紫薇异倍体的杂交亲和性分析及子代倍性鉴定

以二倍体红薇（H,2n）、三倍体紫薇（Z,3n）、四倍体紫薇（Z,4n）及四倍体银薇（Y,4n）为试材,进行杂交试验,检测紫薇异倍体杂交的亲和性,并采用细胞学倍性鉴定法对杂交子代的倍性进行鉴定和比较。结果显示：不同杂交组合子代的结实特性以及种子的出苗率均存在差异,其中Z（4n）×H（2n）的单果重（0.22 g）、单果种子数（40.1）、千粒重（1.79 g）及出苗率（36.4%）均高于H（2n）×Y（4n）,且差异达到显著水平,表明在二倍体与四倍体的杂交中,四倍体作为母本的亲和性更高;H（2n）×Z（3n）后代倍性主要为非整倍体,占80%以上,其次是2n,占11.8%;Y（4n）×H（2n）后代倍性主要为3n,占50%,其次是非整倍体,占40%;H（2n）×Z（3n）后代中,1株为3n,2株为非整倍体;Y（4n）×H（2n）后代中,6株为3n,3株为非整倍体;H（2n）×Y（4n）后代幼苗中,1株为2n,1株为3n;Z（4n）×Z（4n）后代中,1株为4n;在杂交组合H（2n）×Z（3n）、Y（4n）×H（2n）及H（2n）×Y（4n）后代中还出现三子叶变异的幼苗。

浸润性乳腺癌组织中E-cadherin和CD44v6表达及DNA倍体分析

目的探讨浸润性乳腺癌组织中E-cadherin(E-cad)和CD44v6的表达及DNA倍体,并分析其临床病理学意义.方法应用免疫组化SP法、组织化学Feulgen染色及图像分析技术检测103例浸润性乳腺癌组织中E-cad和CD44v6蛋白的表达及DNA倍体.结果浸润性乳腺癌E-cad阳性表达率为35.0%(36/103),E-cad表达与组织学分级、组织浸润程度、腋窝淋巴结转移、复发、远处转移密切相关(P<0.05).CD44v6阳性表达率为76.7%(78/103),其表达与组织学分级、组织浸润程度、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、复发、远处转移密切相关(P<0.05).E-cad阴性和CD44v6阳性表达的浸润性乳腺癌多为异倍体癌;E-cad阳性和CD44v6阴性表达的多为2倍体癌(P<0.05).结论E-cad的低表达与CD44v6的高表达可能参与乳腺癌的侵袭与转移;DNA异倍体可作为对乳腺癌预后的判断指标之一.

7种鳞翅目昆虫细胞系染色体分析

采用直接法制备传代细胞染色体标本、常规G iem sa染色、显微镜下计数中期分裂相染色体数目的方法对7种鳞翅目昆虫细胞系进行了染色体分析,得出了各种细胞系染色体分析所需要的秋水仙素浓度与处理时间以及低渗浓度和处理时间的范围;7种鳞翅目细胞系染色体均表现出典型的鳞翅目昆虫传代细胞的核型特征:染色体数目众多,异倍化严重,多为弥散型的着丝粒的短杆状、颗粒状、点状或圆球状。

乳腺浸润性导管癌DNA含量与组织学分级的关系

目的探讨DNA含量与乳腺浸润性导管癌组织学分级的关系。方法参照Bloom-Richardson和Elston的方法对72例浸润性导管癌按腺管形成、核的多形性和核分裂像计数进行组织学分级,应用图像分析法检测DNA倍体情况。结果在浸润性导管癌中,Ⅰ级(15例)、Ⅱ级(38例)、Ⅲ级(19例),DI值分别是1.08±0.29、1.37±0.20、2.30±0.53。与乳头状瘤相比,各组间差异具有显著性(P<0.01)。结论在浸润性导管癌中,DNA倍体和组织学分级、临床分期同样可作为较好的预后指标。

通过异倍性水稻间杂交获得同源三倍体植株

以３个二倍体水稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．）（２ｎ＝２ｘ＝２４）和３个同源四倍体水稻（２ｎ＝４ｘ＝４８）为杂交亲本配制６个自交组合和３０个杂交组合。试验结果表明，同源四倍体组合的结实率比较低（１０．０１％～２１．７８％），这可能与其花药内所包含的正常花粉粒比例小而异常花粉粒比例大有关。异倍性杂交组合的结实率更低（０．２０％～１．６４％），但在两种配组方式之间却存在着明显差异，即以同源四倍体水稻为杂交母本而以二倍体水稻为杂交父本则其异交结实率比较高（０．４２％～１．６４％），反之，以二倍体水稻为杂交母本而以同源四倍体水稻为杂交父本则其异交结实率比较低（０．２０％～０．８５％）。在杂交时重复一次授粉能显著地增加多倍体组合的异交结实种子数。除此之外，对ＡＰⅣ（４）×ＡＰⅣ（２）杂交组合的胚胎学观察结果表明，其受精率比较低（３４．２％），其中包括卵细胞的单受精（２５．０％）、中央细胞的单受精（３．３％）以及卵细胞和中央细胞的双受精（５．９％）。通过常规杂交法所获得的同源三倍体成活植株的频率很低（０．０７％），而通过采用杂种子房培养法所获得的同源三倍体植株的成活率比较高（０．７８％），后者的效率比前者要高出１１．１?

结肠直肠癌细胞DNA及CD44含量与肿瘤形成和转移的关系

目的 :探讨结肠直肠癌细胞DNA含量及CD4 4的定量检测与癌形成和转移的关系。方法 :采用流式细胞仪 (flowcytometry ,FCM)对手术切除的结肠直肠癌组织及癌旁周围正常组织细胞进行DNA含量及倍体测定、CD4 4定量检测。结果 :DNA含量在结直肠癌组明显增高 ,二倍体细胞明显减少 ,而异倍体明显增多 ,在结直肠癌组异倍体率为 6 6 6 % ;同时CD4 4在结直肠癌组明显高于癌旁周围正常组织组 (P <0 0 1) ,CD4 4在有淋巴结转移组和无淋巴结转移组中有极显著差异 (P <0 0 1)。结论 :癌细胞DNA含量及异倍体率增加 ,CD4 4的表达与结肠直肠癌形成、转移有关。

流式细胞术检测宫颈细胞DNA倍体在宫颈病变中的应用

目的:探讨流式细胞术检测宫颈细胞DNA倍体在宫颈病变中的应用价值。方法:对290例患者的液基细胞学检测后剩余细胞行流式细胞术DNA倍体分析,其中非典型鳞状上皮增生(ASCUS)120例、低度宫颈上皮内瘤变(LSIL)90例、高度宫颈上皮内瘤变(HSIL)60例、鳞状上皮癌(SCC)20例。结果:①异倍体在ASCUS组、LSIL组、HSIL组、SCC组中检出率分别为3.3%、31.1%、85.0%、96.7%。②LSIL、HSIL、SCC 3组的异倍体率与ASCUS组比较有显著性差异(P<0.05);HSIL、SCC 2组的异倍体率与LSIL组比较差异显著(P<0.05);HSIL、SCC 2组的异倍体率之间无统计学差异(P>0.05)。结论:DNA倍体分析可以作为宫颈病变早期的筛查手段。

细胞DNA倍体分析在食管癌临床诊断和疾病程度及预后预测中的价值

目的探讨细胞DNA倍体分析在食管癌临床诊断和疾病程度及预后预测中的价值。方法采用流式细胞术对72例食管鳞癌患者的食管黏膜组织细胞行DNA倍体分析，并将其结果与临床分期、病理检查结果相对照，分析其对肿瘤的诊断价值，同时分析DNA倍体类型与食管癌患者的临床分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移的关系。结果对肿瘤临床分期Ⅱ期及以上病变的筛查，DNA倍体方法的敏感度为84．3％（43／51），特异度为47．6％（10／21），阳性预测值为79．6％（43／54），阴性预测值为55．6％（10／18）。随临床分期增加DNA异倍体率逐渐增加[Ⅰ期52．4％（11／21）、Ⅱ期74．2％（23／31）、Ⅲ-Ⅳ期100．0％（20／20）]，两两比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）。低分化和未分化、中分化者肿瘤组织DNA异倍体率高于高分化者[100．0％（34／34）、90．9％（20／22）比62．5％（10／16）]，差异有统计学意义（x^2=5．41、P〈0．05，x^2=11．15、P〈0．01）。有淋巴结转移者DNA异倍体率高于无淋巴结转移者，差异有统计学意义[97．9％（46／47）比72．0％（18／25）]（x^2=8．56，P〈0．01）。结论DNA倍体类型分析方法诊断食管癌与病理检查结果有较高的符合率，其可一定程度反映疾病程度及预后。

流式细胞术DNA倍体分析在耳鼻咽喉肿瘤快速诊断中的意义

目的:了解流式细胞术DNA倍体分析在耳鼻咽喉-头颈外科肿瘤辅助诊断中的价值。方法:咽喉部新生物(其中炎症组18例,非典型增生组32例,癌组56例包括鼻咽癌21例、喉癌31例、下咽癌4例)作流式细胞术DNA倍体分析和病理学检查,比较2种检查方法的异同。结果:(1)异倍体在炎症组中检出率为11.11%(2/18),在非典型增生组中检出率为93.75%(30/32),在癌组中检出率为83.92%(47/56);(2)炎症组与非典型增生组相比,异倍体差异有显著性(P<0.01),两组间S期细胞差异无显著性(P>0.01);(3)炎症组与癌组比,异倍体差异有显著性(P<0.01),两组间S期细胞差异有显著性(P<0.01);(4)非典型增生组与癌组相比,异倍体差异无显著性(P>0.01),S期细胞差异有显著性(P<0.01)。结论:DNA倍体分析能快速准确诊断耳鼻咽喉-头颈外科肿瘤。

DNA定量细胞学检查联合液基细胞学检测在胸腔积液鉴别诊断中的应用

目的研究DNA定量细胞学检查联合液基细胞学检测在鉴别良恶性胸腔积液中的应用价值。方法收集2015年1月-2017年12月我院73例胸腔积液患者,对其胸腔积液进行DNA定量细胞学检查和液基细胞学检测。结果 DNA定量细胞学检查的灵敏度(78.9%)高于液基细胞学检测(68.4%),差异有统计学意义(P<0.05)。液基细胞学检测的特异度(100%)明显高于DNA定量细胞学检查(82.9%),差异有统计学意义(P<0.05)。二者联合检测诊断胸腔积液的曲线下面积(AUC)为0.921,高于DNA定量细胞学检查(0.809)和液基细胞学检测(0.842)。联合检测的阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比、阴性似然比及诊断准确度分别为84.2%、82.9%、4.91、0.226和67.1%,均优于DNA定量细胞学检测;液基细胞学检测的阳性预测值(100%)优于联合检测,但阴性预测值(74.5%)及诊断准确度(31.6%)不及联合检测。结论胸腔积液DNA定量细胞学检查和液基细胞学检测有较高的灵敏度和特异度,联合检测可提高对恶性胸腔积液诊断的准确性。

DNA异倍体定量检测用于高危型HPV感染妇女分流诊治的临床价值

目的针对DNA异倍体定量检测用于高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染妇女分流诊治的临床价值进行研究。方法随机选择2012年11月至2013年6月进行DNA异倍体定量检测的患者600例,作为本次研究的对象,对患者实施DNA异倍体定量检查,检查结果为高危型HPV阳性的患者实施阴道镜检查,确诊后实施分流诊治。针对宫颈病变检出情况、DNA异倍体异常细胞数等指标进行分析研究。结果 600例患者DNA异倍体定量检测中,47例宫颈高级别鳞状上皮病变（CIN Ⅱ-Ⅲ）及宫颈癌,65例宫颈低级别鳞状上皮病变,77例高危型HPV阳性。DNA倍体异常细胞个数分析中,宫颈高级别鳞状上皮病变（CIN Ⅱ-Ⅲ）及宫颈癌患者中89.36%DNA倍体异常细胞≥3个,宫颈低级别鳞状上皮病变患者中78.46%DNA倍体异常细胞≥3个,或者可见少量DNA倍体异常细胞（1-2个）。高危型HPV阳性患者中45.45%DNA倍体异常细胞≥3个,29.87%可见少量DNA倍体异常细胞（1-2个）。液基细胞学检查和阴道镜检查,对DNA异倍体检查异常细胞患者进行诊断,确定患者的疾病为高危型HPV阳性患者中,19例患者DNA异倍体定量检测结果为未见DNA倍体异常细胞,阴道镜检查报告为宫颈炎。35例DNA异倍体定量检测结果为可见DNA倍体异常细胞患者中,48.57%阴道镜检查结果为高级别鳞状上皮病变,28.57%的阴道镜检查为低级别鳞状上皮病变,22.86%阴道镜检查结果为宫颈炎。可见少量DNA倍体异常细胞患者中,8.70%阴道镜病理结果为高级别鳞状上皮病变,30.43%为低级别鳞状上皮病变,60.87%为宫颈炎症。结论实施DNA异倍体检查,有较高的病变检出率,DNA异倍体检查结果为正常的患者大多为宫颈炎,检测出异常的患者需进一步的确诊。DNA异倍体检查,为患者高危型HPV感染的早期预防提供有效的诊断依据,有较高的临床应用价值。

脱落细胞学检查、DNA倍体分析与血清肿瘤标志物联合检测诊断恶性胸腹水的价值

目的:比较脱落细胞学检查、DNA倍体分析与血清肿瘤标志物联合检测对恶性胸腹水的诊断价值。方法:对128例患者胸腹水同时进行脱落细胞学检查与DNA倍体分析,并抽取静脉血作血清肿瘤标志物检测,比较三者敏感性。结果:脱落细胞学检查阳性率为43.75%。恶性胸腹水脱落细胞学检查联合DNA倍体分析的检测阳性率为83.33%,与单项脱落细胞学检查的阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。血清肿瘤标志物联合检测阳性率为81.25%,与血清标志物癌抗原125和甲胎蛋白单项检测差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:脱落细胞学检查、DNA倍体分析与血清肿瘤标志物检测联合运用,可提高恶性胸腹水的检出率。

流式细胞仪DNA倍体测定鉴别良恶性胸腔积液的诊断价值

目的通过流式细胞仪（FCM）技术测定胸水脱落细胞细胞核的脱氧核糖核酸（DNA）含量，并将此方法与癌胚抗原（CEA）相比较。方法病例选自2004～2006年5月，本院住院患者，留取新鲜的胸腔积液标本，用流式细胞仪检测细胞核DNA倍体，分析细胞的增殖能力。结果在恶性胸腔积液组中70％的标本可以检测到DNA异倍体，在良性胸腔积液中90％的标本表现为两倍体。结论流式细胞仪DNA倍体测定，与CEA联合测定可以提高恶性胸腔积液的检出率。

103例浸润性乳腺癌E-cadherin蛋白表达和DNA倍体分析

目的研究黏附因子E-cadherin(E-cad)在乳腺癌中的表达及其与肿瘤细胞增殖潜能的关系。方法应用免疫组化S-P法、Feulgen染色及计算机图像分析技术检测103例浸润性乳腺癌的E-cad蛋白的表达情况和DNA倍体。结果103例浸润性乳腺癌组织中E-cad阳性表达率为35.0%(36/103),E-cad表达与组织学分级、组织浸润程度、腋窝淋巴结转移、复发、远处转移密切相关(P<0.05),与组织学类型、年龄、肿瘤大小无关(P>0.05)。E-cad阴性表达的患者总生存率比阳性表达的患者低(P<0.05)。E-cad阴性表达的浸润性乳腺癌多为异倍体癌,E-cad阳性表达的多为2倍体癌(P<0.05)。结论E-cad蛋白的低表达可能与乳腺癌的侵袭和转移有关,倍体分析对乳腺癌的诊断有辅助意义。

喉鳞癌中CDK2表达对DNA倍体的作用

目的研究喉鳞癌组织中CDK2表达在引起DNA异倍体发生过程中的作用。方法取手术中获得的50例喉鳞癌组织和30例声带息肉组织,用γ-微管蛋白抗体标记中心体,用免疫组织化学的方法检测CDK2激酶和γ-微管蛋白的表达;用流式细胞术检测喉鳞癌组织DNA倍体。结果在喉鳞癌组织中CDK2激酶和γ-微管蛋白阳性率表达[分别为68.0%(34/50)和78.0%(39/50)]都显著高于在声带息肉组织中(P<0.05)[分别为20.0%(6/30)和33.3%(10/30)],而且CDK2激酶的表达与γ-微管蛋白的表达具有相关性。21例CDK2表达阳性的喉鳞癌组织其DI为1.76±0.36;9例CDK2表达阴性的喉鳞癌组织其DI为1.05±0.07,CDK2阳性的喉鳞癌组织较阴性表达的组织DI增高(P<0.05)。结论喉鳞癌中CDK2过度表达导致肿瘤细胞DNA异倍体发生。在诊断和治疗喉鳞癌中,CDK2可能是一个有重要作用的指标。

黏附分子CD44v6蛋白表达及DNA含量与乳腺浸润性癌的相关性研究

目的研究CD44v6蛋白表达及DNA含量在浸润性乳腺癌侵袭、转移和预后中的作用。方法应用免疫组化S-P法检测103例浸润性乳腺癌石蜡切片中肿瘤细胞CD44v6的表达,并用图像分析法进行DNA含量分析。结果CD44v6主要定位于细胞质,与乳腺浸润性癌组织学的类型无关(P>0.05),而与组织学的浸润程度有关。CD44v6蛋白在组织学分级:Ⅰ级阳性表达率为57.9%,Ⅱ级为87.0%,Ⅲ级为88.1%(P<0.01)。乳腺浸润性癌DNA异倍体情况:采用Feulgen染色示细胞核呈紫红色,胞浆不着色。DNA图像分析结果显示CD44v6蛋白表达阳性者肿瘤细胞异倍体率为82.3%(65/79),表达阴性者肿瘤异倍体为45.9%(11/24),经2检验有统计学意义(P<0.05)。各组织学类型之间异倍体比较,无显著性差异(P>0.05)。结论CD44v6蛋白表达与DNA异倍体水平呈平行关系。CD44v6、DNA倍体的联合检测对于指导临床医生的诊断具有重要的意义。因此,结合DNA含量和CD44v6蛋白表达的联合检测,对乳腺浸润性癌的诊断、判断预后价值更大。

DNA异倍体检测在肺癌早期诊断中的价值

目的探讨DNA异倍体检测在肺癌筛查和早期诊断中的应用价值。方法对679例肺部疾病患者的支气管镜刷检、活检组织(支气管镜活检、手术切除)标本(280例)及胸腔积液脱落细胞399例经常规处理、HE染色,进行病理学检查,采用Motic全自动细胞DNA定量分析系统检测标本中的DNA异倍体,同时分别测定血清、胸腔积液中肿瘤标志物CEA含量。结果全自动细胞DNA定量分析与组织学检测、细胞学检测及血清癌胚抗原(CEA)检测结果之间比较无统计学差异(P>0.05);DNA异倍体的检测结果与胸腔积液的病理学检测、脱落细胞学检测及血清/胸水CEA等检测结果之间亦无统计学差异(P>0.05)。其中,DNA异倍体检测灵敏度及特异度均略低于常规支气管刷片,而与血清CEA检测结果无差异;胸水中DNA异倍体检测的灵敏度与特异度亦均低于胸水脱落细胞学及胸水CEA检测,但与血清CEA检测结果无差异。同时,DNA异倍体在早期及晚期肺癌的检出结果中未见明显统计学差异(P>0.1)。结论全自动DNA定量分析技术是一种敏感而特异的肺癌的筛查技术;DNA异倍体可能属于肺癌发生的早期事件,检测DNA异倍体有望作为肺癌早期诊断与筛查的有价值的标志物;DNA异倍体与支气管镜刷检或与CEA联合检测可提高肺癌诊断的阳性率。

脱落细胞学、DNA异倍体和肿瘤标志物检查联合诊断恶性胸腹水的价值探讨

目的:评价脱落细胞学、DNA异倍体、肿瘤标志物检查联合诊断恶性胸腹水的应用价值。方法:贝克曼公司RS-6500流式细胞分析仪,观察DNA异倍体,以DNA异倍体≥10%作为阳性标准;涂片染色,镜下观察细胞形态特征;肿瘤标志物检查使用Combas 6000电化学发光仪测定。结果:39例恶性肿瘤,DNA异倍体分析有21例阳性,阳性率53.9%,70例良性肿瘤仅1例阳性,阳性率1.4%;细胞学检查,39例恶性胸腹水以找到癌细胞为阳性,阳性16例,阳性率41.0%,70例良性胸腹水中,未找到癌细胞;肿瘤标志物(SF、CEA、NSE、CA-125)检查,恶性阳性率为74.4%,61.5%,64.4%,72.0%,良性阳性率为15.8%,21.4%,12.5%,5.6%,差异有统计学意义(P<0.01),4项联合检测,以任意一项阳性指标作为阳性判断,可将敏感度提高到92.3%。细胞学、DNA异倍体与肿瘤标志物联合检测,其联合灵敏度为87.0%,联合特异度为77.7%,灵敏度明显提高。结论:脱落细胞学、DNA异倍体、肿瘤标志物联合检测,可大大提高恶性胸腹水的诊断阳性率。

细胞DNA定量分析法在乳腺肿物性质诊断中的应用

目的探讨应用细胞DNA定量分析方法鉴别诊断良、恶性乳腺包块的价值，为临床制定手术方法和预后方案提供依据。方法488例乳腺包块住院患者被纳入研究对象，诊断医师进行针吸穿刺，然后将样品制成2张薄层涂片。1张涂片做巴氏染色，用于常规细胞学检查，另一张经Feulgen染色，用自动细胞DNA定量分析系统检测。每例均进行术后病理观察。结果488例乳腺肿物经病理证实，164例为乳腺良陛肿瘤，324例为恶性肿瘤。常规细胞学方法对乳腺肿瘤的灵敏度为91．4％（296／324）、特异性为92．7％（152／164）；而细胞DNA定量分析方法的灵敏度为90．1％（292／324）、特异性为100．0％（164／164）。常规细胞学方法阳性预测值为96．1％（296／308），阴性预测值为84．4％（152／180），而细胞DNA定量分析方法中阳性预测值为100．0％（292／292），阴性预测值为83．7％（164／196）。结论细胞DNA定量分析可用于乳腺肿块术前诊断中恶性程度的判断。

利用异倍体细胞鉴定技术鉴定胶质瘤患者血循环中肿瘤细胞

目的通过鉴定血液中染色体异常的细胞,探索异倍体细胞检测技术在检测胶质瘤患者血液中循环肿瘤细胞(CTC)的可行性。方法对2016年1至12月就诊于北京天坛医院神经外科术前诊断考虑为胶质瘤的88例患者及10例健康人各抽取6 ml外周血,应用差相富集(SE)-免疫荧光原位杂交(iFISH)技术,检测血液中8号染色体异常细胞数目。同时对10例肿瘤组织与10名健康人脑组织进行8号染色体异常细胞鉴定。比较不同类型、不同级别胶质瘤之间CTC数目差异。结果10例肿瘤组织中存在大量8号染色体异常细胞,而健康脑组织中未发现此类细胞(P<0.01)。在90.9%(80/88)的胶质瘤患者血液中检测到CTC,远高于正常组(1/10),P<0.01。96.1%(763/794)CTC不表达胶质酸性蛋白。IDH基因野生型胶质瘤中,高级别胶质瘤较低级别者CTC数目明显增加(12.0比2.2),P<0.01。少突胶质瘤中超五倍体CTC比例低于间变性少突胶质细胞瘤(56.0%比75.9%),P<0.01;低级别星形细胞瘤[世界卫生组织(WHO)Ⅱ级)]低于高级别星形细胞瘤(WHO Ⅲ~Ⅳ级)(51.7%比62.7%),P=0.016。结论异倍体细胞检测技术可以检测到胶质瘤患者血CTC,CTC数目、超五倍体比例与肿瘤级别、肿瘤分子病理学类型存在一定关联。