固相萃取-高效液相色谱-荧光检测土壤中喹诺酮类抗生素

建立了固相萃取-高效液相色谱-荧光(HPLC-FLD)检测土壤中4种喹诺酮类抗生素的分析方法。样品采用50%Mg(NO3)2-10%NH3.H2O(96∶4,V/V)超声提取,过HLB柱富集净化,再用乙腈-0.067 mol/LH3PO4溶液洗脱。采用高效液相色谱-荧光检测器,以乙腈-0.067 mol/L H3PO4(用三乙胺调节至pH2.5)为流动相,于激发波长280 nm、发射波长450 nm处进行检测。土壤样品中4种喹诺酮类抗生素的加标回收率在60.4%～99.3%之间,检出限为0.58～1.0μg/kg。对蔬菜基地土壤样品分析结果表明,本方法能够满足实际样品的分析要求,4种喹诺酮类抗生素均被检出,土壤中抗生素污染问题值得关注。

高效液相色谱-荧光检测法同时测定蔬菜中3种磺胺类药物残留

建立了蔬菜中3种磺胺类药物(SAs)的高效液相色谱-荧光检测法。蔬菜样品用甲醇提取3次,将提取液浓缩干,用0.1mol/LHCl溶解残渣,经荧光胺衍生化后,用反相柱(ODS)分离,以乙腈和0.5%醋酸为流动相进行梯度洗脱,用荧光检测器检测。3种SAs的检出限(LOD)为1.02～1.29μg/g,方法的定量限(LOQ)为3.4～4.3ng/g(鲜重)。蔬菜样品中SAs的添加浓度在0.2～1.0ng/g范围内,3种SAs的平均回收率均大于87%,日内与日间RSD均小于10%。实际蔬菜样品测定结果表明,3种SAs在不同蔬菜中均有不同程度检出,总含量为0.0726～0.3709μg/g(鲜重)。

高效液相色谱/荧光检测法同时测定高分子材料中6种异氰酸酯

建立了高分子材料中6种异氰酸酯含量的高效液相色谱/荧光检测法。样品中的异氰酸酯经萃取衍生,C18色谱柱梯度洗脱分离后,以荧光检测器检测,外标法定量。考察了萃取剂、萃取方式、衍生化时间及流动相组成对异氰酸酯萃取量、衍生化效果及分离效果的影响。结果表明,选用极性萃取剂二氯甲烷超声萃取的回收率高于非极性萃取剂环己烷振荡萃取的回收率,最佳衍生化时间为30 min。流动相采用乙腈-三乙胺缓冲液梯度洗脱时,目标组分的分离度高于1.5,在10～100μg/L范围内异氰酸酯衍生物的线性相关系数不低于0.999 1。高分子样品中异氰酸酯的加标量在0.1～1.0 mg/kg范围内,平均回收率为90%～95%,相对标准偏差(RSD,n=5)为2.2%～4.2%。检出限(信噪比为3)为30.3～42.3μg/kg。实际样品检测结果表明,除苯基异氰酸酯(PI)外的5种异氰酸酯在样品中均有不同程度检出,总含量为79.7～326.3μg/kg。该方法准确、灵敏、重现性好,适用于高分子材料中异氰酸酯残留量的检测。

纳米纤维固相萃取-高效液相色谱-荧光检测麻辣烫汤液中喹诺酮类药物

建立了固相萃取-高效液相色谱-荧光检测麻辣烫汤液中5种喹诺酮类抗生素的分析方法。麻辣烫汤液样品经EDTA-Mcllvaine缓冲溶液（pH 4）提取后,以HCX固相萃取小柱净化富集,用水淋洗,2%氨化甲醇洗脱。采用高效液相色谱-荧光检测器（HPLC-FLD）,于激发波长280 nm,发射波长450 nm处进行检测,流动相为甲醇-水-磷酸（25∶75∶0.1,V/V,三乙胺调至pH 2.8）。麻辣烫汤液样品中氟罗沙星、诺氟沙星、沙拉沙星、环丙沙星、奥比沙星5种喹诺酮类抗生素加标回收率为72.1%~110.3%;日内相对标准偏差（RSD）为1.6%~4.3%,日间相对标准偏差为2.0%~4.3%;检出限（LOD）为1.2~5.4μg/L;定量限（LOQ）为3.9~18μg/L。本方法能够满足实际麻辣烫汤液样品的分析要求。

畜禽粪便中喹诺酮类抗生素的高效液相色谱-荧光分析方法

建立了能同时测定畜禽粪便中4种喹诺酮类抗生素的高效液相色谱-荧光分析方法。该方法以乙腈为提取液,用正己烷液-液萃取法去除样品中的脂类等杂质,超声提取15 min;以乙腈+0.086 mol/L磷酸(15/85,V/V,用三乙胺调节pH值至2.5)作为流动相。畜禽粪便样品中4种喹诺酮类抗生素的加标回收率在65.8%～121.7%之间,相对标准偏差均低于8.0%,样品定量限为0.46～1.23μg/kg。利用该方法测定了广州市畜禽粪便中4种喹诺酮类抗生素的含量,结果4种抗生素均被检出,以环丙沙星为主。

ATP检测方法研究进展

三磷酸腺苷(ATP)和其水解化合物(ADP、AMP)在动物和植物体研究中应用价值突显,目前广泛用于临床医学研究、食品等领域。为更好的掌握ATP在动物和植物体中含量检测方法的研究进展,本研究分析了国内外现有ATP的各种提取、检测方法以及应用情况,并归纳总结了各种检测方法的优缺点,其中涉及目前国内外ATP最新检测技术,指出在相当一段时间内利用高效液相色谱技术检测ATP仍然是主流。为日后进一步开发出更准确、方便快捷的检测方法奠定基础,最后展望能运用各种研究方法和手段为ATP的检测开发出高效稳定的检测技术方法。

固相萃取/高效液相色谱荧光法测定草珊瑚中苯并[α]芘残留

采用固相萃取方法,建立了草珊瑚中苯并[α]芘的高效液相色谱荧光测定方法。以正己烷为提取溶剂对草珊瑚样品进行提取,经中性氧化铝固相萃取柱净化样品后,用高效液相色谱荧光检测器检测,荧光检测器激发波长为370 nm,发射波长为425 nm,流动相为乙腈-水（85∶15）,流速为1.0 m L/min。结果表明：苯并[α]芘在0～20 ng/m L浓度范围内线性关系良好,相关系数（r）为0.999 9,定量下限为0.36μg/kg,回收率为84.4%～101.9%,相对标准偏差（RSD）为1.6%～5.6%。该方法准确,灵敏度高,重复性好,适用于植物药材中苯并[α]芘残留的测定。

高效液相荧光法测定人尿液中儿茶酚胺含量

目的：建立高效液相色谱-荧光检测（ HPLC-FD）法同时测定人尿液中儿茶酚胺（去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺）含量，用于嗜铬细胞瘤的诊断。方法自制活性氧化铝，在弱碱性Tris缓冲液条件下吸附尿液样本中儿茶酚胺，使用 ZORB-AX-SB （4．6 mm ×250 mm，5μm）色谱柱，以甲醇-20 mmol· L-1磷酸二氢钾溶液为流动相；流速：0．8 mL· min-1，柱温25℃；激发波长（EX）为286 nm，检测波长（EM）为318 nm。结果重酒石酸去甲肾上腺素、肾上腺素、盐酸多巴胺在1．56～1000μg· L-1浓度范围内线性关系良好（r＝0．9995、0．9997、0．9998）；日内及日间精密度RSD在0．31％～8．02％之间；高、中、低三个浓度的平均方法回收率在94．22％～108．69％之间。结论该方法准确，稳定性较好，线性范围广，为嗜铬细胞瘤的诊断及围手术期治疗提供依据。

高效液相色谱-荧光光度测定及质谱鉴定酒中脂肪醛

合成了一种新的荧光试剂[1,2-苯并-3,4-二氢咔唑-9-乙基肼基甲酸酯(以下简写作BCEC)]并在酒中脂肪醛高效液相色谱(HPLC)分离及测定中作为柱前衍生试剂。衍生反应在乙腈溶剂中,用三氯乙酸作催化剂并在60℃条件下进行,并能在10 min后获得稳定的荧光产物。用Zorbax Eclipse XDB C8(4.6 mm×150 mm,5μm)作色谱柱,并以不同浓度的乙腈-水溶液作流动相进行梯度淋洗。采用荧光检测,检测的激发波长为333 nm,发射波长为390 nm。采用在线质谱检测对10种脂肪醛进行定性鉴定,醛的物质的量在0.166 5～83.3 fmol之间与其色谱峰面积呈线性关系,相关系数均优于0.999 9,被测各醛的检出限(S/N=3)在3.75～16.65 fmol之间。

高效液相色谱荧光法同时检测黄瓜及土壤中的阿维菌素和甲维盐

利用高效液相色谱荧光法建立了阿维菌素和甲维盐在黄瓜中的多残留分析方法,样品用乙腈提取,直接离心净化后旋蒸浓缩,经三氟乙酸酐（TFAA）和N-甲基咪唑（NMIM）衍生化,过HPLC-FLD检测,结果显示：阿维菌素和甲维盐在0.01~2.0 mg/L标液范围内检测浓度与检测器响应峰面积呈良好线性关系,阿维菌素R2=0.9998,甲维盐R2=0.9993。在浓度为0.01~1.0 mg/kg的添加范围内,阿维菌素在黄瓜和土壤中平均回收率为87.12%~101.13%,RSD 2.38%~5.32%;甲维盐在黄瓜和土壤中平均回收率为85.88%~98.21%,RSD 2.44%~5.87%;本法前处理便捷,分析结果准确度高。

鱼肌肉中阿维菌素和伊维菌素药物残留测定的样品前处理

以高效液相色谱分离荧光检测为手段,对测定鱼肌肉组织中阿维菌素（AVM）和伊维菌素（IVM）药物残留的前处理方法进行了研究。实验结果表明,乙腈是最佳的前处理提取溶剂;中性氧化铝固相萃取柱具有更好的净化效果;与以往报道最大不同在于,提出目标物吸附模式下,以非极性正己烷为上样、淋洗溶剂更加有利于中性氧化铝固相萃取柱与AVM,IVM的极性作用;AVM,IVM的最佳衍生温度为25℃;样品上机测定在24 h内完成,且系列标准工作液在4℃冷藏时间不宜超过24 h。采用优化后的样品前处理条件,测定不同水平添加样品的平均回收率均在70%～110%之间,RSD均小于10%,方法定量限均为3μg/kg。

高效液相色谱荧光检测法测定鸡蛋中三种雌激素

目的:建立一个简便、灵敏度高、重现性好的测定鸡蛋中雌二醇、雌三醇、炔雌醇的方法。方法:新鲜鸡蛋打碎均匀后,用乙腈提取两次,然后目标化合物以水/甲醇/乙腈(50∶30∶20,v/v/v)为流动相,过XTerra RP18色谱柱(5μm,4.6 mm×150 mm),荧光检测器进行检测。结果:3种雌激素的检出限为0.04 mg/kg～0.12 mg/kg,鸡蛋样品中雌激素的添加浓度在0.8 mg/kg～16 mg/kg范围内,组分的平均回收率范围在80.6%～94.4%,相对标准偏差为1.52%～5.11%。结论:该方法简便、准确并可同时测定鸡蛋中的雌激素。

重组人C1酯酶抑制剂中异天门冬氨酸含量检测

目的:检测重组人C1酯酶抑制剂(rh C1INH)中异天门冬氨酸(Iso Asp)的含量。方法:采用异天冬氨酸甲基转移酶催化结合反相高效液相色谱的方法进行测定,对该方法进行专属性、准确性和精密度检验,并用该方法对3批样品的Iso Asp含量进行检测。结果:浓度分别为10、30、60 pmol/60μL的SAH标准品的检测结果均在90%～110%范围内。对同一批3个待测样品进行测定,IsoAsp含量为(0.413±0.020)μmol IsoAsp/g rhC1INH,RSD为4.8%,显示该方法具有较好的专属性、准确性和精密度。3批测试样品中,IsoAsp含量分别为0.633、0.827、0.487μmol IsoAsp/g rhC1INH。结论:经方法学验证,异天门冬氨酸检测试剂盒结合RP-HPLC方法适用于rhC1INH中IsoAspr的含量检测,可为类似蛋白制品中该项目的检测提供借鉴。

黑葡萄穗霉(Stachybotrys chartarum)单端孢霉烯族毒素菌株的分子检测方法

加强真菌毒素的监测和系统性研究已成为国内外学者关注的热点,建立简便、高效、低成本的现场快速筛选检测方法是食品安全领域的一项急迫而重要的研究内容。以47株黑葡萄穗霉菌株和曲霉、链格孢、弯孢、青霉4株真菌菌株为研究对象,利用Tri5基因PCR扩增技术和高效液相色谱HPLC技术,对黑葡萄穗霉产毒菌株进行了分子检测,确认和验证了其产毒特性,为葡萄穗霉属毒素检测领域提供了理论指导和技术支持。试验结果表明,47株黑葡萄穗霉菌株中除15号菌株外,其电泳均出现约454 bp的特征型条带,而其他菌株没有。回收其扩增产物并测定基因序列,验证该基因序列与S. charturum和S. chlorohalonata同源性分别达99%和100%。除此之外,又采用高效液相色谱HPLC技术对lyu20110019号菌株发酵液样品的产毒特性进行了测定,结果表明,lyu20110019号菌株可产生NIV毒素。由此可知,利用Tri5基因设计的特异引物可以用来检测黑葡萄穗霉产毒菌株。