金毛耳草药材的质量标准研究

目的:建立金毛耳草药材的质量标准。方法:采用显微鉴定、薄层色谱对金毛耳草进行定性鉴别;用中国药典法对金毛耳草的水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物测定;采用HPLC法测定熊果酸和齐墩果酸含量,色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C_(18);流动相:甲醇-0.2%醋酸溶液(88∶12);流速:0.8 mL/min;检测波长:210 nm;柱温:30℃。结果:显微特征明显;薄层斑点清晰,分离度好,专属性强;熊果酸和齐墩果酸分别在0.0376 mg/mL~0.9399 mg/mL、0.0074 mg/mL~0.1845 mg/mL范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.61%、97.63%,RSD分别为1.07%、1.13%。测得药材样品总灰分为11.4%~21.4%,酸不溶性灰分为3.0%~11.9%,水分为8.4%~11.0%,含量为1.43 mg/g~3.41 mg/g。结论:该方法合理可行,可用于金毛耳草药材质量控制。

QAMS多组分定量联合PCA、OPLS-DA及GRA分析法评价白花蛇舌草的质量

目的:采用高效液相-一测多评(HPLC-QAMS)法联合化学计量学及灰色关联度分析法评价白花蛇舌草质量。方法:采用Alltima C_(18)色谱柱(5.0μm,250.0 mm×4.6 mm),0.2%磷酸-乙腈为流动相梯度洗脱;以芦丁为参照物,建立其与京尼平苷酸、京尼平苷、车叶草苷酸、车叶草苷、2-羟基-3-甲基蒽醌、1,2-二羟基-3-甲基蒽醌、槲皮素、山柰酚、齐墩果酸、熊果酸、豆甾醇和β-谷甾醇的相对校正因子并进行校正因子耐用性考察。同时采用ESM和QAMS法测定收集到的16批白花蛇舌草中该13种成分的含量,再运用统计软件进行化学计量学及灰色关联度分析。结果:13种成分方法学验证均符合2020年版《中华人民共和国药典》要求。京尼平苷酸、京尼平苷、车叶草苷酸、车叶草苷、2-羟基-3-甲基蒽醌、1,2-二羟基-3-甲基蒽醌、槲皮素、山柰酚、齐墩果酸、熊果酸、豆甾醇、β-谷甾醇与芦丁的平均相对校正因子分别为0.9489、0.7033、0.7824、1.1359、0.5845、0.8005、0.8933、1.0683、0.7406、0.8640、0.6745、0.5424。两种方法测定结果比较,差异无统计学意义(P>0.05)。化学计量学方法显示16批白花蛇舌草聚为3类,呈现一定的产区差异。芦丁、车叶草苷酸、京尼平苷和齐墩果酸是影响白花蛇舌草产品质量的主要潜在标志物。GRA法分析结果显示7个省中浙江和江西地区所得白花蛇舌草质量最优。结论:本试验所建立的方法操作便捷、结果准确,结合化学计量学及GRA方法可用于白花蛇舌草质量的综合评价。

黄毛耳草化学成分的分离与鉴定

从黄毛耳草中分离到七个化合物,经理化和光谱分析鉴定为车叶草甙,熊果酸,白桦脂酸,齐墩果酸,β-谷甾醇,棕榈酸十六醇酯,三十二羧酸。

黄毛耳草药材的薄层色谱研究

目的:建立黄毛耳草药材的定性控制方法。方法:采用薄层色谱法分别检查药材中的环烯醚萜类、黄酮类和内酯类成分。结果:环烯醚萜类、黄酮类和内酯类成分分别在以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(5∶4∶2∶0.5)、氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(5∶1∶1∶0.5)和氯仿-乙酸乙酯-甲酸(5∶3∶1)为展开剂的条件下获得理想分离。结论:该方法简便、快速,可作为黄毛耳草药材的定性控制方法。

黄毛耳草HPLC指纹图谱研究

目的:建立黄毛耳草的HPLC指纹图谱。方法:以Hypersil BDS C18(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,甲醇-0.1%醋酸溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长345 nm,柱温35℃,以乌索酸为参照物得到含有9个峰的共有模式,以共有模式对不同产地黄毛耳草指纹图谱进行相似度分析。结果:从谱图相似度看出,不同产地黄毛耳草指纹图谱基本一致,但也存在地域性差异。结论:HPLC指纹图谱可用于黄毛耳草的鉴别和质量控制。

白花蛇舌草中一葡聚糖的结构鉴定(英文)

通过乙醇沉淀、透析、离子交换和凝胶色谱等分离方法,我们从白花蛇舌草中分离得到一种葡聚糖HD-27,ESI-MS检测其分子量为1800。利用化学及光谱分析方法进行结构研究,确定HD-27是由11个葡萄糖残基组成,其结构为α-D-G lc-(1→4)-[-αD-G lc-(1→4)]9-β-D-G lc。

白花蛇舌草居群AFLP分析

采用AFLP分子标记技术,利用筛选出6对多态性较强的引物组合,构建了白花蛇舌草25份种质的AFLP指纹图谱.6对引物组合共扩增出888条谱带,其中多态带661条,占73%.聚类分析结果表明,来源地相同的白花蛇舌草居群多表现出较为密切的亲缘关系,不同来源地的白花蛇舌草居群间遗传差异相对较大,其中海南白花蛇舌草独自呈类,与其它省份的亲缘关系较远.

金毛耳草中熊果酸和齐墩果酸的含量测定

目的建立HPLC法同时测定金毛耳草中熊果酸与齐墩果酸含量的方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent ZORBAX SB-Cl8(4.6 mm×250 mm,5μm);柱温30℃;流动相为甲醇-0.2%醋酸溶液(88∶12),流速0.8 ml/min;检测波长为210 nm。结果熊果酸在0.0376-0.9399 mg/ml范围内呈良好的线性关系(r=0.9994,n=5);加样回收率为98.61%,RSD为1.07%。齐墩果酸在0.0074-0.1845 mg/ml范围内呈良好的线性关系(r=0.9991,n=5);加样回收率为97.63%,RSD为1.13%。结论HPLC法测定金毛耳草中熊果酸与齐墩果酸含量,操作简便,结果可靠,可用于对金毛耳草质量控制。

黄毛耳草化学成分的分离与鉴定

从黄毛耳草中分离到五个化合物,经理化和光谱分析,鉴定为:(Ⅰ)车叶草甙,(Ⅱ)熊果酸,(Ⅲ)β-谷甾醇,(Ⅳ)棕榈酸十六醇酯,(Ⅴ)三十二羧酸。

耳草属植物的化学研究I.黄毛耳草中环烯醚萜甙的分离和鉴定

从中药黄毛耳草（Ｈｅｄｙｏｔｉｓｃｈｒｙｓｏｔｒｉｃｈａ）中分离鉴定出１０个环烯醚萜类化合物，其中８个已知物为：车叶草甙（ａｓｐｅｒｕｌｏｓｉｄｅ，１），鸡屎藤甙甲酯（ｓｃａｎｄｏｓｉｄｅｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ，２），车叶草酸（ａｓｐｅｒｕｌｏｓｉｄｉｃａｃｉｄ，３），去乙酰车叶草酸（ｄｅａｃｅｔｙｌａｓｐｅｒｕｌｏｓｉｄｉｃａｃｉｄ，４），马钱子素（ｌｏｇａｎｉｎ，５），去乙酰车叶草甙（ｄｅａｃｅｔｙｌａｓｐｅｒｕｌｏｓｉｄｅ，６），乙酰鸡屎藤甙甲酯（ａｃｅｔｙｌｓｃａｎｄｏｓｉｄｅｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ，７），６β羟基京尼平（６βｈｙｄｒｏｘｙｇｅｎｉｐｉｎ，８）；２个新化合物命名为耳草甙（ｈｅｄｙｏｓｉｄｅ，９），６′乙酰车叶草甙（６′ａｃｅｔｙｌａｓｐｅｒｕｌｏｓｉｄｅ，１０）。除车叶草甙外均为首次从该植物得到。

含白花蛇舌草中成药的应用与分析

白花蛇舌草性寒,味微苦、甘,归胃、大肠、小肠经,主要含有蒽醌类、黄酮类、生物碱类、有机酸类、多糖类等多种活性成分。白花蛇舌草具有清热解毒、消痈止痛、利湿通淋、抗菌抗癌等功效,可内服外用。白花蛇舌草单药及其活性成分的研究文献每年均有报道,但含白花蛇舌草中成药的应用研究相对较少。故本文通过整理《中华人民共和国药典》(简称《药典》)与《中华人民共和国卫生部药品标准》(简称《部颁标准》)中所有含白花蛇舌草的中成药,对其应用形式、组成情况、功能主治、使用禁忌等进行综述,并通过中国知网检索含白花蛇舌草中成药相关文献,探讨其临床应用现状并进行相关分析。

黄毛耳草化学成分及其中车叶草苷和京尼平苷的含量测定研究

目的研究黄毛耳草(Hedyotis chrysotricha)全草的化学成分,并采用高效液相色谱(HPLC)法对其主要成分车叶草苷和京尼平苷进行含量测定。方法采用微孔树脂(MCI)柱及半制备高效液相色谱等技术,对其醇提物进行系统分离,得到单体;采用质谱(MS)、核磁共振(NMR)等波谱技术鉴定其结构。定量分析采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)法;色谱柱为Welch Ultimate XB-C 18(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈∶0.1%甲酸水溶液(13∶87)为流动相;流速:1.0 mL·min^-1;检测波长:240 nm,柱温:30℃;进样量10μL。结果从植物中共分离到14个化合物,分别鉴定为(24 R)-stigmastane-3β,5α,6β-triol(1)、24ξ-ethylcholest-22 E-ene-3β,5α,6β-triol(2)、5-stigmasten-3β,7β-diol(3)、豆甾醇(4)、β-谷甾醇(5)、hyptatic acid B(6)、6β-hydroxyursolic acid(7)、齐墩果酸(8)、车叶草苷(9)、车叶草酸(10)、京尼平苷(11)、aitchisonide A(12)、3 S,5 R,6 R,9 S-tetrahydroxy-7 E-megastigmene(13)及(6 S,9 R)-roseoside(14)。首次基于2D-NMR数据完整归属了化合物6的氢谱数据;含量测定结果表明,车叶草苷和京尼平苷分别在12.80~128.00μg·mL^-1(r=0.9990)、3.00~30.00μg·mL^-1(r=0.9993)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为103.19%(RSD=2.40%)、95.06%(RSD=3.90%)。结论共分离鉴定14个化合物,其中,7个化合物(1~3、6、7、12、13)为首次从耳草属植物中分离,14为首次从黄毛耳草中得到;采用高效液相色谱-二极管阵列检测器建立车叶草苷和京尼平苷含量测定方法,10个批次中该两个化合物含量分别为0.733~2.282及0.080~0.328 mg·g^-1,方法简便准确,可作为该药材环烯醚萜苷的质量控制方法。

GC-MS/MS法检测肠炎宁片及其药材中禁用农药残留

目的建立同时定量分析肠炎宁片及其原料药材地锦草、金毛耳草中31个禁用农药残留的方法。方法用乙腈提取样品,再经改良后的Quick(快速)-Easy(容易)-Cheap(便宜)-Effective(有效)-Rugged(稳定)and Safe(可靠)(QuEChERS)方法进行净化,使用气相色谱-三重四极杆质谱仪(GC-MS/MS)检测,样品分析采用基质匹配标准曲线定量法。结果所建立的方法学考察均合格,平均回收率为72.0%~113.0%,相对标准偏差(RSD)为2.4%~17.8%。经过检测,并未检出《中国药典》2020年版通则0212项下规定的禁用农药。结论该方法精密度和重复性良好,能够快速、简便地完成禁用农药检测,可用于肠炎宁片的安全性监测。

基于网络药理学的白花蛇舌草—半枝莲抗肿瘤作用机制研究

目的应用网络药理学研究方法挖掘白花蛇舌草-半枝莲抗肿瘤的物质基础及其作用机制。方法通过中药系统药理学技术平台(TCMSP)数据库检索白花蛇舌草、半枝莲两味中药的主要活性成分,并进行靶点预测。通过TTD、Drug Bank和Gene Cards数据库对其作用靶点进行筛选得到与肿瘤相关的作用靶点。应用STRING平台构建蛋白-蛋白(PPI)互作网络模型,并使用Cytoscape软件对该网络进行拓扑学分析得到核心靶点。通过Metascape软件并对核心靶点进行GO-BP生物功能富集分析以及KEGG通路分析。结果经数据库分析白花蛇舌草中含有活性化合物7个、作用靶点282个;半枝莲中含有活性化合物29个、作用靶点428个,两味药中与肿瘤相关的作用靶点421个。GO-BP生物功能富集以及KEGG通路分析发现,两味中药主要通过激酶活性的调控、跨膜受体蛋白酪氨酸激酶信号通路、肽基丝氨酸磷酸化、细胞对氮化合物、有机环状化合物以及无机物的反应、阳离子稳态、磷脂酰肌醇介导的信号传导等生物学过程发挥其抗肿瘤作用,涉及到的肿瘤有前列腺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌、膀胱癌、胶质瘤、慢性粒细胞白血病、小细胞肺癌、黑色素瘤、子宫内膜癌、急性粒细胞白血病、肾细胞癌、大肠癌和甲状腺癌等。结论该研究从多角度探讨了白花蛇舌草—半枝莲两味中药抗肿瘤的物质基础及其作用机制,为其临床和基础研究提供新的科学依据。

白花蛇舌草联合化疗对癌症治疗的Meta分析

目的利用Meta分析方法评价白花蛇舌草联合化疗治疗癌症的临床疗效。方法按照循证医学的要求全面检索中国期刊全文数据库、PubMed数据库等,把符合纳入标准的7篇文献作为Meta分析的对象。采用RevMan 4.2专用软件进行统计分析。结果 7项研究疗效OR合并检验,Z=4.37(P<0.01),表明白花蛇舌草联合化疗与单纯化疗比较,两组临床疗效差异有统计学意义。3项研究KPS评分OR合并检验,Z=3.84(P<0.01),表明白花蛇舌草联合化疗与单纯化疗对患者生存质量改善的差异有统计学意义。结论现有的临床证据表明,白花蛇舌草联合化疗治疗癌症疗效优于单纯化疗,并且比单纯化疗更能提高患者生存质量。

不同生长阶段白花蛇舌草高效液相色谱指纹图谱及化学模式识别

目的建立生长期、开花期、结果期3个生长阶段白花蛇舌草的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并结合化学模式识别技术评价其质量。方法色谱柱为Shiseido Capcell Pak MG CⅡ-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.15%醋酸溶液(梯度洗脱),流速为0.9 mL/min,检测波长为238 nm(去乙酰车叶草酸酐和车叶草苷)、306 nm(4-香豆酸)、323 nm(阿魏酸)、369 nm(槲皮素、芦丁及山柰酚),柱温为30℃,进样量为10μL;并采用SPSS 24.0统计学软件和SIMCA 16.0软件对HPLC指纹图谱进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)。结果HPLC指纹图谱共标定出白花蛇舌草的17个共有峰,并指认出7个色谱峰。PCA结果显示,白花蛇舌草3个生长阶段的综合质量排序为结果期>开花期>生长期。OPLS-DA模型可将3个生长阶段的样品进行分类,并筛选出导致不同生长阶段含量差异的6个标志物,分别为峰13、峰12(阿魏酸)、峰4、峰16(槲皮素)、峰3(去乙酰车叶草酸酐)、峰17(山柰酚)。结论HPLC指纹图谱结合化学模式识别技术可反映白花蛇舌草不同生长阶段含量的差异,为其采收和质量评价提供参考。

白花蛇舌草中槲皮素提取工艺的优化

目的研究白花蛇舌草中槲皮素的最优提取工艺。方法以液相色谱法测定,在单因素试验基础上,采用正交试验分析,优化提取工艺。结果白花蛇舌草中槲皮素的最佳提取工艺为甲醇浓度100%,料液比1∶60,提取液盐酸比100∶5,回流时间0.25h。结论该方法在节约成本的前提下最大化提取效率,可以为白花蛇舌草中黄酮类化合物的开发提供有价值的参考。

黄毛耳草总黄酮的提取工艺优化及有效成分的含量测定

目的优化黄毛耳草总黄酮的提取工艺,测定黄毛耳草药材中黄酮类成分芦丁、烟花苷的含量。方法考察乙醇浓度、提取时间、液料比3个因素,采用Box-Behnken响应面法设计黄毛耳草总黄酮提取条件并优化提取工艺。采用HPLC法测定黄毛耳草药材中芦丁、烟花苷的含量,以甲醇-0.5%甲酸溶液为流动相,检测波长为360 nm,流速1.0 mL/min,柱温为30℃。结果黄毛耳草总黄酮的最佳提取工艺为:乙醇浓度70%、超声时间47 min、液料比12.5∶1,此条件下黄毛耳草总黄酮得率为12.62%,与预测值12.59%差异无统计学意义。黄毛耳草中芦丁的含量为0.74 mg/g,烟花苷的含量为0.058 mg/g。结论利用Box-Behnken响应面设计法优化的黄毛耳草总黄酮提取工艺方法稳定,预测性较好,可为黄毛耳草总黄酮的提取工艺提供参考。建立的高效液相色谱法操作简便、结果准确,可用于同时测定黄毛耳草中芦丁和烟花苷的含量。

基于网络药理学及分子对接技术研究白花蛇舌草治疗急性髓系白血病的机制

目的通过网络药理学、分子对接技术研究白花蛇舌草医治急性髓系白血病(AML)可能的分子学机制。方法依附TCMSP、PubChem数据库收集白花蛇舌草相关化合物成分、靶点、再使用GeneCards和OMMI数据库选出已被证明有关急性白血病的相关靶点,随后取其交集,筛选共有基因,导入Cytoscape软件构建“药物、成分、疾病、靶标”的关系图,然后将交集靶标输入STRING分析平台绘出PPI图谱;其后用R软件对关键靶标进行GO及KEGG过程分析。利用AutoDock软件包进行分子对接,最后通过GEPIA数据库分析核心基因在AML中的表达与预后。结果白花蛇舌草治疗AML的可能作用靶标位置基因共82个,涉及对异种刺激的反应、调节体液水平、创伤愈合等多个过程,且与化学致癌—受体活化作用、脂质和相关动脉粥样硬化、流体剪切应力和乙型肝炎等生物学过程密切相关。白花蛇舌草可能通过对异种刺激的反应、调节体液水平、创伤愈合等过程涉及DNA结合转录因子激活、RNA聚合酶Ⅱ特异性DNA结合等分子功能治疗AML,且与化学物质致癌——相关受体激活以及动脉粥样硬化相关通路息息相关。IL6、HSP90AA1、HIF1A、CASP3、ESR1等5个基因在AML中均表达上调,其中IL6、HIF1A表达具有显著差异性;ESR1基因对患者预后有着深远的影响(P<0.01)。结论研究初步揭示了白花蛇舌草是以多成分、多靶点、多通路的复杂形式发挥治疗AML作用,为白花蛇舌草的临床应用提供了理论依据。

黄毛耳草药材质量标准研究

目的:建立黄毛耳草药材的质量标准。方法:以乙腈-水(7∶93)为流动相,测定波长为238nm,采用HPLC测定黄毛耳草药材中鸡矢藤苷甲酯的含量。结果:鸡矢藤苷甲酯在22.08～552mg·L-1与峰面积呈良好线性关系,加样回收率为99.7%(n=6),RSD0.72%。结论:方法简便、快速,可作为黄毛耳草药材的质量标准。