血清miR-499-5p、铁调素20联合检测在急性心肌梗死诊断中的应用

目的探讨血清微小RNA(miRNA)-499-5p和铁调素(Hepc)-20联合检测对急性心肌梗死(AMI)的诊断价值。方法选取2020年6月至2021年6月于该中心收治的AMI患者96例作为AMI组。同时,选取同年龄段的心绞痛患者及体检健康者各96例作为心绞痛组和健康组。检测血清中的miR-499-5p、Hepc-20及心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平。采用二元Logistic回归分析AMI的独立危险因素。采用Pearson分析评估miR-499-5p、Hepc-20与cTnI的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-499-5p、Hepc-20单项及联合检测对AMI的诊断价值。结果AMI组血清中的miR-499-5p、Hepc-20、cTnI、低密度脂蛋白(LDL)及三酰甘油(TG)较心绞痛组和健康组升高(P<0.05)。AMI组血清中的高密度脂蛋白(HDL)较心绞痛组和健康组降低(P<0.05)。二元Logistic回归分析显示,miR-499-5p、Hepc-20、cTnI及LDL水平升高是影响AMI发生的独立危险因素(P<0.05)。ST抬高型心肌梗死(STEMI)患者和非ST抬高型心肌梗死(NSTEMI)患者血清中miR-499-5p和Hepc-20水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。miR-499-5p和Hepc-20均与cTnI呈正相关(r=0.746、0.871,P<0.05)。ROC曲线结果显示,miR-499-5p联合Hepc-20检测的曲线下面积(AUC)明显大于miR-499-5p或Hepc-20单项检测的AUC(P<0.05),联合检测的灵敏度和特异度分别为90.24%和78.05%。结论AMI患者血清中miR-499-5p和Hepc-20水平均升高,且是AMI发生的独立危险因素。二者联合检测对AMI具有良好的诊断效能,可为临床实施进一步治疗提供有利支持。

人类抗菌肽hepcidin在毕赤酵母中的分泌表达和纯化

报道了一种低分子量的人类抗菌肽hepcidin基因的克隆、表达以及纯化。试验证明在毕赤酵母中能成功分泌有活性的hepcidin,hepcidin在重组菌株中的表达量约为3 mg/L,Western blot显示2.2 kD的重组hepcidin条带,重组hepcidin通过凝胶过滤及反向高效液相色谱纯化,质谱验证,重组蛋白对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌表现出抗菌活性。

Hepc20在毕赤酵母中的胞内表达及鉴定

构建了Hepc 20的毕赤酵母表达载体,在毕赤酵母中能成功表达有活性的Hepc 20。优化了菌株的培养诱导条件,结果表明BMMY培养基是Hepc 20表达和重组菌株生长的最佳培养基,甲醇诱导终体积分数0.5%,在此条件下Hepc 20在重组菌株中的表达量约为3.6 mg/L。Western blot检测显示的22000处的条带为重组Hepc 20条带;ELISA验证表明重组Hepc 20可以跟抗体特异结合,琼脂扩散法抗菌实验表明重组Hepc 20对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌表现出抗菌活性。