核酸适配体筛选中单链DNA制备方法的研究进展

核酸适配体是人工合成的短链核酸,作为分子识别元件,能够与各类靶标物质高特异性、高亲和力的结合,分为单链DNA和RNA两种类型。其中单链DNA适配体由于其稳定性比RNA适配体更好而更受欢迎,因此得到广泛应用。核酸适配体筛选通常是通过配体指数富集系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)实现的,筛选能否成功在很大程度上取决于其最关键的单链制备步骤,即将双链DNA转化为相应的单链DNA。目前,存在许多方法可以制备单链DNA,包括热变性法、生物素-链霉亲和素亲和分离法、变性胶电泳分离法、核酸外切酶消化法、不对称聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法等。本文在总结文献报道的基础上,具体阐述了各种单链DNA制备方法的原理、优缺点及近5年的应用情况,并对这些单链DNA制备方法进行了比较和展望,以期能为成功筛选各类靶标的核酸适配体提供参考。

电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法同时测定水系沉积物中痕量铅和砷

为准确测定沉积物中痕量铅和砷的含量,比较不同消解方式与不同混合酸体系对沉积物中铅和砷元素的提取效果,并探讨内标法和标准加入法对质控结果的影响,采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定,建立了电热板消解/ICP-MS标准加入法同时测定水系沉积物中铅和砷元素含量的方法。通过分析经认证的标准参考样(GSD-9)来评价方法的准确度。结果显示:采用HCl-HNO_(3)-HF-HClO_(4)体系电热板消解,具有较高的消解回收率;标准加入法可有效清除基质干扰,提高准确度;方法线性关系良好;铅和砷元素的回收率在93.9%~104%,相对标准偏差为4.2%~5.0%(n=6),检出限分别为0.026 mg/kg和0.004 mg/kg。方法的准确度和精密度良好、灵敏度高。为环境中土壤及水系沉积物中痕量重金属元素含量的测定提供了参考分析方法。

采用重金属消解仪加热法测定土壤中有机质含量的研究

对土壤样品中有机质含量的测定,现有的重铬酸钾氧化法通常采用石墨炉和油浴加热后再测定,此两种加热方法存在操作难度大、受热不均、环境不够友好等问题。本文通过采用重金属消解仪加热法测定土壤有机质含量,确定最佳消解温度为200℃,消解时间为8 min。平行实验后,相对标准偏差为0.22%。而采用石墨炉加热法和油浴加热法的相对标准偏差分别为0.86%和1.70%,说明重金属消解仪加热法精密度优于石墨炉加热法和油浴加热法,而且操作过程简单、安全。

盐酸浸提法和消煮法测定牧草中钾钙含量的比较研究

以豆科牧草苜蓿为样品,采用盐酸浸提法和消煮法测定牧草中钾、钙含量.结果表明:2种方法绘制的钾标准曲线较为接近,R2分别高达0.990 9、0.992 3.采用盐酸浸提法测得的钾、钙含量平均值(0.55%、2.39%)小于消煮法测得的钾钙含量平均值(0.57%,2.43%);采用盐酸浸提法测得的钾、钙含量标准差(0.02,0.27)大于消煮法测得的标准差(0.01,0.24).经t检验2种方法测得的结果差异不显著.但与消煮法相比,盐酸浸提法具有简便、快速、节约以及环保的特点.

铝模块消解仪加热法测定土壤中有机质含量

铝模块消解仪加热法替代油浴加热消解土壤样品,测定土壤中有机质含量。通过优化消解仪的消解温度、加热时间等实验,确定消解仪温度220℃（沸腾时消化管内溶液温度约为170℃）,沸腾时间12 min（消解时间约为22 min）为铝模块消解仪的最佳有机质测定条件。使用该方法测定的土壤标准样品的有机质含量均在误差允许范围以内,消解样品有机质回收率达99.98%,校正系数为1.00。同时用我国长期定位试验典型土壤进行该方法准确度和精密度测试,样品有机质测定结果标准偏差为0.06-0.78,变异系数为0.30%-4.11%,符合测定要求。与经典油浴加热方法相比,该方法温度易控制、操作简单、安全,可降低环境污染;结果的准确度和精密度满足要求,值得推广。

快速消解加热法测定水中高锰酸盐指数

用HCA-100标准消解器进行快速加热,控制加热时间,并设有风冷加水冷的冷凝回流,同时减小加药体积,快速消解加热测定了地表水的高锰酸盐指数.该方法缩短了实验时间,短时快速测定出高锰酸盐指数,确定了稀释倍数,避免了多次反复稀释,提高了工作效率,适应了日益繁重的水质监测工作要求.

微波消解凯氏定氮法快速测定酱油中全氮

研究了凯氏定氮法测定酱油中全氮时样品的微波消解方法,进行了微波消解条件的选择及消解结果精密度试验,并与国家标准方法对比,验证了方法的准确度。试验结果表明,消解完全仅需20 min,相对标准偏差均小于2％(n=7),回收率范围为96%～103％,经t检验,微波溶样法与国家标准凯氏定氮法的测定结果无显著性差异。

直观回流双位加热消解法在土壤重金属元素分析中的应用

【目的】建立一种直观、环保、快速的消解和测定土壤中重金属元素的新方法,以减少样品消解的污染环节,并提高分析效率。【方法】利用聚四氟乙烯双位消解管及双位消解仪的透视和分层加热功能,分别进行酸回流、消解温度、消解时间、方法比对试验,测定待测溶液中的铜、锌、铅、镉、铬元素浓度。【结果】双位消解仪的分层加热模式能够回流消解样品,减少酸用量,降低试验空白值,缩短样品消解时间,快速除酸,且其封闭式消解过程避免了环境粉尘对消解管内样品溶液的污染,极大提高分析效率和结果精密度。此外,双位消解仪和消解管的透视功能使样品消解过程始终处于直观的受控状态,避免了样品消解不完全、被蒸干或剩余酸过多等的现象,有效提高分析结果的可靠性。采用直观回流双位加热消解法所测定的基地土壤样品重金属元素含量均在标准值范围内,加入标准的回收率为98%-101%,相对标准偏差〈5.0%。【结论】直观回流双位加热消解法是一种环保、安全和高效的土壤样品消解新方法,此方法消解和测定土壤中重金属含量的结果精确度和准确性较高,值得大力推广应用。

3种方法检测水体底泥有机质含量的比较

为探寻操作安全、简便、精确的水体底泥有机质检测方法,运用统计学法比较了油浴加热法、消化炉加热法和完全湿烧法检测水体底泥有机质质量比的精度。结果表明,消化炉加热可达到油浴加热的效果,方法较可靠(F<F_(0.05)),完全湿烧法与油浴加热法差异显著(F>F_(0.01))。消化炉加热法操作安全、简便,检测结果可靠,稳定性较高,且两种水体均适用。

环境监测中4种COD测定方法的对比实验

采用目前常用的4种COD测定方法,分别对COD浓度为50,100和800mg/L的标准溶液进行测定,经统计检验其准确度和精密度均较好.选择12种有代表性的工业废水进行对比实验,结果表明:微波消解法是一种适用、快捷、简便、节能、二次污染程度小的方法;在测定ρ(COD)<50mg/L的废水时,微波消解法与重铬酸盐法的结果相差稍大;在测定ρ(COD)>50mg/L的废水时,二者的结果相近,其相对误差为±5%。因此,在测定工业废水中的COD时,完全可以用微波消解法取代经典的重铬酸盐法.

土壤有机质测定的绿色消化技术研究

[目的]为便捷、准确、绿色化地测定山地和耕地土壤有机质含量。[方法]采用烘箱加热法,对土壤有机质测定的保温温度、时间进行研究,分析其与油浴法测定土壤有机质含量的差异。[结果]烘箱加热法测定土壤有机质的最优保温温度为170℃,最优保温时间为25~30min。选择保温温度170℃、保温时间30min的条件测定的土壤有机质含量与油浴法测定值显著相关。2种方法测定的土壤有机质含量没有明显差异,烘箱加热法测定的有机质标准差、相对标准偏差较油浴法测定的小。[结论]烘箱加热法测定土壤有机质有较高的准确度和重现性,可准确分析山地和耕地土壤中有机质含量。

外加热消解-风冷管回流在测定土壤有机质含量中的应用

采用电热板加热-风冷管重复回流的重铬酸钾-硫酸消解体系测定土壤中有机质含量,通过研究消解温度、消煮时间、干扰因素对有机质含量的影响。在测定土壤有机质中得出消解温度220℃,消煮时间8 min为最佳消解条件。结果表明:风冷管重复回流可保证消解体系的酸度保持恒定,减少蒸发的同时,有利于土壤有机物的消解。经国家标准物质验证,测定值与标准值吻合,测试结果重现性好,相对标准偏差小于0.88%。该斱法迚一步降低测试成本,且更加环保、可靠、具有环境适应性强、测试效率高等特点,适用于土壤有机质含量的批量快速测定。

水溶性腐植酸含量的微波测定法

本文介绍了一种利用微波加热一压力浸提、消解技术测定腐植酸类肥料中水溶性腐植酸含量的新方法。并讨论了功率、时间、酸度等因素对测定结果的影响，与标准方法相对照，经ｔ检验法及Ｆ检验法检验，没有明显差异，大大提高了测定速度。该法具有操作简便、省时、省力、经济、不污染环境、也不被环境污染、宜于大批量样品的测定、便于普及推广等优点。为水溶性腐植酸的测定提供了一个快速、准确、简便的分析方法，亦可借鉴于其它样品的分析。

不同土壤消解法对标准样品重金属元素测定的影响

通过对土壤标准样品GSS-13进行消解后测定样品中Cu、Pb、Ni、Mn含量的方法,比较了土壤样品电热板消解法与微波消解法的优劣。结果表明,2种消解方法均可作为土样前处理的等效方法,电热板消解法的土壤取样量不受限制,准确度较高,适用于考核样品及少量样品的消解;微波消解法人工、试剂、时间成本较低,精密性较好,可适用于大批量土壤样品的消解。

水中高锰酸盐指数测定全程质量控制

质量控制是环境监测赖以生存和发展的基础,加强全程质量控制才能确保监测数据的准确性和可靠性。结合环境监测工作实际,应用国标经典分析方法-酸性法/碱性法《水和废水监测分析方法》(第四版)(增补版)对水中高锰酸盐指数测定进行了全程质量控制技术探讨。简介了方法所需仪器与试剂,深入探讨了运用国标法进行水中高锰酸盐指数测定全程质量控制技术问题。指出在标准分析方法基础上,选用有效期内的质量合格的分析纯以上试剂,正确进行样品测定预处理,严格规范加热操作与滴定过程,准确进行分析结果数据处理,切实加强结果填报规定程式,能够确保大批量、成分复杂未知水样高锰酸盐指数测定精密度和准确度。

微波加热—压力消解快速测定风化煤中的游离腐植酸

用聚四氟乙烯生料带密封容器,利用微波加热技术在较高温度和压力下浸提和消解风化煤样品中的游离腐植酸,样品不污染环境,也不被环境污染,测定的精密度和准确度高,与标准方法对照,测定速度提高数十倍,分析结果没有显著性差异,结论的置信度为95％。

沼气工程加热方式对发酵料液温度场的影响

本试验拟采用自制沼气工程保温恒温系统装置,研究了发酵罐内底部加热、内侧壁加热和底部内侧壁组合加热3种加热方式,高温发酵、中温发酵2种发酵工艺等6种状态下,发酵料液温度场分布规律和温度场随时间变化的波动。结果表明:发酵罐内任1种加热方式的发酵料液温度场稳定性、加热的热效率均优于发酵罐外侧壁加热方式。发酵罐内底部加热是较佳的加热方式,其发酵料液温度场分布最稳定,温度场随时间变化的波动最小。

湿热处理对甘薯粉条食用品质及消化性能的影响

为研究湿热处理对甘薯粉条食用品质的改善作用,在前期研究基础上,以甘薯粉条断条率(BR)、最大拉伸阻力(RTE)及消化性能【快消化淀粉(RDS)、慢消化淀粉(SDS)、抗性淀粉(RS)含量】为品质评价指标,利用单因素实验和响应面法中的Box-Behnken试验设计模型优化甘薯淀粉的湿热处理条件。结果表明:淀粉含水量和湿热处理时间对甘薯粉条品质的影响极显著(P<0.01),湿热处理温度对甘薯粉条品质的影响显著(P<0.05)。最佳湿热处理条件为:温度95℃,含水量26%,时间1 h。在此条件下,甘薯粉条BR为3.33%,RTE为162.25 g,RDS含量为25.83%、SDS含量为27.07%、RS含量为45.38%。相较于原甘薯粉条,在最佳条件下获得的湿热处理甘薯粉条BR、RDS和SDS分别降低了33.33%,29.94%和31.78%,RTE和RS分别提高了60.27%和108.84%。经反复验证,条件合理可行,研究结果为湿热处理提高甘薯粉条的口感和营养价值提供了理论依据。

压煮器加热管束结疤的清理方法

本文介绍了间接加热高压溶出压煮器加热管束表面结疤的各种清理方法,比较了各种清理方法的优缺点,总结出一套行之有效的清理方法,并在山西分公司、广西分公司高压溶出中得到了很好的实施及推广。

电热板消解ICP-MS测定生物质中的砷

选择硝酸-过氧化氢消解体系于电热板上对生物质样品进行消解,采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)测定消解液中砷的含量并采用标准加入法进行定量分析,以消除基体干扰。结果表明,电热板消解ICP-MS法测定生物质中的砷,具有准确度高、精密度好的特点,标准加入法的线性回归方程Y=16390X+443035,相关系数(r)=0.9998;样品加标回收率在102%～104%之间;6次平行测定的标准偏差RSD为1.5%,对生物质样品中砷的检出限为0.0109 mg/kg。本研究建立了一种快速准确测定生物质样品中砷含量的方法。