莠去津降解菌HB-5的最佳产酶培养基及发酵条件

从农药厂废水中分离到一株降解莠去津的节杆菌(Arthrobacter sp.)HB-5,以从该菌中提取到的降解酶对莠去津的降解率为指标,进行最佳产酶培养基及发酵条件的优化研究,对其产酶量进行了评价.通过正交试验和均匀试验,对细菌HB-5的发酵培养基进行了优化研究.运用SAS软件进行结果分析,所获优化培养基配方为:蔗糖3.0g·L-1,莠去津0.38g·L-1,K2HPO40.5g·L-1,KH2PO41.2g·L-1,MgSO4.7H2O1.2g·L-1,NaCl0.1g·L-1,微量元素溶液3.8mL·L-1.得到菌株培养的最佳优化条件为:菌株发酵液培养时间为48h,接种量为2%,发酵液初始pH值为9,250mL三角瓶中装液量为80mL.经优化后,降解酶对莠去津的降解率(91.64%)比原培养基(40.67%)提高了125%.

莠去津高效降解细菌HB-5的固定化研究

以莠去津降解细菌HB-5作为研究对象,探索了降解菌HB-5的固定化方法,并对降解菌HB-5及其固定化菌对土壤中莠去津的降解能力进行了比较。采用注射器滴定方法对细菌HB-5进行了固定化,并对海藻酸钠、聚乙烯醇、卡拉胶、脱乙酰壳多糖4种包埋材料从成本、固定时间等方面进行了比较,筛选出最佳固定条件。研究确定海藻酸钠为最佳包埋剂,并对包埋剂的浓度、包埋粒径等进行了探索,测定了降解菌HB-5及其固定化菌对土壤中莠去津的降解率。结果表明,以浓度为2.5%￣3.5%的海藻酸钠溶液作为包埋剂进行固定化,生产的HB-5固定化菌机械强度和物理稳定性好,分离度高,符合实验和应用的要求。菌株经固定化后,降解莠去津的能力大大提高,在第1 d以后,其降解率均高于未固定化菌;在第1￣7 d,随培养时间的延长,降解菌与固定化菌HB-5的降解率迅速提高,在第7 d达到85%;在第7￣13 d,两者的降解率增长缓慢,但在第10 d均可达到90%。

实时荧光定量RT-PCR检测急性白血病患者骨髓HB-1的表达

目的:探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者骨髓细胞HB-1基因的表达水平以及HB-1基因在监测ALL微小残留病(MRD)方面的意义。方法:建立实时荧光定量RT-PCR方法(Taqman探针),检测HB-1基因的表达水平,并对其灵敏度、特异性和重复性进行检测。应用此方法检测了急性淋巴细胞白血病183例次,急性髓系白血病(AML)70例,血液系统非恶性疾病52例和造血干细胞健康供者24例的骨髓细胞HB-1基因的表达水平,并分析33例急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者HB-1基因的表达水平与疾病诊断、复发的相关性。结果:构建的实时荧光定量PCR方法的灵敏度达10-4水平,批间变异系数为6.79%,批内变异系数为4.80%。检测到HB-1基因特异性表达于B-ALL细胞:初发/复发B-ALL中HB-1基因表达的中位水平明显高于ALL完全缓解组、初发T-ALL、初发AML、血液系统非恶性病及健康骨髓供者(33.0%vs 0.68%、0.07%、0.02%、0.58%、0,P<0.01),而初发TALL、初发AM L、血液系统非恶性疾病和健康供者HB-1基因的表达水平无统计学差异(P>0.05)。B-ALL患者血液学缓解时HB-1基因水平明显下降至0.68%(0-7.99%),疾病复发时HB-1表达水平再次升高(共3例,HB-1分别为7.69%、8.08%和484.0%),其检测结果与流式细胞学检测结果变化一致。结论:HB-1基因特异性表达于B-ALL细胞,所建立的实时荧光定量RT-PCR法在检测骨髓细胞HB-1基因的表达水平方面具有很好的灵敏度、特异性和重复性。HB-1基因可作为B-ALL患者的临床检测、监测MRD和早期预测复发的分子学标志。

细菌HB-5对除草剂莠去津的酶促降解研究

研究了从高效降解细菌HB-5（Arthrobacter）中提取的降解酶的分离条件及酶对莠去津的降解性能．研究证明，对莠去津的降解主要是胞内酶在起作用．从高效降解菌HB-5中提取到的降解酶。在不含有莠去津的培养基中连续转接7次，会逐渐丧失对莠去津的降解代谢活性，由此判断该降解酶不是组成酶，而是诱导酶．以牛血清白蛋白为标准蛋白测得粗提酶中可溶性蛋白含量为0．65mg·mL^-1；在pH8．0～9．5之间，酶活力均能保持在最高酶活力的89％以上，该酶降解莠去津的最适pH为8．5；在25～45℃的温度范围内能保持较好的降解活性，最适温度为35℃；进一步研究发现，该酶具有较好的热稳定性和pH稳定性，暴露在温度30—40％，pH6．0—9．0的条件下2h仍能保持较高的酶活力；该酶与底物莠去津结合力强，对莠去津具有较好的降解效果，其米氏常数Km为0．7034mmol·L^-1，最大降解速率为0．1863μmol·mg^-1·min^-1．

钻井废浆液固化剂HB-1的研制与应用

在大量室内试验的基础上 ,选择出了可结合大量水分子的水硬材料 SA,并利用该材料研制开发出了一种高效固化剂 HB- 1,该种固化剂在几口井进行了现场试验。结果表明 ,其固化速度快、固结强度高、有害物质固定效果好 ,具有较好的推广应用价值。

冻干保护剂和复水溶液对HB-Ⅰa脂质体包封率的影响

目的：研究不同保护剂种类与浓度、不同复水溶液对HB-Ⅰa脂质体冻干前后包封率的影响。方法：按不同配方进行了18组对比实验，通过比较各组脂质体冻干前后包封率，优选较好的HB-Ⅰa脂质体冻干工艺。结果：在对HB-Ⅰa脂质体包封率的提高与冻干保护方面，蔗糖及甘氨酸所组成的二元保护剂显示了较好的效果；在保护剂使用过程中，过高或过低的蔗糖浓度对提高冻干HB-Ⅰa脂质体的包封率不利；在复水溶液的使用方面，当保护剂蔗糖存在时，冻干后缓冲液复水较纯水复水包封率高。结论：以蔗糖-甘氨酸-卵磷脂-胆固醇-HB-Ⅰa(4：0．8：1：0．5：0．2)的配方配制的HB-Ⅰa脂质体包封率冻干前可达91．1％，冻干后可达85．6％。

小檗碱衍生物HB-13抗单纯疱疹病毒-2作用机制的研究

目的探讨小檗碱衍生物HB-13抗单纯疱疹病毒-2(HSV-2)的作用机制。方法采用细胞病变法检测HB-13是否对HSV-2有直接作用;空斑法检测HB-13是否抑制HSV-2的吸附和释放;荧光定量PCR检测HB-13是否影响HSV-2 DNA复制以及蛋白免疫印迹方法检测HB-13是否影响HSV-2蛋白质合成。结果HB-13在细胞外无直接杀灭HSV-2作用;对HSV-2的吸附和释放亦无影响;不抑制HSV-2 DNA复制;但HB-13浓度依赖性地抑制HSV-2蛋白质合成。结论HB-13可抑制HSV-2蛋白质合成,其抗HSV-2作用机制与ACV等核苷类药物不同。

制备HB-Ⅰa脂质体的工艺处方研究

目的优化HB-Ⅰa脂质体的工艺处方,提高包封率。方法采用逆相蒸发法制备HB-Ⅰa脂质体,以包封率为指标,通过正交实验对工艺处方进行了优化研究,用HPLC法测定其包封率。用透射电镜扫描观察其外观形态和测定平均粒径。结果最佳的处方比例为卵磷脂:胆固醇:HB-Ⅰa=400∶200∶60,平均包封率为(85.92±0.61)%,平均粒径为11.25μm。结论优化的处方工艺合理,包封率显著提高。

一株螯合球菌HB-4的分离及多相分类鉴定

自华北油田地层水中分离得到的细菌HB-4,对其进行形态学、生理生化特征鉴定、化学成分分析以及遗传特征测定,并结合16S rRNA基因序列分子生物学鉴定及系统发育学分析。结果表明,该菌株归属于螯合球菌属(Chelatococcussp.),并且可鉴定为大邱螯合球菌(Chelatococcus daeguensis)。其最适生长温度为37℃,主要极性脂为DPG、PE、PG及PC,醌为Q-10,主要脂肪酸组成分别为C18:1ω7c(47.01%)和C19:0cycloω8c(21.83%),HB-4具有氧化酶、接触酶、酯酶(C4)、类脂酯酶(C8)、白氨酸芳胺酶、缬氨酸芳胺酶、胱氨酸芳胺酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、酸性磷酸酶及萘酚-AS-BI-磷酸水解酶等酶活性。

一株华北油田地层水细菌HB-1的分离及多相分类鉴定

自华北油田地层水中分离得到的细菌HB-1,对其进行形态学、生理生化特征鉴定、化学成分分析以及遗传特征测定,并结合16S rRNA基因序列分子生物学鉴定及系统发育学分析。结果表明,该菌株归属于螯合球菌属(Chelatococcussp.),并且可鉴定为大邱螯合球菌(Chelatococcus daeguensis)。其最适生长温度为37℃,主要极性脂为DPG、PE、PG及PC,醌为Q-10,主要脂肪酸组成分别为C18:1ω7c(39.49%)和C19:0cycloω8c(30.39%),HB-1具有氧化酶、接触酶、酯酶(C4)、类脂酯酶(C8)、白氨酸芳胺酶、缬氨酸芳胺酶、胱氨酸芳胺酶、胰蛋白酶、酸性磷酸酶及萘酚-AS-BI-磷酸水解酶等酶活性。该菌株是首次从油田地层水中分离并鉴定得到的螯合球菌。

小檗碱衍生物HB-13对角质形成细胞分泌IL-10的影响

目的:评价小檗碱衍生物HB-13对HaCaT细胞分泌IL-10的影响。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法筛选HB-13的细胞安全浓度;以P物质刺激HaCaT细胞,加入不同浓度的HB-13分别孵育12、24、48 h后,ELISA法及荧光定量PCR法检测培养上清液中IL-10水平及细胞内IL-10mRNA的表达。结果:HB-13浓度为2.5、5、10μg/mL时对HaCaT细胞的毒性作用不显著,但可促进P物质诱导IL-10的分泌,促进作用随时间的延长而增强(P<0.05)。结论:HB-13的抗炎作用部分可能是通过促进细胞因子IL-10的分泌而实现的。

伪狂犬病病毒HB-98株不同保存条件下病毒含量的比较

将同一批次的伪狂犬病病毒HB-98株病毒液与同一条件下冻干生产的成品分别在2℃～8℃和-20℃以下保存,间隔一定时间分别测定其病毒含量。发现无论在何种环境下保存,随着时间的推移,病毒含量趋于下降。但在一定时期内,病毒液在不同保存条件下病毒含量有明显区别,在2℃～8℃保存明显好于在-20℃以下保存;冻干后的成品在两种存放条件下短期存放则无明显区别。

混合办公废纸脱墨浆DBI和HB-1组合漂的研究

本文首先研究DBI漂白混合办公废纸脱墨浆时NaHSO3和NaBH4的配比、漂白温度、时间以及pH值等对提高脱墨浆的白度和降低油墨尘埃度的影响,确定DBI漂白脱墨浆的最佳工艺条件,接着研究最佳工艺条件下的DBI和HB-1组合漂白,实验结果表明,先进行HB-1段漂,后进行DBI段漂,可以获得更好的漂白效果。

小檗碱衍生物HB-13抗单纯疱疹病毒1型豚鼠皮肤感染的疗效

目的:评价小檗碱衍生物HB-13凝胶治疗单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus,HSV-1)豚鼠皮肤感染的疗效。方法:用HSV-1在豚鼠皮肤造模,感染后1小时开始局部给药,每日2次,连续7天。同时以阿昔洛韦凝胶和喷昔洛韦乳膏阳性对照,及凝胶基质和空白对照。结果:与空白对照相比,0.5%HB-13凝胶可减轻皮损评分,促进结痂,但不能缩短病程。结论:0.5%HB-13凝胶对HSV-1感染有明显减轻临床症状的作用。

小檗碱衍生物HB-13对角质形成细胞分泌IFN-γ的影响

目的研究小檗碱衍生物HB-13对人永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)分泌γ干扰素(IFN-γ)的影响,探讨HB-13的抗炎机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝法确定HB-13作用于HaCaT细胞的安全浓度;细胞经P物质刺激后,加入不同浓度的HB-13分别孵育12、24、48h,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清液中IFN-γ的含量,应用实时荧光定量PCR法检测细胞内IFN-γmRNA表达情况。结果 HB-13浓度为2.5、5、10μg/ml对HaCaT细胞毒性作用不显著,并可促进P物质诱导的IFN-γ的分泌。结论促进表皮细胞分泌IFN-γ可能是HB-13在皮肤局部发挥抗炎作用的机制之一。

HB-2型重油节能素在α-Al_2O_3生产中的应用

阐述了HB－2型重油节能素的特性、重油乳化工艺、操作指标、在α－Al2O3厂的应用情况和节能效果。

华东地区汉族人群HB-1基因多态性的研究

目的:检测华东地区汉族人群HB-1基因的多态性,并与国外数据库进行比较。方法:采用直接测序法检测188例华东地区汉族正常个体全血标本中HB-1基因启动子、全部2个外显子及邻近的内含子区的多态性变化,所得结果与美国国立生物技术信息中心(NCBI)的SNP数据库(dbSNP)进行比较。结果:在188例正常样本中共发现6个SNPs,5个位于启动子,一个位于编码区,在dbSNP数据库中均已报道,但有6个数据库已报道的SNPs在本次研究中未能证实。结论:华东地区汉族人群HB-1基因多态性的分布与dbSNP数据库中的资料存在差异,为在华东地区汉族人群中研究HB-1基因相关疾病提供可靠数据。

HB-3、HB-4型钴钼触媒升温硫化总结

总结了HB - 3,HB - 4型钴钼触媒升温硫化过程及注意事项 ,简单介绍了使用情况 。

中低低流程使用HB-3、HB-4催化剂

介绍HB 3、HB 4型催化剂在中低低流程中的使用情况。分析了第一低变HB 4催化剂活性衰退的原因 。

外源氧载体和前体L-谷氨酸添加策略提高Bacillus subtilis HB-1发酵产γ-聚谷氨酸

为了提高外源L-谷氨酸依赖性菌株枯草芽孢杆菌HB-1产γ-聚谷氨酸(γ-PGA)的能力,采用添加氧载体和前体L-谷氨酸的策略,研究其对菌体生长和γ-PGA产量的影响。摇瓶单因素结果表明,最佳氧载体为聚二甲氧基硅烷(PDMS),在原始培养基中添加体积分数为10%的PDMS,菌体OD600提高了3~5倍;前体L-谷氨酸的最适添加时间为18 h,最适添加质量浓度为10 g/L。在3 L发酵罐扩大培养后,γ-PGA产量提高到45 g/L;在发酵30 h流加碳源和前体L-谷氨酸,γ-PGA质量浓度达到52 g/L。发酵产物经红外,氨基酸分析仪等证实其为多肽类化合物,相对分子质量高达1000万。