熊果酸对H22荷瘤小鼠抗肿瘤及免疫调节作用

目的探讨熊果酸(UA)对H22荷瘤小鼠抗肿瘤作用及免疫功能的影响。方法皮下移植建立H22荷瘤小鼠模型,腹腔注射不同剂量UA,检测抑瘤率和免疫器官指数,MTT法检测脾脏T、B淋巴细胞增殖能力,流式细胞术检测CD4+、CD8+T细胞亚群含量及比例,ELISA法检测血清细胞因子IL-2、IL-4和TNF-α的表达量。结果 UA对小鼠皮下移植性肿瘤H22有显著的抑制作用,可降低免疫器官中异常增大的脾指数,增强脾脏中T、B淋巴细胞增殖能力,提高淋巴细胞亚群CD4+T细胞表达及CD4+/CD8+T细胞亚群比例,促进血清IL-2、TNF-α表达,降低IL-4表达。结论 UA可抑制小鼠肝癌H22肿瘤生长,体内可以提高荷瘤小鼠的免疫能力,其抗肿瘤作用可能与机体的免疫调节作用相关。

Notch信号通路在小鼠肝癌细胞H22增殖凋亡中的作用及意义

目的观察Notch信号通路在小鼠肝癌细胞H22增殖和凋亡中的作用,并探讨其可能的机制。方法培养小鼠肝癌细胞株H22,将细胞随机分为A、B、C组,分别加入Notch信号激活剂rhNF-κB、抑制剂DAPT及PBS共培养48 h。用MTT法检测细胞吸光度值(A值)观察细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,应用免疫组化法检测各相关处理过的细胞株,RT-PCR、Western blotting法分别检测H22细胞中的Notch1、Hes1、Bcl-2 mRNA及其蛋白。结果培养24、48、72、96 h后,A、B组与C组比较,细胞增殖差异明显(P均<0.05)。A、B、C组细胞凋亡率分别为25.52%±2.13%、0.91%±0.18%、8.91%±1.50%,A、B组与C组比较差异明显(P均<0.05)。与C组比较,A组细胞中Notch1、Hes1、Bcl-2 mRNA及其蛋白表达量均显著增加(P均<0.05),B组细胞中Notch1、Hes1、Bcl-2 mRNA及其蛋白表达量均显著降低(P均<0.05)。结论 Notch1信号通路在抑制小鼠肝癌细胞株H22增殖、促进其凋亡中发挥了重要的调控作用,其机制可能与调节靶基因Hesl、Bcl-2表达有关。

山仙颗粒对H22肝癌移植瘤微环境中淋巴细胞活性的调控作用

目的观察山仙颗粒对H22肝癌移植瘤的抑制作用及肿瘤组织中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子-β(TGF-β)含量的影响,探讨山仙颗粒对H22肝癌移植瘤微环境中淋巴细胞活性的调控作用。方法取50只雄性昆明小鼠,随机选择40只小鼠建立H22肝癌移植瘤模型,其余10只小鼠作为空白组。造模24 h后将小鼠随机分为模型组及山仙颗粒低、中、高剂量组各10只,山仙颗粒低、中、高剂量组分别给予山仙颗粒0.025 g/mL、0.05 g/mL、0.1 g/mL灌胃,空白组和模型组给予等量生理盐水灌胃,均早晚各1次,连续30 d。颈椎脱臼法处死小鼠,剥离瘤组织,计算抑瘤率;ELISA法检测H22移植瘤组织中IFN-γ、IL-6、TGF-β含量。结果山仙颗粒低、中、高剂量组H22肝癌移植瘤的抑瘤率随用药剂量增加而增高,各组间比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。与空白组比较,模型组移植瘤组织中IFN-γ含量明显降低(P<0.05),IL-6、TGF-β含量均明显增高(P均<0.05);与模型组比较,山仙颗粒各组移植瘤组织中IFN-γ含量明显增高(P均<0.05),IL-6、TGF-β含量均明显降低(P均<0.05);山仙颗粒高剂量组移植瘤组织中IFN-γ、IL-6、TGF-β含量变化更明显,其次为山仙颗粒中剂量组,各组间比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论山仙颗粒具有抑制小鼠H22肝癌移植瘤生长的作用,其机制可能与调控肿瘤微环境中淋巴细胞活性,影响IFN-γ、IL-6、TGF-β的表达,从而提高机体抗肿瘤免疫功能相关。

沙冬青提取物(JA1)对小鼠肝癌H_(22)细胞体外增殖和皮下移植生长的抑制

采用噻唑蓝(MTT)还原法测定梯度浓度的沙冬青提取物(JA1)对体外培养小鼠肝癌细胞株H22增殖的影响;同时对皮下移植肿瘤H22小鼠灌服不同剂量的JA1以检测抑瘤率,进一步采用流式细胞术、光镜和透射电子显微镜技术,检测和观察JA1对小鼠移植性肿瘤H22的诱导凋亡作用。结果显示,JA1可显著抑制体外培养小鼠肝癌H22细胞的增殖,并且这种抑制存在浓度和时间关系。同时,JA1对小鼠皮下移植性肿瘤H22也有明显的抑制作用。流式细胞分析表明,JA1灌胃试验组瘤组织细胞DNA直方图上见有明显的凋亡峰;在光镜和电镜下,JA1灌胃试验组也见有明显的瘤细胞凋亡,表明JA1对体内、外H22细胞的增殖抑制是以诱导凋亡为基础的。

癌毒清对肝癌模型小鼠肿瘤组织病理及微血管密度的影响

目的:观察癌毒清对肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)模型小鼠肿瘤组织病理及微血管密度(microvessel density,MVD)的影响。方法:将50只小鼠腋下接种H22肝癌细胞株,建立肝癌异位移植瘤模型。将造模成功的小鼠随机分为模型组、癌毒清高剂量组、癌毒清中剂量组、癌毒清低剂量组及氟尿嘧啶组,每组各10只。癌毒清各剂量组给予不同剂量的癌毒清溶液灌胃,氟尿嘧啶组给予氟尿嘧啶腹腔注射,模型组给予等剂量蒸馏水灌胃。给药12 d后,脱颈处死,剥取瘤组织,称取瘤质量,计算抑瘤率和病理组织学检查,免疫组织化学法观察MVD。结果:与模型组比较,癌毒清高剂量组、癌毒清中剂量组、癌毒清低剂量组及氟尿嘧啶组瘤质量降低,以癌毒清高剂量组最为明显,差异具有统计学意义(P <0. 05)。癌毒清高剂量组、癌毒清中剂量组、癌毒清低剂量组抑瘤率分别为50. 91%、35. 25%、20. 10%,氟尿嘧啶组为43. 99%,与模型组比较,差异有统计学意义(P <0. 05)。与模型组比较,癌毒清高剂量组、癌毒清中剂量组、癌毒清低剂量组及氟尿嘧啶组MVD计数降低,以癌毒清高剂量组最为明显,差异具有统计学意义(P <0. 05)。结论:癌毒清的抗癌机制可能是通过降低肿瘤MVD,抑制肝癌微血管生成而实现的。

羟基喜树碱双嵌段共聚物纳米粒的抗肿瘤作用

目的研究羟基喜树碱双嵌段共聚物纳米粒(MePEG-PLGA-HCPT-NPs)的抗肿瘤作用。方法选择人肝癌细胞株Bel-7402为体外模型,采用MTT法观察体外肝癌细胞的生长和增殖抑制情况,评价MePEG-PLGA-HCPT-NPs对肝癌细胞的毒性作用;采用激光共聚焦荧光显微镜技术观察其对肝癌细胞摄取药物的影响;采用小鼠H22肝癌细胞实体瘤模型进行体内抑瘤实验观察荷瘤动物的生长情况,测定肿瘤生长抑制率。结果 MePEG-PLGA-HCPT-NPs能抑制肝癌细胞的生长增殖,且随羟基喜树碱浓度的升高而增强;激光共聚焦荧光照片显示载药纳米粒能有效地被Bel-7402细胞摄取;MePEG-PLGA-HCPTNPs对小鼠的H_(22)实体瘤生长具有明显的抑制作用,低、中、高剂量组的生长抑瘤率分别为37.62%、50.31%和70.25%,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MePEG-PLGA-HCPT-NPs具有较强的体外、体内抗肿瘤作用。与羟基喜树碱注射剂相比,MePEG-PLGA-HCPT-NPs的抑瘤率更高,且与剂量有关,并对肿瘤生长的抑制更为持久。