利用离体大白鼠肝癌细胞的EROD诱导指示二恶英的复合毒性效应

离体条件下 ,以大白鼠肝癌细胞株H4IIE的 7 乙氧基 3 异吩恶唑酮 脱乙基酶 (EROD)活力诱导作为毒性指标 ,测定了 2 ,3,7,8 TCDD单独存在以及与一定浓度的 2 ,3,7,8, TCDF ,OCDD ,PCB12 6和PCB77分别共存下的EROD活力 ,并用TEF和独立作用模型 (independence)两种方法对实验结果进行了评估。利用TEF评估的结果表明实验的TEQ值和理论计算的TEQ值十分接近 ,复合毒性表现为加合作用 (additivi ty) ,这一结果与用独立作用模型评估的结果完全一致。研究结果不仅证实了TEF评估方法的有效性和利用模型方法评估二恶英类化合物复合毒性的可行性 ,同时还表明离体条件下 ,大白鼠肝癌细胞株H4IIE的EROD酶活力诱导适用于化合物的复合毒性的研究。

肝源性磷脂酰乙醇胺的分离及其诱导肝癌细胞凋亡的研究

采用氧化铝柱色谱法以95%乙醇-氯仿为洗脱剂分离纯化了肝源性磷脂酰乙醇胺(PE),并采用GF254硅胶板薄层色谱法以氯仿-甲醇-水(65:25:4,体积比)为展开剂检测PE。结果表明,以95%乙醇-氯仿顺序洗脱氧化铝色谱柱中的磷脂时,PE与磷脂酰胆碱(PC)可实现完全分离。采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)测定了在不同时间点25μmol/LPE对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响,并与子宫颈癌细胞Hela、正常人肝细胞HL7702做比较,发现肝源性PE对肝癌细胞的生长具有明显的抑制作用,且能诱导其发生凋亡。

东亚钳蝎毒生物提取物对人肝癌细胞体外增殖及凋亡的影响

目的 探讨东亚钳蝎毒生物提取物 (PBMK)对人肝癌细胞的体外增殖及凋亡影响。方法 用MTT法测定PBMK对人肝癌细胞的体外增殖 ,用Tunel法测定其对人肝癌细胞的调亡影响。结果 PBMK对人肝癌细胞体外生长有明显抑制作用 ,可高度诱导肝癌细胞的凋亡。经PBMK作用的癌细胞在相差显微镜下表现为细胞稀疏、收缩 ,胞质拉长。HE染色可见明显的细胞内空泡和细胞出泡现象。结论 PBMK可作为一种有效的癌细胞毒药物 ,具有开发应用前景。

东亚钳蝎毒生物提取物对人肝癌细胞体外增殖及凋亡的影响

目的 :探讨东亚钳蝎毒生物提取物 (PBMK)对人肝癌细胞的体外增殖及凋亡影响。方法 :用 MTT法测定 PBMK对人肝癌细胞的体外增殖 ,用 Tunel法测定其对人肝癌细胞的凋亡影响。结果 :PBMK对人肝癌细胞体外生长有明显抑制作用 ,可高度诱导肝癌细胞的凋亡。经 PBMK作用的癌细胞在相差显微镜下表现为细胞稀疏、收缩 ,胞质拉长。倒置显微镜下可见明显的细胞内空泡和细胞出泡现象。结论 :PBMK可作为一种有效的癌细胞毒药物 。

肝癌凋亡细胞相关蛋白的表达分析

目的：分析肝癌凋亡细胞与肝癌细胞所表达的蛋白质在分子量分布上的差异。方法：ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳后薄层扫描。结果：肝癌凋亡细胞所表达蛋白质的分子量普遍较大。在分子量大于６．７×１０４ｕ时，凋亡的肝癌细胞有７个较为明显的蛋白扫描峰，与未凋亡的肝癌细胞具有明显的区别。部分大分子量的凋亡相关蛋白在肝癌凋亡细胞表达量很高，其蛋白质扫描峰的面积可占总面积的８％。结论：肝癌凋亡细胞有较大分子量的蛋白质表达，可通过分子筛等分离工具分离某些蛋白质并进一步鉴定其生物学功能。

单克隆抗体与链黑菌素偶联物的抗肝癌BEL-7402细胞活性

采用活化酯法制备链黑菌素与抗人肝癌单克隆抗体(McAb)3A5的免疫偶联物,该偶联物兼有二者的生物活性和紫外吸收特征。抗体与链黑菌素偶联分子比为1:2～6,蛋白回收率为76％,链黑菌素保留原活性的12.5％,抗体活性基本上完全保持。但随着药物分子偶联数目的增加,抗体活性减小。偶联物在体外细胞克隆生成试验中,对肝癌BEL-7402细胞的抑制作用为游离链黑菌素的63倍,而对与抗原性无关的人咽上皮癌KB细胞的作用则较游离的链黑菌素弱11倍。以上结果表明,该免疫偶联物对靶细胞显示选择性杀伤作用。