QuEChERS-高效液相色谱法检测蔬菜中的吡虫啉、虫酰肼、阿维菌素和噻螨酮

将一种新的QuEChERS样品处理方法进行了提取及净化的改进,结合HPLC对蔬菜中吡虫啉、虫酰肼、阿维菌素和噻螨酮4种农药进行同时检测,取得了满意结果。以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,269、240 nm双波长检测,流速1.0 mL/min。检出限分别为：吡虫啉0.02 mg/kg、虫酰肼0.02 mg/kg、阿维菌素0.10 mg/kg、噻螨酮0.05 mg/kg。在添加浓度为0.05-1.0 mg/kg范围内,4种化合物回收率在80%-100%之间,相对标准偏差1%-10%。方法适用于蔬菜中吡虫啉、虫酰肼、阿维菌素和噻螨酮4种农药残留量的同时检测。

分散固相萃取净化气相色谱串联质谱法测定茶叶、西葫芦和芒果中噻螨酮和噻嗪酮残留量

建立了分散周相萃取净化、气相色谱串联质谱法(GC-MS/MS)测定茶叶、芒果和可葫芦中噻螨酮和噻嗪酮残留分析方法,并对噻螨酮、噻嗪酮的质谱裂解规律和基质效应进行了分析。噻嗪酮和噻螨酮分别在0.040～40 mg/L和0.025～2.5 mg/L浓度范围内呈线性关系,相关系数0.9910,检出限分别为0.005和0.010 mg/L;不同样品中噻螨酮和噻嗪酮平均回收率为83.6%～116.9%之间,相对标准偏差为2.0%～15.7%,方法定量限为茶叶中0.010 mg/kg,西葫芦、芒果中为0.002 mg/kg采用此方法抽检我国不同地区市场上的120份芒果、西葫芦样品,均未检出噻螨酮噻嗪酮残留;检测20份噻嗪酮田间残留试验茶叶样,均未检出噻嗪酮残留(低于3.9 mg/kg)。

气相色谱-质谱联用法测定大蒜中的嘧霉胺、噻螨酮残留量

建立了大蒜中嘧霉胺、噻螨酮残留量的气相色谱-质谱联用(GC-MS)检测方法。大蒜样品经过微波处理,乙酸乙酯提取,硅胶柱净化,采用EI源、选择离子监测方式(SIM),并通过基质添加标准消除了基质效应。结果证明,方法定量下限噻螨酮为0.01 mg/kg,嘧霉胺为0.001 mg/kg,加标回收率范围73.5%～97.8%,相对标准偏差在2.3%～12.5%之间,该方法可实现快速、灵敏、准确的检测分析。

柑橘全爪螨代谢抗性相关基因表达差异分析

【目的】为了明确谷胱甘肽S-转移酶(GST)基因、羧酸酯酶(CarE)基因,过氧化氢酶(CAT)基因在柑橘全爪螨Panonychus citri抗性中的作用,【方法】在室内用噻螨酮对柑橘全爪螨进行抗性选育,进一步构建抗/敏品系数字基因表达谱,采用RPKM法对柑橘全爪螨敏感品系和噻螨酮抗性品系3种代谢抗性相关基因进行表达差异分析。【结果】经过20代抗性选育,获得了柑橘全爪螨噻螨酮抗性品系,与敏感品系比较,柑橘全爪螨对噻螨酮的抗性倍数达到3 532.12倍。基因差异性分析发现,抗性品系中有11条GST基因、17条CarE基因和6条CAT基因表达上调;14条GST基因、24条CarE基因和3条CAT基因表达下调。上调倍数最高的GST基因、CarE基因和CAT基因分别为Unigene31530[log2 ratio(RS/SS)=1.05]、Unigene23121[log2 ratio(RS/SS)=2.05]和Unigene31477[log2 ratio(RS/SS)=10.04]。进一步对Unigene31477进行荧光定量PCR分析发现,抗性和敏感品系基因表达水平没有显著差异。【结论】根据柑橘全爪螨抗/敏性品系基因表达差异推断,GST、CarE和CAT基因可能与柑橘全爪螨对噻螨酮产生的抗性没有密切关系。

分散固相萃取净化-气相色谱-质谱联用法测定茶叶中7种杀螨杀虫类农药残留

目的建立茶叶中7种农药残留的快速检测方法。方法采用分散固相萃取净化,气相色谱-质谱法(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)测定茶叶中噻螨酮、噻嗪酮、哒螨灵、喹瞒醚、苯醚甲环唑、联苯菊酯和氟氰戊菊酯7种农药的残留。结果 7种农药在0.05~5.00 mg/kg范围有良好的线性关系,相关系数均大于或等于0.9995。3个浓度的平均加标回收率为70%~115%,相对标准偏差为5.0%~13.2%;方法检出限(limit of detection,LOD)为0.005~0.05 mg/kg,定量限(limit of quantitation,LOQ)为0.015~0.15 mg/kg。采用此方法抽检了我国不同地区市场上的110批次的茶叶样品,其中有15批次样品检出联苯菊酯,含量在24~1640μg/kg之间;有4批次样品中检出噻嗪酮,含量在35~150μg/kg之间;3批次样品检出哒螨灵,含量在70~200μg/kg之间。结论本方法符合农药残留分析标准的要求,可用于茶叶中7种农药残留的快速检测和确证分析。

噻螨酮的合成工艺

以赤式-1-对氯苯基-2-氨基丙醇为原料,经酯化反应,二硫化碳环合,双氧水氧化,最后与环己基异氰酸酯缩合得到噻螨酮。酯化中以氯磺酸代替浓硫酸作为反应试剂,提高了产率,缩短了反应时间;二硫化碳环合反应的最佳条件:硫酸酯II与二硫化碳的摩尔比为1∶3,反应温度55℃;双氧水氧化反应的最佳条件:硫酮III、双氧水、甲醇钠的摩尔比为1∶3.5∶3.5,反应温度30℃。产品含量97.8%,总收率达到77.6%。

茶皂素对尼索朗杀灭桔全爪螨的增效作用

本文就茶皂素对尼索朗杀灭桔全爪螨的增效作用，进行了室内及田间药效试验。按茶皂素和尼索朗的有效成分比３０．５∶１．５混配成３２％４１６杀螨剂乳油，室内杀卵试验结果表明：茶皂素单剂不杀卵，５％尼索朗单剂ＬＣ５００．２１９１ｕｇ／ｍｌ，混剂ＬＣ５００．２３２６ｕｇ／ｍｌ，增效６１．８倍。田间药效试验结果表明：３２％４１６乳油稀释２０００、２５００、３０００倍液，施药后第３天防治效果分别为９９．２％、９８．０％、９６．５％；第４０天分别为９８．８％、９８．７％、９６．２％。５％尼索朗乳油２０００倍液对照，第３与第４０天分别为＋１１．６％（虫口增加）和１００％。茶皂素在农药乳油中的增效作用，使尼索朗有效成分用量减少７０％，有极显著的社会。

噻满酮在悬汞电极上的吸附伏安特征及分析应用

研究了噻满酮在悬汞电极上的吸附伏安行为特征 ,并建立了测定噻满酮的线性扫描吸附伏安分析方法 ;在 pH=5.5的NaAc -HAc缓冲溶液中 ,噻满酮于 -1.27V(vsSCE)产生灵敏的还原峰 ,噻满酮含量在0.4～20mg/L范围内与峰高呈线性关系 ,检出限为0.08mg/L ;利用该法测定了农药制剂和农田水样中的噻满酮含量。

7.5%甲氰菊酯·噻螨酮EC的高效液相色谱分析

采用高效液相色谱方法,以甲醇-水(体积比80∶20)为流动相,用紫外检测器于240nm处,在200mm×4.6mm(i.d.)HypersilODS不锈钢柱上同时测定甲·噻乳油中甲氰菊酯和噻螨酮的含量。在选定的色谱条件下,有效成分以及未知物能得到有效分离,并能获得较好的检测结果。测得甲氰菊酯、噻螨酮的相关系数为0.9995、0.9996,变异系数为1.49%和1.59%。

6.8%阿维菌素·噻螨酮乳油对柑橘红蜘蛛毒力测定及田间药效试验

为明确6.8%阿维菌素.噻螨酮乳油对柑橘红蜘蛛的毒力及田间最适使用浓度,采用浸叶饲养法测定了6.8%阿维菌素.噻螨酮乳油对柑橘红蜘蛛的毒力,并进行田间药效试验。结果表明,该药剂对柑橘红蜘蛛具有较高毒力,药后48 h,LC50为2.11 mg/L。田间试验结果显示,6.8%阿维菌素.噻螨酮乳油对柑橘红蜘蛛药效高,持效期长,药后7 d防效仍在90%以上,可以在柑橘果园推广应用。使用浓度在3 000倍液左右。

尼索朗对映体的高效毛细管电泳电导拆分

使用自行设计的毛细管电泳柱端电导检测系统,以未涂层融硅石英毛细管(75μm×45 cm)为分离柱,用非水介质对尼索朗对映体进行了拆分。研究了缓冲溶液浓度和酸碱度、非水介质、手性拆分剂(β-CD)等因素对分离的影响。以V(甲醇):V(甲酰胺)=8:2溶液为非水介质,5 mmol/L NaAc+2 mmol/L HAc为缓冲溶液,分离电压为15 kV,在8．0～160 mg/L范围内,峰高与浓度呈良好的线性关系,线性同归方程:y= 9．4+36．8x,线性相关系数R=0．996 3,检出限为1．6 mg/L。

水果中噻螨酮残留量检测技术研究

目的：通过对水果中噻螨酮残留量的测定达到建立检测技术的目的。方法：采用超声波提取-固相萃取-高效液相色谱法对方法的检出限、精密度和准确度进行了研究。结果：方法的检出限为0．05mg／kg，回收率为84．0％-92．6％，相对标准偏差为7．17％。结论：该方法具有准确度高，精密度好，能够满足水果中噻螨酮残留量的检测要求。

唐山市板栗红蜘蛛防治试验

板栗红蜘蛛是唐山市板栗生产上的主要害虫。根据板栗红蜘蛛发生消长规律,采用烟雾机喷雾施药,研究了聚乙烯醇、刹死倍和3种杀螨剂对红蜘蛛越冬卵和发生期螨的防治效果。结果表明:对越冬卵的防效聚乙烯醇40倍液+5度石硫合剂在栗树休眠期可达86.53%;刹死倍200倍液在栗树芽萌动期达77.9%;尼索朗对发生期螨的防效达80.6%,均可在板栗产区推广应用。

炔螨特等5种杀螨剂防治苹果红蜘蛛田间药效试验

测定了5种不同作用机理杀螨剂对苹果树红蜘蛛的防效,并对其田间的应用效果进行评价。结果表明:73%炔螨特乳油和20%甲氰菊酯乳油速效性较好,药后2d防效即达到79%以上,但持效期相对较短;500g/L四螨嗪悬浮剂、80%苯丁锡水分散粒剂和5%噻螨酮乳油速效性一般,但持效期较长,药后25d防效仍能维持在90%以上。炔螨特、四螨嗪、苯丁锡、噻螨酮4种不同作用机制的杀螨剂对天敌和作物安全,交替使用能有效控制红蜘蛛为害,降低产生抗性的风险;甲氰菊酯为广谱性杀虫剂,不宜作为专用杀螨剂使用。

柑橘全爪螨钠离子通道基因差异性分析

为弄清钠离子通道基因与柑橘全爪螨Panonychus citri噻螨酮抗性的关系,通过柑橘全爪螨转录组分析鉴定了钠离子通道基因;采用序列比对和Sanger测序,分别对柑橘全爪螨敏感品系和噻螨酮抗性品系钠离子通道基因序列进行单核苷酸多态性分析;进一步采用RPKM法和荧光定量PCR对抗性品系和敏感品系钠离子通道基因进行表达差异分析.从柑橘全爪螨转录组中获得了39条钠离子通道基因,相对于敏感品系,抗性品系中有21条表达上调,17条表达下调,Nav1.8.1和Nav1.6.4分别为上调倍数最高的2个钠离子通道基因[log2Ratio(RS/SS)分别为10.59,10.30],进一步荧光定量PCR分析发现,Nav1.8.1和Nav1.6.4上调倍数分别为3.92和1.68;基因序列比较和Sanger测序发现,抗性品系中,Nav1.9.4在344,441,468位和Nav1.7.3在第786分别有3个和1个SNP位点,进一步分析编码的氨基酸序列发现,Nav1.9.4只有第468位G突变为A导致蛋氨酸突变为异亮氨酸,Nav1.7.3在第786位T突变为C导致亮氨酸突变为色氨酸.钠离子通道基因差异性分析及验证为进一步研究柑橘全爪螨抗性分子机理提供了有价值的基因资源.

橘全爪螨不同品系γ氨基丁酸受体基因差异性分析

【目的】为明确γ氨基丁酸受体基因与橘全爪螨抗性的关系,【方法】通过BLAST搜索,对GABA受体基因进行鉴定;进一步通过序列比对和Sanger测序,对橘全爪螨敏感品系和噻螨酮抗性品系GABA受体基因SNPs进行分析和真实性验证;采用RPKM法对橘全爪螨敏感品系和噻螨酮抗性品系GABA受体基因进行表达差异分析。【结果】从橘全爪螨转录组中获得了19条GABA受体基因。通过敏感品系和抗性品系GABA受体基因序列比较和sanger测序发现Unigene11199_All有2个SNP位点。对GABA受体基因表达差异分析发现,相对于敏感品系,抗性品系中部分GABA受体基因表达量发生了不同程度的变化,抗性品系中有3条GABA受体基因表达上调,13条GABA受体基因表达下调,Unigene24440_All下调倍数最高[log2 Ratio(RS/SS)=-10.452479]。【结论】由此推断,橘全爪螨抗性产生可能是一个比较复杂的过程,而Unigene11199_All和Unigene24440_All可能是橘全爪螨对噻螨酮产生抗性的重要原因。

柑桔全爪螨噻螨酮抗性与敏感品系GST基因表达差异分析

为了明确谷胱甘肽S-转移酶(glutathion S-transferases,GSTs)基因与柑桔全爪螨Panony-chus citri抗性的关系,通过BLAST搜索,对柑桔全爪螨转录组数据库的GST基因进行鉴定,进一步采用RPKM法分析柑桔全爪螨噻螨酮敏感品系(SS)和抗性品系(RS)的GST基因表达差异。从柑桔全爪螨转录组中获得了30条GST基因,11条基因属于Delta家族,10条属于Mu家族,6条属于Kappa家族,2条属于Omega家族,1条属于Zeta家族,同一家族的基因聚在同一进化分支上;两个品系有5条GST基因表达没有差异,此外,抗性品系中有16条发生了下调,有9条GST基因发生了上调;抗性品系上调倍数最高的3个GST基因分别是GSTd6、GSTm5和GSTm4,log_2(RPKM_(RS)/RPKM_(SS))分别仅为1.05、0.74和0.71,荧光定量PCR分析测得上调倍数分别仅为1.13、1.42和1.21,上调倍数均不高。推断,GST基因上调可能不是柑桔全爪螨对噻螨酮产生抗性的重要原因。

反式-5-(4-氯苯基)-4-甲基-2-氧代噻唑烷酮的合成

报道了一种合成噻螨酮关键中间体——反式-5-(4-氯苯基)-4-甲基-2-氧代噻唑烷酮的方法。以赤式-1-对氯苯基-2-氨基丙醇盐酸盐和二硫化碳为原料,在130℃下直接环合得到反式5-(4-氯苯基)-4-甲基-2-氧代噻唑烷酮,收率82%,色谱纯度99%;再经双氧水氧化得到噻螨酮关键中间体,收率84%,色谱纯度95%。该工艺流程经两步合成得到目标产物,简化了操作步骤,缩短了反应时间,避免了酸性废水的排放,符合绿色化工的要求。

罗宾根螨及其防治

1988年8月首先在红星四场死亡的洋葱鳞茎上发现罗宾根螨;为害不断加重;面积不断扩大,受害严重处洋葱植株腐烂、死亡率达30.45％,是洋葱的第三大害虫,影响洋葱品质和产量,影响加工和脱水,影响出口创汇;国内尚无报导。可用尼索朗、灭扫利、久效磷、敌敌畏、乐果等杀螨剂,兑水浇灌防治,效果较好。

25%噻·喹乳油防治柑桔红蜘蛛田间药效试验

通过试验显示，噻·喹乳油防治柑桔红蜘蛛不但防治效果好，１０００倍液药后１天为９１４％，３天为９１２％，１０天为９５６％，而且药效的持续时间也较长，可达４０天以上。它克服了噻螨酮防治柑桔红蜘蛛前期效果差和喹硫磷药效持续时间短的缺点。