葛根芩连汤的HPCE指纹图谱研究

目的 采用高效毛细管电泳法 ( HPCE)建立葛根芩连汤的指纹图谱。方法 电解质溶液由 30 mm ol/ L磷酸盐和 4 0 m mol/ L硼酸盐组成 ,未涂层融硅毛细管 ( 6 5 cm× 5 0μm,有效长度 4 3cm ) ,分离电压 2 2 k V,进样 1s,检测波长 2 5 4 nm ,温度 30℃。结果 上述条件下 ,葛根芩连汤中 2 7个成分得到了较好的分离 ,方法学考察结果符合定量测定和定性研究的要求。结论 该方法具有较好的分离效果和良好的精密度 。

葛根芩连汤及微丸中葛根素、大豆苷元的HPCE分析

目的:建立高效毛细管电泳法分离葛根异黄酮并测定葛根芩连汤及微丸中葛根素和大豆苷元的方法。方法:以555.8μg·mL-1苄基三乙基氯化铵为内标,缓冲液由85%的硼砂(30 mmol·L-1,pH=9.2)与15%甲醇组成;未涂层融硅毛细管(52 cm×50μm,有效长度30 cm),分离电压18 kV,进样压力6.7 kPa,进样1 s;检测波长254 nm,温度30℃。结果:上述条件下,葛根芩连汤及微丸中葛根素和大豆苷元在8 min内得到很好的分离,葛根素和大豆苷元的加样回收率分别为99.75%和98.59%;RSD分别为2.0%和1.6%。结论:该方法具有良好的精密度和回收率,可为葛根制剂中葛根素及大豆苷元的含量测定提供参考。

LIF-HPCE法检测食品中的黄曲霉毒素B1

采用自行设计搭建的激光诱导荧光(LIF)-高效毛细管电泳(HPCE)检测平台,建立LIF-HPCE法对食品中的黄曲霉毒素B1(AFB1)进行高灵敏度检测。AFB1在胶束电动毛细管电泳(MECC)模式下分离,LIF检测,375nm激光进行激发,检测波长440nm,操作电压15kV,电流104μA。AFB1在0.5～50μg/kg浓度范围内线性关系良好,r=0.9994;最低检出质量1.7×10-13g(S/N=3),最低定量限5.6×10-13g(S/N=10),方法精密度和重复性的相对标准偏差为5%左右。测定食品中粮油等食品样品,加标回收率为84.1%～96.1%。所建立的方法无需进行衍生反应和荧光标记,快速灵敏,绿色环保,10min左右完成分析,适用于食品中黄曲霉毒素的高灵敏度检测。

兔房水HPCE检测及其对培养角膜基质细胞的作用

目的:采用高效毛细管电泳(HPCE)的毛细管区带电泳(CZE)分离与检测兔房水中各蛋白组成,观察房水对培养角膜基质细胞的作用。方法:CZE测定新西兰白兔房水蛋白成分:运行缓冲液硼酸钠-硼酸缓冲溶液(pH=8.7、9.1、9.4);毛细管柱温20℃;检测波长200 nm;压力进样0.5 psi,进样时间10s;运行电压20 kV。第1代培养角膜基质细胞进行DMEM/F12培养,加入体积分数为10%的房水,CCK-8检测24 h后细胞增殖情况,每天倒置显微镜下观察细胞生长情况。结果:应用pH=9.4的硼酸钠-硼酸缓冲溶液可获得分离效果较理想的兔房水毛细管电泳峰图。加入房水24 h后CCK8检测吸光度增高(P<0.05),角膜基质细胞生长良好。结论:HPCE可快速有效方便检测兔房水蛋白成分,体积分数为10%的兔房水可促进培养的兔角膜基质细胞生长与增殖。

HPCE内标法测定三黄泻心汤3种制备方式样品中盐酸小檗碱的含量的差异

[目的]建立三黄泻心汤中盐酸小檗碱含量的毛细管电泳内标测定方法,比较3种三黄泻心汤不同制备方式样品中盐酸小檗碱含量差异。[方法]以二苯胍为内标物;熔融石英毛细管柱（50μm×80 cm,有效长度71.7 cm）为分离通道;电泳介质为25 mmol/L的硼砂-乙腈（3∶1,V/,V pH=9.12）;柱温为15℃;检测器为DAD检测器,检测波长为275 nm;分离电压为30 kV;进样压力为：5 kPa,15 s,测定样品中盐酸小檗碱的含量。[结果]当二苯胍内标物的浓度为60.10μg/m l时,盐酸小檗碱在6.40~97.28μg/m l范围内线性关系良好,r=0.999 57,加样平均回收率为100.17%,RSD为1.75%;运用该法测定中成药剂,结果配方浸膏中盐酸小檗碱含量明显高于传统汤剂和复方浸膏中的含量。[结论]该方法操作简便、快速、准确,重复性好,可作为三黄泻心汤质量检测手段。

酶解褐藻胶寡糖的HPCE分析方法研究

采用高效毛细管电泳法(HPCE)对酶解褐藻胶寡糖进行了分离分析,考察了缓冲液浓度、pH、电压及温度等参数对寡糖分离的影响。实验结果表明在pH=2.5,100mmol/L磷酸盐缓冲液中,运行电压20kV,电泳由负极到正极,温度30℃,235nm紫外检测条件下,酶解褐藻胶寡糖获得了高效分离。

柱前衍生化-HPCE法测定霍山石斛中游离氨基酸

游离氨基酸作为中药炮制与食品加工过程中参与米拉德反应的底物,是影响中药炮制中组分变化和食品风味的关键物质。霍山石斛因其鲜品难以保存,临床以其加热炮制成干燥品的茎入药,开展霍山石斛游离氨基酸研究对于揭示霍山石斛炮制机制、霍山石斛资源综合利用具有重要意义。采用柱前衍生化-高效毛细管电泳法(HPCE)对霍山石斛中12种游离氨基酸进行定性定量分析,结果显示霍山石斛中游离氨基酸最佳毛细管电泳分离条件为:检测波长254 nm、pH 11的60 mmol/L硼砂+20 mmol/L磷酸氢二钠缓冲液、分离电压10 kV、毛细管有效长度50 cm。在该条件下,12种氨基酸可在60 min内实现基线分离,在最优分离条件下,构建了标准曲线并进行了方法学考察,测得霍山石斛根、茎、叶中总游离氨基酸含量分别为1.8958、 2.0736和2.5954 mg/g,各氨基酸线性相关系数R^2均大于0.99,加样回收率为90.17%~110.25%,RSD均小于5%(n=3)。方法准确、可靠、重现性较好,可用于霍山石斛中游离氨基酸的定性定量分析。

HPCE法测定治疗溃疡性结肠炎药物中秦皮甲素的含量

目的:建立治疗溃疡性结肠炎药物中秦皮甲素含量的测定方法。方法:采用高效毛细管电泳法,以15 mmol.L-1硼酸为缓冲液,检测波长为335 nm,电压17 kV。结果:回归方程为y=21 843x-7 365,r=0.998,秦皮甲素的含量在0.080～0.400 mg.mL-1的范围内峰面积与其浓度呈良好线形关系。结论:本法操作简便、结果准确,重现性好,可用于秦皮甲素的含量测定。

简易HPCE法分离检测扑尔敏对映异构体

采用高效毛细管电泳（HPCE）法分离扑尔敏手性异构体,建立了简易HPCE法分离检测扑尔敏对映体含量的方法.在国产仪器上,以未涂层石英毛细管柱（75μm）、pH2.5、Tris-磷酸缓冲液（40 mmol/L）、分离电压25 kV、进样时间1 min、检测波长214 nm、温度20℃条件下扑尔敏两对映体实现了基线分离,分离度可达10.64.扑尔敏消旋体浓度在0.001~0.10 mg/mL范围内,峰高、峰面积与浓度呈线性关系,峰面积线性关系好于峰高,两峰峰面积线性相关系数r可达0.99883和0.99128,前峰的峰高及峰面积精密度实验表明,RSD（5次）分别为7.97%和8.29%.在未构建其他手性环境的条件下,该方法使扑尔敏两对映异构体达到快速分离,据此建立的测定方法可用于实际样品的含量测定.

喀什树莓酒HPCE指纹图谱的建立

采用毛细管区带电泳法建立喀什树莓酒的HPCE指纹图谱,电泳条件为:石英毛细管柱(50 cm×75μm),运行电压17 kV,运行缓冲液为50 mmol/L硼砂,其中含10%甲醇,检测波长260 nm,室温。在此条件下,建立了10批树莓酒的指纹图谱。结果表明,10个批次的样品之间有9个共有指纹峰,这9个成分得到了较好的分离,相似度评价结果良好;因此,HPCE指纹图谱分析法可作为喀什树莓酒的质量控制方法。

HPCE/HPCE-MS技术及其在食品分析中的应用

高效毛细管电泳技术 (HPCE)及其与质谱联用技术 (HPCE -MS)是近年来发展较快的分析技术 ,本文介绍了高效毛细管电泳技术的原理及其与质谱联用的关键技术 。

高效毛细管电泳法测定苦参碱和氧化苦参碱

建立了测定苦参碱和氧化苦参碱含量的高效毛细管电泳法。 ２０ ｍｍｏＬ／Ｌ的磷酸盐缓冲液（ｐＨ＝８．０）为电泳电解质，电压为３０ｋＶ（运行电流为１００～１１０ｕＡ），检测波长为２１４ｎｍ，内标氨茶碱。苦参碱 ０．１２６～１．２６ ｍｇ／ｍＬ、氧化苦参碱 ０．１０～１．０ ｍｇ／ｍＬ其浓度与峰面积之比呈良好的线性关系，ｒ均为０．９９９８，日内、日间变异系数均小于５．７％，常用２２种药物除地塞米松外其余的对其无干扰。用本法测定了２批苦参提取物，其中苦参碱为（４５．１９±０．０５８）％，（６２．８１±０．１２３）％；氧化苦参碱为（８．７１±０．０３）％，（６．８１±０．０８６）％。结果表明，该方法简单、灵敏，特异性和重现性良好，具有较强的实用价值。

高效毛细管电泳法测定牛奶和奶粉中残留的三聚氰胺

建立了牛奶和奶粉中三聚氰胺的高效毛细管电泳-二极管阵列检测器(HPCE-DAD)检测方法。使用长度58.5cm、内径75μm的毛细管柱,分离电压25kV,进样量3.5kPa(35mbar)×8s,分离温度25℃,缓冲溶液20mmol/L柠檬酸-40mmol/L磷酸氢二钠(pH2.6),检测波长232nm。分析物在1～100mg/L范围内线性良好,r2>0.997;牛奶和奶粉的定量限分别为0.5mg/kg和1.0mg/kg。在添加水平为定量限浓度至50mg/kg时的回收率为72.2%～97.3%,相对标准偏差为2.1%～3.9%。

十大功劳属部分植物茎中生物碱的高效毛细管电泳法测定

目的 :对十大功劳属植物中 3种生物碱的含量进行测定 ,为其内在质量的评价提供科学依据。方法 :运用毛细管区带电泳 (CZE)模式 ,以马钱子碱为内标化合物 ,测定了小檗碱、巴马亭和药根碱的含量。背景缓冲溶液为0 1mol·L-1磷酸缓冲液 (pH 7 0 )与甲醇 ( 2∶1)的混合体系。线性范围 :盐酸小檗碱为 4 9～ 4 98 6μg·mL-1(γ =0 9990 ) ;盐酸巴马亭为 5 0～ 5 0 4 9μg·mL-1(γ =0 9996) ;盐酸药根碱为 5 1～ 5 0 5 8μg·mL-1(γ =0 9984 )。回收率 :盐酸小檗碱为 96 0 0 %～ 10 1 66% ;盐酸巴马亭为 10 0 15 %～ 10 2 97% ;盐酸药根碱为 96 68%～ 10 2 4 4%。结果 :不同品种、不同产地、不同采集时间的植物中的生物碱含量均有较大差别。结论 :高效毛细管电泳法是中草药质量控制的一种简便、快速、有效的方法。十大功劳属多种植物生物碱含量较高 。

高效毛细管电泳法测定玉米花粉多糖中单糖的组成

目的采用高效毛细管电泳法测定玉米花粉多糖中单糖的组成。方法玉米花粉多糖水解后,经α-萘胺衍生化,高效毛细管电泳分析。电泳条件:缓冲液为75 mm o l/L硼砂溶液(pH 9.5);柱温22℃;电压16 kV;检测波长200 nm;气压进样,进样时间5 s。结果玉米花粉多糖主要是由葡萄糖、阿拉伯糖和半乳糖3种单糖组成。结论高效毛细管电泳可用于测定多糖中单糖的组成。

高效毛细管电泳法检测牛奶中的青霉素中间体以及3种青霉素类药物

建立了高效毛细管电泳(HPCE)同时检测牛奶中青霉素类抗生素中间体6-氨基青霉烷酸(6-APA)以及3种青霉素类药物青霉素钾(PEN)、氨苄青霉素(AMP)和阿莫西林(AMO)的方法。利用正交实验设计,对HPCE中的缓冲液离子浓度和pH值、分离电压、分离温度等分离条件进行了优化。结果表明:在采用40 mmol/L磷酸二氢钾-20 mmo l/L硼砂缓冲体系(pH 7.8)、分离电压为28 kV、分离温度为30℃的电泳条件下,4.5 min内可以实现上述4种青霉素类药物的快速分离检测。各组分在1.56～100 mg/L范围内有良好的线性,相关系数(r 2)为0.997 9～0.999 8,加标回收率为84.91%～96.72%,相对标准偏差(RSDs)为1.11%～9.11%(n=6)。该方法简便、快速,可以应用于市售牛奶中4种青霉素类药物的快速检测。

高效毛细管电泳法测定蜂蜜中单糖的含量

采用高效毛细管电泳技术,经α-萘胺衍生化,以鼠李糖作内标物,分别对五种蜂蜜中葡萄糖和果糖的含量进行了测定,获得满意结果。

分子印迹固相萃取-高效毛细管电泳法检测鸡肉中的恩诺沙星残留

以恩诺沙星为模板分子,α-甲基丙烯酸为功能单体,二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂,制备了恩诺沙星分子印迹聚合物。以该分子印迹聚合物为固相萃取材料,采用高效毛细管电泳分离方式,建立了分子印迹固相萃取-高效毛细管电泳检测鸡肉中恩诺沙星的方法。结果表明,该方法能有效地萃取和检测鸡肉中的恩诺沙星。在优化条件下,恩诺沙星的检出限为92.02μg/kg,定量限为336.04μg/kg;不同恩诺沙星添加水平下的回收率为77.84%～86.52%,相对标准偏差为2.18%～3.76%。该方法适用于鸡肉中恩诺沙星残留的测定。

心舒口服液毛细管电泳指纹图谱的研究

目的对心舒口服液的质量控制方法进行研究。方法采用高效毛细管电泳法建立以10批当归道地药材,10批川芎道地药材,10批红花道地药材,10批心舒口服液为样品的指纹图谱,比较研究制剂与药材指纹图谱之间的相关性,并与单味药材水煎液、各药材阴性对照液的指纹图谱进行比较,通过比较在线紫外光谱和迁移时间的方法,对口服液与各药材的水煎液、阴性对照液的指纹图谱中各指纹峰进行一一归属。结果分别建立标准指纹图谱,初步确定样品制剂与原料药材指纹图谱之间的相关性,最终建立复方中药制剂的质量控制方法。结论在心舒口服液指纹谱中,27个指纹峰中有14个指纹峰来自当归,10个指纹峰来自川芎(其中7个指纹峰是当归与川芎所共有的),9个指纹峰来自红花。

磷脂的分离纯化及高效毛细管电泳分析

采用溶剂提取和柱色谱法分离纯化市售大豆粉末磷脂（卵磷脂含量14．05％），得到高纯度的卵磷脂产品（纯度92．80％）。重点建立了磷脂的胶束电动毛细管色谱（MECC）分离分析方法。以分离度和峰面积为优化指标，对表面活性剂及其浓度、电泳缓冲液pH、有机改性剂及其含量、缓冲液浓度、温度等条件进行优化，确定了最优化电泳条件：电泳缓冲液为35mmol／L脱氧胆酸钠-1mmol／L硼砂缓冲液／正丙醇（体积比为57：43）（pH8．30），柱温44℃，操作电压25kV，检测波长200nm；内加法定性磷脂组分．外标法定量卵磷脂。结果表明，MECC法能有效分离5种磷脂组分；0．1～1g／L的质量浓度范围内卵磷脂的线性关系良好（r=0．9990），平均回收率为98．0％，日内、日间精密度分别为1．36％和3．27％，定性结果与薄层色谱法、红外光谱法的定性结果相符。