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Regulation of activin receptor-interacting protein 2 expression in mouse hepatoma Hepa1-6 cells and its relationship with collagen type Ⅳ 被引量:14
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作者 Hong-Jun Zhang Gui-Xiang Tai Jing Zhou Di Ma Zhong-Hui Liu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2007年第41期5501-5505,共5页
AIM: To investigate the regulation of activin receptor-interacting protein 2 (ARIP2) expression and its possible relationships with collagen type Ⅳ (collagen Ⅳ) in mouse hepatoma cell line Hepal-6 cells. METHOD... AIM: To investigate the regulation of activin receptor-interacting protein 2 (ARIP2) expression and its possible relationships with collagen type Ⅳ (collagen Ⅳ) in mouse hepatoma cell line Hepal-6 cells. METHODS: The ARIP2 mRNA expression kinetics in Hepal-6 cells was detected by RT-PCR, and its regulation factors were analyzed by treatment with signal transduction activators such as phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA), forskolin and A23187. After pcDNA3- ARIP2 was transfected into Hepal-6 cells, the effects of ARIP2 overexpression on activin type Ⅱ receptor (ActRⅡ) and collagen Ⅳ expression were evaluated. RESULTS: The expression levels of ARIP2 mRNA in Hapel-6 cells were elevated in time-dependent manner 12 h after treatment with activin A and endotoxin LPS, but not changed evidently in the early stage of stimulation (2 or 4 h). The ARIP2 mRNA expression was increased after stimulated with signal transduction activators such as PMA and forskolin in Hepal-6 cells, whereas decreased after treatment with A23187 (25.3% ± 5.7% vs 48.1% ± 3.6%, P 〈 0.01). ARIP2 overexpression could remarkably suppress the expression of ActRⅡA mRNA in dose-dependent manner, but has no effect on ActRⅡB in Hepal-6 cells induced by activin A. Furthermore, we have found that overexpression of ARIP2 could inhibit collagen Ⅳ mRNA and protein expressions induced by activin A in Hapel-6 cells. CONCLUSION: These findings suggest that ARIP2 expression can be influenced by various factors. ARIP2 may participate in the negative feedback regulation of signal transduction in the late stage by affecting the expression of ActRIIA and play an important role in regulation of development of liver fibrosis induced by activin. 展开更多
关键词 Activin receptor-interacting protein 2 hepal-6 cells Lipopolysaccharide Phorbol 12-myristate 13-acetate FORSKOLIN Collagen
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当归红芪超滤物对重离子12C6+辐射肝癌细胞DNA损伤修复的影响 被引量:1
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作者 寇炜 李应东 +3 位作者 窦春江 顾巧玲 刘凯 陈红 《辐射防护》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期331-337,共7页
将人肝癌H22细胞分成4组,分别为对照组、药物组(100 mg/L)、辐射组(2 Gy)及联合组(100 mg/L药物+2 Gy照射),采用CCK-8法、单细胞凝胶电泳、γ-H2AX免疫荧光原位杂交技术以及Western Blotting印迹法,研究当归红芪超滤物(Radix Angelicae ... 将人肝癌H22细胞分成4组,分别为对照组、药物组(100 mg/L)、辐射组(2 Gy)及联合组(100 mg/L药物+2 Gy照射),采用CCK-8法、单细胞凝胶电泳、γ-H2AX免疫荧光原位杂交技术以及Western Blotting印迹法,研究当归红芪超滤物(Radix Angelicae Sinensis and Radix Hedysari, RAS-RH)对重离子12C6+辐射引起人肝癌H22细胞DNA损伤修复的影响和其可能的机制。结果表明,在0~72 h和给药剂量为5~200 mg/L范围内,RAS-RH对人肝癌H22细胞的增殖抑制作用具有时间和剂量依赖性,其20%抑制浓度IC20为(117.6±2.15)mg/L;单细胞凝胶电泳显示联合组头部DNA含量低于辐射组,而尾部DNA含量、尾距TM、Olive尾距OTM均高于辐射组;γ-H2AX免疫荧光原位杂交技术发现RAS-RH不增加重离子12C6+辐射引起的DNA损伤,但在2-12 h,DNA双链断裂的γ-H2AX foci修复作用被RAS-RH抑制,DNA损伤持续存在;Western Blotting显示RAS-RH通过下调Ku70/80及Rad51的蛋白表达,抑制γ-H2AX的聚集。以上结果说明RAS-RH对人肝癌H22细胞的辐射增敏作用可能是下调DNA损伤修复相关因子Ku70/80及Rad51的表达。 展开更多
关键词 当归红芪超滤物 重离子12C^6+ 肝癌H22细胞 DNA损伤修复
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疏肝健脾方联合解毒抗癌方对人肝癌细胞株HpG2 IL-6和IGF-IR影响随机平行对照研究 被引量:7
3
作者 赵昌林 陈超 郭春芳 《实用中医内科杂志》 2014年第8期118-120,共3页
[目的]观测疏肝健脾方联合解毒抗癌方对人肝癌细胞株HpG2 IL-6和IGF-IR影响。[方法]使用疏肝健脾方、解毒抗癌方和HpG2细胞株共同培养24h、48h、72h和96h后进行MTT、IL-6 ELISA和IGF-IR ELISA检测,使用顺铂作为对照组。[结果]MTT抑制率1... [目的]观测疏肝健脾方联合解毒抗癌方对人肝癌细胞株HpG2 IL-6和IGF-IR影响。[方法]使用疏肝健脾方、解毒抗癌方和HpG2细胞株共同培养24h、48h、72h和96h后进行MTT、IL-6 ELISA和IGF-IR ELISA检测,使用顺铂作为对照组。[结果]MTT抑制率11.1%,解毒抗癌方为72.8%,顺铂为74.7%。疏肝健脾方和解毒抗癌方(χ2=1.600,P=0.000<0.01)。顺铂与HpG2(P=0.001<0.01);解毒抗癌方与HpG2(P=0.008<0.01),疏肝健脾方与HpG2比较,(P=0.752>0.05)。IGF-IR,顺铂与HpG2(P=0.001<0.01);解毒抗癌方与HpG2(P=0.004<0.01)。疏肝健脾方与HpG2(P=0.860>0.05)。IGF-IR,顺铂与HpG2(P=0.001<0.01);解毒抗癌方与HpG2(P=0.004<0.01)。疏肝健脾方与HpG2(P=0.860>0.05)。[结论]疏肝健脾方和解毒抗癌方对HpG2细胞株的作用不同,解毒抗癌方直接杀灭肿瘤细胞,其作用可能是抑制IL-6和IGF-IR的分泌而促使肿瘤细胞凋亡;疏肝健脾方对HpG2细胞株无作用。 展开更多
关键词 人肝癌细胞株HpG2 IL-6 IGF-IR 疏肝健脾方 解毒抗癌方 作用 临床研究
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IFNγ和 IL- 6对人肝癌细胞系C1抑制物合成的调控(英文)
4
作者 陈晓韧 谢佩蓉 郑萍 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期84-86,91,共4页
目的为研究 IFNγ或 IL - 6对肝癌细胞系 C1抑制物 (C1INH)合成的调控作用。方法用 EL ISA双夹心法检测了经其刺激后 Hep G2和 SMMC7712细胞培养上清中 C1INH的含量。结果两细胞系自身能合成少量 C1INH。 IFNγ和 IL - 6可通过不同的途... 目的为研究 IFNγ或 IL - 6对肝癌细胞系 C1抑制物 (C1INH)合成的调控作用。方法用 EL ISA双夹心法检测了经其刺激后 Hep G2和 SMMC7712细胞培养上清中 C1INH的含量。结果两细胞系自身能合成少量 C1INH。 IFNγ和 IL - 6可通过不同的途径上调两种细胞 C1INH的合成 ,且 IFNγ的作用强于 IL- 6。结论此结果提示有可能用 IFNγ和 IL- 6治疗 C1INH缺乏病。 展开更多
关键词 IFNΓ IL-6 肝肿瘤 C1抑制物
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规律间隔成簇短回文重复序列/相关蛋白9靶向Rho GDIα基因敲除质粒的构建及其对小鼠肝癌细胞系Hepa 1-6迁移的影响
5
作者 曲明娟 李延敏 +3 位作者 谢静 秦苗苗 王静 周菊华 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期55-59,共5页
目的利用规律间隔成簇短回文重复序列/相关蛋白9(CRISPR/Cas9)技术构建Rho鸟苷酸解离抑制因子α(GDIα)的基因敲除载体,并探讨干扰Rho GDIα后对小鼠肝癌细胞Hepa 1-6迁移的影响。方法根据CRISPR/Cas9靶点设计原则,设计Rho GDIα的向导R... 目的利用规律间隔成簇短回文重复序列/相关蛋白9(CRISPR/Cas9)技术构建Rho鸟苷酸解离抑制因子α(GDIα)的基因敲除载体,并探讨干扰Rho GDIα后对小鼠肝癌细胞Hepa 1-6迁移的影响。方法根据CRISPR/Cas9靶点设计原则,设计Rho GDIα的向导RNA(sgRNA)序列,并与PX458载体相连,构建Rho GDIα基因敲除重组质粒PX458-Rho GDIα-sgRNA1和PX458-Rho GDIα-sgRNA2;脂质体转染法将重组质粒转染入Hepa 1-6细胞抑制Rho GDIα的基因表达;RT-PCR法检测Rho GDIα被抑制后的mRNA表达情况;划痕法检测Rho GDIα干扰后Hepa 1-6细胞迁移距离的差异;迁移小室法检测抑制Rho GDIα后Hepa 1-6细胞迁移数量的差异。结果成功构建了Rho GDIα的CRISPR/Cas9基因敲除质粒PX458-Rho GDIα-sgRNAs;转染有PX458-Rho GDIα-sgRNA1的Hepa 1-6细胞与对照组只转染空载体PX458的细胞相比,Rho GDIα的表达被明显抑制(P<0.05),而且该组细胞从划痕起始处迁移到空白处距离较远,从迁移小室上端迁移到底端数目明显增多,差异极其显著(P<0.01),说明Rho GDIα被抑制后肝癌细胞的迁移能力提高。结论CRISPR/Cas9法构建的重组质粒PX458-Rho GDIα-sgRNA1可以有效抑制Rho GDIα的基因表达;Rho GDIα被抑制后明显促进小鼠肝癌细胞Hepa 1-6的迁移,提示在体情况下,Rho GDIα的表达可能起到抑制细胞迁移的重要作用,在肿瘤组织中,可以利用过表达Rho GDIα来抑制肿瘤细胞的转移。 展开更多
关键词 规律间隔成簇短回文重复序列/相关蛋白9 鸟苷酸解离抑制因子α 向导RNA PX458质粒 肝癌细胞系Hepa 1-6 反转录聚合酶链反应 小鼠
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CD147及其配体CypA在小鼠肝癌细胞Hepa1-6逃避T细胞免疫监视中的作用 被引量:2
6
作者 吴海燕 任一鑫 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期17-22,共6页
目的探讨CypA和CD147分子的相互作用对肿瘤细胞和T细胞生物学行为的影响。方法将pGPU6/GFP/Neo-CD147shRNA转染至Hepa1-6细胞中,用G418筛选阳性克隆,采用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)、Western blot法鉴定CD147的表达水... 目的探讨CypA和CD147分子的相互作用对肿瘤细胞和T细胞生物学行为的影响。方法将pGPU6/GFP/Neo-CD147shRNA转染至Hepa1-6细胞中,用G418筛选阳性克隆,采用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)、Western blot法鉴定CD147的表达水平,以不同浓度CypA处理Hepa1-6和Hepa1-6-CD147shRNA的细胞24 h后,再用CCK8试剂盒检测CypA的促细胞增殖作用,利用流式细胞仪分选C57Bl/6j小鼠T细胞,Transwell小室法检测CypA在Hepa1-6和Hepa1-6-CD147shRNA细胞影响下趋化T细胞的能力,将Hepa1-6和Hepa1-6-CD147shRNA细胞接种至C57Bl/6j小鼠皮下20 d,每5 d测量肿瘤生长情况。结果 Hepa1-6-CD147shRNA细胞中CD147表达水平较Hepa1-6细胞显著下降。CypA以浓度依赖性方式促进Hepa1-6细胞的增殖,但对Hepa1-6-CD147shRNA细胞无明显作用。在加入Hepa1-6细胞后,CypA趋化T细胞的能力显著低于加入Hepa1-6-CD147shRNA细胞(P<0.01)。Hepa1-6细胞在C57Bl/6j小鼠皮下的成瘤体积显著大于Hepa1-6-CD147shRNA细胞在C57Bl/6j小鼠皮下的成瘤体积(P<0.01)。结论 Hepa1-6细胞可通过其CD147与CypA作用,促进其自身细胞增殖,并同时影响CypA对T细胞的趋化能力,进而逃避T细胞的免疫监视作用。 展开更多
关键词 CD147 亲环蛋白A Hepa1-6肝癌细胞 T细胞 肿瘤免疫逃避
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腺病毒介导的AFP基因修饰树突状细胞的体外生物学特性 被引量:6
7
作者 宋文刚 曲迅 +3 位作者 陈宪锐 李雅林 吴聪 秦庆亮 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2003年第4期269-273,共5页
目的:探讨腺病毒介导AFP基因修饰树突状细胞瘤苗体外生物学活性。方法:将携带小鼠AFP全长cDNA的重组腺病毒表达载体Ad-AFP转染BMDC,构建AFP-DC肝癌瘤苗,采用电化学发光免疫测定法确证AFP-DC转染的有效性,FACS检测表面分子和内吞功能,~3H... 目的:探讨腺病毒介导AFP基因修饰树突状细胞瘤苗体外生物学活性。方法:将携带小鼠AFP全长cDNA的重组腺病毒表达载体Ad-AFP转染BMDC,构建AFP-DC肝癌瘤苗,采用电化学发光免疫测定法确证AFP-DC转染的有效性,FACS检测表面分子和内吞功能,~3H-TdR掺入法检测T细胞增殖反应的能力,^(51)Cr释放法检测CTL活性。结果:AFP基因转染12h后DC及其培养上清中可检到AFP的表达,表明腺病毒介导的AFP基因转染的有效性。AFP-DC与BMDC比较B7分子明显上调,MHC分子也有轻度升高,内吞功能降低(P<0.05)。AFP-DC激发同基因型小鼠T细胞增殖功能均明显高于DC对照组和LacZ-DC组(P<0.05)。AFP-DC体外诱导CTL对Hepal-6肿瘤细胞的杀伤作用具有特异性。结论:肝癌相关基因AFP可作为抗肝癌基因治疗的切入点,该研究为肝癌树突状细胞体内免疫治疗提供了实验依据。 展开更多
关键词 树突状细胞 甲胎蛋白 hepal-6 肝癌细胞 瘤苗 基因转染
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不同途径免疫的AFP基因修饰DC瘤苗体内抗肿瘤效应的研究 被引量:3
8
作者 宋文刚 曲迅 +3 位作者 李雅林 李松 吴聪 陈宪锐 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2004年第1期22-26,共5页
目的:探讨腺病毒介导AFP基因修饰的:DC(AFP—DC)瘤苗经不同途径免疫后机体抗肿瘤免疫应答反应。方法:采用皮下注射、静脉注射和瘤体注射三种途径回输AFP-DC瘤苗,比较观察AFP—DC瘤苗对荷瘤小鼠免疫治疗作用,应用4 h51Cr释放杀伤实验、T... 目的:探讨腺病毒介导AFP基因修饰的:DC(AFP—DC)瘤苗经不同途径免疫后机体抗肿瘤免疫应答反应。方法:采用皮下注射、静脉注射和瘤体注射三种途径回输AFP-DC瘤苗,比较观察AFP—DC瘤苗对荷瘤小鼠免疫治疗作用,应用4 h51Cr释放杀伤实验、T细胞与NK体内剔除实验等方法,观察AFP—DC瘤苗对荷瘤小鼠免疫治疗作用及保护性免疫反应。结果:皮下注射AFP-DC瘤苗治疗效果在抑制肿瘤生长、延长小鼠存活期方面都明显优于瘤体内注射或尾静脉注射(P<0.05),AFP-DC瘤苗体内能更有效地诱导特异CTL细胞毒活性,能使免疫动物产生一定的免疫保护作用,抵抗肿瘤细胞的再攻击。在AFP-DC瘤苗诱导抗肿瘤免疫排斥反应过程中,必需有CD4+T和CD8+T细胞的参与;而在其效应阶段,则依赖于CD8+T细胞的参与,CD4+T细胞为非必需;在免疫诱导及效应阶段剔除NK细胞对抗肿瘤免疫应答无明显影响。结论:皮下注射AFP-DC瘤苗能有效诱导机体产生抗肿瘤免疫反应,为DC介导的肝癌免疫治疗开辟了新的途径。 展开更多
关键词 树突状细胞 甲胎蛋白 hepal-6肝癌细胞 瘤苗 基因疗法
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IL-18基因修饰增强肿瘤细胞裂解物致敏的树突状细胞的抗肿瘤效应 被引量:2
9
作者 宋文刚 叶欣 +3 位作者 巩利鹏 马世彬 李雅林 康莉 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2004年第23期1327-1329,1333,共4页
目的:观察经肿瘤细胞裂解物致敏的白细胞介素18(IL-18)基因修饰的树突状细胞(DC)体内诱导的抗肿瘤免疫应答反应。方法:体外培养的小鼠骨髓树突状细胞经IL-18重组腺病毒感染后(IL18-DC),再经Hepa1-6肝癌细胞裂解物冲击致敏后通过皮下注... 目的:观察经肿瘤细胞裂解物致敏的白细胞介素18(IL-18)基因修饰的树突状细胞(DC)体内诱导的抗肿瘤免疫应答反应。方法:体外培养的小鼠骨髓树突状细胞经IL-18重组腺病毒感染后(IL18-DC),再经Hepa1-6肝癌细胞裂解物冲击致敏后通过皮下注射用于荷瘤小鼠的治疗。用ELISA检测细胞因子,4h51Cr释放法检测NK细胞活性及CTL杀伤活性。结果:致敏IL18-DC组体内诱导NK细胞活性与未致敏IL18-DC组无明显差别(P>0.05),但明显高于致敏DC组和DC组(均P<0.01);致敏IL18-DC组体内诱导特异性CTL杀伤活性明显高于IL18-DC组、致敏DC组和DC组(均P<0.01);致敏IL18-DC组免疫治疗作用明显优于未致敏IL18-DC组、致敏DC组和DC组(均P<0.01)。结论:肿瘤细胞裂解物致敏的IL-18基因修饰的DC疫苗进行体内免疫治疗,能诱导出显著的抗肿瘤免疫反应,为DC介导的肿瘤基因治疗开辟了新的途径。 展开更多
关键词 白细胞介素18 树突状细胞 hepal-6肝癌细胞 肿瘤裂解物 基因疗法
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磷酸吡哆醛对H22肝癌细胞DNA拓扑异构酶Ⅰ活性的影响 被引量:1
10
作者 陈兴 陈麟凤 +2 位作者 江平 张乃哲 石彦涛 《河北省科学院学报》 CAS 2003年第3期175-178,共4页
为建立DNA拓扑异构酶活性测定方法和探讨磷酸吡哆醛(PLP)抑制肿瘤细胞增殖的可能机制,本实验以DNA琼脂糖凝胶电泳EB荧光法测定了H22肝癌细胞DNA拓扑异构酶I(TOPOI)的活性。结果表明维生素B6的活性形式PLP能有效地抑制TOPOI松弛负超螺旋... 为建立DNA拓扑异构酶活性测定方法和探讨磷酸吡哆醛(PLP)抑制肿瘤细胞增殖的可能机制,本实验以DNA琼脂糖凝胶电泳EB荧光法测定了H22肝癌细胞DNA拓扑异构酶I(TOPOI)的活性。结果表明维生素B6的活性形式PLP能有效地抑制TOPOI松弛负超螺旋的作用,且抑制效应与PLP剂量呈正相关。从而证实PLP能明显抑制TOPOI的活性并在分子水平上调节细胞周期活动和肿瘤细胞增殖活动。 展开更多
关键词 H22肝癌细胞 DNA拓扑异构酶Ⅰ 酶活性 磷酸吡哆醛 维生素B6 抗癌机制
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木瓜凝乳蛋白酶对卡铂杀伤鼠肝癌细胞的增强作用
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作者 蔡小玲 郭勇 +3 位作者 王捷 崔堂兵 杨太成 冼江 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期59-62,共4页
在不同培养时间下,将不同浓度的木瓜凝乳蛋白酶、卡铂(CBP)、木瓜凝乳蛋白酶+CBP增加到鼠肝癌细胞hepa-6培养液中,采用MTT法检测它们对hepa-6的细胞毒性.结果表明,木瓜凝乳蛋白酶对hepa-6细胞的半数抑制浓度(IC50)约为1 200 μg/mL,随... 在不同培养时间下,将不同浓度的木瓜凝乳蛋白酶、卡铂(CBP)、木瓜凝乳蛋白酶+CBP增加到鼠肝癌细胞hepa-6培养液中,采用MTT法检测它们对hepa-6的细胞毒性.结果表明,木瓜凝乳蛋白酶对hepa-6细胞的半数抑制浓度(IC50)约为1 200 μg/mL,随浓度增加,酶对细胞的生长抑制率增加;且均能增强CBP对鼠肝癌细胞hepa-6的杀伤作用.在hepa-6细胞加药培养至48h时第二次加入酶,能继续增强CBP对hepa-6的杀伤作用. 展开更多
关键词 木瓜凝乳蛋白酶 卡铂 鼠肝癌细胞hepa-6 协同杀伤作用
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一种对HepG2细胞生长有抑制作用的玉米六肽
12
作者 王华丽 王一玮 +4 位作者 王萌 耿伟涛 王金菊 贾龙刚 王艳萍 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2021年第12期8-13,共6页
采用DEAE-FF离子交换和Sephdax G-15葡聚糖凝胶层析方法,从玉米肽中分离、纯化,获得具有抑制HepG2细胞增殖活性的短肽,采用高效液相色谱串联质谱电喷雾法(liquid chromatography-electrospray ionization tandem mass spectrometry,LC-E... 采用DEAE-FF离子交换和Sephdax G-15葡聚糖凝胶层析方法,从玉米肽中分离、纯化,获得具有抑制HepG2细胞增殖活性的短肽,采用高效液相色谱串联质谱电喷雾法(liquid chromatography-electrospray ionization tandem mass spectrometry,LC-ESI-MS/MS)对其活性片段进行结构鉴定。结果表明:其短肽的一级结构为LPPYLP[命名为玉米六肽(corn peptides-6,CPs-6)],通过四唑盐[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]比色法试验发现,CPs-6具有抑制HepG2细胞增殖的效果,且对L-02细胞的毒性低。 展开更多
关键词 玉米活性肽(CPs-6) HepG2抑制作用 肝癌细胞 活性肽 肽的分离纯化
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旋毛虫抗C57BL/6小鼠体内Hepa1-6肝癌细胞作用的研究 被引量:14
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作者 张媛媛 宫鹏涛 +3 位作者 张西臣 李建华 杨举 张国才 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2009年第1期24-26,共3页
目的观察旋毛虫对C57BL/6小鼠体内Hepa1-6肝癌细胞生长的抑制作用。方法将C57BL/6小鼠随机分成8组,每组10只。第1和5、2和6、3和7组分别感染未处理旋毛虫、60Co处理和紫外线处理旋毛虫,4和8组为不感染旋毛虫对照组,1~4组和5~8组分别... 目的观察旋毛虫对C57BL/6小鼠体内Hepa1-6肝癌细胞生长的抑制作用。方法将C57BL/6小鼠随机分成8组,每组10只。第1和5、2和6、3和7组分别感染未处理旋毛虫、60Co处理和紫外线处理旋毛虫,4和8组为不感染旋毛虫对照组,1~4组和5~8组分别于接种旋毛虫前7 d和接种后11 d接种Hepa1-6肝癌细胞。荷瘤后25 d后处死小鼠,测量肿瘤体积、重量及脾脏CD3+、CD4+、CD8+淋巴细胞数量。结果未处理旋毛虫组、60Co处理组和紫外线处理组小鼠肿瘤体积和重量均显著低于对照组(P<0.05);脾脏CD3+、CD4+百分率和CD4+/CD8+、CD4+/CD3+的比值显著高于对照组(P<0.01或P<0.05)。结论未处理的旋毛虫、经60Co和紫外线处理的旋毛虫对C57BL/6小鼠体的Hepa1-6肝癌细胞的生长均有抑制作用,未处理旋毛虫的抑瘤效果最好。 展开更多
关键词 旋毛虫 C57BL/6小鼠 Hepa1-6肝癌细胞 抑瘤效果
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重组腺病毒rAD—mTERT—m4—1BBL与T淋巴细胞混合培养对小鼠肝癌细胞株Hepa1-6的免疫杀伤作用 被引量:1
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作者 肖樟生 马士签 +4 位作者 龚伟达 姚辉华 杜鹏 邢迎清 吴浩荣 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期894-898,共5页
目的研究在T淋巴细胞混合培养条件下,腺病毒rAD—mTERT—m4—1BBL(简称rAD—mTERT)对小鼠肝癌细胞株Hepal-6的免疫杀伤作用。方法分别以rAD、rAD—CMV—m4-1BBL(简称rAD-CMV)和rAD—mTERT转染Hepal-6和L929细胞,检测其生长和凋亡... 目的研究在T淋巴细胞混合培养条件下,腺病毒rAD—mTERT—m4—1BBL(简称rAD—mTERT)对小鼠肝癌细胞株Hepal-6的免疫杀伤作用。方法分别以rAD、rAD—CMV—m4-1BBL(简称rAD-CMV)和rAD—mTERT转染Hepal-6和L929细胞,检测其生长和凋亡变化。将转基因细胞与小鼠脾T淋巴细胞混合培养,观察T淋巴细胞表型变化及转基因细胞的生长和凋亡变化。细胞生长的检测采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法,细胞凋亡的检测采用AnnexinV-碘化丙啶(P1)双染色法。结果rAD、rAD-CMV和rAD—mTERT病毒对Hepal-6和L929细胞均有明显的生长抑制作用和轻度的促凋亡作用。与活化T淋巴细胞混合培养后,各组转基因Hepal-6和1929细胞的生长均受到抑制,以rAD—CMV+T淋巴细胞组最为明显;rAD-CMV对Hepal-6和L929细胞的促凋亡作用均十分明显,rAD—mTERT仅对Hepal-6细胞有明显的促凋亡作用。混合培养后,CD4^+和CD8^+T淋巴细胞均出现一定程度的增殖,但CD8^+T淋巴细胞增殖明显强于CD4^+T淋巴细胞,CD4/CD8比值从混合培养前的1.27下降为混合培养后的1.08。结论单纯腺病毒可以抑制靶细胞的生长,但不促进其凋亡。在与T淋巴细胞混合培养下,重组腺病毒载体rAD—mTERT可靶向抑制Hepal-6细胞的生长并促进其凋亡,其促凋亡作用是通过T淋巴细胞的免疫杀伤作用实现的。 展开更多
关键词 重组腺病毒载体 端粒酶逆转录酶 hepal-6细胞 T淋巴细胞 免疫 细胞
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丹酚酸B对肝癌细胞的体外抑制作用及基本机制
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作者 何金洋 刘亚敏 +2 位作者 葛文华 江远 郭兴伯 《中国热带医学》 CAS 2012年第6期660-663,共4页
目的观察丹酚酸B对小鼠肝癌细胞hepa1-6的抑制作用及其基本机制。方法以hepa1-6细胞培养为体外模型,用MTT法检测丹酚酸B对hepa1-6细胞的细胞毒作用,然后以Annexin V法用流式细胞仪检测丹酚酸B诱导hepa1-6细胞死亡的机制,以荧光定量PCR... 目的观察丹酚酸B对小鼠肝癌细胞hepa1-6的抑制作用及其基本机制。方法以hepa1-6细胞培养为体外模型,用MTT法检测丹酚酸B对hepa1-6细胞的细胞毒作用,然后以Annexin V法用流式细胞仪检测丹酚酸B诱导hepa1-6细胞死亡的机制,以荧光定量PCR法检测丹酚酸B对hepa1-6细胞凋亡相关基因Bcl-2和BaxmRNA水平的影响。结果丹酚酸B在12.5ug/ml以上对hepa1-6细胞有明显的细胞毒作用,其TC50为31.9ug/ml。在25-50ug/ml之间,诱导hepa1-6细胞凋亡率为27.58%~74.26%,在37.5ug/ml浓度时可以使抑制凋亡基因Bcl-2mRNA显著降低,使促进凋亡基因BaxmRNA显著升高。结论丹酚酸B对小鼠肝癌细胞hepa1-6具有显著体外抑制作用,其机制主要是诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 丹酚酸B 肝癌 hepa1-6细胞 体外
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柴胡皂苷b2对肝癌细胞增殖的影响及机制 被引量:1
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作者 有曼 陈洁 +2 位作者 何广宏 王红伟 李瑞芳 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第22期3281-3285,共5页
目的研究柴胡皂苷b2(SSb2)对肝癌细胞增殖的影响,并进一步探讨柴胡皂苷b2抑制肝细胞癌发生发展的分子机制。方法将细胞分为空白对照组(NC)、SSb2组、沉默信息调节因子6(SIRT6)si-RNA组(si-SIRT6)、si-SIRT6+SSb2组,NC组与SSb2组分别加... 目的研究柴胡皂苷b2(SSb2)对肝癌细胞增殖的影响,并进一步探讨柴胡皂苷b2抑制肝细胞癌发生发展的分子机制。方法将细胞分为空白对照组(NC)、SSb2组、沉默信息调节因子6(SIRT6)si-RNA组(si-SIRT6)、si-SIRT6+SSb2组,NC组与SSb2组分别加入含阴性质粒的转染溶液,si-SIRT6组和si-SIRT6+SSb2组加入含si-SIRT6质粒的转染溶液,转染24 h后,SSb2组和si-SIRT6+SSb2组加入80 mg·L^(-1)的SSb2,各组继续转染24 h。检测各组HepG2细胞中腺苷三磷酸(ATP)含量、细胞上清液中葡萄糖以及乳酸的含量,用蛋白质印迹法检测HepG2细胞中SIRT6、缺氧诱导因子1α(HIF1α)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)的表达水平变化。结果NC组、SSb2组、si-SIRT6组和si-SIRT6+SSb2组细胞的ATP含量分别为(36.81±2.42)、(26.22±2.09)、(74.16±2.65)和(33.95±2.00)μmol·gprot^(-1),葡萄糖摄取量分别为(1.41±0.07)、(0.49±0.05)、(1.86±0.10)和(1.06±0.12)mmol·L^(-1),乳酸生成量分别为(7.09±0.30)、(4.13±0.25)、(11.49±0.68)和(5.76±0.27)mmol·L^(-1),SIRT6蛋白相对表达水平分别为0.29±0.06、0.70±0.06、0.06±0.03和0.17±0.04,HIF1α蛋白相对表达水平分别为0.18±0.03、0.06±0.03、0.44±0.04和0.22±0.04,GLUT1蛋白相对表达水平分别为0.63±0.05、0.30±0.09、1.34±0.12和0.51±0.09。上述指标,SSb2组与NC比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);si-SIRT6组与NC比较,差异均有统计学意义(均P<0.01);si-SIRT6+SSb2组与SSb2组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论SSb2在体外可以抑制肝癌细胞的增殖,其作用可能是通过调控SIRT6介导的糖代谢通路实现的。 展开更多
关键词 柴胡皂苷b2 肝癌细胞 沉默信息调节因子6 糖代谢
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