journal of Chemistry》 SCIE CAS CSCD 2007年第8期1099-1104,共6页
Halobacterium halobium is a typical kind of extremely halophilic bacterium. Combined with the antibiotic resistance assay, the microcalorimetric method was used to study the promoter function of the cloned DNA fragmen... Halobacterium halobium is a typical kind of extremely halophilic bacterium. Combined with the antibiotic resistance assay, the microcalorimetric method was used to study the promoter function of the cloned DNA fragments from Halobacterium halobium J7 plasmid pHH205 in Escherichia coli TG1. The promoter probe vector, plasmid pKK232-8, was used to form the recombinants. The DNA fragment, which is the promoter for the chloramphenicol acetyl transferase (CAT) gene in plasmid pKK232-8, is about 800 bp, and the chloramphenicol resistance level presented by IC50 is about 200 μg·mL^-1, which suggests a high promoter activity. The conclusions show that there probably exist double-function or trinary-function gene promoters in Halobacterium halobium, and Archaea may contain rich genetic resources. 展开更多
关键词 halobacterium halobium J7 plasmid pKK232-8 gene promoter MICROCALORIMETRY
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无胶筛分毛细管电泳分离盐生盐杆菌DNA片段 被引量:5
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作者 王园朝 熊音 +2 位作者 曾昭睿 程介克 沈萍 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期439-442,共4页
由羟乙基纤维素和聚吡咯烷酮混合组成筛分介质 ,在涂敷聚硅氧烷的毛细管柱上 ,研究了LambdaDNA/EcoRⅠ +HindⅢ片段分离的最佳条件。实验表明 ,混合筛分介质与单一的羟乙基纤维素筛分介质相比 ,改变了筛分介质的孔径大小 ,抑制了毛细管... 由羟乙基纤维素和聚吡咯烷酮混合组成筛分介质 ,在涂敷聚硅氧烷的毛细管柱上 ,研究了LambdaDNA/EcoRⅠ +HindⅢ片段分离的最佳条件。实验表明 ,混合筛分介质与单一的羟乙基纤维素筛分介质相比 ,改变了筛分介质的孔径大小 ,抑制了毛细管壁对DNA的吸附 ,从而改善了分离 ,并首次在同一条件下将所含的 13个片段完全分离。方法简便、快速 ,曾应用于两组盐生盐杆菌DNA片段的分离及其碱基对数目的推测。 展开更多
关键词 无胶筛分子毛细管电泳 混合筛分介质 DNA片段 盐生盐杆菌 分离 聚吡咯烷酮 羟乙基纤维素
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盐生盐杆菌生长过程热动力学研究 被引量:5
4
作者 黄玉屏 刘义 +1 位作者 沈萍 屈松生 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第2期251-254,共4页
用 LKB2 2 77生物活性检测系统测定了盐生盐杆菌 R1、J7、S9以及 R1和 J7的融合子 F9生长的产热功率曲线 .根据曲线的特征 ,建立了古生菌生长过程的热动力学方程 :ln[P· ( 1 -P/Pm) r- 1 ]=ln[P0 · ( 1 -P0 /Pm) r- 1 ]+k... 用 LKB2 2 77生物活性检测系统测定了盐生盐杆菌 R1、J7、S9以及 R1和 J7的融合子 F9生长的产热功率曲线 .根据曲线的特征 ,建立了古生菌生长过程的热动力学方程 :ln[P· ( 1 -P/Pm) r- 1 ]=ln[P0 · ( 1 -P0 /Pm) r- 1 ]+k· t.由此求得了盐生盐杆菌的生长速率常数 ,并对此模型和融合子 F9的生长进行了讨论 .该热动力学方程描述了一系列非理想的细菌生长过程的产热功率曲线 ,并将其与经典的指数式生长模型和 lo-gistic模型进行了比较 ,它具有更广泛的适用性 . 展开更多
关键词 盐生盐杆菌 微量热法 热动力学 古生菌 生长过程 代谢机制
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盐生盐杆菌B培养条件的优化研究 被引量:2
5
作者 郭爱莲 徐金贵 +1 位作者 侯洵 陈烽 《西北大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期87-90,共4页
利用Plackett-Burman设计筛选出影响盐生盐杆菌(Halobacteriumhalobium)B培养条件的重要因素,然后利用正交试验设计对这些重要因素加以优化。结果表明,盐生盐杆菌B的最适培养条件为:MgSO4·7H2O20g/L,酵母膏10g/L,KCl2.5g/L,FeSO4&#... 利用Plackett-Burman设计筛选出影响盐生盐杆菌(Halobacteriumhalobium)B培养条件的重要因素,然后利用正交试验设计对这些重要因素加以优化。结果表明,盐生盐杆菌B的最适培养条件为:MgSO4·7H2O20g/L,酵母膏10g/L,KCl2.5g/L,FeSO4·7H2O50mg/L,NaCl200g/L,柠檬酸钠2g/L,酪蛋白氨基酸5g/L,甘油10g/L,pH6.5,温度38℃,摇瓶转速180r/min,光照培养。 展开更多
关键词 盐生盐杆菌B 培养条件 正交试验设计 P1ackett—Burman设计 培养基 紫膜
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盐生盐杆菌含耐盐相关基因DNA片段的克隆 被引量:2
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作者 谭静 刘广发 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期146-149,共4页
将盐生盐杆菌总 DNA的 Bam HI不完全酶切片段与质粒 p U C19连接成重组质粒 ,并以重组质粒转化 E. coli JM10 1.经 X- Gal- IPTG法筛选白色重组子 ,结合高盐平板检测 ,已经获得 3株比原受体菌的耐盐性提高 30 %~ 67%的转化子 .重组质... 将盐生盐杆菌总 DNA的 Bam HI不完全酶切片段与质粒 p U C19连接成重组质粒 ,并以重组质粒转化 E. coli JM10 1.经 X- Gal- IPTG法筛选白色重组子 ,结合高盐平板检测 ,已经获得 3株比原受体菌的耐盐性提高 30 %~ 67%的转化子 .重组质粒酶切电泳分析表明 ,被克隆的盐生盐杆菌含耐盐相关基因的 DNA片段长度在 1.0~ 3.5kb之间 . 展开更多
关键词 盐生盐杆菌 耐盐基因 克隆 盐碱地改良
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盐生盐杆菌的质粒及其物理图谱 被引量:9
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作者 沈萍 陈娅静 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1994年第5期409-416,共8页
本文用4种不同的方法对10株盐生盐杆菌(Halobacteriumhalobium)是否含有质粒进行了检测,其中6株(S9、RP1、J7、R6-4、R6-5、T4-1)含有质粒,均属大质粒。几种检测方法中,以TENS... 本文用4种不同的方法对10株盐生盐杆菌(Halobacteriumhalobium)是否含有质粒进行了检测,其中6株(S9、RP1、J7、R6-4、R6-5、T4-1)含有质粒,均属大质粒。几种检测方法中,以TENS法效果最好。J7菌株含有1种CCC结构十分稳定的质粒,称之为pHH205,其分子量较小,约为16.7kb;拷贝数较高,为49个/每个细胞。该质粒在宿主的对数生长后期出现拷贝数高峰。通过限制性酶切分析,确定了5种酶在pHH205上的切点,其中BamHI、HindIII和XbaI3种酶为单一切点,而且彼此十分邻近。 展开更多
关键词 盐生盐杆菌 质粒 物理图谱
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嗜盐细菌冷冻干燥保护剂的正交法优化 被引量:3
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作者 郑从义 屈三甫 陶天申 《武汉大学学报(自然科学版)》 CSCD 1994年第1期109-114,共6页
报道了利用正交试验设计的原理和方法,筛选冷冻干燥保藏盐生盐杆菌(Halobacteriumhalobium)菌株R1的保护剂组成与最佳配比的结果.直接分析和方差分析的结果表明:在由NaCl、水解乳蛋白、海藻糖和蔗糖4... 报道了利用正交试验设计的原理和方法,筛选冷冻干燥保藏盐生盐杆菌(Halobacteriumhalobium)菌株R1的保护剂组成与最佳配比的结果.直接分析和方差分析的结果表明:在由NaCl、水解乳蛋白、海藻糖和蔗糖4种成份组成的保护剂系统中,海藻糖对菌株R1冷冻干燥存活率影响最大,为主要因素;其次为蔗糖和NaCl;水解乳蛋白影响最小,为次要因素.保护剂最优的水平组合为NaCl16%、水解乳蛋白4%、海藻糖6%、蔗糖18%.采用正交法从传统“简单可比性”需81次的实验减少到9次,并且正交法的综合可比性能在较短时间内找出最佳的水平组合.利用最佳组合的保护剂使冷冻干燥菌株R1存活率达到91.80%.从试验的结果可以认为只要选择适当的保护剂,用冷冻干燥法保藏嗜盐菌是安全可行的. 展开更多
关键词 盐生盐杆菌 冷冻干燥 保护剂
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嗜盐古菌染色体DNA片段在大肠杆菌中的启动子功能(英文)
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作者 刘义 黄玉屏 +3 位作者 高振霆 段珍红 沈萍 屈松生 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第9期800-804,共5页
以启动子探针质粒pKK232-8为载体,用微量量热法研究了源自盐生盐杆菌R1染色体的RM13DNA片段在大肠杆菌HB101中的真细菌启动子功能,该启动子RM13 DNA片段的大小为1000bp(碱基对),它能启动探针质粒pKK232-8上的氯霉素乙酰水解酶基因(即:... 以启动子探针质粒pKK232-8为载体,用微量量热法研究了源自盐生盐杆菌R1染色体的RM13DNA片段在大肠杆菌HB101中的真细菌启动子功能,该启动子RM13 DNA片段的大小为1000bp(碱基对),它能启动探针质粒pKK232-8上的氯霉素乙酰水解酶基因(即:氯霉素抗性基因Cm),氯霉素抗性水平可达到150 mg·L^(-1),抗性水平较高,启动活性较大.研究结果表明,在盐生盐杆菌染色体上可能存在具有双功能或多功能的启动子DNA片段,这对系统发育、微生物遗传学和生物热化学等均有重要的意义. 展开更多
关键词 嗜盐古菌染色体 DNA片段 大肠杆菌 启动子功能 盐生盐杆菌 Rl染色体 质粒pKK232-8 微量量热法 微生物遗传学 物热化学
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盐生盐杆菌S9营养条件及紫膜分离的初步研究
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作者 郭爱莲 徐金贵 +1 位作者 侯洵 陈烽 《西北大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期191-194,共4页
目的 为获得紫膜,研究了盐生盐杆菌(Halobacteriumhalobium)S9的最适营养条件和紫膜的分离。方法通过该菌的培养特征、不同培养基、细胞色素的测定等,利用正交试验法对NaCl、酪蛋白氨基酸、MgSO4·7H2O和甘油这4个重要因素进行了... 目的 为获得紫膜,研究了盐生盐杆菌(Halobacteriumhalobium)S9的最适营养条件和紫膜的分离。方法通过该菌的培养特征、不同培养基、细胞色素的测定等,利用正交试验法对NaCl、酪蛋白氨基酸、MgSO4·7H2O和甘油这4个重要因素进行了优化。结果 最适营养和浓度分别是:NaCl200g/L,酪蛋白氨基酸10g/L,MgSO4·7H2O25g/L,甘油10g/L。该菌株在光照条件下,38℃摇瓶培养6d,可用高速冷冻离心、透析袋、蔗糖密度梯度纯化、超速离心等得到紫膜。结论优化了盐生盐杆菌S9的最适营养条件,并确定了所获紫膜的基本性质,可指导用于分子电子器件,今后将继续对其作定量研究。 展开更多
关键词 盐生盐杆菌S9 营养条件 优化 紫膜 分离
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具有真细菌基因启动子活性的古生菌DNA片段
11
作者 熊音 段珍红 +1 位作者 黄玉屏 沈萍 《武汉大学学报(自然科学版)》 CSCD 1999年第6期876-878,共3页
以大肠杆菌启动子探测质粒pKK232-8 为载体,用4 组限制性内切酶分别消化古生菌盐生盐杆菌R1(Halobacterium halobium )的染色体DNA,在体外进行重组,转化E.coliDH-5α感受态细胞,得到12 个转化子(T1~T12),其抗性水平分布在10~500 m g/... 以大肠杆菌启动子探测质粒pKK232-8 为载体,用4 组限制性内切酶分别消化古生菌盐生盐杆菌R1(Halobacterium halobium )的染色体DNA,在体外进行重组,转化E.coliDH-5α感受态细胞,得到12 个转化子(T1~T12),其抗性水平分布在10~500 m g/L的区间内. 将这些转化子所含质粒分别命名为pSX1~pSX12,限制性酶切分析表明,这些质粒各插入了一段不同的外源DNA 片段,杂交分析表明,抗性最强的转化子T11 所含质粒pSX11 上插入了一段来源于盐生盐杆菌R1 染色体的DNA 片段. 该DNA 片段在大肠杆菌中具有启动子功能. 展开更多
关键词 盐生盐杆菌 DNA 启动子活性 古生菌 真细菌 基因
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盐生盐杆菌在光生物制氢研究中的应用
12
作者 秦艳 邓文武 《生物学杂志》 CAS CSCD 2010年第1期84-86,45,共4页
回顾了近30年来盐生盐杆菌(Halobacterium halobium)在光生物制氢中的应用。就H.halobium可能的光合产氢机理、产氢研究现状及产氢工艺进行概述。分析了盐生盐杆菌光照产氢的主要影响因素,提出未来利用H.halobium生物制氢的研究方向。
关键词 光生物制氢 盐生盐杆菌 细菌视紫红质 混合培养
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盐生盐杆菌RM07 DNA片段在大肠杆菌中的定点诱变和启动子功能分析
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作者 杨洋 沈萍 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第5期525-532,共8页
将来源于嗜盐古生菌———盐生盐杆菌 (Halobacteriumhalobium)基因组的RM0 7DNA片段以正反两个方向分别插入大肠杆菌启动子探针载体pKK2 32 8携带的报告基因———氯霉素抗性基因 (cat)的上游 ,得到RM0 7 cat融合的质粒pRM0 7 1(+)和p... 将来源于嗜盐古生菌———盐生盐杆菌 (Halobacteriumhalobium)基因组的RM0 7DNA片段以正反两个方向分别插入大肠杆菌启动子探针载体pKK2 32 8携带的报告基因———氯霉素抗性基因 (cat)的上游 ,得到RM0 7 cat融合的质粒pRM0 7 1(+)和pRM0 7 1(- ) ,将其分别转入大肠杆菌HB10 1,进而检测了不同转化子菌株的氯霉素抗性水平和细胞内氯霉素乙酰转移酶蛋白质浓度。结果表明 :正向的RM0 7片段在真细菌 (大肠杆菌 )中具有启动子活性 ,能够驱动cat报告基因的表达 ;而反向的RM0 7片段在大肠杆菌中不具有启动子活性。对RM0 7片段进行了定点诱变分析 ,检测了特定核苷酸突变对启动子活性的影响 ,结果进一步精确定位了RM0 7片段中对在大肠杆菌中的启动子功能有重要作用的关键碱基 ,并且通过改造RM0 7片段的碱基组成成分大幅提高了其在大肠杆菌中的启动子活性。 展开更多
关键词 盐生盐杆菌 大肠杆菌 启动子功能
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具有真细菌基因启动子活性的盐生盐杆菌质粒DNA片段 被引量:4
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作者 孙广秀 江爱民 沈萍 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1997年第4期380-384,共5页
利用大肠杆菌启动子探测质粒pKK232-8为载体、用两组限制性内切酶BamHI-SalI和HindⅢ-SalI分别消化盐生盐杆菌J7(Halobacteriumhalobium)的质粒pHH205,在体外进行重组,转... 利用大肠杆菌启动子探测质粒pKK232-8为载体、用两组限制性内切酶BamHI-SalI和HindⅢ-SalI分别消化盐生盐杆菌J7(Halobacteriumhalobium)的质粒pHH205,在体外进行重组,转化E.coliHB101感受态细胞,在含氨苄青霉素和氯霉素的选择平板上筛选转化子,并从随机挑选的20株转化子中,获得抗氯霉素水平达到110μg/ml的转化子T1和T2,所含重组质粒分别被命名为pJH和pJB。经限制性酶切分析及杂交分析表明,pJH质粒上插入了一段来源于pHH205质粒的DNA片段,其大小为800bp左右。通过重新转化实验进一步表明,该DNA片段在大肠杆菌中具有启动子功能,从而证明,在古细菌(盐生盐杆菌)的质粒DNA中存在具有真细菌(大肠杆菌)基因启动子活性的DNA片段。 展开更多
关键词 盐生盐杆菌 启动子活性 质粒DNA 真细菌基因
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盐生盐杆菌DNA片段RM07的-35、-10区缺失分析 被引量:1
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作者 王茵 黄玉屏 +1 位作者 段珍红 沈萍 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期69-74,共6页
RM0 7DNA片段分离自嗜盐古菌———盐生盐杆菌R1 ,该片段不仅在嗜盐古菌内具有启动子功能 ,而且在大肠杆菌中也具有启动子活性。序列分析表明其上确实含有细菌启动子的 35、 1 0保守区。进一步通过缺失分析证实该片段就是在大肠杆菌中... RM0 7DNA片段分离自嗜盐古菌———盐生盐杆菌R1 ,该片段不仅在嗜盐古菌内具有启动子功能 ,而且在大肠杆菌中也具有启动子活性。序列分析表明其上确实含有细菌启动子的 35、 1 0保守区。进一步通过缺失分析证实该片段就是在大肠杆菌中具启动功能的DNA片段 :仅含 1 0区而缺失 35区的RM0 7a片段基本上无启动活性 ;而含 35和 1 0区的0 1kb片段RM0 7b具有高于RM0 7的启动活性。研究结果还表明 ,RM0 7片段在大肠杆菌中的启动活性是受环境因素调节的 ,尤其是对氯化钠浓度的提高具有明显的相关性。因此RM0 7片段有可能成为构建双功能表达载体的新启动子资源 ,同时对进一步揭示古菌的融合特征及水平基因转移具有特殊意义。 展开更多
关键词 盐生盐杆菌 启动子活性 大肠杆菌 缺失分析 RM07片段
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