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AAV mediated carboxyl terminus of Hsp70 interacting protein overexpression mitigates the cognitive and pathological phenotypes of APP/PS1 mice
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作者 Zhengwei Hu Jing Yang +7 位作者 Shuo Zhang Mengjie Li Chunyan Zuo Chengyuan Mao Zhongxian Zhang Mibo Tang Changhe Shi Yuming Xu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS 2025年第1期253-264,共12页
The E3 ubiquitin ligase,carboxyl terminus of heat shock protein 70(Hsp70)interacting protein(CHIP),also functions as a co-chaperone and plays a crucial role in the protein quality control system.In this study,we aimed... The E3 ubiquitin ligase,carboxyl terminus of heat shock protein 70(Hsp70)interacting protein(CHIP),also functions as a co-chaperone and plays a crucial role in the protein quality control system.In this study,we aimed to investigate the neuroprotective effect of overexpressed CHIP on Alzheimer’s disease.We used an adeno-associated virus vector that can cross the blood-brain barrier to mediate CHIP overexpression in APP/PS1 mouse brain.CHIP overexpression significantly ameliorated the performance of APP/PS1 mice in the Morris water maze and nest building tests,reduced amyloid-βplaques,and decreased the expression of both amyloid-βand phosphorylated tau.CHIP also alleviated the concentration of microglia and astrocytes around plaques.In APP/PS1 mice of a younger age,CHIP overexpression promoted an increase in ADAM10 expression and inhibitedβ-site APP cleaving enzyme 1,insulin degrading enzyme,and neprilysin expression.Levels of HSP70 and HSP40,which have functional relevance to CHIP,were also increased.Single nuclei transcriptome sequencing in the hippocampus of CHIP overexpressed mice showed that the lysosomal pathway and oligodendrocyte-related biological processes were up-regulated,which may also reflect a potential mechanism for the neuroprotective effect of CHIP.Our research shows that CHIP effectively reduces the behavior and pathological manifestations of APP/PS1 mice.Indeed,overexpression of CHIP could be a beneficial approach for the treatment of Alzheimer’s disease. 展开更多
关键词 adeno-associated virus Alzheimer’s disease APP/PS1 mice carboxyl terminus of hsp70 interacting protein gene therapy
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Effect of Ultraviolet Radiation on Hsp70 Protein Expression in HaCaT Cells
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作者 Sergio Hugo Sánchez Rodríguez Jesús Rodríguez Vergil +6 位作者 Manuel Venancio Muñoz Juárez Kevin Said Ramírez Dávila Luis Martín García Ortiz Germán Flores Cortés Luz Elena Vidales Rodríguez Jesús Adrián López David Alejandro García López 《World Journal of Nuclear Science and Technology》 CAS 2024年第1期59-71,共13页
Ultraviolet radiation by its wavelength is divided into: UVA, UVB and UVC. Only UVA and UVB manage to penetrate the ozone layer, but due to anthropological activities, all of them are capable of interacting with human... Ultraviolet radiation by its wavelength is divided into: UVA, UVB and UVC. Only UVA and UVB manage to penetrate the ozone layer, but due to anthropological activities, all of them are capable of interacting with humans to a greater or lesser extent, and can generate adverse effects such as cellular stress when interacting with intra-and extracellular biomolecules. The skin is the first organ in contact with UV radiation, and the stress it generates can be analyzed by the expression of a bioindicator of cellular damage such as Hsp70. Therefore, the objective of the project was: to determine the effect of UVA, UVB and UVC radiation on HaCaT epithelial cells, by analyzing the expression of Hsp70. Materials and methods: HaCaT cells were cultured in vitro, which were irradiated with UVA, UVB and UVC light at different doses, to subsequently determine the degree of Hsp70 expression by Immunodetection by PAGE-SDS and Western Blot. Results: Basal expression of Hsp70 was observed in no irradiated HaCaT cells. When HaCaT cells were irradiated with UVA, UVB, UVC, an increase in this Hsp70 protein was observed. With UVA, a higher degree of expression was observed at a time of 30 minutes of irradiation. With UVB the highest expression shifted to a time of 20 minutes. With UVC, overexpression was observed after 10 minutes. Conclusion: UV radiation generates cellular stress on HaCaT cells, evaluated by the stress bioindicator Hsp70. According to the wavelength of UV radiation, those that have a shorter wavelength have a greater potential for cellular damage, such as UVC. 展开更多
关键词 Ultraviolet A Light (UVA) Ultraviolet B Light (UVB) Ultraviolet C Light (UVC) Heat Shock protein 70 (hsp70) HACAT
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Effect of chaperone–client interaction strength on Hsp70-mediated protein folding
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作者 邹禄军 陆伽俊 徐秀莲 《Chinese Physics B》 SCIE EI CAS CSCD 2023年第11期635-641,共7页
Protein folding in crowding cellular environment often relies on the assistance of various chaperones. Hsp70 is one of the most ubiquitous chaperones in cells. Previous studies showed that the chaperone–client intera... Protein folding in crowding cellular environment often relies on the assistance of various chaperones. Hsp70 is one of the most ubiquitous chaperones in cells. Previous studies showed that the chaperone–client interactions at the open state tend to remodel the protein folding energy landscape and direct the protein folding as a foldase. In this work, we further investigate how the chaperone–client interaction strength modulates the foldase function of Hsp70 by using molecular simulations. The results showed that the time of substrate folding(including the whole folding step and substrate release step) has a non-monotonic dependence on the interaction strength. With the increasing of the chaperone–client interaction strength, the folding time decreases first, and then increases. More detailed analysis showed that when the chaperone–client interaction is too strong, even small number of chaperones–client contacts can maintain the substrate bound with the chaperone. The sampling of the transient chaperones–client complex with sparse inter-molecule contacts makes the client protein have chance to access the misfolded state even it is bound with chaperone. The current results suggest that the interaction strength is an important factor controlling the Hsp70 chaperoning function. 展开更多
关键词 protein folding molecular chaperone molecular dynamics hsp70
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Ischemic preconditioning induces chaperone hsp70 expression and inhibits protein aggregation in the CA1 neurons of rats 被引量:2
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作者 葛鹏飞 罗天飞 +3 位作者 张纪周 陈大伟 栾永新 付双林 《Neuroscience Bulletin》 SCIE CAS CSCD 2008年第5期288-296,共9页
Objective To investigate the effect of ischemic preconditioning on chaperone hsp70 expression and protein aggregation in the CA1 neurons of rats, and to further explore its potential neuroprotective mechanism. Methods... Objective To investigate the effect of ischemic preconditioning on chaperone hsp70 expression and protein aggregation in the CA1 neurons of rats, and to further explore its potential neuroprotective mechanism. Methods Two-vesseloccluded transient global ischemia rat model was used. The rats were divided into sublethal 3-min ischemia group, lethal 10- min ischemia group and ischemic preconditioning group. Neuronal death in the CA1 region was observed by hematoxylineosin staining, and number of live neurons was assessed by cell counting under a light microscope. Immunochemistry and laser scanning confocal microscopy were used to observe the distribution of chaperone hsp70 in the CA1 neurons. Differential centrifuge was used to isolate cytosol, nucleus and protein aggregates fractions. Western blot was used to analyze the quantitative alterations of protein aggregates and inducible chaperone hsp70 in cellular fractions and in protein aggregates under different ischemic conditions. Results Histological examination showed that ischemic preconditioning significantly reduced delayed neuronal death in the hippocampus CA1 region (P 〈 0.01 vs 10-min ischemia group). Sublethal ischemic preconditioning induced chaperone hsp70 expression in the CA1 neurons after 24 h reperfusion following 10-min ischemia. Induced-hsp70 combined with the abnormal proteins produced during the secondary lethal 10-min ischemia and inhibited the formation of cytotoxic protein aggregates(P〈0.01 vs 10-min ischemia group).Conelusion Ischemic preconditioning induced chaperone hsp70 expression and inhibited protein aggregates formation in the CA1 neurons when suffered secondary lethal ischemia, which may protect neurons from death. 展开更多
关键词 ischemic preconditioning protein aggregation CHAPERONE hsp70
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过表达热激蛋白70促进C2C12细胞糖酵解相关基因表达
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作者 秦蕾 许可 +8 位作者 张春光 楚菡 邓诗凡 张建斌 杨华 洪亮 张贵峰 孙超 蒲蕾 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1417-1425,共9页
本文旨在研究热激蛋白70(70-kD heat shock proteins,Hsp70)过表达对C2C12细胞成肌成脂状态下糖酵解的影响。本文以C2C12细胞为研究材料,采用腺病毒过表达Hsp 70基因,通过荧光定量PCR技术和Western印迹技术检测糖酵解基因的表达变化。... 本文旨在研究热激蛋白70(70-kD heat shock proteins,Hsp70)过表达对C2C12细胞成肌成脂状态下糖酵解的影响。本文以C2C12细胞为研究材料,采用腺病毒过表达Hsp 70基因,通过荧光定量PCR技术和Western印迹技术检测糖酵解基因的表达变化。研究表明,在C2C12细胞成肌分化的过程中,Hsp 70基因与Gsk3β、Pkm、Prkag3、Pfkm和Hk-2基因表达趋势基本一致,推测Hsp70在成肌分化过程中与糖酵解途径有关。细胞过表达Hsp 70在成肌分化后期能显著上调Gsk3β、Pkm、Prkag 3和Pfkm基因的表达(P<0.05),对Hk-2基因的表达未见显著影响(P>0.05)。C2C12细胞成脂诱导过程中,Hsp 70基因与Gsk3β、Pkm、Prkag3、Pfkm和Hk-2基因表达趋势基本一致,推测Hsp70在成脂诱导过程中与糖酵解途径有关。过表达Hsp 70时,C2C12细胞成脂诱导中后期,脂滴数量明显高于对照组,Gsk3β、Pkm、Prkag 3和Pfkm基因的表达显著上调(P<0.05),Hk-2基因的表达未见显著影响(P>0.05)。综上所述,Hsp70在C2C12细胞成肌成脂状态下,通过促进糖原分解为6-磷酸葡萄糖,从而加强糖酵解途径,为Hsp 70基因对C2C12细胞糖酵解的功能研究提供参考。 展开更多
关键词 热激蛋白70基因 C2C12细胞 成肌分化 成脂诱导 糖酵解
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Effects of moxibustion on heat-shock protein 70 expression in the spinal cord and colonic mucosa in a rat model of ulcerative colitis 被引量:3
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作者 Li Qi Yin Shi +6 位作者 Luyi Wu Jingping Mu Linying Tan Xiaopeng Ma Huirong Liu Shifen Xu Huangan Wu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2010年第22期1717-1722,共6页
Pathological changes in the colon are closely associated with the spinal cord, and innervation of spinal cord can regulate cellular functions. Our previous studies verified that moxibustion protects and restores the c... Pathological changes in the colon are closely associated with the spinal cord, and innervation of spinal cord can regulate cellular functions. Our previous studies verified that moxibustion protects and restores the colonic mucosa, but the mechanisms of action remain unknown. The present study observed the effects of moxibustion and salicylazosulfapyridine on expression of heat-shock protein 70 (HSP70) and its mRNA in the spinal cord and colonic mucosa of ulcerative colitis rats. Results demonstrated that moxibustion and salicylazosulfapyridine increased HSP70 mRNA expression in the spinal cord and colonic mucosa of ulcerative colitis rats. The decreased transcriptional activity of HSP70 in the spinal cord and colonic mucosa might participate in damage to the colonic mucosa in ulcerative colitis rats. Moxibustion exerted protective effects on colonic mucosa by up-regulating HSP70 transcriptional activity in the spinal cord and colonic mucosa. 展开更多
关键词 heat-shock protein 70 MOXIBUSTION spinal cord colonic mucosa ulcerative colitis
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Immunogenicity and protective efficacy of recombinant M2e.Hsp70c(Hsp70_(359–610)) fusion protein against influenza virus infection in mice 被引量:2
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作者 Hamidreza Attaran Hassan Nili Majid Tebianian 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2014年第4期218-227,共10页
New strategies in vaccine development are urgently needed to combat emerging influenza viruses and to reduce the risk of pandemic disease surfacing. Being conserved, the M2 e protein, is a potential candidate for univ... New strategies in vaccine development are urgently needed to combat emerging influenza viruses and to reduce the risk of pandemic disease surfacing. Being conserved, the M2 e protein, is a potential candidate for universal vaccine development against influenza A viruses. Mycobacterium tuberculosis Hsp70(mHsp70) is known to cultivate the function of immunogenic antigen-presenting cells, stimulate a strong cytotoxic T lymphocyte(CTL) response, and stop the induction of tolerance. Thus, in this study, a recombinant protein from the extracellular domain of influenza A virus matrix protein 2(M2e), was fused to the C-terminus of Mycobacterium tuberculosis Hsp70(Hsp70c), to generate a vaccine candidate. Humoral immune responses, IFN-γ-producing lymphocyte, and strong CTL activity were all induced to confirm the immunogenicity of M2 e.Hsp70c(Hsp70359–610). And challenge tests showed protection against H1N1 and H9N2 strains in vaccinated groups. Finally these results demonstrates M2 e.Hsp70c fusion protein can be a candidate for a universal influenza A vaccine. 展开更多
关键词 influenza A virus M2e.hsp70 recombinant fusion protein universal influenza vaccine
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Novel heat shock protein Hsp70L1 activates dendritic cells and acts as a Th1 polarizing adjuvant 被引量:1
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作者 WanT ZhouX ChenG AnH ChenT ZhangW LiuS JiangY YangF WuY CaoX 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期771-771,共1页
Heat shock proteins (HSPs) are reported to act as effective adjuvants to elicit anti-tumor and anti-infection immunity. Here, we report that Hsp70-like protein 1 (Hsp70L1), a novel HSP derived from human dendritic cel... Heat shock proteins (HSPs) are reported to act as effective adjuvants to elicit anti-tumor and anti-infection immunity. Here, we report that Hsp70-like protein 1 (Hsp70L1), a novel HSP derived from human dendritic cells (DCs), has potent adjuvant effects that polarize responses toward Th1. With a calculated molecular weight of 54.8 kDa, Hsp70L1 is smaller in size than Hsp70 but resembles it both structurally and functionally. Hsp70L1 shares common receptors on DCs with Hsp70 and can interact with DCs, promoting DC maturation and stimulating secretion of the proinflammatory cytokines interleukin 12p70 (IL-12p70), IL-1beta, tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha), and the chemokines IP-10, macrophage inflammatory protein-1alpha (MIP-1alpha), MIP-1beta, and normal T cell expressed and secreted (RANTES). The induction of interferon-gamma-inducible protein 10 (IP-10) secretion by Hsp70L1 is not shared by Hsp70, and other functional differences include more potent stimulation of DC IL-12p70, CC-chemokine, and CCR7 and CXCR4 expression by Hsp70L1. Immunization of mice with the hybrid peptide Hsp70L1-ovalbumin(OVA)(257-264) induces an OVA(257-264)-specific Th1 response and cytotoxic T lymphocyte (CTL) that results in significant inhibition of E.G7-OVA tumor growth. The ability of Hsp70L1 to activate DCs indicates its potential as a novel adjuvant for use with peptide immunizations; the Hsp70L1 antigen peptide hybrid may serve as a more effective vaccine for the control of cancer and infectious diseases. 展开更多
关键词 Th heat Novel heat shock protein hsp70L1 activates dendritic cells and acts as a Th1 polarizing adjuvant
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脊尾白虾热休克蛋白HSP70基因的克隆及其表达分析 被引量:28
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作者 韩俊英 李健 +3 位作者 李吉涛 常志强 陈萍 李华 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1130-1138,共9页
克隆了脊尾白虾热休克蛋白基因全长cDNA,并进行了序列分析。该基因由2 250 bp的碱基组成,开放阅读框长1 959 bp,编码由652个氨基酸组成的蛋白,基因两翼分别存在83 bp(5'端)和208 bp(3'端)的非翻译区,将该基因命名为Ec-HSP70。... 克隆了脊尾白虾热休克蛋白基因全长cDNA,并进行了序列分析。该基因由2 250 bp的碱基组成,开放阅读框长1 959 bp,编码由652个氨基酸组成的蛋白,基因两翼分别存在83 bp(5'端)和208 bp(3'端)的非翻译区,将该基因命名为Ec-HSP70。与其它物种HSP70s氨基酸序列进行同源性比较发现,与甲壳动物的同源性都在90%以上,表明该蛋白属于热休克蛋白HSP70家族。聚类分析表明,脊尾白虾热休克蛋白氨基酸序列与中国明对虾和凡纳滨对虾紧密聚为一支,之后聚类顺序依次为斑节对虾、日本囊对虾、刀额新对虾等。通过荧光定量RT-PCR对该基因在肝胰腺、肌肉的表达分析表明,温度、pH和氨氮胁迫都可以引起该基因的高表达,而且肝胰腺中的高表达时间相对肌肉中出现的较早。试验结果表明,温度、pH和氨氮胁迫对脊尾白虾HSP70基因表达有一定的诱导效果,但胁迫的时间过长则抑制其表达,肝胰腺对胁迫比肌肉较敏感。 展开更多
关键词 脊尾白虾 热休克蛋白70 基因克隆 表达分析
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槲皮素对SGC-7901胃癌细胞生长及HSP70和EGFR表达的影响 被引量:12
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作者 向廷秀 陶小红 +2 位作者 姜政 王丕龙 谯敏 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期411-414,共4页
目的观察槲皮素对胃癌细胞SGC-7901生长及HSP70和EGFR的影响。方法以台盼蓝拒染法计数胃癌细胞的生长抑制率,透射电镜从形态变化上了解凋亡的发生,流式细胞术检测细胞周期变化,免疫组化检测HSP70和EGFR的表达。结果台盼蓝拒染法计数显... 目的观察槲皮素对胃癌细胞SGC-7901生长及HSP70和EGFR的影响。方法以台盼蓝拒染法计数胃癌细胞的生长抑制率,透射电镜从形态变化上了解凋亡的发生,流式细胞术检测细胞周期变化,免疫组化检测HSP70和EGFR的表达。结果台盼蓝拒染法计数显示槲皮素抑制SGC-7901细胞增殖的作用明显,且呈浓度和时间依赖性,槲皮素处理48 h后的IC50为14.12μmol/L。形态学检测显示出细胞凋亡的特征变化,流式细胞仪检测表明经10-20μmol/L的槲皮素处理,SGC-7901细胞周期阻滞于G0/G1期,经10μmol/L槲皮素处理的SGC-7901下调HSP70和EGFR蛋白的表达。结论槲皮素能抑制胃癌细胞的生长,呈时间剂量依赖性,能诱导SGC-7901发生凋亡,使细胞周期阻滞于G0/G1期,抑制增生与诱导凋亡的机制可能与下调HSP70和EGFR的表达有关。 展开更多
关键词 槲皮素 胃癌细胞 凋亡 hsp70 EGFR
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松材线虫Hsp70基因的克隆与原核表达 被引量:12
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作者 戴素明 成新跃 +1 位作者 肖启明 谢丙炎 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期512-519,共8页
热激蛋白70(Hsp70)是已知热休克蛋白家族中最重要的一种,它在细胞内的大量表达可以明显改善细胞的生存能力,提高对环境胁迫或伤害的耐受性。采用RACE-PCR技术,从松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)中克隆了Hsp70基因的全长cDNA... 热激蛋白70(Hsp70)是已知热休克蛋白家族中最重要的一种,它在细胞内的大量表达可以明显改善细胞的生存能力,提高对环境胁迫或伤害的耐受性。采用RACE-PCR技术,从松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)中克隆了Hsp70基因的全长cDNA序列(共2 061 bp)(GenBank登录号为:DQ785812)。其编码一个分子量为70 kD的642个氨基酸的蛋白序列,含有3段Hsp70家族的签名序列。同源性分析表明,氨基酸序列与其它真核生物的Hsp70序列具有很高的相似性,并与秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)热激蛋白70家族中的hsp-1基因编码的氨基酸序列更为相似。因此,将克隆的松材线虫Hsp70基因命名为Bx-hsp-1。构建了一个原核表达载体Bx70pEASY-E1,当IPTG终浓度为0.4-0.8 mmol/L时,能诱导表达融合蛋白。Bx-hsp-1基因的克隆和表达,将为松材线虫的生态适应性机理研究奠定基础。 展开更多
关键词 松材线虫 热激蛋白70 Bx-hsp-1 RACE 表达
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慢性应激抑郁模型大鼠强迫游泳后海马中Hsp70的表达 被引量:8
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作者 彭淼 韩继阳 +3 位作者 朱宇章 毕波 金魁和 丁宝坤 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期326-328,后插1,共4页
目的研究慢性应激对强迫游泳大鼠海马神经元热休克蛋白70(Hsp70)表达的影响。方法将50 只大鼠随机分为实验组和对照组各25只。实验组大鼠通过21天的应激刺激制作抑郁动物模型,此期间对照组大 鼠正常饲养。此后所有大鼠逐只进行急性强迫... 目的研究慢性应激对强迫游泳大鼠海马神经元热休克蛋白70(Hsp70)表达的影响。方法将50 只大鼠随机分为实验组和对照组各25只。实验组大鼠通过21天的应激刺激制作抑郁动物模型,此期间对照组大 鼠正常饲养。此后所有大鼠逐只进行急性强迫应激刺激。采用特异性抗体的免疫组织化学方法,观察2组大鼠在 强迫游泳后2 h、6 h、18 h、24 h和48 h各时点海马神经元Hsp70的表达情况。结果慢性应激抑郁大鼠模型接受 急性强迫游泳应激后,海马CA3区和齿状回(DG)内Hsp70蛋白的表达较对照组强迫游泳后显著降低(P<0.05)。 结论慢性应激使大鼠在急性强迫游泳应激后海马CA3区和DG内Hsp70的表达降低。 展开更多
关键词 热休克蛋白70 慢性应激 强迫游泳 海马
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电击死大鼠心脏超微结构及HSP70、HIF-1α表达变化 被引量:6
13
作者 张国忠 李瑞利 +4 位作者 冯国伟 毕海涛 王松军 丛斌 左敏 《法医学杂志》 CAS CSCD 2015年第4期262-265,共4页
目的观察电击死大鼠心脏超微结构及热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)、低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的表达变化,探讨其是否能作为电击死法医学鉴定的依据。方法将72只SD大鼠随机分为电击死组、死... 目的观察电击死大鼠心脏超微结构及热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)、低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的表达变化,探讨其是否能作为电击死法医学鉴定的依据。方法将72只SD大鼠随机分为电击死组、死后电击组和对照组。通过透射电镜观察电击死大鼠心肌超微结构的改变,并采用免疫组织化学技术观测心肌HSP70和HIF-1α的表达变化。结果电击大鼠心肌细胞肌原纤维断裂,线粒体嵴和膜溶解消失,Z线、M线排列紊乱。HSP70和HIF-1α在电击死组呈强阳性表达,与死后电击组、对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HSP70和HIF-1α在电击死组表达明显上调,有望作为电击死的诊断参考指标。 展开更多
关键词 法医病理学 电击伤 心脏 热休克蛋白70 低氧诱导因子-1Α 大鼠
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有氧运动对大鼠中枢神经系统HSP70表达的影响 被引量:5
14
作者 陆阿明 陆爱云 夏春林 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期411-414,共4页
目的:探讨有氧运动对大鼠中枢神经系统(CNS)细胞热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法:40只SD大鼠分成5组,分别为对照组、中等强度耐力训练组、中等强度耐力训练+大强度力竭运动组、大强度耐力训练组和大强度耐力训练+大强度力竭运动组... 目的:探讨有氧运动对大鼠中枢神经系统(CNS)细胞热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法:40只SD大鼠分成5组,分别为对照组、中等强度耐力训练组、中等强度耐力训练+大强度力竭运动组、大强度耐力训练组和大强度耐力训练+大强度力竭运动组,耐力训练持续6周,力竭运动在最后1次耐力训练后次日进行,各组取材后采用免疫组化和图像分析方法观察运动对CNS脑和脊髓6个部位HSP70表达的影响。结果:中等、大强度耐力训练组CNS各部位HSP70表达水平与对照组相比显著增加;力竭运动组CNS各部位HSP70表达水平均高于相应的耐力训练组,其中中等强度耐力训练+大强度力竭运动组表达增加最显著。结论:耐力训练是CNS各部位HSP70表达水平增加的重要诱导因素,运动强度的适应性改变是决定耐力训练后CNS各部位HSP70表达量的主要因素。 展开更多
关键词 hsp70表达 中枢神经系统 有氧运动 热休克蛋白70(hsp70) 耐力训练 中等强度 图像分析方法 CNS 适应性改变 训练组 运动组 SD大鼠 力竭运动 免疫组化 诱导因素 运动强度 对照组 训练后 表达量 水平
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在缺氧条件下培养的海马神经元形态结构及热休克蛋白(HSP)70表达变化及丹参的影响 被引量:16
15
作者 匡培根 刘军 +5 位作者 王福庄 黄燕华 丁爱石 吴卫平 张凤英 姜树军 《脑与神经疾病杂志》 1997年第1期1-4,共4页
在体研究曾发现在缺血再灌注模型中,丹参具神经保护作用。本文采用新生大鼠海马神经元培养技术,以细胞形态学及HSP70免疫性细胞表达为指标,首次观察了缺氧条件下培养的海马神经无形态结构及HSP70表达变化及丹参的影响。结果发现:(... 在体研究曾发现在缺血再灌注模型中,丹参具神经保护作用。本文采用新生大鼠海马神经元培养技术,以细胞形态学及HSP70免疫性细胞表达为指标,首次观察了缺氧条件下培养的海马神经无形态结构及HSP70表达变化及丹参的影响。结果发现:(1)不论缺氧1h或2h,在培养的海马神经细胞中,有的细胞出现细胞体周围光晕消失,胞浆内颗粒变性,细胞膜肥厚、粗糙,轴突变粗、断裂,并且出现HSP70免疫阳性细胞;(2)缺氧1h组的海马神经细胞存活率及HSP70免疫阳性细胞率均显著高于缺氧2h组,(3)丹参组(在缺氧0.5h前给丹参100mg/ml(终浓度)的海马神经细胞存活率及HSP70免疫阳性细胞率均显著高于缺氧2h组。结果提示丹参具有直接的抗缺氧性神经细胞损伤的作用,减轻了缺氧所造成的神经细胞形态学上的改变。 展开更多
关键词 丹参 药理 缺氧 缺血 海马神经元 热休克蛋白
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2个柞蚕诱导型HSP70基因的克隆及热应激表达特征 被引量:5
16
作者 刘微 李慧君 +6 位作者 王勇 孙影 李喜升 黄伶 肖红 姜义仁 秦利 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期83-91,共9页
研究柞蚕热休克蛋白基因在高温胁迫下的表达变化,有助于从分子水平解析柞蚕对高温的应激反应机制。采用RTPCR技术从柞蚕蛹脂肪体组织中克隆了2个热休克蛋白70基因Ap HSP70-1(Gen Bank登录号:KR821069)、Ap HSP70-2(GenBank登录号:KT2254... 研究柞蚕热休克蛋白基因在高温胁迫下的表达变化,有助于从分子水平解析柞蚕对高温的应激反应机制。采用RTPCR技术从柞蚕蛹脂肪体组织中克隆了2个热休克蛋白70基因Ap HSP70-1(Gen Bank登录号:KR821069)、Ap HSP70-2(GenBank登录号:KT225460),2个基因的开放阅读框(ORF)均为1 905 bp,编码634个氨基酸,蛋白质具有细胞质特征基序,推测为诱导型热休克蛋白,其序列N端为高度保守的ATPase功能域,C端为多肽结合功能域,是差异位点的主要分布区域。Ap HSP70-1和Ap HSP70-2蛋白之间的序列相似度为86.91%,二者与Ap HSC70蛋白序列的相似度分别为71.82%和70.14%。半定量RT-PCR检测显示,高温(43℃)诱导后柞蚕蛹脂肪体组织中Ap HSP70-1、Ap HSP70-2基因的表达量明显升高,而Ap HSC70基因的表达量变化不大;相对于Ap HSP70-2,正常环境下Ap HSP70-1在柞蚕蛹各组织中几乎不表达,但热激后被诱导表达。qRT-PCR检测高温(43℃)诱导处理后柞蚕蛹脂肪体组织中的Ap HSP70-2表达量上调了6.32倍,Ap HSP70-1的表达量上调了4.18倍。推测克隆的2个Ap HSP70基因在柞蚕应对热激胁迫的反应中发挥重要作用。 展开更多
关键词 柞蚕 热休克蛋白70 基因克隆 序列结构 高温 诱导表达
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温度、盐度对马氏珠母贝外套膜Hsp70基因表达量的联合影响 被引量:5
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作者 王亚男 王辉 +3 位作者 罗明明 朱晓闻 刘志刚 杜晓东 《广东海洋大学学报》 CAS 2012年第3期35-41,共7页
设定温度范围16~40°C,盐度范围10~50,采用复合设计和响应曲面分析法在实验室条件下研究不同温度、盐度对马氏珠母贝(P.fucata)外套膜Hsp70基因表达量的综合效应并建立模型。采用方差分析(ANOVA)、决定系数等对实验所得回归方程... 设定温度范围16~40°C,盐度范围10~50,采用复合设计和响应曲面分析法在实验室条件下研究不同温度、盐度对马氏珠母贝(P.fucata)外套膜Hsp70基因表达量的综合效应并建立模型。采用方差分析(ANOVA)、决定系数等对实验所得回归方程模型进行显著性及拟合度检验。结果表明,温度的一次、二次效应对马氏珠母贝外套膜Hsp70基因表达量影响显著(p值<0.05);盐度的一次效应对马氏珠母贝外套膜Hsp70基因表达量无显著影响(p值>0.05),二次效应对马氏珠母贝外套膜Hsp70基因表达量影响极显著(p值<0.05);温度、盐度之间的互作效应对马氏珠母贝外套膜Hsp70基因表达量无显著影响(p值>0.05)且温度的效应大于盐度的效应。经响应曲面分析法和优化,得到马氏珠母贝外套膜Hsp70基因表达量在适宜的温度、盐度范围内呈峰值变化,在温度26.85°C、盐度29.39时,马氏珠母贝外套膜Hsp70基因表达量达到最小值0.95,满意度达到99.36%。建立了马氏珠母贝外套膜Hsp70基因表达量模型方程,其决定系数98.69%,矫正决定系数97.38%,预测决定系数91.42%,模型的拟合度极高,可用于预测马氏珠母贝外套膜Hsp70基因表达量。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 热休克蛋白70 温度 盐度 相应曲面 优化
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缺氧对海马神经元培养的影响及巴曲酶的保护作用—HSP70的表达及细胞形态学的研究 被引量:5
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作者 刘军 匡培根 +4 位作者 王福庄 黄燕华 丁爱石 张凤英 吴卫平 《中风与神经疾病杂志》 CSCD 北大核心 1997年第1期8-10,共3页
本文采用新生大鼠海马神经元培养技术,以细胞形态学及HSP70免疫阳性细胞表达为指标,首次观察了巴曲酶对缺氧海马神经元损伤的直接保护作用。结果发现:在缺氧前0.5h给予巴曲酶(0.5BU/ml),海马神经细胞存活率以及... 本文采用新生大鼠海马神经元培养技术,以细胞形态学及HSP70免疫阳性细胞表达为指标,首次观察了巴曲酶对缺氧海马神经元损伤的直接保护作用。结果发现:在缺氧前0.5h给予巴曲酶(0.5BU/ml),海马神经细胞存活率以及HSP70免疫阳性细胞率均明显高于缺氧对照组(P<0.01),而在缺氧前24h给予巴曲酶后,二者与缺氧对照组均无明显差别。表明:巴曲酶对缺氧海马神经细胞损伤有直接的保护作用,而且其作用与给药的时机有关。 展开更多
关键词 缺氧 海马神经元 细胞培养 热休克蛋白70 巴曲酶
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细粒棘球绦虫Hsp70基因的克隆、表达及抗体制备 被引量:3
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作者 赵莉 陈皓斐 +8 位作者 张文宝 马正海 张壮志 张旭 古努尔·吐尔逊 米晓云 金映红 薛晶 石保新 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期2491-2501,共11页
【目的】克隆细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,E.g)热休克蛋白家族基因Hsp70,在原核细胞中表达、纯化Hsp70蛋白并制备其特异性抗体。【方法】从包囊中分离原头蚴,提取RNA,RT-PCR扩增EgHsp70基因的cDNA,将其构建至原核表达载体pMAL... 【目的】克隆细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,E.g)热休克蛋白家族基因Hsp70,在原核细胞中表达、纯化Hsp70蛋白并制备其特异性抗体。【方法】从包囊中分离原头蚴,提取RNA,RT-PCR扩增EgHsp70基因的cDNA,将其构建至原核表达载体pMAL-p2x,转化大肠杆菌BL-21菌株。通过改变诱导温度、IPTG浓度和诱导时间筛选出EgHsp70融合蛋白可溶性表达的最佳条件。并用麦芽糖亲和层析法纯化该蛋白。纯化蛋白经皮下多点注射免疫新西兰白兔制备抗血清,ELISA和Western blotting检测血清效价和特异性。【结果】RT-PCR扩增获得EgHsp70基因的cDNA,酶切和测序结果表明EgHsp70基因已克隆入pMAL-p2x。表达条件优化实验结果筛选出Hsp70融合蛋白可溶性表达的最佳条件为:当A600为0.6时,以0.3 mmol.L-1 IPTG于30℃条件下诱导表达4 h。SDS-PAGE显示Hsp70融合蛋白相对分子质量约为68.6kD,经麦芽糖亲和层析法纯化获得了Hsp70融合蛋白,其表达量为2.5 mg.L-1。Western blotting检测证明制备的抗血清与EgHsp70融合蛋白、原头蚴粗提抗原、E.granulosis虫体蛋白和E.granulosis虫体表面蛋白均能特异性结合,ELISA检测表明获得的抗血清效价达到1﹕256 000。【结论】在大肠杆菌中表达并纯化获得了EgHsp70融合蛋白,并制备了高效价的兔抗EgHsp70蛋白抗血清,为研制包虫病疫苗及相关诊断试剂奠定了基础。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 热休克蛋白家族基因hsp70 抗血清
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HSP70在放线菌素D所致肺腺癌细胞增殖抑制和凋亡中的作用 被引量:2
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作者 刘先领 刘伏友 +2 位作者 李桂源 胡春宏 马芳 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第1期42-49,共8页
为探讨热休克蛋白70(heatshockprotein70,HSP70)在肺腺癌中的表达及其作用,首先采用免疫印迹检测经临床支纤镜确诊并行手术切除的肺腺癌组织标本中HSP70的表达,结果显示在癌旁正常组织中HSP70的表达量显著低于其在癌组织中的表达量.其次... 为探讨热休克蛋白70(heatshockprotein70,HSP70)在肺腺癌中的表达及其作用,首先采用免疫印迹检测经临床支纤镜确诊并行手术切除的肺腺癌组织标本中HSP70的表达,结果显示在癌旁正常组织中HSP70的表达量显著低于其在癌组织中的表达量.其次,采用HSP70反义寡核苷酸阻断A549细胞中HSP70表达后,经MTT和Hoechst33258检测发现,HSP70下调能显著促进放线菌素D(actinomycinD,ActD)所致的A549细胞增殖抑制及凋亡,反义寡核苷酸处理组与正义或随机寡核苷酸处理组比较P值均小于0.05.进一步构建HSP70真核重组质粒并瞬时转染A549细胞后,能显著增加A549细胞中HSP70表达,同时采用MTT和流式细胞术及基因组DNA琼脂糖凝胶电泳检测发现,HSP70过表达能显著抵消ActD所致细胞增殖抑制及凋亡,转染HSP70重组质粒组与转染空载体组相比P值小于0.05.上述结果提示,HSP70在肺腺癌组织中高表达,高表达的HSP70在降低肺腺癌细胞对ActD的敏感性及促进癌细胞增殖与抑制凋亡等方面发挥了重要作用. 展开更多
关键词 热休克蛋白70 肺腺癌 增殖 凋亡 A549细胞 放线菌素D
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