千佛菌对H22肝癌移植瘤抑制作用的实验研究

目的探讨不同剂量千佛菌对H22肝癌移植瘤的抑制作用。方法建立H22荷瘤小鼠模型,千佛菌按300、600mg/(kg. d)分为低、高剂量,于造模次日起,按千佛菌不同剂量分别灌胃治疗;对照组给予等量生理盐水灌胃,连续给药3w,定期测量瘤块大小。末次给药12h后,麻醉小鼠,取血,流式细胞技术检测小鼠外周血淋巴细胞亚群水平;取脾脏检测小鼠脾淋巴细胞增殖能力、NK细胞杀伤活性;取胸腺及脾脏称重计算脾脏、胸腺指数;剥离瘤块,称瘤重,计算肿瘤抑制率。结果不同剂量千佛菌能够显著抑制小鼠体内肿瘤的生长,高剂量尤为明显,低、高剂量抑瘤率分别为39. 28%及55. 31%;千佛菌还能增强荷瘤小鼠脾淋巴细胞的增殖能力;对NK细胞的杀伤活性有显著提高,与模型组相比,差异具有显著性(P <0. 05);千佛菌能促进荷瘤小鼠T细胞,尤其CD8+T细胞的增殖,纠正荷瘤小鼠CD4/CD8的比值,大剂量尤为明显,与模型组比较,差异具有显著性(P <0. 05)。结论千佛菌能够改善荷瘤小鼠机体的免疫功能,同时具有抗肿瘤作用。千佛菌可能是通过维持荷瘤小鼠脏器指数的稳定,保护小鼠的免疫器官,控制肿瘤生长;增强荷瘤小鼠淋巴细胞的增殖能力、提高NK细胞的杀伤活性及纠正荷瘤小鼠机体CD4/CD8比值的紊乱来实现的。

Aglaroxin C对小鼠H22肝癌移植瘤的抑制作用及对其脏器的影响

目的:探讨楝酰胺衍生物Aglaroxin C对小鼠H22肝癌皮下移植瘤的影响及在实验剂量下对小鼠各脏器有无影响。方法:建立BALB/C小鼠H22腋下实体瘤模型,并随机分为Ⅰ组(尾静脉给药对照组)、Ⅱ组(尾静脉给药组,0.1 mg每只)、Ⅲ组(瘤内给药对照组)、Ⅳ组(瘤内给药组,0.05 mg每只)、Ⅴ组(瘤内给药组,0.1 mg每只),每组各5只。隔天给药(Aglaroxin C)一次,共4次。每日测量小鼠体重。末次给药24小时后切除肿瘤及各组小鼠主要脏器并称重,计算抑瘤率、脏器系数。用各组肿瘤及各脏器制作病理切片,苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE染色),并在光镜下观察其细胞形态学变化。结果:Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组的瘤体质量分别为(2.11±0.50)g、(1.59±0.14)g、(2.30±0.64)g、(1.66±0.12)g、(1.06±0.14)g,Ⅱ组瘤体质量明显小于Ⅰ组(P<0.01),Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组比较差异有统计学意义(P<0.01)。Ⅴ组的抑瘤率最高达53.91%。显微镜下观察肿瘤病理切片,给药组坏死肿瘤细胞明显增多,对照组肿瘤细胞坏死轻微;各组小鼠体质量组间变化无明显统计学意义(P>0.05);显微镜下观察各脏器病理切片,各给药组与对照组相比,无明显异常;脏器系数各剂量组与对照组组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Aglaroxin C对小鼠H22肝癌皮下移植瘤的生长有抑制作用,在实验剂量下对小鼠各脏器无明显影响。

枸杞多糖对小鼠移植性肝癌端粒酶活性及hTERT蛋白表达的影响

目的探索枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharides,LBP)对小鼠移植性肝癌端粒酶活性及其限速酶hTERT表达的影响。方法采用皮下接种法建立小鼠移植性肝癌模型,将96只小鼠随机分成正常对照组,模型组,LBP高、中、低(20,10,5 mg/kg·d)剂量组和环磷酰胺(20 mg/kg·d)组。观察LBP对小鼠肿瘤体积、抑瘤率的影响。PCR-TRAP-ELISA法检测端粒酶的活性,Western blot测定hTERT蛋白表达。结果 20,10,5 mg/kg·d的LBP能明显减小肿瘤细胞的体积和质量(P<0.05),抑瘤率分别为42.23%、25.10%和9.16%;同时,LBP(20,10mg/kg·d)能明显抑制肝癌组织hTERT蛋白表达(P<0.05),降低端粒酶的活性(P<0.05)。结论 LBP可通过抑制小鼠肝癌组织hTERT蛋白表达、降低端粒酶的活性,从而对小鼠移植性肝癌的生长起到抑制作用。

辽东楤木叶总皂苷对荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究

目的:研究辽东楤木叶总皂苷对荷瘤小鼠抑瘤作用的效果,初步探讨其体内抑瘤作用机制。方法:采用小鼠H22肝癌细胞实体瘤模型进行体内抑瘤实验,测定肿瘤生长抑制率,利用光镜、电镜等方法进行形态学观察,是否产生凋亡小体。结果:辽东楤木叶总皂苷对小鼠的H22实体瘤生长具有明显的抑制作用,形态学观察显示,治疗组与对照组比较,肿瘤团块较小,异型性不明显,病理性核分裂和间质血管较少,淋巴细胞浸润明显。电镜下可见凋亡小体形成,其中以总皂苷组最明显。结论:辽东楤木叶总皂苷对荷瘤小鼠具有较强的体内抗肿瘤作用,作用机制可能与其能够抑制肿瘤细胞分裂、增殖及能够诱导肿瘤细胞凋亡有关。

基于AKT信号通路探讨鳖甲煎丸诱导H22肝癌细胞皮下瘤细胞凋亡的作用机制

目的:探讨鳖甲煎丸对H22肝癌细胞皮下瘤的作用及相关机制。方法:以BALB/c小鼠为研究对象,建立H22皮下瘤模型,分别用0.9%氯化钠溶液、鳖甲煎丸、环磷酰胺、鳖甲煎丸+环磷酰胺干预小鼠,监测小鼠皮下瘤生长情况。TUNEL染色检测皮下瘤细胞凋亡情况;免疫组化检测cleaved-caspase3的表达;Western Blot法检测cleavedcaspase3、cleaved-caspase9、Bax、Bcl-2、AKT、p-AKT、REK、p-ERK、JNK、p-JNK的蛋白表达。结果:鳖甲煎丸可以显著抑制皮下瘤生长,联合环磷酰胺抑制效果更加明显,并能改善环磷酰胺引起的肝损害;鳖甲煎丸可以诱导皮下瘤细胞凋亡;与模型组比较,联合用药组cleaved-caspase3、cleaved-caspase9、Bax表达上调,Bcl-2、p-AKT表达下调(P<0.01,P<0.05)。结论:鳖甲煎丸可以通过抑制AKT信号通路,诱导H22皮下瘤细胞凋亡,发挥抗肝癌作用,联合环磷酰胺可以增加抗肿瘤作用,并减轻环磷酰胺的毒副作用。

云树果实醋酸乙酯提取物对H22荷瘤小鼠抑瘤作用及机制研究

目的研究云树果实醋酸乙酯提取物(EGCF)对H22实体移植瘤的抑制活性及作用机制。方法皮下接种H22瘤株建立小鼠H22实体移植瘤模型,随机分为模型组、环磷酰胺(20 mg/kg,阳性对照,ip给药)组和EGCF高、中、低剂量(400、200、100 mg/kg,ig给药)组,连续给药10 d,另设一对照组。检测小鼠体质量变化、抑瘤率及脾脏指数,ELISA法测定血清中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量,HE染色法观察肿瘤组织病理学改变,免疫组化法检测肿瘤组织p-STAT3及血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果与模型组比较,EGCF高、中、低剂量组小鼠的肿瘤质量均显著降低(P<0.01、0.001),脾脏指数均无显著性差异;高、低剂量组小鼠血清中IL-6水平显著降低(P<0.05),各剂量组TNF-α含量显著增加(P<0.05、0.01);各剂量组瘤组织均出现较多红染、碎片状的干酪样坏死区域,且伴有大量空泡形成;各剂量组均显著减少肿瘤组织VEGF表达,高剂量组显著抑制STAT3磷酸化(P<0.05、0.01)。结论 EGCF能够抑制H22实体移植瘤生长,其机制可能与阻断STAT3相关信号通路有关。

白芥子挥发油对小鼠肝癌H_(22)移植性肿瘤的抑制作用及其机制研究

目的探讨白芥子挥发油对肝癌H22移植性肿瘤的抑制作用及其机制。方法建立小鼠肝癌H22移植性肿瘤模型。造模24 h后小鼠分成5组:模型组,环磷酰胺(25 mg/kg)阳性对照组,白芥子挥发油低、中、高剂量(20、40、80 mg/kg)组,采用腹腔给药或原位注射给药,观察白芥子挥发油对H22荷瘤小鼠肿瘤质量、生存期的影响;HE染色法以及吖啶橙(AO)染色观察肿瘤细胞形态的变化;免疫组化法检测肿瘤细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达。结果白芥子挥发油显著延长H22荷瘤小鼠生存期并抑制肿瘤生长(P<0.01);上调Bax的表达、下调Bcl-2的表达。白芥子挥发油对H22细胞的抑制作用呈良好的剂量相关性,但高剂量组毒副作用明显。结论白芥子挥发油能够抑制H22荷瘤小鼠肿瘤细胞的生长,其机制可能与上调Bax的表达、下调Bcl-2的表达,进而诱导细胞凋亡有关。

草果挥发油对肝癌H_(22)荷瘤小鼠的抑瘤作用

建立肝癌H22荷瘤小鼠模型,探讨了草果挥发油对肿瘤质量、胸腺指数和脾脏指数的影响,采用HE染色法观察肿瘤细胞形态变化,免疫组化法检测肿瘤细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达.结果发现,草果挥发油各剂量组均能明显抑制肿瘤生长(p<0.05);高剂量组(300 mg·kg-1)有些微毒副作用,各剂量组胸腺指数和脾脏指数较环磷酰胺(CTX)组有明显升高(p<0.05);推测草果挥发油能够抑制H22荷瘤小鼠肿瘤细胞生长的机制是通过上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达来诱导细胞凋亡.

羟基喜树碱双嵌段共聚物纳米粒的抗肿瘤作用

目的研究羟基喜树碱双嵌段共聚物纳米粒(MePEG-PLGA-HCPT-NPs)的抗肿瘤作用。方法选择人肝癌细胞株Bel-7402为体外模型,采用MTT法观察体外肝癌细胞的生长和增殖抑制情况,评价MePEG-PLGA-HCPT-NPs对肝癌细胞的毒性作用;采用激光共聚焦荧光显微镜技术观察其对肝癌细胞摄取药物的影响;采用小鼠H22肝癌细胞实体瘤模型进行体内抑瘤实验观察荷瘤动物的生长情况,测定肿瘤生长抑制率。结果 MePEG-PLGA-HCPT-NPs能抑制肝癌细胞的生长增殖,且随羟基喜树碱浓度的升高而增强;激光共聚焦荧光照片显示载药纳米粒能有效地被Bel-7402细胞摄取;MePEG-PLGA-HCPTNPs对小鼠的H_(22)实体瘤生长具有明显的抑制作用,低、中、高剂量组的生长抑瘤率分别为37.62%、50.31%和70.25%,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MePEG-PLGA-HCPT-NPs具有较强的体外、体内抗肿瘤作用。与羟基喜树碱注射剂相比,MePEG-PLGA-HCPT-NPs的抑瘤率更高,且与剂量有关,并对肿瘤生长的抑制更为持久。