Herpetin, a New Bioactive Lignan Isolated from Herpetospermum caudigerum

Aim To study the chemical constituents of seeds of Herpetospermum caudigerum. Methods Column chromatography was used in the isolation procedure, and the structure was elucidated by spectral data, whose pharmacologic activity was assayed in vitro. Results A new compound named herpetin was isolated, whose structure was determined to be 3-benzofuran methanol-2, 3-dihydm-2-（4- hydroxy-3-methoxyphenyl ）-4-methoxy-6-[ tetrahydm-2-（ 3-hydroxy-4-methoxyphenyl ）-3-methanol ]-2- furanmethyl, showed significant inhibitory effects on HBV-DNA and the replication and expression of HBsAg and HBeAg. Conclusion Herpetin offers wide research and development prospect.

波棱滴丸溶出度的测定方法研究

目的建立RP-HPLC测定波棱滴丸溶出度的方法。方法以0．5%十二烷基硫酸钠水溶液为溶出介质,转速为100 r/min,用RP-HPLC法检测波棱素,检测波长为280 nm。结果波棱素在0．084～1．008μg范围内,与峰面积的线性关系良好(r=0．999 9),平均加样回收率为99．18%,RSD为2．15%,3批样品的平均累计溶出度为87．3%～90．8%。结论所建方法操作简便、准确、可靠,适用于波棱滴丸的质量控制。

外翻肠囊法研究波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂的大鼠肠吸收特性

目的利用肠外翻模型,研究波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂(total lignans of Herpetospermum caudigerum nanosuspension,HTL-NS)在大鼠体外的肠吸收特性,并与波棱瓜子总木脂素混悬剂(total lignans of Herpetospermum caudigerum coarse suspensions,HTL-CS)进行对比。方法以波棱甲素与波棱素在大鼠的肠吸收参数为指标,考察不同质量浓度HTL-NS在大鼠十二指肠、空肠、回肠的吸收状况。结果 HTL-NS中2种成分在各肠段的累计吸收量、吸收速率常数和表观渗透系数随着质量浓度的增加而增加,并且明显高于HTL-CS(P<0.05或P<0.01);波棱甲素与波棱素在空肠吸收最好,而十二指肠与回肠的吸收无显著性差异(P>0.05)。结论 HTL在体内的吸收可能为被动吸收,HTL-NS能有效改善HTL肠吸收。

藏药波棱瓜子有效成分波棱素对ConA诱导的免疫性肝损伤的保护作用

目的通过建立ConA诱导的免疫性肝损伤动物模型,研究波棱瓜子有效成分波棱素对免疫性肝损伤的保护作用.方法一次性动物尾静脉注射刀豆球蛋白(20mg/kg)建立小鼠免疫性肝损伤模型,考察不同剂量的波棱素对小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH),以及肝组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量(或活性)的影响.结果小鼠尾静脉注射ConA后,模型组小鼠血清AST、ALT等活性明显升高,说明ConA诱导的损伤模型造模成功.给予波棱素药物后,与模型组相比较,波棱素能明显降低小鼠ALT、AST和LDH活性,降低小鼠肝组织MDA的含量;升高肝组织SOD和GSH-Px的活性.结论波棱素能明显减轻ConA诱导的小鼠肝组织损伤,改善其炎症反应,保护肝脏组织.

波棱素脂质体的制备工艺及处方优化研究

波棱素是波棱瓜子中的木脂素分离出来的活性单体成分,其具有抗肝损伤、抑制乙型肝炎病毒复制的作用。该实验首次采用薄膜分散法成功制备了波棱素脂质体,以包封率为指标,对处方工艺进行优化。优化后的最佳膜材处方为波棱素-大豆磷脂-胆固醇2.44∶78.05∶19.51,选用0.5%普流尼克(F68)溶液50℃下进行水合脱膜,并水浴超声时间20 min,制备得到的波棱素脂质体平均包封率为(94.50±2.15)%,粒径(119.2±10.7)nm,达到试验预期,这将为后期的肝靶向给药系统的研究奠定基础。

波棱素脂质体冻干粉针的制备及初步安全性和药效学研究

该文研究了波棱素(herpetin,HPT)脂质体冻干粉针剂的制备方法,并对其初步安全性和药效学进行评价。采用薄膜分散法制备HPT脂质体溶液,以包封率、粒径等为评价指标,筛选最佳冻干保护剂;对冻干粉针进行稳定影响因素实验,并初步研究了HPT脂质体冻干粉针的安全性以及对CCl4所致急性肝损伤模型小鼠的治疗效果。质量分数5%乳糖+5%蔗糖为最佳冻干保护剂,按照最优处方制得的脂质体冻干粉针复水后,平均包封率为(99.70±0.50)%,平均粒径为(107.0±1.2)nm,平均电位为(-6.11±0.72);脂质体冻干粉针对温度、湿度及光照均较为敏感;脂质体冻干粉针复水后不会引起溶血和红细胞聚集反应,静脉注射对血管亦无明显影响;HPT脂质体对CCl4所致急性肝损伤模型小鼠的治疗效果明显,血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)指标水平均明显改善,治疗效果明显优于HPT原药。按照最优处方制备的波棱素脂质体冻干粉复水后粒径均匀,包封率符合《中国药典》要求,且具有较高的安全性,能显著提高HPT的治疗效果,保存时应该注意低温、避光、密封保存。

波棱素脂质体包封率的测定及体外释药研究

目的研究波棱素脂质体包封率测定的方法及其在体外释药特性。方法采用薄膜分散法制备脂质体,分别采用超滤法、高速离心法、透析法分离脂质体和游离药物,计算脂质体包封率,筛选最佳方法,并考察了波棱素脂质体的体外释放规律。结果三种方法中,超滤法最适合用于测定包封率,脂质体包封率为(98.9±0.13)%;脂质体24 h内累计释放量为88.31%,72 h基本上完全释放,药物释放符合Higuchi方程。结论超滤法为波棱素脂质体最佳包封率测定方法,波棱素脂质体体外释放具有缓释特点。

一测多评法在肝能滴丸质量控制中的应用研究

目的建立一测多评法同时测定肝能滴丸及其原料药中8种成分(去氢双松柏醇、波棱醇I、波棱内酯A、波棱甲素、波棱素、herpetetrone、波棱酮、波棱乙素)的含量。方法采用HPLC法,以波棱甲素为内参物,建立波棱甲素与其他7种指标成分的相对校正因子(f_(k/m)),并计算各待测成分的量。同时采用外标法测定5批肝能滴丸及原料药中这8种成分的含量,比较一测多评法所得的计算值与实测值之间的差异,以验证建立的一测多评法的准确性与可行性。结果在一定线性范围内,波棱甲素与去氢双松柏醇、波棱醇I、波棱内酯A、波棱素、herpetetrone、波棱酮、波棱乙素的f_(k/m)分别为0.908、0.728、0.516、0.720、0.461、0.623、0.410,在不同情况下重现性良好;5批肝能滴丸及原料药的计算值与实测值无显著性差异。结论以波棱甲素为内参物,同时测定肝能滴丸及原料药中8种成分含量的一测多评方法可靠,结果准确,可用于肝能滴丸的质量控制。

波棱素对ConA诱导的免疫性肝损伤的影响

目的:探讨波棱瓜子有效成分波棱素抗Con A诱导的免疫性肝损伤作用机制。方法:一次性给予动物尾静脉注射刀豆求(球)蛋白(20mg/kg)造成小鼠免疫性肝损伤模型,取肝脏组织,考察药物对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、细胞因子信号传导抑制蛋白1(SOCS1)和核因子-κB(NF-κB)的影响。结果:HE显示肝细胞出现肿胀与坏死,部分出现细胞变形,说明Con A诱导肝损伤模型造模成功。波棱素给药后发现,与模型组对比,20mg/kg剂量组NF-κB、TNF-α、IFN-γ、iNOS和IL-4酶活性有不同程度的下降;HE显示各组肝细胞不同程度的损伤,部分肝细胞坏死,与模型组比较波棱素各组细胞破坏程度较轻,肝窦之间的炎症因子变少。结论:波棱素可降低Con A引起的肝损伤的酶活力,保护肝脏组织免受侵害,其机制可能与提高自身的抗氧化能力和抑制TNF-α/NF-κB信号通路,减少炎症反应有关。

波棱素对免疫性肝损伤的保护作用

目的:本实验分别从体外细胞与体内实验研究波棱素对卡介苗(BCG)联合脂多糖(LPS)所致的免疫性肝损伤的保护作用。方法:建立卡介苗(BCG)联合脂多糖(LPS)诱导小鼠肝损伤模型,大鼠尾静脉注射BCG 12 d,用LPS诱发肝细胞损伤,同时建立原代肝细胞损伤模型,细胞与整体实验同时进行,以论证该单体药物的适用性和可靠性。分别测定血清和上清液中各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、以及整体实验中肝组织匀浆的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等生化指标活力或水平的影响。结果:波棱素体外实验中5、20、80 mg/L和体内实验中10mg/kg和20mg/kg可以降低BCG+LPS所致免疫性肝损伤和肝细胞损伤中的血清和细胞上清液中ALT、AST、LDH的活力,增强整体实验中肝组织匀浆的SOD和GSH-Px活性,减少其中MDA的含量,表现出波棱素对免疫性肝损伤的保护作用及其抗氧化的特性。结论:波棱素对由BCG+LPS致免疫性肝损伤具有一定的保护和抗氧化作用。

波棱素脂质体对乙肝病毒复制和抗原表达的影响

目的：以Hep G2.2.15细胞系为体外实验模型,研究波棱素脂质体体外抑制乙肝病毒的生物学活性。方法：MTT法检测药物对细胞的毒性,将不同安全浓度的波棱素脂质体及阳性对照药物拉米夫定（3TC）作用于此细胞系,同时实验设不加药物的细胞对照,给药3,6d后收集细胞培养上清液。采用ELISA法测定各组细胞培养上清液中HBs Ag,HBsAg水平,实时定量PCR检测HBV-DNA的含量。结果：波棱素脂质体对HepG2.2.15细胞的TC50为1443.68μg/ml。波棱素脂质体对HepG2.2.15分泌的HBs Ag和HBeAg的IC50分别为131.08μg/ml,109.50μg/ml,治疗指数为11.01和13.18。同时,浓度范围在25~200μg/ml时明显抑制HBV-DNA表达,最高抑制率达到55.04%。结论：波棱素脂质体具有一定的体外抑制乙肝病毒复制及抗原表达的作用。