ACUPUNCTURE-MOXIBUSTION, HEAT SHOCK PROTEIN 70 AND CYTOPROTECTION

Pleat shock protein 70 （HSP70） is a kind of non-specific cytoprotective protein, and its generation can be induced by acupuncture and moxibustion. In the present paper, the authors review the protective actions of HSP70 on the heart, gastric mucosa, liver, brain tissues, kidney, etc., and the relationship among acupuncture/moxibustion, heat shock protein and the cytoprotective actions. It is worth studying the cytoprotective effect of acupuncture and moxibustion by way of the resultant generation of HSP70 in the organism.

血清CF-6、HSP-70表达对慢性心力衰竭患者病情及预后的评估价值

目的探究血清线粒体偶联因子-6(CF-6)、热休克蛋白70(HSP-70)表达对慢性心力衰竭(CHF)患者病情及预后的评估价值。方法选取2020年12月至2021年12月我院收治的CHF患者106例(CHF组),根据美国纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级标准分为:NYHAⅡ级36例(Ⅱ级组),NYHAⅢ级38例(Ⅲ级组),NYHAⅣ级32例(Ⅳ级组);根据预后情况分为预后良好组54例,预后不良组52例;选择同期我院体检健康的106例志愿者为对照组。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清中CF-6、HSP-70的表达水平;多因素Logistic回归分析影响CHF预后的危险因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清中CF-6、HSP-70对CHF预后的评估价值。结果与对照组相比,CHF组血清中CF-6、HSP-70表达水平显著升高(P<0.05)。CHF患者Ⅳ级组血清CF-6、HSP-70表达水平显著高于Ⅱ级组和Ⅲ级组,Ⅲ级组表达水平显著高于Ⅱ级组(P<0.05)。与预后良好组相比,预后不良组CF-6、HSP-70水平显著升高(P<0.05)。预后不良组血肌酐水平显著高于预后良好组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,CF-6、HSP-70、血肌酐表达水平是影响CHF预后的危险因素;ROC分析显示,血清CF-6、HSP-70水平联合预测CHF预后的AUC高于CF-6、HSP-70单独预测的AUC值(P<0.05)。结论CHF患者血清CF-6、HSP-70表达水平显著升高,并随着病情加重而升高,二者对CHF患者的预后评估有一定的临床价值。

Hcy、HSP70、H-FABP对脑梗死患者的疗效评估作用

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)、热休克蛋白70(HSP70)、心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)对丁苯酞联合通窍活血汤治疗脑梗死患者的疗效评估作用。方法选取鹿邑县人民医院2021年10月至2022年10月收治的82例脑梗死患者作为研究对象,给予丁苯酞联合通窍活血汤治疗。比较有效组和无效组的临床资料及血清学指标,Logistic回归分析影响治疗效果的因素,分析血清Hcy、HSP70、H-FABP单独及联合检测预测治疗效果的价值并编制ROC曲线。结果治疗14 d后,显效38例、有效30例、无效14例,治疗有效率为82.93%。其中有效组68例,无效组14例;有效组Hcy、HSP70、H-FABP水平均低于无效组;Hcy、HSP70、H-FABP均是影响脑梗死患者治疗效果的危险因素;血清Hcy、HSP70、H-FABP联合检测预测治疗效果的AUC值高于单项检测,差异有统计学意义(Z_(Hcy)=3.038,Z_(HSP70)=2.411,Z_(H-FABP)=2.352,P<0.05)。结论血清Hcy、HSP70、H-FABP联合检测对丁苯酞联合通窍活血汤治疗的脑梗死患者的临床疗效具有一定预测价值。

血清N末端B型利钠肽原和胰岛素样生长因子结合蛋白7及热休克蛋白47联合检测在慢性心力衰竭患者诊断中的应用价值分析

目的探讨血清N末端B型利钠肽原(NT-pro BNP)、胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)、热休克蛋白47(HSP47)联合检测在慢性心力衰竭(CHF)患者诊断中的应用价值分析。方法选取2021年12月至2023年12月唐山中心医院收治的CHF患者(n=106)为CHF组,另选取同期在本院健康体检者(n=106)为对照组。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定两组血清NT-pro BNP、IGFBP7、HSP47表达水平,多因素logistic回归分析影响CHF发生的因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析其对CHF患者的诊断价值。结果CHF组血清NT-pro BNP、IGFBP7、HSP47水平与对照组相比,明显升高(t=0.960、8.047、11.196,P<0.05)。血清NT-pro BNP、IGFBP7、HSP47三者联合诊断CHF的AUC最高,高于单独检测(Z_(三者联合-NT-pro BNP)=3.847、P=0.001,Z_(三者联合)-IGFBP7=4.672、P<0.001,Z_(三者联合-HSP47)=2.101、P=0.036)。多因素logistic结果显示,血清NT-pro BNP、IGFBP7、HSP47水平是影响CHF的危险因素(P<0.05),左心室射血分数(LVEF)是影响CHF的保护因素(P<0.05)。结论CHF患者血清中NT-pro BNP、IGFBP7、HSP47表达水平升高,三者联合诊断CHF的效能最好。

超声检查联合血清糖原合成酶激酶-3β和热休克蛋白27对慢性肺源性心脏病的诊断价值

目的 探讨超声检查联合血清糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和热休克蛋白27(HSP27对慢性肺源性心脏病(CPHD)的诊断价值。方法 将100例CPHD患者设为观察组,100名健康体检者设为对照组。比较两组受试者一般资料、实验室检查结果、超声检查结果、GSK-3β及HSP27水平。采用Pearson相关性分析法探讨超声检查指标与血清HSP27、GSK-3βmRNA水平的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析超声检查和各项血清指标对CPHD的诊断效能。结果 观察组受试者肺动脉压高于对照组,主肺动脉内径、右室内径及右房内径均长于对照组(P<0.01)。观察组受试者血清HSP27水平高于对照组,血清GSK-3β mRNA水平低于对照组(P<0.01)。血清HSP27水平与肺动脉压、主肺动脉内径、右房内径和右室内径均呈正相关(P<0.05或0.01)。血清GSK-3β mRNA水平与肺动脉压、主肺动脉内径、右房内径和右室内径均呈负相关(P<0.05或0.01)。超声参数、血清GSK-3β、HSP27诊断CPHD的曲线下面积(AUC)分别为0.880、0.834和0.868,联合诊断的AUC为0.923,高于单独诊断。结论 超声参数、血清GSK-3β和HSP27对CPHD均具有较高的诊断价值,联合检测的诊断效果更高。

超声心动图参数及HSP70基因多态性与老年慢性心力衰竭预后的相关性分析

目的:分析超声心动图参数、热休克蛋白70(HSP70)基因多态性与老年慢性心力衰竭患者预后的相关性。方法:选取2019年10月至2021年10月于我院治疗的老年慢性心力衰竭患者142例作为研究对象,对其进行1年随访观察,用是否发生心血管事件评估其预后情况,将其分为预后不良组(32例)、预后良好组(110例)。收集患者出院前超声心动图检测参数,采用聚合酶链反应(PCR)结合限制性内切酶分析检测HSP70-1基因+190G/C、HSP70-2基因+1267A/C、HSP70-hom基因+2437T/C多态性,结合患者临床人口学与病理资料,分析两组患者超声心动图参数及HSP70基因多态性差异。采用二元Logistic回归分析老年慢性心力衰竭预后与超声心动图参数及HSP70基因多态性的相关性,建立ROC曲线评估超声心动图参数及HSP70基因多态性预测预后不良的价值。结果:与预后良好组患者相比,预后不良组患者超声心动图参数左心室舒张末期直径(LVEDD)、左心室收缩末期直径(LVESD)均更高(P<0.05),左心室射血分数(LVEF)更低(P<0.05)。与预后良好组患者相比,预后不良组患者HSP70-2基因+1267A/C基因型、等位基因差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示年龄、LVEDD、LVEF、HSP70-2基因+1267A/C多态性是预后不良的影响因素(P<0.05)。LVEDD、LVEF、HSP70-2基因+1267A/C多态性单独、联合预测预后不良曲线下面积分别为0.728、0.852、0.624、0.985。结论:LVEDD、LVEF、HSP70-2基因+1267A/C多态性是老年慢性心力衰竭患者预后的影响因素,LVEDD升高,LVEF降低以及GG基因型均可增加老年慢性心力衰竭预后不良风险,三者联合时预测预后不良效能更高。

miR-149-3p在先天性心脏病胎鼠心脏组织中的表达及其对P19细胞分化的影响

目的 探讨miR-149-3p在先天性心脏病(CHD)胎鼠心脏组织中的表达及其对小鼠畸胎瘤P19细胞分化的影响。方法 建立CHD室间隔缺损胎鼠模型,于妊娠第19天,HE染色观察心脏组织病理学变化,实时荧光定量PCR(qPCR)检测心脏组织中miR-149-3p和热休克蛋白蛋白家族B成员6(HSPB6)mRNA表达水平。二甲基亚砜(DMSO)诱导P19细胞向心肌细胞分化,并收集分化第0、5、10天的细胞,qPCR检测诱导分化过程中心肌分化标志物GATA结合蛋白4(GATA4)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、心房利钠尿多肽(ANP)的mRNA表达水平以及HSPB6 mRNA和miR-149-3p表达水平。miR-149-3p过表达慢病毒和空载慢病毒感染P19细胞,DMSO诱导分化第10天,免疫荧光染色检测细胞中cTnI蛋白表达情况,qPCR检测心肌分化相关标志物mRNA表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-149-3p与HSPB6之间的靶向关系。结果 与正常组比较,CHD组胎鼠出现心脏室间隔缺损,心脏组织中miR-149-3p高表达,而HSPB6低表达(P<0.01)。P19细胞在向心肌细胞分化的过程中,GATA4、cTnT、ANP和HSPB6mRNA水平均逐渐上升,而miR-149-3p表达水平逐渐下降(P<0.05)。诱导分化第10天,miR-149-3p过表达可明显降低心肌细胞分化率,并下调GATA4、cTnT、ANP mRNA表达水平(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实,miR-149-3p可以靶向调控HSPB6表达。结论 miR-149-3p可能通过靶向下调HSPB6抑制P19细胞向心肌细胞分化。

热休克蛋白在器官移植中的作用研究现状

器官移植是多种终末期疾病有效的治疗方案,近年来,器官移植领域发展迅速,并得到广泛认可和应用,但供者利用率低和术后并发症高仍是亟需解决的问题。热休克蛋白(HSP)是一类由热休克或其他应激源诱导表达的蛋白质家族,应激刺激时HSP通过发挥抗炎、抗氧化、抗凋亡作用来减少应激带来的损伤,HSP还参与促进免疫反应、抗排斥反应等过程。器官移植手术作为应激刺激,诱导HSP在移植过程中通过多途径发挥作用,从而减轻移植物组织损伤、提高供者利用率、延长移植受者术后生存时间。本文就HSP在肺移植、心脏移植、肝移植、肾移植中的作用研究现状进行综述,旨在为器官移植供者保护及术后并发症的治疗提供参考。

红景天苷对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的预防保护时限

目的:探讨红景天苷对大鼠肾脏缺血再灌注损伤预防保护时限,阐明其可能机制。方法:54只健康成年SD大鼠随机分成9组,分别为空白对照组、缺血再灌注夹闭15、30、45和60min组、腹腔注射红景天苷水溶液夹闭15、30、45和60min组,每组6只。缺血再灌注组和红景天苷组大鼠分别制作肾脏缺血再灌注模型,红景天苷组大鼠实验前采用红景天苷水溶液预处理。检测各组血清肌酐(Scr)水平;切除右肾,夹闭左肾蒂相应时间后取左肾组织HE染色,用光镜观察肾组织病理改变,蛋白质印迹法和免疫组织化学法分别检测肾组织中热休克蛋白72(HSP72)和核转录因子κB(NF-κB)的表达。结果:与缺血再灌注各组比较,红景天苷夹闭15、30和45min组大鼠Scr水平明显下降(P<0.01),病理损伤明显减轻,肾脏组织中HSP72和NF-κB表达也明显减少。与空白对照组比较,红景天苷各组大鼠血清Scr水平有所上升,其中夹闭60min明显上升(P<0.05),夹闭15、30和45min时病理损伤变化不明显。结论:应用红景天苷后,大鼠肾脏缺血再灌注损伤明显减轻,其机制可能是通过抑制肾组织中Hsp72和NF-κB的表达,增强肾脏抗氧化能力,从而减轻肾脏组织炎性细胞浸润和细胞凋亡。

HSP70表达上调对兔快速心房起搏致房颤心肌K_(Ca)3.1表达的影响

目的:观察热应激诱导心肌热休克蛋白(HSP)70表达上调,对兔快速心房起搏致房颤心肌钙激活钾通道(K_(Ca))3.1表达的影响。方法:将24只新西兰大白兔随机分为假手术组(n=8,仅植入电极而不起博)、起搏组(n=8,以600次/min快速起搏右心房6h)和热应激起搏组(热应激组,n=8,先行热应激预处理,再行与起搏组一样的快速起搏)。结果:与假手术组和起搏组比较,热应激组心脏各部位HSP70mRNA和蛋白表达显著上调[HSP70蛋白,左房:(39.00±3.21)比(39.75±2.82)比(69.75±3.45),右房:(38.38±2.92)比(39.50±3.89)比(69.00±2.93),左心耳:(37.75±3.28)比(39.00±3.89)比(68.63±3.23),右心耳:(37.00±3.85)比(38.38±3.74)比(68.75±2.82)],P均<0.01,而起搏组和假手术组间无显著性差异(P>0.05);与起搏组K_(Ca)3.1mRNA和蛋白表达量显著下调比较,热应激组心脏各部位K_(Ca)3.1 mRNA和蛋白表达量显著上调[K_(Ca)3.1蛋白,左房:(21.25±1.67)比(24.00±2.62),右房:(21.13±1.96)比(23.75±1.83),左心耳:(21.00±2.07)比(23.75±1.67),右心耳:(20.88±2.03)比(23.50±2.45)],P均<0.05,且热应激组与假手术组间无显著差异(P>0.05)。结论:热应激可诱导心房起搏心肌热休克蛋白(HSP)70表达上调,抑制K_(Ca)3.1mRNA和蛋白表达量显著下降。

电击死大鼠心脏超微结构及HSP70、HIF-1α表达变化

目的观察电击死大鼠心脏超微结构及热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)、低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的表达变化,探讨其是否能作为电击死法医学鉴定的依据。方法将72只SD大鼠随机分为电击死组、死后电击组和对照组。通过透射电镜观察电击死大鼠心肌超微结构的改变,并采用免疫组织化学技术观测心肌HSP70和HIF-1α的表达变化。结果电击大鼠心肌细胞肌原纤维断裂,线粒体嵴和膜溶解消失,Z线、M线排列紊乱。HSP70和HIF-1α在电击死组呈强阳性表达,与死后电击组、对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HSP70和HIF-1α在电击死组表达明显上调,有望作为电击死的诊断参考指标。

大鼠心肌缺血后心、肝组织应激改变的研究

目的本研究旨在探讨短暂和持续心肌缺血应激后大鼠心、肝组织病理改变及热休克蛋白(HSP70)的表达规律。方法复制大鼠短暂心肌缺血(BMI)5min后再灌20h及持续心肌缺血(MI)20h模型,取心、肝组织,用Western blotting法、免疫组化及HE染色,观察大鼠心、肝组织的病理变化和HSP70的表达规律。结果短暂和持续心肌缺血后心、肝组织病理形态均有改变,HSP70表达均显著增加,心、肝组织中HSP70表达在短暂心肌缺血再灌组增加显著且组织病变较轻,持续心肌缺血组HSP70表达较少且组织损伤较大。结论不同程度心肌缺血对心、肝组织病理改变和HSP70表达影响不同,短暂心肌缺血再灌比持续心肌缺血对心脏及肝脏组织损伤较小而刺激组织HSP70增加较多。

人结核杆菌HSP70原核表达质粒的构建及其抗肿瘤效应

目的构建可在大肠杆菌中表达编码人结核杆菌(TB)热休克蛋白70(HSP70)基因的表达质粒,并经纯化后研究重组蛋白rHSP70抗肿瘤效应。方法采用基因工程技术将HSP70基因经PCR及末端修饰后装入大肠杆菌质粒pRSET-B中,构建成新的重组质粒pMT70-3。诱导表达纯化后经Western-blot、抗原肽结合试验、native-page鉴定,在有ADP、MgCl2存在时利用重组人 TB的HSP70与小鼠淋巴细胞白血病细胞系L1210的上清于37℃温育形成HSP70-肿瘤抗原肽复合物,以此作为抗原进行体内肿瘤免疫保护试验。结果 HSP70基因的表达质粒构建成功,其产物人TB rHSP70经纯化后具有生物活性。实验动物的腹水量较对照组下降,表明该复合物可引起一定的免疫保护反应(与对照组比较P<0．05)。结论人TB rHSP70-肿瘤抗原肽复合物免疫刺激后可使小鼠产生针对同种肿瘤的强烈免疫作用,与其剂量有一定的相关性。人TB HSP70不仅可起到免疫佐剂的作用,且肿瘤抗原肽复合物也起到一定的抗肿瘤作用。

四逆汤预处理对大鼠心缺血再灌注后心功能的延迟保护作用

目的:探讨四逆汤诱导的心肌延迟预适应对心缺血再灌注(MI/R)后心功能的影响及其可能机制。方法:缺血再灌注采用经典大鼠冠脉结扎,缺血1h,再灌1h。四逆汤预处理灌胃(5g/kg·d)连续3天,末次灌药24小时后缺血1h,再灌1h。以大鼠左心功能为评价指标,通过RTPCR检测热休克蛋白70(HSP70)mRNA的表达情况,利用免疫组织化学染色法检测大鼠心肌HSP70的表达。结果:四逆汤预处理组与缺血再灌注组相比可以显著改善心功能,上调HSP70基因的表达及蛋白合成。结论:四逆汤预处理对MI/R后心功能的损害具有延迟保护效应,其机制与四逆汤诱导HSP70的表达密切相关。

全麻复合硬膜外阻滞对高血压大鼠心肌c-fos和HSP70基因表达的影响

目的通过检测高血压大鼠心肌组织c-fos和HSP70基因的表达水平,研究全麻复合硬膜外阻滞减轻应激反应的效果。方法 18只SHR和18只SD大鼠随机分3组:气管切开全麻复合硬膜外阻滞组(A1、A2)、气管切开全麻组(B1、B2)和对照组(D1、D2)。全麻以氟芬合剂(0.1～0.3ml/kg)复合地西泮(3～6mg/kg)腹腔注射,气管切开连接简易呼吸装置。硬膜外阻滞选择T11-T12棘突间隙切开直接向头端插入硬膜外导管2cm,缓慢注入1%利多卡因0.2ml。A1、A2、B1、B2组施行脾脏切除术。尾动脉置管连接监护仪监测MAP、HR,同时观察呼吸改变。术后24h处死动物,取心肌组织2块,液氮保存。用RT-PCR方法检测c-fos和HSP70两基因反应产物相对于β-actin值。结果高血压大鼠全麻复合硬膜外阻滞组(A1)的c-fos/β-actin比值显著低于单纯全麻组(B1),而HSP70/β-actin比值显著高于全麻组。结论与单纯全麻比较,全麻复合胸段硬膜外阻滞可以减少高血压大鼠手术刺激时心肌c-fos表达、降低应激反应水平,同时增强HSP70表达,对心肌具有一定的保护作用。

人结核分支杆菌HSP70的原核表达质粒的构建及诱导表达

目的 构建编码人结核分支杆菌 (TB)热休克蛋白 70 (HSP70 )的Dnak基因的重组原核表达质粒 ,并研究其表达动力学。方法 质粒pMT70用限制性内切酶消化、核酸体外扩增 (PCR)及末端修饰后可获得Dnak基因全长 ,与大肠杆菌质粒 pRSET连接重组 ,阳性克隆经酶切分析鉴定后即为质粒 pMT70 3,转入受体菌BL2 1DE3中 ,经诱导剂异丙基硫代 - β -D-半乳糖 (IPTG)诱导 ,由SDS -PAGE、Western -blot鉴定 ,并以薄层扫描分析。结果 重组表达质粒 pMT70 3构建成功 ,可在大肠杆菌中高效表达 ,诱导后 1h即开始表达 ,16h达高峰期。表达量占菌体总蛋白的 6 5 % ,可溶性产物占总表达量的 90 %。结论 pMT70 3质粒不仅构建成功且更有利于对分支杆菌HSP70蛋白的纯化 ,方便对其抗结核。

复方中药对慢性热应激下蛋鸡生产性能和心脏组织HSP70表达量的影响

选取250只60日龄蛋鸡,随机分为5组:空白对照组、维生素C组、复方中药Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,每天记录各组的耗料量、蛋重、产蛋量、死淘数以及软、破蛋数量,采用ELISA法测定蛋鸡心脏组织HSP70表达量。结果显示,复方中药能够全面改善热应激状态下蛋鸡的生产性能,其中复方Ⅱ的效果最佳;中药复方组蛋鸡心脏组织热休克蛋白-70(HSP70)表达量均低于空白对照组,其中复方Ⅱ组下降的幅度最大,表明各复方中药均能提高热应激蛋鸡的生产性能,其作用机制可能与调控HSP70表达量有关。试验探讨了中药复方对慢性热应激下蛋鸡生产性能和心脏组织HSP70表达量的影响,研究成果具有指导生产实际价值。

低氧及常氧灌流对离体大鼠心脏应激蛋白的诱导

目的和方法：观察低氧灌流和常氧灌流诱导离体大鼠心脏的应激蛋白合成。结果：低氧和常氧灌流均可诱导３个分子量为７０ｋＤａ的一组应激蛋白（ｓｐ６８，７０和７２）合成显著增加，５个分子量为６０ｋＤａ的一组应激蛋白（ｓｐ５４－６５）合成也有所增加。比较不同灌流方式和时程对应激蛋白合成的影响，发现７０ｋＤａ的一组应激蛋白合成量在常氧灌流的离体心脏中高于低氧灌流；并且该组应激蛋白合成量在经两种灌流方式处理１ｈ的以脏高于灌流处理２ｈ的心脏。结论：应激蛋白合成量并不与应激原的迭加或与细胞受环境损害的严重性成正比。对灌流的离体心脏而言，缺血可能是诱导应激蛋白合成的主要因素。

HSP70在发绀型先天性心脏病人心肌组织中的表达

目的 :探讨发绀型先天性心脏病人心肌细胞中HSP70的表达及其心肌保护作用。方法 :非发绀型先天性心脏病人 12例 (A组 ) ,发绀型先天性心脏病人 12例 (B组 )。两组病人于阻断主动脉前、阻断主动脉后 2 0min及开放主动脉后 2 0min ,取右房心肌标本 ,分别进行免疫组化法检测HSP70的含量及化学比色法检测SOD活性、MDA的含量。结果 :心肌细胞中HSP70的含量在手术过程中无明显变化 (P >0 .0 5 ) ;B组HSP70的含量明显低于A组 (P <0 .0 5 )。手术过程中B组SOD活性明显降低 ,MDA含量明显高于A组 (P <0 .0 5 )。结论 :发绀型先天性心脏病人心肌细胞中HSP70呈低水平表达与其抗缺血 /再灌注损伤作用减弱有关。