黑曲霉酸性蛋白酶PrA在毕赤酵母中的高效表达

【目的】本研究致力于获得酸性蛋白酶PrA的高产酵母菌株,以便在食品加工、饲料添加剂等领域进行应用。【方法】构建毕赤酵母表达菌株,在摇瓶水平重组表达PrA并检测其酶学性质。通过信号肽改造、基因剂量优化、共表达分子伴侣等措施逐步提高PrA产量,并利用高密度发酵进一步提高表达水平。【结果】PrA的比酶活为3974.00 U/mg,最适反应pH为3.0,最适反应温度为45℃。初始菌株的PrA产量达到738.03 U/mL。通过使用MF4I信号肽将PrA产量提高至1206.52 U/mL,增加PrA基因拷贝数导致产量提高至2406.47 U/mL。进一步共表达分子伴侣或分子伴侣组合将PrA产量提高至4091.27U/mL。经过高密度发酵,发酵168h酶活达到43088.00 U/mL,与初始产量相比提高58.4倍。【结论】在毕赤酵母中成功实现了酸性蛋白酶PrA的高效表达,为其未来的工业化应用奠定了基础。这些结果为进一步研究和开发该酶在食品加工和饲料添加剂领域的应用提供了重要参考。

双重滤过血浆置换降低高群体反应性抗体的研究

目的与单纯血浆置换对比,双重滤过血浆置换仅需少量白蛋白即可以对致病性抗体进行清除,包括高群体反应性抗体(PRA)。方法选择在309医院拟行肾移植手术高PRA患者13例,肾移植术后急性排异合并高PRA患者3例,进行双重滤过血浆置换治疗152例次,每例患者治疗前后检验PRA等指标。结果与治疗前PRA(56.72±4.53)%相比,治疗后PRA(<10%)显著下降(P<0.05),7例高PRA患者接受肾移植手术未出现急性排异,3例肾移植术后急性排异合并高PRA患者脱离透析。结论双重滤过血浆置换能降低高群体反应性抗体水平,减少肾移植术前及术后急性排异反应。

美国城市公园生态设计实践——以纽约高线公园为例

当前美国的景观设计行业可以说处于全球的领先水平,而纽约高线公园是美国当代城市改造更新中的经典案例。本文回顾了高线公园的发展历程,并阐述了公园中所存在的诸多生态设计元素,为我国城市公园的建设提供参考和借鉴方向。

NASA高技术项目风险管理技术与方法

现代高技术项目具有探索性强、技术管理复杂、经费投入规模大等鲜明特征 ,其研发过程因而充满着极大的风险 ,国外太空探索项目更是有着不少失败的例子。本文以美国航空航天局太空项目的风险管理为例 ,深入阐述了现代高技术项目风险管理的主要技术方法 ,结合我国高技术项目管理现状 ,分析我国高技术项目风险管理中存在的主要问题 ,提出我国高技术项目动态风险管理的模型与思路。

医疗FMEA结合ST-PRA在西药房高危药品管理与用药安全中的应用

目的:探讨医疗失效模式和效应分析(FMEA)结合社会技术概率风险评估(ST-PRA)在西药房高危药品管理与用药安全中的应用效果。方法:选取本院2019年1月—2020年12月在职工作的药房工作人员40名,按照管理方法不同区别其为试验组及对照组,每组20例。对照组采用传统高危药品管理,试验组采用医疗FMEA结合ST-PRA联用药品管理,比较两组RPN指数及给药错误率,并通过模糊综合评价法量化比较工作人员药品审核、药品调剂及存放、失效或无标识药品处理、处方开具、用药安全性5项高危药品管理水平。结果:试验组RPN总值为236,低于对照组的2514(P<0.05);试验组给药错误率为2.64%,低于对照组的10.03%(P<0.05);试验组工作人员的药品审核、药品调剂及存放、失效或无标识药品处理、处方开具、用药安全性评分高于对照组(P<0.05)。结论:医疗FMEA结合ST-PRA有助于降低西药房的RPN值,减少其给药错误率,并且能够提高西药房的高危药品管理质量。