中国神方丙治疗β-地中海贫血症的临床与机理研究

β-地中海贫血(以下简称β-地贫)是世界性顽症之一,它是一种遗传性贫血,其分子基础是由于β-基因缺失或功能缺乏,使β-珠蛋白链不能合成导致早期造血障碍。其治疗以输血为主,有的用5氮胞苷(Azac),阿糖胞苷(Arac)羟基脲(HU)等化疗药物治疗。刘氏曾报告马利兰虽能明显提高贫血恒河猴的r-基因表达,使HbF(抗碱血红蛋白)合成,临床上也有一定的效果,但上述这些药物均有很强的副反应。我们根据中医肾藏精生髓”的理论,采用滋补肾阴生血法。

鲈α-珠蛋白基因的克隆和序列分析

从鲈头肾cDNA文库中随机挑取噬菌斑,作为模板,以λZAPExpress载体两端含有的T3和T7启动子序列设计引物,用PCR方法扩增插入片断,从中克隆到血红蛋白α亚基的cDNA(Genebank登录号为EU588586)。该cDNA包含435 bp的开放阅读框,编码144个氨基酸。计算其可能的分子量为15864.51,PI为8.83。序列比较分析结果表明,在近端与血红素结合的组氨酸高度保守,与大菱鲆α类珠蛋白同源性最高,达83.3%,与金鲈和大西洋鳕的同源性分别为72.7%和67.8%,与非洲爪蟾α-珠蛋白同源性最低,为2339.4%。通过构建系统进化树,对鲈α-珠蛋白的系统演化进行了分析,并对其二级和三维结构进行了预测。

透明颤菌血红蛋白基因调控与功能的研究

透明颤菌（Ｖｉｔｒｅｏｓｃｉｌａ）血红蛋白（ＶＨｂ）是一种氧调节、氧结合蛋白。其基因（ｖｇｂ）已被克隆及表达。ｖｇｂ基因表达在转录水平上受氧控制，ＦＮＲ蛋白作为厌氧激活子介入该调节过程。ＶＨｂ可与氧结合参与细胞代谢过程，使细胞适应贫氧环境。

血红蛋白和肝素对FQ-PCR检测HBV DNA结果的影响

目的探讨血红蛋白和肝素对荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)定量检测乙型肝炎病毒核酸(HBVDNA)的影响。方法采用沉淀煮沸裂解法提取含不同浓度血红蛋白或肝素的血浆标本中的HBVDNA,应用FQ-PCR方法对HBVDNA进行定量检测。结果血浆标本中血红蛋白浓度<37g/L或肝素浓度<62.5U/ml时,对HBVDNA的定量结果无明显影响,但当肝素浓度达到125U/ml以上时,PCR反应明显受到抑制。结论对轻微的溶血和使用常规浓度肝素抗凝的血浆标本,可采用沉淀煮沸裂解法提取HBVDNA进行FQ-PCR定量检测。

鲤形目五种鱼α-珠蛋白基因cDNA的克隆

从血液中提取总RNA ,根据α珠蛋白氨基酸序列的N末端和C末端碱基序列的保守性设计 2 0个碱基长的简并引物 ,用RT PCR方法扩增并克隆了鲤鱼 (Cyprinuscarpio)、草鱼 (Ctenopharyngodonidellus)、鲫鱼 (Carassiusaura tus)、泥鳅 (Misgurnusanguillicaudatus)和大鳞副泥鳅 (Paramisgurnusdabryanus) 5种我国常见鱼类的α 珠蛋白基因cDNA。序列同源性检索表明 :所克隆的cDNA片段为这 5种鱼各自的α 珠蛋白基因 ,其GenBank注册号分别为AF5 2 815 6、AF5 2 815 7、AF5 2 8197、AF5 2 8198、AF5 2 8199;克隆的 5种鱼的α 珠蛋白基因氨基酸编码序列均为 4 2 9bp。氨基酸序列比较后发现 :泥鳅与大鳞副泥鳅的相似性最高为 94 4 1% ;大鳞副泥鳅与草鱼的相似性最低为 83 92 % ;其余的相似性介于二者之间。另外 ,对已克隆的α 珠蛋白基因用Within group方法进行了聚类分析 ,聚类结果显示 :进化关系较近的物种α 珠蛋白氨基酸序列的相似性与其从形态解剖所得的系统进化关系是一致的 ;进化关系较远的物种α 珠蛋白氨基酸序列的相似性与其生存环境具有较密切的关系。

斜带石斑β-珠蛋白cDNA的克隆和序列分析

从斜带石斑Epinepheluscoioides白细胞cDNA文库随机挑取噬菌斑 ,做为模板 ,用λTriplEx 5 3 长距离插入子筛选引物 ,进行插入片断的PCR扩增 ,并进行表达序列探针 (ESTs)测定。从中克隆到了血红蛋白 β亚基cDNA。cDNA包含长达 44 4bp的开放阅读框 ,编码 147个氨基酸的多肽。用www expasy ch网站的computepI MW程序计算其可能的相对分子质量为 16 5 44 ,等电点为 6 95。其氨基酸序列与草鱼 β_珠蛋白Ⅲ的同源性最高 ,为73 0 %。在远端和近端的与血红素结合的组氨酸都是保守的。另外 ,与其它鱼类及蛙、鸡和人的 β_珠蛋白比较 ,在血红素结合区及亚基结合区的氨基酸残基均是高度保守的。

利用孕妇外周血中胎儿有核红细胞行无创产前性别诊断的初步研究

目的建立一种利用孕妇外周血中分选出的胎儿有核红细胞(FNRBC)进行无创伤性产前诊断的有效方法。方法收集5例妊娠7～9周的人流妇女的绒毛及外周血20ml,采用抗-CD45和抗ε链双标细胞,流式细胞仪分选CD45dim的细胞经显微挑选出ε-链免疫荧光抗体阳性的胎儿有核红细胞,再采用单细胞多重置换扩增技术(MDA)进行全基因组扩增,以扩增产物为模板,常规PCR检测Alphoid基因片段,确定胎儿性别,与绒毛PCR结果比较。结果抗-ε链、抗-CD45双标记的5例标本流式分选CD45dim细胞后,所有标本均观察到血红蛋白ε链阳性细胞。怀有2例男性和1例女性孕妇的外周血分选出的阳性细胞经MDA和PCRAlphoid基因片段扩增,显示1例全基因组扩增失败;1例诊断为男胎,1例为女性,与绒毛PCR性别检测结果完全符合。结论ε-抗体、CD45双标的CD45dim细胞经流式分选后结合显微操作技术从母血中挑选出ε-血红蛋白阳性细胞,经全基因组扩增可以有效获取足够量的研究模板,保证后续分析的准确性,可应用于性连锁遗传疾病的无创性产前诊断。

招远市5例异常血红蛋白的解链及纯化

①目的 对发现于招远市的异常血红蛋白(Hb)进行分子结构的研究。②方法 取异常Hb血样,以生理盐水洗去血浆蛋白质,再以蒸馏水处理压积红细胞以溶血,溶血液以-20℃的酸性丙酮处理提取珠蛋白,用尿素将珠蛋白解链,再经柱层析分离及纯化异常链。③结果 经羧甲基纤维素及交联葡聚糖层析分离及纯化得到异常α或β链,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)检查纯度,这些异常α或β链均为一条电泳带。④结论 纯化的异常α或β链均电泳纯净。

以高亲和力结合血红蛋白β链与δ链单克隆抗体的研制

目的:制备可同时识别血红蛋白A2(HbA2)与血红蛋白A(HbA)的单克隆抗体(mAb),即与血红蛋白的δ链与β链结合,而不与γ链结合。方法:以原核表达的重组Hbδ链免疫小鼠,常规融合制备杂交瘤细胞,以离子交换层析分离的天然HbA2与HbA为抗原同时进行筛选;所获mAb用间接ELISA、基于变性与非变性聚丙烯凝胶电泳的Western blot、等离子表面共振及流式细胞术进行鉴定。结果:所获mAb2C9以高亲和力与纯化的天然HbA2与HbA结合,经等离子表面共振测定KA值分别为2.25×1011、2.16×1010;该mAb不与胎儿血红蛋白(HbF)、血红蛋白α链及重组血红蛋白ζ(zeta)链结合。结论:获得1株可结合HbA2与HbA的mAb2C9,提示其识别血红蛋白δ链与β链的共同表位。该抗体将成为研究与诊断血红蛋白病的有效工具。

Hb D Punjab基因的鉴定——DNA 扩增在异常血红蛋白研究中的应用

本文应用作者设计的寡核苷酸引物和探针,通过聚合酶链反应(PCR)扩增β珠蛋白DNA序列,并通过限制酶EcoRI酶谱分析或寡核苷酸杂交,快速鉴定Hb D Punjab基因。应用这种技术先后对汉、藏、哈萨克等3个民族4个家系的Hb D Punjab基因进行了鉴定。

新生儿异常Hb Q的家系分析

目的报道新生儿异常Hb Q的家系分析结果,进而加强医务人员对Hb Q患者及其他异常Hb携带者的重视。方法采集患者家系成员的外周血标本,行血常规检测、血红蛋白(Hb)电泳、变性珠蛋白小体(Heinz小体)试验及α、β地中海贫血基因检测。结果5例先证者及其父或母MCV、MCH均降低,4例先证者及其父或母α基因型均为-α^(4.2)/αα;1例先证者α基因型为--SEA/-α^(4.2),其父及母α基因型分别为--SEA/αα、-α^(4.2)/αα。4例先证者的Hb电泳在S区含有(19.2-24.0)%的区带,Hb Bart's:(0.3-1.4)%,Hb A:(8.1-21.0)%,Hb F:(59.3-67.4)%。其父或母为异常Hb Q1含量:(27.9-29.1)%,Hb A:(68.2-69.7)%,Hb A2:(1.7-1.9),Hb Q2:(0.7-0.8)%。1例先证者Hb电泳在S区含有46.3%的区带,Hb Bart's:26.9%,Hb F:25.7%,未见Hb A,且Heinz小体试验阳性,阳性率为0.5%。其父Heinz小体试验阳性。其母为异常Hb Q1含量:28.5%,Hb A:69.1%,Hb A2:1.7%,Hb Q2:0.7%。结论根据家系遗传和地贫基因分析,推断上述5例先证者及其父或母的异常血红蛋白均为α链变异的Hb Q连锁静止型α^(4.2)地贫。此5例家系的报道提升了医务人员对异常血红蛋白复合α地中海贫血的认知,对优生优育与遗传咨询具有重要指导意义。

人血红蛋白β链氨基酸对的变异模式(英文)

根据氨基酸对可预测性分析人血红蛋白β链的244个变异,以确定哪些氨基酸对对变异更敏感。结果发现4种变异模式:(1)85.66%的变异发生在不可预测的氨基酸对,(2)绝大多数被替换掉的氨基酸对中包含一个或两个氨基酸对它们的实际频率大于预测频率,(3)79.51%的变异中被替换出的氨基酸对包含一个或两个在正常人β血红蛋白中不存在的氨基酸对,(4)大多数变异缩小了氨基酸对实际频率与预测频率之差。说明变异通常导致人血红蛋白β链的构成更随机、更稳定。

异常血红蛋白的研究

作者对普查出的异常血红蛋白进行了异丙醇和享氏小体生成率实验,抗碱血红蛋白和H包涵体测定及酸洗脱实验。结果均在正常范围,表明这些异常血红蛋白较为稳定,并排除了地中海贫血的可能。同时还进行了异常血红蛋白含量测定及肽链的柱层析解离,结果证明为β链异常。

内蒙古蒙古族中发现的异常血红蛋白HbD Beograd

伊盟地区鄂托克前旗进行异常血红蛋白病筛查时发现１例慢速β链异常血红蛋白。化学结构分析证明该变异物为β链的第１２１位谷氨酸被缬酸取代，与血红蛋白ＨｂＤ Ｂｅｏｇｇｒａｎｄ［ａ２β２１２１（ＧＨ４）Ｇｌｕ→Ｖａ１］为相同变异物。

肌肉的延迟性酸痛与血清肌酸激酶的关系

为探讨运动后肌肉出现延迟性酸痛（ＤＯＭＳ）的机理，观测了大鼠急性运动后即刻、１２、２４、４８小时后血清肌酸激酶（ＣＫ）的变化。结果表明，ＤＯＭＳ与血清ＣＫ的升高无显著相关。

Deviation matrix and asymptotic variance for GI/M/1-type Markov chains

We investigate deviation matrix for discrete-time GI/M/1-type Markov chains in terms of the matrix-analytic method, and revisit the link between deviation matrix and the asymptotic variance. Parallel results are obtained for continuous-time GI/M/1-type Markov chains based on the technique of uniformization. We conclude with A. B. Clarke＇s tandem queue as an illustrative example, and compute the asymptotic variance for the queue length for this model.

内蒙古乌海地区发现的血红蛋白G Taipei

进行血红蛋白病筛查时检出１例慢速β链异常血红蛋白，经化学结构分析证明该变异物为β链第２２位谷氨酸被丙氨酸取代，与血红蛋白ＧＴａｉｐｅ［α２β２２（Ｂ４）Ｇｌｕ→Ｇｌｙ］为相同变异物。

云南白族中发现一例Hb J—Lome[β59(E3)Lys→Asn]

作者在云南白族中发现一例快泳异常血红蛋白(Hb)。经化学结构分析,确认这例快泳血红蛋白的β链第59位的赖氨酸被天冬酰胺取代,为Hb J-Lome,此为云南白族中首次发现。

脑出血后早期天幕疝形成患者的护理

脑出血后早期天幕疝形成患者的护理王艳华，刘淑芬，孔禾（包头医学院一附院神经科，包头０１４０１０６）对脑出血后早期天幕疝形成的患者，施行颈动脉推注２０％甘露醇治疗，效果较好，为手术治疗赢得了时间。但与精心护理有密切关系。１临床资料本组１２例患者均在动态...

病毒性肝炎患者尿液HB_sAg的检测分析

通过对１２６例肝炎患者血、尿中乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）的检测，两方法经Ｘ２检验无显著差异（Ｐ＞０．０５），发现用反向被动血凝法（简称ＲＰＨＡ）测定尿ＨＢｓＡｇ是个简单易行的好方法，受检对象无痛苦，适合于大批人群ＨＢｓＡｇ的普查，适合乙肝病人的动态观察。